本研究藉由篩選具有解熱、鎮痛、抗發炎作用之中草藥對於 LPS
與Interferon-γ 誘導小鼠巨噬細胞(RAW264.7)產生 NO 抑制之作用為 指標，設立一實驗篩選平台。
首先從八十七種用於治療抗發炎、解熱及鎮痛之中草藥篩選對 LPS 與 Interferon-γ 誘導巨噬細胞(RAW264.7)產生 NO 抑制之影響。
其中半枝蓮不僅活性佳，且為台灣民間常用的抗癌藥物，又半枝蓮幾 個主要化學成分也與中藥黃芩類似，因此本研究進一步以醋酸扭體 法、福馬林舔足試驗及λ-carrageenan 足蹠腫脹法，探討半枝蓮及其成 分 scutellarein 之鎮痛及抗發炎藥理作用，最後測定 λ-carrageenan 誘 導足蹠腫脹小鼠之腫脹腳掌的MDA 及 NO 含量、肝組織中抗氧化酵 素(SOD、GSH-Rd、GSH-Px)活性，以探討 scutellarein 之抗發炎機轉。
獲得結果簡述如下：
ㄧ、八十七種中草藥對LPS 與 INF-γ 誘導巨噬細胞(RAW264.7)產生 NO 活性抑制之實驗中包括艾納香 Blumea balsamifera (L.) DC.
(IC50: 30.03 μg/mL); 鵝不食草 Centipeda minima (L.) A. Br. ＆ Ascher. (IC50: 7.34 μg/mL); 馬藍 Kalimeris indica (L.) Sch. Bip.
(IC50: 32.37 μg/mL); 葉下珠 Securinega suffruticosa (Pall.) Rehd.
(IC : 26.12 μg/mL); 廣東紫花地丁 Gentiana loureirii (G. Don)
Griseb. (IC50: 13.5 μg/mL); 半枝蓮 Scutellaria rivularis Wall. (IC50: 38.28 μg/mL); 益母草 Leonurus artemisia (Lour.) S. Y. Hu (IC50: 37.46 μg/mL); 廣東香思子 Abrus cantoniensis Hance (IC50: 68.31 μg/mL); 龍鬚藤 Bauhinia championii (Benth.) Benth. (IC50: 40.47 μg/mL); 丁葵草 Zornia gibbosa Spanoghe (IC50: 40.12 μg/mL); 剛 毛尖子木 Oxyspora vagans (Roxb.) Wall. (IC50: 19.79 μg/mL); 地 瓜榕 Ficus tikoua Bur. (IC50: 17.51 μg/mL); 仙鶴草 Agrimonia
pilosa Ledeb. (IC
50: 27.44 μg/mL); 細葉水團花 Adina rubellaHance (IC50: 3 μg/mL) 及深綠卷柏 Selaginella doederleinii Hieron.
(IC50: 47.11 μg/mL)等，共有 15 種中草藥對 LPS 與 INF-γ 誘導巨 噬細胞(RAW264.7)產生之 NO 含量有顯著的抑制作用，其抑制率 都在80％以上。半枝蓮成分 wogonin、baicalein、scutellarein 對 抑制NO 產生實驗中又以 scutellarein 效果最好，其 IC50為 12.7±3.11 μg/mL。
二、口服給予半枝蓮粗抽物（0.5, 1.0 mg/kg）均可減少由醋酸所引起 疼痛之扭體次數，顯示有鎮痛作用。腹腔注射scutellarein 明顯減 少由醋酸所引起疼痛之扭體次數，且以scutellarein (20 mg/kg)效 果最佳，顯示有鎮痛作用。
三、口服給予半枝蓮粗抽物對減少小鼠福馬林誘發前期之舔足反應時 間沒有明顯影響，但可明顯減少小鼠福馬林誘發後期之舔足反應 時間，顯示其具有週邊鎮痛作用，且以半枝蓮 (1.0g/kg)效果較 佳。腹腔注射scutellarein 對減少小鼠福馬林誘發前期之舔足反應 時間沒有明顯影響，但可明顯減少小鼠福馬林誘發後期之舔足反 應時間，顯示其具有週邊鎮痛作用。
四、口服給予半枝蓮粗抽物可明顯降低λ-carrageenan 誘導的急性足 蹠浮腫，顯示半枝蓮粗抽物具有抗發炎作用。腹腔給予scutellarein 可明顯降低λ-carrageenan 誘導的急性足蹠浮腫，顯示 scutellarein 具有抗發炎作用，其中以scutellarein (10 mg/kg)效果最佳。且 scutellarein 能明顯降低 NO、MDA 含量，及明顯提升 SOD、
GSH-Rd 抗氧化酵素的濃度，顯示 scutellarein 之抗發炎作用與提 升肝臟中抗氧化酵素之活性，因而減少MDA 與 NO 含量有關。
五、Scutellarein 對 LPS 與 INF-γ 誘導巨噬細胞(RAW264.7)產生之 NO 含量的抑制率明顯高於baicalein 與 wogonin，顯示其活性與 flavone 結構上氫氧基數量有關。
綜合上述結果顯示，利用LPS 與 INF-γ 誘導小鼠巨噬細胞
(RAW264.7)產生 NO 含量之抑制作用為指標，可篩選出具有抗發炎作 用之中草藥。半枝蓮及其成分 scutellarein 具有鎮痛與抗發炎作用，而 scutellarein 之抗發炎作用機轉，與提高肝臟中抗氧化酵素 (SOD 與 GSH-Rd) 之活性，並減少足蹠組織中之 MDA 與 NO 含量有關。
謝 辭
衷心感謝恩師吳金濱博士、謝明村博士及彭文煌博士不辭辛勞的 盡心指導，本論文方得順利完成，在此致上最誠摯的謝意。受業期間，
承蒙吳老師協助申請至日本大學進修，日本交流協會與國科會提供經 費，那段赴日進修的時光永生難忘；感謝謝校長如父執般的殷殷提 攜；彭老師如兄長般的殷切指導與關懷，受益恩情永銘於心。由衷感 謝陳教授介甫博士、吳教授午龍博士、陳主任忠川博士、張所長永勳 博士於論文審查時所賜寶貴建議，使本論文更臻完善。更感謝張所長 的提拔，推廣教育中心九年的行政經驗讓我成長許多，鼓勵並提供我 良好的進修環境；日本大學生藥學研究室北中進教授提供一氧化氮研 究方法與優良的研究環境，王立岩博士、王玨博士在實驗上的指導；
瀋陽藥科大學姚新生教授提供部分藥材樣本，孫啟時教授、吳維春教 授協助鑑定藥材；謝教授文全博士、邱年永老師協助採集與鑑定植 物，葉副教授豐次博士、黃副教授順爵博士、郭副教授昭麟博士、黃 副教授太鴻博士給予的提攜與教導。
感謝臻里生物科技股份有限公司協助抽取半枝蓮。感謝動物中心 王技士文信先生、中藥所藥理實驗室立偉、泛修、皓元、宗俊、宜璇、
信維、冠麟、芸禎、熒駿、承瑋、藥化所植化實驗室惠雅、致群、雯
茹、釗偉、勝紘、柏雄等學弟妹們的協助，能與大家一起做實驗，是 我最愉快的時光。博士班同學賴副教授妙英博士、柯助理教授裕仁博 士、謝助理教授長奇博士、高國清博士、碩士班同學黃助理教授雯雯 博士、大學同學張助理教授文德博士、余副教授建志博士，以及慧敏、
惠貞、宜文、淑華、淑瓊、夙真、玲珊等諸多好友，謝謝你們給我的 關懷與鼓勵。
七年的時光雖然有些波折，但我心中充滿感恩，感恩這一路上所 有陪我走過來的朋友們。感恩我的先生、我無話不談的好朋友林昆宏 醫師，多年來以實際行動支持我在職進修，總在我想要放棄的時候拉 我ㄧ把，鼓勵我不論有多艱苦也要完成學業；感恩我三個乖巧貼心的 小孩汝穎、汝潔、伯勳，媽媽終於畢業了；感恩公公林資湖先生、婆 婆洪素鶯女士對我如女兒般的照拂，讓我時時感受到溫暖。
最後謹以本論文獻給四十年來始終疼愛我的父親廖福麟先生、母 親鍾秀琴女士及愛護我的大哥廖芳俊、二哥廖廷尉，由於您們多年來 的關懷與支持，讓我終於完成此人生重要的階段。
參考文獻
1. Koop CE. The future of medicine. Science 2002; 295: 233.
2. 謝明村。中藥學概論，國立中國醫藥研究所，台北，1996：pp99-124。
3. 許鴻源。簡明藥材學，新醫藥出版社，台北，1985：pp78-203。
4. 魏文漢。病理生理學(第一版)，上海科學技術出版社，上海，1984：
p388.
5. Costa D, Gomes A, Reis S. Hydrogen peroxide scavenging activity by non-steroidal anti-inflammatory drugs. Life Sci 2005; 76: 2841-8.
6. Yoshida Y, Wang MQ, Liu JN. Immunomodulating activity of Chinese medicinal herbs and oldenlandia diffusa in particular. Int J Immunol 1997; 19: 359.
7. 劉銀良，高佛良。NO 一種新的信息分子與效應分子，
免疫學雜誌
1996；12：1-4。8. Liao JC, Lin KH, Ho HY, Peng WH, Yao XH, Kitanaka S, Wu JB.
Inhibitory effects of 87 species of traditional Chinese herbs on nitric oxide production in RAW264.7 macrophages, activated with
lipopolysaccharide and interferon-γ. Pharmaceutical Biology 2005; 43:
158-63.
9. 中藥大辭典，上海科學技術出版社，上海，1978：p738。
10. Hsu HY. Illustrations of Chinese herb medicine of Taiwan. Chinese Herb Medicine Committee National Health Administration. Taipei, R.O.C., 1972: p133.
11. Kan WS. Pharmaceutical Botany. National Research Institute of Chinese Medicine. Taipei, R.O.C., 1975: p487.
12. Chiu NY and Chang KH. The Illustrated medicinal plants of Taiwan Vol. (1) Southern Materials Center Inc., Taipei, R.O.C. 1999; p188.
13. Qian B. Clinical effect of anticancer Chinese medicine. Shanghai Translation Publishing House; Shanghai, 1987: pp6-7.
14. Yin X, Zhou J, Jie C. Anticancer activity and mechanism of
Scutellaria barbata extract on human lung cancer cell line A549. Life Science 2004; 75: 2233-44.
15. 路平成、許益民。半枝蓮多糖對細胞免疫的調節作用，南京中醫 學院學報，1989；2：32-33。
16. Yu J, Lei J, Yu H, Cai X, Zou G. Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oil of Scutellaria barbata,
Phytochemistry 2004; 65: 881-4.
17. 向仁德、鄭永芳。半枝蓮化學成分的研究，中草藥，1982；13：
9-12。
18. Chiu FH, Lin CC, Yen MH, Wu PS, Yang CY. The pharmacological and pathological studies on several hepatic protective crude drugs from Taiwan (Ⅴ): The effects of Bombax malabrica and Scutellaria
rivularis. American Journal of Chinese Medicine 1992; 4: 257-64.
19. Lin SC, Lin CC, Lin YH, Chen CH. Protective and therapeutic effects of Ban-zhi-lian on hepatotoxin-induced liver injuries. American
Journal of Chinese Medicine 1994; 22: 29-42.
20. Lin CC, Shieh DE. The anti-inflammatory activity of Scutellaria
rivularis extracts and its active components, baicalin, baicalein and
wogonin. American Journal of Chinese Medicine 1996; 24: 31-6 21. Chen YC, Yang LL, Lee TJF. Oroxylin A inhibition of LPS-inducediNOS and COX-2 gene expression via suppression of NF-κB activation. Biochem Pharmacol 2000; 59: 1445-57.
22. Chen YC, Shen SC, Chen LG, Lee TJ, Yang LL. Wogonin, baicalin, and baicalein inhibition of inducible nitric oxide synthase and
cyclooxygenase-2 gene expressions induced by nitric oxide synthase inhibitors and lipopolysaccharide. Biochemical Pharmacology 2001;
61: 1417-27.
23. 楊光華。病理學第五版，人民衛生出版社，北京，2002：p572。
24. Shacter E, Weitzman SA. Chronic inflammation and cancer. Oncology
(Huntington) 2002; 16: pp217-26, 229, discussion 230-2.
25. Murakami A, Nakamura Y, Torikai K, Tanaka T, Koshiba T,
Koshimizu K, Kuwahara S, Takahashi Y, Ogawa K, Yano M, Tokuda H, Nishino H, Mimaki Y, Sashida Y, Kitanaka S, Ohigashi H.
Inhibitory effect of citrus nobiletin on phorbol ester-induced skin inflammation, oxidative stress, and tumor promotion in mice. Cancer
Res 2000; 60: 5059-66.
26.曾頌惠：台北醫學大學生藥學研究所論文，非類固醇抗炎藥與天 然物合併治療對抗發炎反應之協調作用，2002，pp28-9.
27. Ozaki Y. Antiinflammatory effect of tetramethylpyrazine and ferulic acid. Chem Pharm Bull 1992; 40: 954-6.
28. Deepak M, Handa SS. Antiinflammatory activity and chemical
composition of extracts of Verbena officinalis. Phytother Res 2000; 14:
463-5.
29.許鴻源。簡明藥材學，新醫藥出版社，台北，1985，pp410-1.
30.Hsieh WT, Tan TW, Chen CF, Tsai HY. Studies of anti-inflammatory and analgesic effect of Ampelopsis brevipedunculata. Chin Med Coll J 1998; 7: 81-7.
31. Vinegar R, Schreiber W. R. Biphasic development of carrageenan edema in rats. J Pharmacol Exp Ther 1969; 1: 96-166.
32. Holsapple MP, Yim GKW. Threapeutic rsduction of ongoing carrageenin induced inflammation by lipo-oxygense, but not cyclo-oxygenase inhibitors. Inflammation 1984; 8: 233.
33. Gepdiremen A, Mshvildadze V, Suleyman H, et al. Acute and chronic antiinflammatory effects of Hedera colchica in rats. J Ethnopharmacol 2004; 94: 191-5.
34. Bilici D, Akpinar E, Kiziltunc A. Protective effect of melatonin in carrageenan-induced acute local inflammation. Pharmacol Res 2002;
46: 133-9.
35. Cuzzocrea S, Zingarelli B, Hake P, et al. Antiinflammatory effects of mercaptoethylguanidine, a combined inhibitor of nitric oxide synthase and peroxynitrite scavenger, in carrageenan-induced models of
inflammation. Free Radic Biol Med 1998; 24: 450-9.
36.鄭皓元：去羥梔子苷鎮痛、抗炎及保肝作用之研究。中國醫藥學 院中國藥學研究所碩士論文，台中，2002，pp36-9。
37.丁克祥，邱仲峰，呂鋒洲。SOD 生物與醫學淺論，藝軒圖書出版 社，台北，1996：p218。
38. Culotta E, Koshland DE Jr. NO news is good news, Science 1992;
258: 1862-5.
39. Drummond GR, Harrison DG. eNOS-overexpressing mice: too much NO makes the blood pressure low. Journal of Clinical Investigation 1998; 102: 2033-4.
40. Tamir S, Tannenbaum SR. The role of nitric oxide (NO.) in the carcinogenic process. Biochimica et Biophysica Acta 1996; 1288:
F31-6.
41. Weisz A, Oguchi S, Cicatiello L, Esumi H. Dual mechanism for the control of inducible-type NO synthase gene expression in
macrophages during activation by interferon-gamma and bacterial lipopolysaccharide. Transcriptional and post-transcriptional regulation.
Journal of Biological Chemistry1994; 269: 8324-33.
42. Ohshima H, Bartsch H. Chronic infections and inflammatory processes as cancer risk factors: possible role of nitric oxide in carcinogenesis. Mutation Research 1994; 305: 253-64.
43. Shan BE, Yoshida Y, Sugiura T. Stimulating activity of Chinese
medicinal herbs on human lymphocytes in vitro. International Journal
of Immunopharmacology 1999; 21: 149
44. Gross SS, Wolin MS. Nitric oxide: pathophysiological mechanisms.
45.Kengatharan M, De Kimpe SJ, Thiemermann C. Analysis of the signal transduction in the induction of nitric oxide synthase by lipoteichoic acid in macrophages. Br J Pharmacol 1996; 117: 1163-70.
46.Clancy RM, Abramson SB. Nitric oxide: a novel mediator of
inflammation. Experimental Biology & Medicine 1995; 210: 93-101.
47.Laskin DL, Pendino KJ. Macrophages and inflammatory mediators in tissue injury. Annual Review of Pharmacology & Toxicology 1995; 35:
655-77.
48.Cochran FR, Selph J, Sherman P. Insights into the role of nitric oxide in inflammatory arthritis. Medicinal Research Reviews 1996; 16:
547-63.
49.Wolkow PP. Involvement and dual effects of nitric oxide in septic shock. Inflammation Research 1998; 47: 152-66.
50.Connor JR, Manning PT, Settle SL, Moore WM, Jerome GM, Webber RK, Tjoeng FS, Currie MG. Suppression of adjuvant-induced arthritis by selective inhibition of inducible nitric oxide synthase. Eur J
Pharm 1995; 273: 15-24.
51.Meda L, Cassatella MA, Szendrei GI, Otvos L Jr, Baron P, Villalba M, Ferrari D, Rossi F. Activation of microglial cells by beta-amyloid protein and interferon-gamma. Nature 1995; 374: 647-50.
52.Vodovotz Y, Lucia MS, Flanders KC, Chesler L, Xie QW, Smith TW, Weidner J, Mumford R, Webber R, Nathan C, Roberts AB, Lippa CF, Sporn MB. Inducible nitric oxide synthase in tangle-bearing neurons of patients with Alzheimer's disease. Journal of Experimental
Medicine 1996; 184: 1425-33.
53.Mullet D, Fertel RH, Kniss D, Cox GW. An increase in intracellular cyclic AMP modulates nitric oxide production in IFN-gamma-treated macrophages. Journal of Immunology 1997; 158: 897-904.
54.Woolf CJ, Thompson SWN. The induction and maintenance of central ensitization is dependent on N-methyl-D-aspartic acid receptor
activation: Implications for the treatment of post-injury pain hypersensitivity states. Pain 1991; 44: 293-9.
55. Dubner R, Ruda MA. Activity-dependent neuronal plasticity following tissue injury and inflammation. Trends Neurosci 1992; 15: 96-101.
56. 曹永昌：中國醫藥大學中國醫學研究所博士論文，電針刺激與一 氧化氮合成酵素抑制劑結合的鎮痛研究，2003，pp14-24.
57. 孫維仁、侯文詠、謝正勇、劉健強、林瑞明：C-fos 細胞致癌基因 在疼痛訊號傳遞過程中所扮演的角色。疼痛醫學雜誌 1994：4：
75-88.
58. Dubner R. Methods of assessing pain in animals. Textbook of pain Vol.
Ⅰ Second Ed. (Wall PD and Melzack R), Churchill Livingstone, Edinburgh London Melbourne and New York 1989: pp247-50.
59. Eide PK, Rosland JH. The role of tail skin temperature in the
facilitation of the tail-flick relax after spinal transaction or interference
facilitation of the tail-flick relax after spinal transaction or interference