第二章 巨峰葡萄籽之成分分離研究
第二節 巨峰葡萄籽成分之結構鑑定
一、化合物 I—gallic acid
化合物 I 為白色針狀結晶，熔點 253 ℃。其 TLC 片經溶媒（ethyl acetate）展開後 Rf 值為 0.83，噴氯化鐵試液後，顏色呈紫黑色。噴 10% H2SO4加熱後，顏色呈紅褐色，初步推斷為多酚類的化合物。
紅外光光譜（圖八）顯示，在 3400~3200 cm-1為 OH 基的吸收，
1706 cm-1為羧基（C＝O）的吸收，1620、1543 及 1450 cm-1為 benzene ring 的吸收。
紫外光光譜（圖九）在 272 nm、245 nm 有最大吸收波長，272 nm 是 3,4,5-trihydroxybenzoic acid 的π π*吸收。
由 EIMS m/z（rel. int. %）圖譜（圖十）顯示其 m/z 170 (100)
1H-NMR 光譜（圖十一；acetone-d6）顯示δ8.20（br）為 benzene ring 上 OH 的氫訊號，δ 7.20 為 benzene ring 上氫的訊號。氫譜顯示 化合物的對稱性很高。
13C-NMR 光譜（圖十二；acetone-d6）也顯示在結構上有對稱性，
在δ166.6 為羧酸上的 C 訊號，δ144.9 (C-3,5)、137.6 (C-1)、121.0 (C-4)、109.0 (C-2,6)皆為 benzene ring 上 C 的訊號，經與標準品的光 譜比對，得知此化合物為 3,4,5-trihydroxybenzoic acid ( gallic acid )。
OH OH
COOH
O H
1 2
3 4
5 6
圖八、化合物 I 之 IR 光譜
圖九、化合物 I 之 UV 光譜
圖十、化合物 I 之 EI 質譜
圖十一、化合物 I 之質子核磁共振光譜( 200 MHz, acetone-d6)
圖十二、化合物 I 之碳十三核磁共振光譜( 200 MHz, acetone-d6)
二、化合物 II—epi-catechin
化合物 II 為白色粉末，熔點 224-226 ℃。其 TLC 片經溶媒（ethyl acetate）展開後 Rf 值為 0.71，噴氯化鐵試液後，顏色呈紫黑色。噴 10% H2SO4加熱後，顏色呈紅褐色，初步推斷為多酚類的化合物。
紅外線光譜（圖十三）顯示，在 3500~3200 cm-1為 OH 基的吸 收， 1620、1520 及 1466 cm-1為 benzene ring（C＝C）的吸收。
紫外光光譜（圖十四）在 280 nm、261 nm 有最大吸收波長，
1H-NMR 光譜（圖十六；acetone-d6）顯示δ7.8-8.5 為 5 個 OH 基上氫的訊號，7.05 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-2΄)，6.82 (2H, m, H-5΄,6΄)，
6.02 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-6)，5.91 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-8)，4.87 (1H, s, H-2)，3.59 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-3)，2.84 (1H, dd, J =16.6, 3.6 Hz, Heq-4)，2.77 (1H, dd, J =16.6, 3.4 Hz, Hax-4)。
13C-NMR 光譜（圖十七；acetone-d6）顯示，δ156.4-156.0
(C-5,7,8a)，144.2 (C-3΄, 4΄)，131.1 (C-1΄)，118.2 (C-6΄)，114.4 (C-5΄)，
114.1 (C-2΄)，98.7 (C-4a)，95.1 (C-6)，94.6 (C-8)，78.3 (C-2)，65.8 (C-3)，28.0 (C-4)，與標準品光譜比對，得知此化合物為 epi-catechin。
O
圖十三、化合物 II 之 IR 光譜
圖十四、化合物 II 之 UV 光譜
圖十五、化合物 II 之 EI 質譜
圖十六、化合物 II 之質子核磁共振光譜( 200 MHz, acetone-d6)
三、化合物 III—catechin
化合物 III 為白色粉末，熔點 212-214℃。其 TLC 片經溶媒（ethyl acetate）展開後 Rf 值為 0.71，噴氯化鐵試液後，顏色呈紫黑色。噴 10% H2SO4加熱後，顏色呈紅褐色，初步推斷為多酚類的化合物。
紅外線光譜（圖十八）顯示，在 3500~3200 cm-1為 OH 基的吸 收訊號， 1620 、1520 及 1466 cm-1為 benzene ring 的吸收，與 epi-catechin 相似。
紫外光光譜（圖十九）在 280 nm、263 nm 有最大吸收波長，
與 epi-catechin 相似。
由 EIMS m/z（rel. int. %）圖譜（圖二十）顯示其 m/z 290（14）
[M＋]為主要的分子離子峰，所以分子量為 290。裂解模式與 epi-catechin 相似，m/z 152 (17)與 139 (0.2) 。
1H-NMR 光譜（圖二十一；acetone-d6），顯示δ7.9-8.2 為 OH 基 上氫的訊號，δ7.05 (1H, d, J = 1.8 Hz, H-2΄)，6.79 (2H, m, H-5΄,6΄)，
6.02 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-6) ，5.86 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-8)，4.55 (1H, d,
J = 7.5 Hz, H-2)，3.99 (1H, m, H-3)，2.90 (1H, dd, J =16.0, 5.1 Hz,
Heq-4)，2.52 (1H, dd, J =14.5, 6.8 Hz, Hax-4)。
13C-NMR 光譜（圖二十二；acetone-d6）顯示，δ156.6、156.1 、 155.8 (C-5,7,8a)，144.6 (C-3΄, 4΄)，131.0 (C-1΄)，118.9 (C-6΄)，114.5 (C-5΄)、114.1 (C-2΄)，99.5 (C-4a)，95.0 (C-6)，94.3 (C-8)，81.6 (C-2)，
67.2 (C-3)，27.7 (C-4)，與標準品光譜比對，得知此化合物為 catechin。
O
圖十八、化合物 III 之 IR 光譜
圖十九、化合物 III 之 UV 光譜
圖二十、化合物 III 之 EI 質譜
圖二十一、化合物 III 之質子核磁共振光譜( 200 MHz, acetone-d6)
圖二十二、化合物 III 之碳十三核磁共振光譜( 200 MHz, acetone-d6)
四、化合物 IV—dilinoleyl stearyl glyceride
化合物 IV 為透明液體。其 TLC 片經溶媒（n-hexane）展開後 Rf 值為 0.85，噴 10% H2SO4加熱後，顏色呈淡黃色，初步推斷為不 飽和脂肪酸。
紅外線光譜（圖二十三）顯示，在 3009 cm-1有不飽和 CH 的 伸縮振動，3000~2800 cm-1為飽和 CH2的吸收， 1744 cm-1為 ester 的 C＝O 吸收，1620 、1659 cm-1為 C＝C 的吸收，1459、1374、1165 cm-1 為-CH2、-CH3的變角振動吸收，結構上似乎沒有苯環。
紫外光光譜（圖二十四）在 210 nm 有最大吸收波長，顯示沒 有共軛系或苯環結構。
由 EIMS m/z (rel. int. %)圖譜（圖二十五）顯示其 m/z 262 (0.4) 為 linoleic acid 從 ester 斷裂產生的(RC+＝O)離子。
1H-NMR 光譜( 圖二十六；CDCl3)，顯示 δ5.37 (9H, m)為雙鍵
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上及 OCH2-HC-CH2O 之氫的訊號，4.29 (2H, dd, J = 11.9, 4.3 Hz, H-1, 3)，4.13 (2H, dd, J = 11.9, 5.9 Hz, H-1,3) ，2.76 (4H, t, J = 5.8 Hz,
Hz, H-8΄,14΄,8˝΄,14˝΄)，1.23 (br, -(CH2)n-) ，0.89 (9H, t, -CH3)。
13C-NMR 光譜（圖二十七；CDCl3）顯示在δ172.8 為 carboxylic ester 上(C-1΄,1˝΄)，172.6 (C-1˝)，129.5~130.0 (C-9΄,13΄,9˝΄, 13˝΄)，127.8、
127.6 (C-10΄,12΄,10˝΄,12˝΄)，68.6 (C-2)，61.9 (C-1,3)，22~33 為-CH2 -的訊號，13.9 為-CH3的訊號，經與文獻比對(32)，得知此化合物為 dilinoleyl stearyl glyceride。
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圖二十三、化合物 VI 之 IR 光譜
圖二十五、化合物 VI 之 EI 質譜
圖二十六、化合物 IV 之質子核磁共振光譜( 200 MHz, CDCl3)
圖二十八、化合物 IV 之1H-1H COSY 核磁共振光譜( 200 MHz, CDCl3)