第二章 材料與方法
第六節 毛茄葉部大量萃取及分離
一. 溶媒：
1. 二氯甲烷 (Methylene chloride, CH2Cl2)：Mallinckrodt, USA 2. 甲醇 (Methanol, CH3OH)：Mallinckrodt, USA
3. 95 % 乙醇 (Ethanol, C2H5OH)：友和貿易股份有限公司，Taiwan 4. 乙酸乙酯 (Ethyl acetate, CH3COOC2H5)：關東化學株式會社，Japan 5. 正丁醇 (n-Butanol, C4H10O)：Riedel-de Haë, Germany
6. 醋酸 (Acetic acid, CH3COOH) : JT-Baker, USA 二. 層析材料：
1. TLC Plates Silica gel 60 F254：Merck No.105554, Germany 2. Silica gel 60-230 mesh : Merck No.64271, Germany
三. 儀器設備：
1. 紫外線照射燈：UVP Model®, UVGL-25 2. 水流式抽氣機：EYELA®, A-1000S 3. 冷卻循環機：EYELA®, CA-100 4. 水浴器：Guang pyna®
5. 減壓濃縮機：Heidolph®, Laborota 4000 6. 電子天平：EXCELL®,BH-600
7. 微熔點測定儀：Yanaco®, MP-S3 8. 紫外線分光光譜儀：Hitachi®, U2900) 9. 紅外線光譜儀：SHIMADZU®, FTIR-8501 10. 核磁共振儀：Bruker®, AV-400
11. 離子層析儀：Dionex ics-1100
12. 感應耦合電漿質譜儀：Agilent 7500A/G3160B 四. 毛茄葉部大量萃取及分離之實驗步驟
將陰乾絞碎後的毛茄葉部 (SLL) 共 540.38 g，加入 9 L 95%乙醇，
於 80 ℃下加熱迴流萃取 6 個小時，趁熱過濾後，收集濾液，殘渣再次 加入 9 L 95 %乙醇。依上述步驟重複萃取共十次直至濾液無色，合併濾 液，將濾液減壓濃縮至乾，得到黑褐色毛茄酒精萃取物，標示為 SLLE，
共 116.53 g。將萃取物 116.53 g 以 H2O 共 1.6 L 及 CH2Cl2溶媒共 3.5 L 作分配萃取，可得 27.56 g CH2Cl2層萃取物標示為，SLLED。0.47 g 不 溶物萃取物標示為，SLLEI。H2O 層再與 EtOAc 溶媒共 8.0 L 作分配萃 取可得 19.07 g EtOAc 層萃取物，標示為 SLLEA。0.89 g 乳化層萃取物，
標示為 SLLEE。剩下之 H2O 層再與 n-Butanol 溶媒共 8.0 L 作分配萃取 可得 n-Butanol 層萃取物，標示為 SLLEB 共 41.18 g。H2O 層萃取物，標 示為 SLLEW 共 26.20 g。將 CH2Cl2、EtOAc、乳化層、n-Butanol、不溶 物與 H O 層萃取物分別進行 DPPH 自由基清除能力測試、Trolox 當量抗
氧化能力試驗及總酚含量測定試驗，結果則以 SLLEA (EtOAc 層萃取 物) ，具有最高之抗氧化能力，結果論述於第三章第四節。由 SLLEA 預留 0.4067 g，作為預試驗用。由 SLLEA 中可分離得到 7.3457 g (1) 化 合物，剩餘 11.32 g 以 CH2Cl2 : MeOH (25:1) 進行矽膠管柱層析分離，分 離得 SLLEA1~5 之五個分層。將此五個分層分別進行 DPPH 自由基清除 能力測試、Trolox 當量抗氧化能力試驗及總酚含量測定試驗，結果顯示 出 SLLEA2 具有最佳之抗氧化能力，結果論述於第三章第四節。再將 SLLEA2 預留 0.0505 g，其餘 0.3398 g 以 CH2Cl2 : MeOH (25:1) 進行矽 膠管柱層析分離，得 SLLEA2-1~ SLLEA2-6 之六個分層。將此六個分層 分別進行 DPPH 自由基清除能力測試、Trolox 當量抗氧化能力試驗及總 酚含量測定試驗，結果顯示出 SLLEA2-2 及 SLLEA2-3 具有最佳之抗氧 化能力。SLLEA2-3 分離得到 (2) 化合物。萃取分離純化流程圖如圖 2-1 以下即分別敘述毛茄個部位水萃及 95 %乙醇萃取物、各分配萃取 層及矽膠管柱分離之各分層之 DPPH 自由基清除能力試驗、Trolox 當量 抗氧化能力試驗及總酚含量試驗測定試驗結果，及 (1) 化合物與 (2) 化合物之結構鑑定。
圖 2-1 毛茄葉部 95 %乙醇萃取物之分離及純化流程圖 The Leaves of Solanum lasiocarpum (SL) (540 g)
H2O / CH2Cl2 Crude extract (SLLE) (116.53 g)
H2O layer 116.53 g for partition
CH2Cl2 layer
the Salt class mixture (1) (7.3457 g) 407 mg for preliminary test SLLEA (11.32 g)
SiO2 c.c.
CH2Cl2 : MeOH (25:1)
SLLEA2 (0.3398 g)
50.5 mg for preliminary test
SiO2 c.c.
CH2Cl2 : MeOH (25:1)
Paprazine (2) (1.54 mg)
第三章 結果與討論