第一章 緒論
第三節 毛茄的文獻回顧
一、毛茄的研究
毛茄全株具消炎、行氣、活血及止痛;民間是用來治療咳嗽、咽喉痛、
水腫、跌打損傷及疝氣(14),而在印度則用來治療蛀牙(16)。目前文獻研究發 現,毛茄的種子含有硬脂酸、棕櫚酸、油酸及亞油酸(17),且果實也發現含 有 Solanine(16,18)。Yang 等人對 127 種可食用植物中 (包含毛茄) 進行超氧陰 離子自由基清除能力測試及 Trolox 當量抗氧化能力試驗的抗氧化能力分析,
並從中挑選 5 個抗氧化能力最佳,進一步進行其他抗氧化試驗,結果顯示,
毛茄不是前 5 名抗氧化能力最佳之植物(19),因此,未詳細敘述毛茄之相關 活性。對於毛茄之其他活性成分研究目前尚未有文獻報告,因此選擇毛茄 作為本篇論文之研究材料。
二、 抗氧化活性評估方法
本 研 究 選 用 毛 茄 , 以 活 性 目 標 分 離 方 式 (Activity-guided isolation) 進行毛茄之抗氧化活性成分之分離純化及構造鑑定,所選 用之抗氧化活性評估方法有 DPPH 自由基清除能力試驗、Trolox 當 量的抗氧化能力 (TEAC 法) 及總酚含量測定試驗三種。DPPH 自由 基清除能力試驗為模擬脂質自氧化的過程中會產生自由基造成脂質 酸敗,實驗目的為觀察待測物對 DPPH 自由基之清除能力。Trolox
當量的抗氧化能力 (TEAC 法) 為模擬體內陽離子自由基,實驗目的 為觀察待測物對陽離子自由基之清除能力;總酚含量測定,可測量 物質中的黃酮素類、花青素類、酚酸類等,這些已被研究出具有抗 氧化能力之酚類物質。以下分別敘述此三種平台的試驗原理:
(一) DPPH 自由基清除能力試驗原理(20):
DPPH 自由基可溶於甲醇或是乙醇溶液中,為一穩定的自由基其 結構如圖 1-3,DPPH 自由基溶液,在波長 517 nm 下,呈現藍紫色強 的吸光值。當一個抗氧化劑還原 DPPH 自由基時,會使得在 517 nm 之吸光值下降形成 DPPH2,此時顏色會變為黃色。當抗氧化劑的抗 氧化能力越強時,其吸光值就會越低,DPPH 自由基清除能力就越佳,
其反應如圖 1-3 所示。
圖 1-3 DPPH 氧化型/還原型之化學結構圖(21)
(二) Trolox 當量抗氧化試驗原理(22):
Trolox 當量抗氧化試驗的抗氧化能力的評估是使用 ABTS˙+
﹝2,2'-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid 陽離子自由基﹞
的清除能力。當 ABTS 在 Horseradish peroxidase (HRP) 的催化下與 雙氧水 (H2O2) 反應,會形成穩定的藍綠色 ABTS˙+陽離子自由基溶 液,其反應如圖 1-4。當 ABTS˙+與擁有抗氧化能力的反應物結合後,
會使得吸光值降低,而測出來的吸光值越低,則代表著反應物清除 ABTS˙+的能力越佳,即代表著較佳的抗氧化能力效果,其反應如圖 1-4 所示。
圖 1-4 ABTS 氧化型/還原型之化學結構圖(21)
(三) 總酚含量測定試驗原理(23,24):
測定方式是採用 Folin-Ciocalteu 法,以沒食子酸 (Gallic acid) 當 標準品進行測定。Folin-Ciocalteu 法中的福林酚試劑 (Folin-Ciocalteu reagent) 內含鎢酸鈉 Sodium tungstate (Na2WO4· 2H2O, 100 g) 與鉬 酸鈉 Sodium molybdate (Na2MoO4, 25 g) 的黃色溶液。酚類成分與
Folin-Ciocalteu 試劑反應時,必須在鹼性環境下才能進行反應,因 此加入碳酸鈉溶液使 pH 值位在鹼性。當 Folin-Ciocalteu 試劑被酚 還原成藍綠色的複合物,其在 750 nm 擁有較強的吸光值,當吸光值 越高,就代表著還原能力越佳,則酚的含量就越多。其反應式如下:
Mo (VI) + phenols → Mo (V)