樣品處理與量測

果蠅心臟(或稱背血管)位於背中線，被表皮所包覆著，如圖 3.3 所示，其位置由胸節(T2)到腹節(A7)，主要功能為提供營養、循環、

過濾血淋巴液，果蠅心臟共由 104 個不同類群及功能的心臟細胞所組 成，是一條會規律跳動的管狀構造，前端不會收縮，功能較類似血管，

故稱為主動脈(aorta)；後端具有規則收縮功能以及類似瓣膜構造稱為 ostiae 的結構，故後端稱為心臟(heart)，如圖 3.4 所示。在心臟每一次 收縮(跳動)中，血淋巴液(即果蠅的血液)從組織中經由 ostiae 流進心 臟(heart)的部位，前端則有血淋巴液自主動脈(aorta)流出背管進到組 織中，完成在果蠅開放式循環系統的功能。幼年之果蠅表皮呈半透 明，成年果蠅個體大約 2~3 釐米且表皮變成不透明，而其背血管(即 主動脈與心臟)位置由胸節到腹節，被表皮所包覆著，需要在具有高

度散射特性生物體內仍能取得觀測影像的斷層掃描技術。

Heart Heart aorta

aorta

(a) (b)

圖3.3 果蠅身體透視結構圖，(a)側視圖、(b)上視圖，紅色箭頭所指為果 蠅的心臟(heart)，藍色箭頭所指為果蠅的主動脈(aorta)，圖片修改自文獻

[27]。

圖3.4 果蠅心臟透視圖，A..為將果蠅切開後使用 green fluorescent protein (GFP) (1029-Ga4/UASGFP)的方法來觀察果蠅的心臟型態

、B.為示意圖，圖中左半部為皆為果蠅主動脈(aorta)，右半部皆為果蠅心 臟(heart)，圖片修改自文獻[28]。

3.2.2 果蠅培養

在試管底部放置食物，再將果蠅放進試管，試管口用棉花塞住，

如此讓空氣能夠進出，如此將試管放在25℃的恆溫環境下培養果蠅，

果蠅的生命週期大約為七到九週，我們採用隔週量測，每個種類，公 的跟母的各量測 1、3、5、7 週，每次量測 20 隻果蠅，每隻量測 30 秒，按照如此計算，一個種類總大約共需要量測160 隻果蠅。

3.2.3 果蠅處理與活體量測

果蠅只要接觸到二氧化碳(CO2)就會昏迷大概 5 到 10 分鐘，所以 先將果蠅用二氧化碳(CO2)迷昏，然後再將果蠅放在載波片上並且用 果凍膠固定，如用此法量測，量測時因為果蠅呈半昏迷狀態，所以身 體還是會一直動，如此便會造成在處理data時很多的不便，所以將果 蠅用二氧化碳(CO2)迷昏之後，先用麻醉劑將果蠅麻痺，我們採用的 麻醉劑為Fly Nap，從文獻[29]中知道，此麻醉劑幾乎不會影響果蠅心 臟的跳動，它可以使果蠅的身體不會動，麻醉劑Fly Nap是用氣體的 形式麻醉果蠅，只要讓果蠅接觸Fly Nap大約 5 到 10 分鐘，果蠅就能 被麻醉半小時左右，此時果蠅心臟會正常跳動，但身體卻不會動，這 時再將果蠅放在載波片(slide)上並且用果凍膠(Jelly glue)固定住果蠅 (Drosophila)的翅膀，如圖 3.5(b)所示。

將果蠅如圖 3.5(b)所示固定好之後，將此樣品放在掃瞄式光源之 光 學 同 調 斷 層 攝 影 系 統 (Swept Source Optical Coherence

Tomography，SS-OCT)的樣品端即可開始量測，如圖 3.5(a)所示。

slide

Jelly glue Drosophila

Fiber

C-scanning

translation stage slideslide

Jelly glue Drosophila

Fiber

C-scanning translation stage

^slide

Jelly glue Drosophila

slide

Jelly glue Drosophila

(a) (b)

圖3.5 (a)果蠅量測示意圖，(b)果蠅固定結構圖，將果蠅放在載波片(slide) 上並且用果凍膠(Jelly glue)固定住果蠅(Drosophila)的翅膀。