西方墨點法檢測參與 Hep3B 與 A549 細胞壞死的調控蛋白

（一）利用西方點墨法探討大黃酚對人類肝癌細胞株Hep3B 細胞壞 死的調控蛋白表現量的差異

以西方墨點法分析人類肝癌細胞株 Hep3B 以 50μM 的濃度作用 不同時間（control、6、12、24、48、72h）後的蛋白相對表現量，結 果顯示加藥組在影響細胞內ROS 代謝的酵素包括 GST、SOD（Mn）、

SOD（Cu）及 catalase 蛋白皆比控制組的表現量低，但是 SOD（Mn）、

SOD（Cu）及 catalase 在 48 及 72 小時皆有回升的現象。加藥組的 PARP 在 12 ~ 72 小時的表現量皆比控制組高，與細胞凋亡中的死亡 接受器相關的caspase 8 蛋白，在加藥組的表現量比控制組低，細胞 凋亡中與的粒線體路徑有關的AIF、Apaf-1、caspase 9 蛋白，加藥組 的表現量沒有比控制組高，其中AIF 的表現量在 6 ~ 12 小時的表現量 雖然高於控制組但是在48 與 72 小時的表現量就控制組低。另外，可 顯示粒線體電子傳遞鏈崩解程度的cytochrome c 表現量則上升。

圖5-9-A 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株 Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；圖左為GST 蛋白的表現量，圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-B 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 SOD（Mn）蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左 為 SOD（Cu）蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-C 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 catalase 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左為 PARP 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-D 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 caspase 8 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左為 caspase 9 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-E 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 cytochrome c 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左 為 Apaf-1 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

圖5-9-F 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株Hep3B 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；圖左為AIF 蛋白的表現量，圖右為 AIF 蛋白量化統計圖。

（二）利用西方點墨法探討大黃酚對人類肺癌細胞株A549 細胞細胞 壞死的調控蛋白表現量的差異

以西方墨點法分析 A549 細胞蛋白相對表現量的結果顯示加藥組 在影響細胞內 ROS 代謝的酵素包括 GST、SOD（Cu）及 catalase 蛋 白皆比控制組的表現量低，但是在24 ~ 72 小時皆有回升的現象。加 藥組的PARP 在 12 ~ 72 小時的表現量皆比控制組高，與死亡接受器 路徑相關的 caspase 8 蛋白，在加藥組的表現量比控制組低；粒線體 路徑有關的AIF、Apaf-1、caspase 3 蛋白，加藥組的表現量比控制組 低。另外，可顯示電子傳遞鏈崩解程度的cytochrome c 表現量則上升。

（A）

（B）

圖5-9-G 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株A549 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 GST 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左為 catalase 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-H 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株A549 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 SOD（Mn）蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左 為 SOD（Cu）蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-I 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株 A549 經相同濃度大黃酚

（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 cytochrome c 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左 為 PARP 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-J 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株 A549 經相同濃度大黃酚

（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 caspase 3 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左為 caspase 8 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

（A）

（B）

圖5-9-K 以西方墨點法分析人類肝癌細胞株A549 經相同濃度大黃 酚（50μM）作用不同時間（control、6、12、24、48、72h）

後，細胞中的蛋白相對表現量及量化統計圖；A 圖左為 Apaf-1 蛋白的表現量，A 圖右為量化統計圖；B 圖左為 AIF 蛋白的相對表現量，B 圖右為量化統計圖。

第十節 大黃酚對人類肝癌細胞株 Hep3B 及肺癌細胞株