申請專利範圍結構分析

依據根據美國專利規範 37 CFR §1.75 (d) (1) “The claim or claims must conform to the invention as set forth in the remainder of the specification and the terms and phrases used in the claims must find clear support or antecedent basis in the description so that the meaning of the terms in the claims may be ascertainable by reference to the description.” ， 因 此 藉 由 申 請 專 利 範 圍 結 構 分 析 (claim

construction) ，可以得知該篇專利之申請專利範圍是否得到了專利說明書的充 分支持，進而判定該專利的申請專利範圍品質及其有效性，此對於主張專利權 利範圍或進行授權談判將產生重大影響。下表10 為本研究之鑑價標的『蛋白質 表現系統』之技術所申請並已經獲證的美國專利 UA7524648 申請專利範圍 (Claim)，本研究針對其申請專利範圍結構分析結果為：

該申請專利範圍(Claim)之保護標的計有『嵌合基因(chimeric gene)』、『蛋 白質表現載體（protein expression vector）」、「分離之宿主細胞(isolated host cell)」、「在宿主細胞中以增加之產率生產重組目標蛋白質之方法與在宿主細 胞中生產具有增加之免疫原性之重組目標蛋白質之方法(method for enhancing immunogenicity and/or solubility of a target protein or polypeptide in a host cell expression system)」、「表現目標蛋白質或多肽之方法(method of expressing a target protein or polypeptide)」。其中說明書已由實施例一至實施例十三(Examples 1-13)完整揭露上述保護標的之各項特徵。

根據上述分析，本項目符合 4 分之評分標準：同時兼具權利範圍廣、結構 之元件或製作步驟/流程的文字定義清楚、且結構元件之間的相對關係清楚、說 明書可充份支持 Claim 內容、且申請之權利範圍能確實掌握住其發明的技術特 徵。

表10

US7524648

項目 申請權利範圍

1 A chimeric gene comprising:

a. a first DNA sequence encoding a protein transduction domain (PTD) having HIV-Tat PTD activity;

b. a second DNA sequence, linked in translation frame with the first DNA sequence, a encoding J-domain having a heat shock protein 70

(Hsp70)-interacting activity; and

c. a third DNA sequence, linked in translation frame with the second DNA sequence, a target protein or polypeptide.

(一種嵌合蛋白質，其包含：

a. 主要由編碼序列編號：1 之蛋白質轉導結構域之核苷酸序列；

b. 編碼序列編號：3 之 Hsp40-J 結構域之核苷酸序列；及 c. 編碼目標蛋白質之核苷酸序列。)

表10(續)

項目 申請權利範圍

2 The chimeric gene of claim 1, wherein the first DNA sequence encodes a protein transduction domain (PTD) comprising the amino acid sequence set forth by SEQ ID NO: 1.

(如申請專利範圍第 1 項之嵌合基因，其中該編碼蛋白質轉導結構域之核 苷酸序列包含序列編號：1 之核苷酸序列。)

3 The chimeric gene of claim 1, wherein the second DNA sequence encodes a J-domain comprising the amino acid sequence encoding set forth by SEQ ID NO: 3.

(如申請專利範圍第 1 項之嵌合基因，其中該編碼 Hsp40 J 結構域之核苷 酸序列包含序列編號：3 之核苷酸序列。)

4 The chimeric gene of claim 1, wherein the first DNA sequence encodes a protein transduction domain (PTD) comprising the amino acid sequence set forth by SEQ ID NO: 1, and the second DNA sequence encodes a J-domain comprising the amino acid sequence set forth by SEQ ID NO: 3.

(如申請專利範圍第 1 項之嵌合基因，其中該目標蛋白質包含 Hsp 肽、生 長因子、病毒受體結合性結構域及病毒核心蛋白質中之至少一種。) 5 The chimeric gene of claim 1, wherein the J-domain is a member selected

from the group consisting of a heat shock protein 40 (Hsp40) J-domain and a simian virus 40 (SV40) large T antigen (Tag) J-domain.

(如申請專利範圍第 1 項之嵌合基因，其中該目標蛋白質包含 Hsp 肽、生 長因子、病毒受體結合性結構域及病毒核心蛋白質中之至少一種。) 6 The chimeric gene of claim 1, wherein the J-domain is from a human heat

shock protein 40.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 1 項所述之嵌合基因。) 7 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 1.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 1 項所述之嵌合基因。) 8 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 4.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 4 項所述之嵌合基因。) 9 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 5.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 5 項所述之嵌合基因。) 10 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 2.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 2 項所述之嵌合基因。) 11 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 3.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 3 項所述之嵌合基因。) 12 A protein expression vector comprising the chimeric gene of claim 6.

(一種蛋白質表現載體，其包含如申請專利範圍第 6 項所述之嵌合基因。) 13 An isolated host cell comprising the expression vector of claim 7.

(一種經分離之宿主細胞，其包含如申請專利範圍第 7 項之蛋白質表現載 體。)

14 An isolated host cell comprising the expression vector of claim 8.

(一種經分離之宿主細胞，其包含如申請專利範圍第 8 項之蛋白質表現載 體。)

表10(續)

項目 申請權利範圍

15 An isolated host cell comprising the expression vector of claim 9.

(一種經分離之宿主細胞，其包含如申請專利範圍第 9 項之蛋白質表現載 體。)

16 An isolated host cell comprising the expression vector of claim 10.

(一種經分離之宿主細胞，其包含如申請專利範圍第 10 項之蛋白質表現 載體。)

17 The host cell of claim 13, wherein the host cell is an E. coli cell.

(如申請專利範圍第 13 項之宿主細胞，其中該宿主細胞為大腸桿菌。) 18 A method for enhancing immunogenicity and/or solubility of a target

protein or polypeptide in a host cell expression system comprising the steps of:

a. generating a protein expression vector according to claim 7;

b. transfecting a host cell with the expression vector;

c. culturing the host cell transfected with the expression vector under conditions that permit expression of the target protein or polypeptide; and d. lysing the host cell to release proteins or polypeptides;

e. separating soluble from insoluble proteins or polypeptides; and

f. isolating the soluble target proteins or polypeptides, wherein the yield of the soluble inherently more immunogenic target proteins or polypeptides is significantly greater that that from an expression vector without PTD and J-domain.

(一種在宿主細胞中以增加之產率生產重組目標蛋白質之方法，其包含：

a.構築如申請專利範圍第 7 項所述之蛋白質表現載體；b.在宿主細胞中轉 形該蛋白質表現載體； c.從宿主細胞中收集及單離該重組目標蛋白質；

d.溶解宿主細胞中的蛋白質或多肽；e.從蛋白質或多肽中分離出可溶物；

f.隔離目標蛋白質或多胜。)

19 A method of expressing a target protein or polypeptide comprising the steps of:

a. transfecting a host cell with the expression vector of claim 7;

b. culturing the host cell transfected with the expression vector under conditions that permit expression of the target protein or polypeptide; and c. isolating the target protein or polypeptide.

(一種製作表現目標蛋白質或多肽的方法，其包括：a.在宿主細胞轉譯如 申請專利範圍第7 項所述之蛋白質表現載體；b.在表現目標蛋白質或多 肽培養宿主細胞中的蛋白質表現載體；以及 c.分離目標蛋白質或多肽。) 20 An isolated host cell comprising the expression vector of claim 11.

(一種經分離之宿主細胞，其包含如申請專利範圍第 11 項之蛋白質表現 載體。)