推論性統計分析

由 H.E.染色法可以發現心肌細胞的排列隨著休克後時間的增長而有 越來越鬆散的情形，加上細胞質的淡化都意味著休克將會對心肌細胞產生 傷害；同時在復甦組中可以發現在各個時間點都相對於休克組有較輕微的 變化，但是沒有辦法恢復到如同對照組一般，我們推測此現象可證明輸液 治療可以減輕休克所造成的心肌傷害。TUNEL 染色法中也可看到休克後明 顯增加凋亡細胞的數目，而復甦治療可減輕部份休克所造成的傷害。最 後，在心肌細胞受到創傷出血性休克及復甦治療的相關路徑方面，我們可 以推論是經由內外在路徑及心臟保護的路徑作調控。(Fig. 13)

休克組 4小時 對照組

對照組

休克組 0小時

休克組 8小時 對照組

Fig.1 左方對照組的心肌細胞細胞核清晰可見，細胞排列整齊緊密；右方 休克組的心肌細胞，由上而下隨著休克後的時間越來越長，細胞質染色淡 化，更明顯的是細胞的排列漸漸鬆散

休克組 0小時

休克組 4小時

休克組 8小時

復甦組 0小時

復甦組 4小時

復甦組 8小時

Fig.2 左方休克的心肌細胞由上而下隨著休克後的時間越來越長，細胞質 染色淡化，細胞的排列漸漸鬆散；而在右方復甦組中上述情形皆有出現但 在任何相對時間都較休克組輕微

p-NFκB 65 kD

Sham Shock Resuscitation

p-NFκB/β-actin

Fig.3 Nuclear factorκB (NFκB) 和磷酸化 NFκB(p- NFκB) 在對照 組、休克組、休克加上復甦組在休克或復甦治療後第 0、4、8 小時的表現 量

* 相對於對照組 p<0.05 ; # 相對於休克組 p< 0.05

Control

S0 R0 S4 R4 S8 R8

TNF-α 17 kD

Sample

Sham Shock Resuscitation

0 hr

β-actin 46 kD

Sham Shock Resuscitation

0

Sham Shock Resuscitation

FADD

t-Bid

22 kD

Control

S0 R0 S4 R4 S8 R8

β-actin 46 kD

22 kD Bid

Sample

Bid/β-actin

Sham Shock Resuscitation

t-Bid

23 kD Bax

Control

S0 R0 S4 R4 S8 R8

β-actin ^{46 kD}

Bax

p-IGF-I receptor

100 kD

Control S0 R0 S4 R4 S8 R8

β-actin 46 kD

p-IGFIR/β-actin

p-IGFIR

Sample

Sham Shock Resuscitation

0

p-Akt 60 kD

β-actin 46 kD

Control

S0 R0 S4 R4 S8

p-Akt

Sample

p-Akt/β-actin

Sham Shock Resuscitation

0

DAPI TUNEL MERGE

Control 17.83%

Sock 0hr 58.39%

Resuscitation 0 hr 23.4%

Fig.10 對照組、創傷併出血組、休克後復甦組在休克後第 0 小時的心肌 細胞 DAPI、TUNEL 染色的變化以及二者合併圖(圖中百分比為凋亡細胞在 此畫面中的細胞數中所占比例)

DAPI TUNEL MERGE

Sock 4hr 51%

Resuscitation 4hr 35.14%

Fig.11 創傷併出血組、休克後復甦組在休克後第 4 小時的心肌細胞 DAPI、

TUNEL 染色的變化以及二者合併圖(圖中百分比為凋亡細胞在此畫面中的 細胞數中所占比例)

DAPI TUNEL MERGE

Sock 8 hr 53.14%

Resuscitatio 8 hr 23%

Fig.12 創傷併出血組、休克後復甦組在休克後第 8 小時的心肌細胞 DAPI、

TUNEL 染色的變化以及二者合併圖(圖中百分比為凋亡細胞在此畫面中的 細胞數中所占比例)

BCl2 Bax

(Cytosolic) Cytochrome c

Mitochondrial dependent pathway

Fas

Cardiac apoptosis

in trauma/ hemorrhagic shock rats

-Fas dependent pathway

FADD Bid tBid

Caspase cascade

Fig.13 根據實驗結果，我們對於心肌細胞經過創傷併發出血性休克而引 起的凋亡過程(虛線箭頭)，以及復甦治療效果(實線箭頭)提出的細胞內路 徑圖

第四章 討論