杭菊萎凋病之相關病原菌之分離及初步鑑定

(一) 病原菌之分離及初步鑑定

苗栗地區之萎凋病分離株，係採組織分離法以及稀釋分離法進行分離。利用 此二方法分離的結果列如表 8。結果發現苗栗銅鑼鄉地區分離所得之真菌具有鐮 刀狀大分生孢子，初步判定為鐮胞菌屬。上述鐮胞菌分離株依其形態可分為大分 生孢子兩端尖細之尖鐮胞菌 (如圖 7、10)。及孢子兩端橢圓之茄形鐮胞菌 (如圖 8、9)。

統計自苗栗地區杭菊病株以組織分離及稀釋分離得到之分離菌株共有 6 株 真菌分離株如表 9，其中 4 株為鐮胞菌，此些分離株之編號以 F 後加不同代碼，

另有兩株為尚無法鑑定之土黃色及橘黃色真菌菌落，編號以 GK122 及 TL322 表示。在細菌方面共有 3 分離株，此些分離株之編號皆以 HG 後加不同代碼表 示，由於所分離之細菌菌落具有類似青枯病菌 (Ralstonia sp.) 高度流動性之特性，

故另以 TTC 鑑別培養基 (Schaad et al, 2001) 培養之，以供初步之鑑定。因自杭 菊萎凋病株分到似青枯病菌之菌株，且分離率甚高，故本研究亦自食品工業研究 所生物資源保存及研究中心 (Bioresource Collection and Research Center, BCRC) 訂購典型青枯病菌株 (編號 12605)，以來相互比較。此些細菌性分離株在 PDA 培養基上呈高度流動性，在 TTC 培養基上則呈現中央紅色，四周略有透明白色 菌泥之特性，如圖 11，此一特性與青枯病菌十分相似，故暫歸類為「似青枯病」。

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表 8、自苗栗地區杭菊萎凋病株分離可疑病原菌之結果

Table 8. The suspect pathogens from the wilt diseased chrysanthemum in Mioali.

地點 杭菊品系 分離樣本數 鐮胞菌之分離率 似青枯病菌之分離率 苗栗縣公館鄉 白花 2 0/2(0％) 1/2(50％)

苗栗縣銅鑼鄉 白花 7 4/7(57％) 5/7(71％)

表 9、自苗栗地區杭菊萎凋病株分離所得真菌及細菌分離株之編號及其來源。

Table 9. Number and source of fungus or bacterium isolates derived from wilt diseased chrysanthemum in Mioali.

分離株編號 來源地 分離部位 菌株歸類

F412 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 Fusarium oxysporum F421 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 Fusarium oxysporum F522 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 Fusarium solani F322 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 Fusarium solani GK122 苗栗公館 白花萎凋莖基部 未明土黃色真菌菌落 TL312 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 未明橘黃色真菌菌落 HG01 苗栗公館 白花萎凋莖基部 疑似青枯病菌落 HG02 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 疑似青枯病菌落 HG05 苗栗銅鑼 白花萎凋莖基部 疑似青枯病菌落

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圖 7、苗栗地區杭菊萎凋病株分離所得鐮胞菌 F412 之分生孢子型態。

Figure 7. The conidia of Fusarium isolate F412 isolated from wilt chrysanthemum in Mioali.

圖 8、苗栗地區杭菊萎凋病株分離所得鐮胞菌 F322 之分生孢子形態。

Figure 8. The conidia of Fusarium isolate F322 isolated from wilt chrysanthemum in Mioali.

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圖 9、苗栗地區杭菊萎凋病株分離所得鐮胞菌 F522 之分生孢子形態。

Figure 9. The conidia of Fusarium isolate F522 isolated from wilt chrysanthemum in Mioali.

圖 10、苗栗地區杭菊萎凋病株分離所得鐮胞菌 F421 之分生孢子形態。

Figure 10. The conidia of Fusarium isolate F421 isolated from wilt chrysanthemum in Mioali.

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圖 11、自杭菊萎凋病株分離所得細菌分離株 HG02 於 TTC 培養基上生長之菌 落特徵。

Figure 11. The colony morphology of bacterial isolate HG02 on TTC medium.