本實驗之流程如圖一所示，即每次測驗當天的前一晚，必須禁食，而測驗當天，首 先在安靜休息後即開始進行第一項運動測驗（肝醣耗竭運動測驗），肝醣耗竭運動測驗 後則立即進入恢復期，在恢復期期間的第0 小時給予第一次實驗指定的增補飲料，第 2 小時給予第二次實驗指定的增補飲料，接著在恢復期結束後（即第 4 小時），立即進行 第二次的運動測驗（70%Pmax 耐力運動測驗），當受試者完成此運動測驗即結束當天之 實驗。
於實驗中，分別在肝醣耗竭運動的前後、以及 70%Pmax 耐力運動測驗之前後，採 集血液分析血乳酸、游離脂肪酸、血糖及胰島素之濃度。
0h 2h 4h 體重測量
血液採集 血液採集 血液採集 血液採集 圖一 實驗流程簡圖
第五節 實驗方法與步驟
在本研究中，每位受試者必須接受4 次的實驗測驗，分別為 1 次的最大攝氧量測驗 以及3 次的實驗處理，每次測驗間隔 7 天以上，在每次的實驗處理中，每位受試者必須 依序接受肝醣耗竭運動測驗、4 小時之恢復期增補以及 70%Pmax 耐力運動測驗。
一、 實驗前準備階段
（一） 儀器校正及檢視
1. Cortex 能量代謝測量儀器 (MetaMax3B, Cortex, Germany) ：使用前先以標準 氣體 (5%CO2, 15%O2) 進行校正，以確定分析 O2和CO2的準確性，再依操作 手冊所列之程序進行氣量之比對和系統之測試。
2. 腳踏車測功儀 (H/P/Cosmos, Cyclus2, Germany) ：使用前依操作手冊所列之程 序方法進行阻力與速度之校正。
3. Polar 無線心跳率紀錄錶 (Polar S810iTM, Polar Electro Inc, Finland) ：本實驗採 用EDGETM公司所製的Polar 錶，記錄運動時的心跳率。使用前檢查心跳率發 報器是否將心跳率傳送至手錶顯示器上，並與橈動脈實測值進行比對校正。
4. 血乳酸分析器 (Lactate ProTM, KDK Corporation, Japan) ：分析測驗前後的血乳 酸值，使用前依操作手冊所列之程序與方法進行校正。
5. 檢視抽血針筒、止血帶、採血器及採血針等用具是否清潔、安全，並確定醫護 人員的支援時間。
（二） 受試者之準備
實驗前發給每位受試者乙份受試者須知及同意書，並向受試者說明有關研究目的、
過程及回答相關問題，同時要求受試者在同意書上簽名，表示願意參與本實驗。測驗當 天再向受試者詳述測驗程序、方法及相關細節，實驗期間隨時回答受試者的疑問，並要 求受試者：
1. 實驗期間禁止喝酒，以及維持平常之飲食習慣，測驗當天不得抽菸。
2. 測驗前 24 小時不得飲用咖啡、茶、可可亞等其他含咖啡因的飲料。
3. 在實驗前，須禁食至少 4 小時以上，包含禁止大量攝取水分。
4. 在測驗前 30 分鐘，穿著運動服裝至實驗室報到。
（三） 實驗環境紀錄
本實驗進行時，實驗室溫度設定維持在20~22。C 之間。
二、 最大攝氧量測驗
（一） 氣體採集裝置
以採集氣體之專用口罩，罩住受試者的鼻與嘴部，將呼出的氣體透過導氣管連接到 Cortex 電腦能量代謝系統進行分析。
（二） Polar 無線心跳紀錄錶之安裝
先用酒精擦拭受試者胸骨柄下端與左右側第五根肋骨處，再將 Polar 無線心跳率發 報器置於該部位，並由受試者自行將手錶顯示器帶至左手腕上，以利施測者觀察及記 錄，檢查心跳率發報器是否將心跳率資料傳送至手錶顯示器上，並與橈動脈實測值進行 比對。
（三） 遞增負荷運動測驗
受試者在自行車測功儀上進行測驗，在遞增負荷運動測驗前，先讓每位受試者在熟 悉實驗流程時選擇自己適合之踩踏速率 (60 ~ 80 rpm) ，此踩踏速率修改自 Karp 等 (2006) ，以作為本研究運動測驗的衰竭判定指標，同時，每位受試者在日後的測驗中只 能以首次所選擇的踩踏速率進行運動測驗。測驗開始前，先調整每位受試者座椅的高 度，接著，每位受試者先自行在測功儀上進行5 分鐘的熱身，再以 100W 的初速度開始 進行騎乘，在騎乘中每2 分鐘增加 50W，直到受試者騎至自主性衰竭，即結束測驗。
（四）衰竭判定
受試者衰竭判定指標則依據Riechman 等 (2001) 所提出的判定原則：
1. 呼吸交換率 (V‧CO2: V‧O2) 大於 1.2。
2. 心跳率大於年齡預估之最大值。
3. 當運動強度增加時，每分鐘攝氧量呈現水平而未上升的狀態 (<150 ml/min) 。 4. 主觀的疲勞、衰竭及無法繼續運動測驗。
5. 受試者達到上述 4 項中的其中 3 項，即判定該受試者已達個人最大攝氧量。最 大心跳率的判定，則選取受試者於運動測驗中之最高值。
（五） 氣體能量分析
進行最大攝氧量測驗時，採開放式能量代謝測量法，在自行車測功儀上進行運動 時，以口罩將受試者呼出的氣體做氣體分析，本實驗採用Cortex 能量代謝測量系統，全 部測驗過程每10 秒分析和記錄資料ㄧ次，分析每分鐘攝氧量及呼吸交換率。
三、 肝醣耗竭測驗
肝醣耗竭運動測驗是以間歇運動的方式進行，強度的設定為 (90, 80, 70, 60% Pmax) 四階段的強度負荷，每個強度負荷之設定時間皆為2 分鐘，在完成每次的負荷後，會持 續接著2 分鐘的 50% Pmax 恢復騎乘。
運動測驗一開始，受試者自行於自行車測功儀上暖身 5 分鐘後，即開始進入正式測 驗，ㄧ開始受試者之第一階騎乘負荷強度為90% Pmax，而受試者在每個負荷強度下必 須維持2 分鐘的衝刺，每一階衝刺結束後繼續 2 分鐘 50%Pmax 低強度的動態恢騎乘，
連續反覆進行2 分鐘指定強度及 2 分鐘動態恢復，直到受試者在此強度下無法維持固定 之踩踏速率（降低10 rpm）時，則強度降至第二階 (80% Pmax) ，並反覆相同進行 2 分 鐘指定強度及2 分鐘動態恢復，依此類推，受試者在每一階段的強度負荷下騎乘，當受 試者無法維持其固定踩踏速率時，則將負荷降至下一階之強度，進行重複騎乘，直到強 度負荷降至最後一階 (60% Pmax) ，亦無法維持固定之踩踏速率時，即結束測驗。
（一） 衰竭判定
本實驗之衰竭判定是以測驗過程中，其踩踏頻率降低10 rpm，並且持續超過 20 秒 以上即判定為衰竭。
（二）血液檢測
1. 肝醣耗竭運動測驗前（安靜時）後以及 70%Pmax 耐力運動測驗前（4 小時增 補後）後立即以採集指尖血方式，檢測全血之血乳酸值，所採集血液量約5μl。
利用血乳酸分析器分析血乳酸值。本研究以Lactate ProTM進行分析。
2. 採血時間點與血乳酸採集相同（共 4 個採血點），由合格護士於受試者肘前靜
脈進行真空抽血，隨後將5ml 之血液樣本注入生化試管（含抗凝血劑 EDTA）
中，以離心機離心取得血清後，送至檢驗所（台北市，邱內科）進行化驗，以 酵素組合試劑利用酵素作用及比色測定之原理，在定量的血漿中加入acyl CoA synthetase、acyl CoA oxidase 及 peroxidase 作用後產生紫色化合物，於 550 nm 下測量其吸光度，再計算血清中游離脂肪酸濃度 (free fatty acid, FFA) 。 3. 採血時間點與血乳酸採集相同，將 5ml 之血液樣本注入生化試管中，以離心
機離心取得血清後，送至檢驗所（台北市，邱內科）進行化驗，以生化比色法 檢測血醣濃度，並以免疫化學發光分析儀 (CLIA) 分析胰島素濃度。
四、 恢復期
本實驗之恢復期共有4 小時，並在肝醣耗竭運動後之立即（0 小時）以及第 2 個小 時給予增補，實驗指定飲料包括：全脂牛奶 (WFM) 、脫脂牛奶 (NFM) 以及水 (W) ， 並在第4 小時恢復期結束後立即接受 70% Pmax 耐力運動測驗。牛奶給予的飲用量是以 每公斤體重1 克的醣類計算，水的飲用量則是與全脂牛奶及脫脂牛奶的飲用量相同，同 時要求受試者於10 分鐘內飲用完畢。
在恢復期中，受試者必須於實驗休息室中進行監控，並告知受試者在恢復期間不可 做費力之活動，但是允許受試者從事輕度的身體活動，此外，在恢復期間不可進食以及 飲用任何飲料，但允許受試者飲用水，飲水之容量則必須予以記錄。
五、 70%Pmax 耐力運動測驗
（一） 採氣裝置
以採集氣體之專用口罩，罩住受試者的鼻與嘴部，將呼出的氣體透過導氣管連接到 Cortex 電腦能量代謝系統進行分析。
（二） Polar 無線心跳紀錄錶之安裝
先用酒精擦拭受試者胸骨柄下端與左右側第五根肋骨處，再將 Polar 無線心跳率發 報器置於該部位，並由受試者自行將手錶顯示器帶至左手腕上，以利施測者觀察及記 錄，檢查心跳率發報器是否將心跳率資料傳送至手錶顯示器上，並與橈動脈實測值進行 比對。
（三）運動測驗
受試者於自行車測功儀上自行進行5 分鐘之熱身，接著以 70% Pmax 之運動強度開 始正式測驗。在測驗過程中受試者必須維持所規定之踩踏速率，當受試者無法維持所規 定之踩踏速率時即結束測驗。
（四） 衰竭判定
此測驗之衰竭判定是以測驗過程中，當受試者在騎乘中若無法維持其踩踏速率，並 且降低10 rpm，連續超過 30 秒以上即判定為衰竭。
（五）血液檢測
1. 測驗前安靜休息時以及測驗結束的立即以採集指尖血方式，利用血乳酸分析器 分析血乳酸值。
2. 測驗前以及測驗後的立即，由合格護士在受試者肘前靜脈，進行真空抽血，隨 後將5 毫升的血液樣本注入生化試管中，以離心機離心取得血清後，送至檢驗 所（台北市，邱內科）化驗，檢測血液中游離脂肪酸、血醣及胰島素之濃度。
第六節 前導實驗結果
在前導實驗的部份，以3 名大學體育系男性學生為受試對象（年齡 21.3 ± 1.2 歲，
體重 74.2 ± 7.1 公斤，身高 176.7 ± 0.6 公分）。研究結果發現血乳酸 (La) 、心跳率 (HR) 、攝氧量 (V‧O2) 、呼吸交換率 (RER) 、耗竭時間 (tlim) 以及運動自覺感受 (RPE) ，在 3 種實驗處理之間並無顯著差異，但是在實驗結果中亦發現，增補全脂牛奶 後的耐力運動持續時間略高於其他 2 種飲料處理，而 RER 亦有低於其他 2 種實驗處理 的趨勢，這似乎顯示全脂牛奶中的脂肪，可能作為耐力運動時之能源使用。由於本研究 為前導性實驗，因此須增加受試人數及擴大取樣範圍，所得結果必須再做更進一步探討。