張淑貞1、申屠萱1,*、劉則言3、羅淑卿2、周桃美1、高靜華1
1.行政院農業委員會農業試驗所應用動物組; 2.行政院農業委員會農業試驗所農業化學組;
3.行政院農業委員會林業試驗所森林保護組; *通訊作者 e-mail: [email protected] 摘要
針對食品安全，食藥署與農糧署每年都會以公告的食品中殘留農藥檢驗方法 抽檢農產品上的農藥殘留。此方法雖很精準，但需應用逾千萬元的分析儀器，且樣 品需逐件上機檢測，緩不濟急。農業試驗所為協助解決農產品的農藥快篩壓力，自 1985 年開始推廣以家蠅乙醯膽鹼酯酶與蘇力菌為核心的農藥快篩技術，可快速篩 檢農產品上的有機磷、氨基甲酸鹽類等神經劇毒農藥與部份殺菌劑。但隨著農藥種 類日漸增多，針對新作用機制之農藥尚無快篩方法，乃於 2012 年起針對常檢出之 高風險農藥及未有公告檢驗方法之農藥種類，加速發展農藥免疫檢測快篩方法。農 藥免疫檢測是新一代的農藥殘留檢測技術，其原理是基於抗體與抗原的特異性結 合，此技術不受限於農藥類別，每種農藥都有機會可研發出其相對應的抗體。但因 農藥分子小，不足以誘發動物產生抗體，需先將農藥連結至蛋白質上，再注射入動 物體中，以誘發動物免疫反應產生農藥抗體。農藥抗體可應用於各項分析技術，進 而衍生各項農藥檢測試劑與產品，使農藥檢驗更為快速、簡便，如應用直接競爭型 ELISA，搭配免疫分析儀，一次檢測流程 90 分鐘，可同時檢測 93 個蔬果檢體含 特定農藥的殘留量；搭配膠體金快篩片技術，10 分鐘就能呈色，不需儀器，可直 接以肉眼判讀；未來搭配漸臻成熟的微型晶片技術，可同時偵測同一檢體上的多種 農藥。整體而言，農藥免疫檢測由於各項分析技術日益精進，將可更快及精準地檢 測農藥殘留，進行農產品農藥即時把關，增進國人食的安全。
關鍵詞：農藥免疫檢測、農藥抗體、酵素連結免疫吸附分析法 (ELISA)、膠體 金。
前言
現今農藥的未依規定使用，已對食品安全造成嚴重威脅。為增進上市食品安全，
衛生福利部食品藥物管理署 (食藥署) 與行政院農業委員會農糧署 (農糧署) ，每 年都會以公告的食品中殘留農藥檢驗方法抽檢農產品上的農藥殘留。如食藥署 103 年檢驗農產品 2,528 件，檢出不合格 323 件，不合格率 12.8% (蔡等，2015)。
目前國內已登記農藥 362 種，食藥署公告之「食品中殘留農藥檢驗方法-多重殘留 分析方法(五) 」可檢測 310 項農藥 (衛福部，2014)，此公告檢驗方法雖然精準，
但檢驗一件樣品需 5,000~6,000 元，樣品萃取流程冗長，需使用有毒的有機溶劑及 多樣濃縮設備，再應用 LC/MS/MS、GC/MS/MS 及其相應之農藥資料庫比對分析，
相關設備合計逾千萬元，且操作檢驗人員需具備相當之熟練度及專業、分析能力等。
此外，樣品需逐件上機檢測，耗時費力，對於有時效性、不具長保存期的生鮮農產 品來說，無法做到即時確認農產品食用安全或現場快速篩檢之需求，亦有抽驗件數 限制。
農試所為建構農產品農藥殘留之快篩把關能力，在 1963 年即以活體家蠅於 18 個果菜市場進行安檢把關；於 1985 年再度推出以家蠅乙醯膽鹼酯酶及蘇力菌 為核心的農藥殘留生化快篩方法，可快速篩檢農產品上殘留之有機磷、氨基甲酸鹽
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類等神經劇毒農藥及部份殺菌劑，平均每件樣品檢驗需 10 分鐘。此生化法經多年 免疫測定法 (Radioimmunoassay, RIA)、螢光免疫分析法 (Fluorescence immunoassay, FIA)、酵素連結免疫吸附分析法 (Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 等。
其中酵素連結免疫吸附分析法係應用辣根過氧化物酶 (Horseradish peroxidase, HRP) 或鹼性磷酸酯酶 (Alkaline phosphatase, AP) 等酵素來標記抗體或抗原，再加 hemocyanin, KLH) 等；其中牛血清蛋白因具穩定、不易變性、價格便宜易取得 等優點，應用較廣泛。
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食安把關新利器-農藥殘留免疫檢測技術 (Direct competitive ELISA, dc-ELISA) 與間接競爭型 ELISA (Indirect competitive ELISA, ic-ELISA )。
直接競爭型 ELISA 是將農藥抗體固定在微量盤，加入待測農藥與農藥半
樣品需經數種有機溶劑與 SPE 萃取後再濃縮，以 ELISA 分析之樣品則僅以 82.0-128.7%；另將小黃瓜及番茄打汁後外加賽速安後以賽速安 ELISA 檢測，
其回收率為 88.4-110.2%。Qian 等人 (2009) 於甘藍及葡萄外加農藥陶斯松
食安把關新利器-農藥殘留免疫檢測技術 偵測儀檢測微晶片上的免疫反應，可檢測檢體中的腸病毒 (enterovirus)。由於 免疫晶片分析技術皆以偵測抗原與抗體間特異性結合之結合物為基礎，本所已
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書 名：農業害蟲管理暨食安把關研發成果研討會專刊 主 編：石憲宗、申屠萱、陳怡如、高靜華
作 者 (依姓氏筆畫排序) ：
丁柔心、王清玲、王昭月、石憲宗、申屠萱、江明耀、何明勳、余志儒、李啟 陽、李奇峯、吳孟修、周桃美、林鳳琪、林秀枝、林宗俊、邱一中、姚美吉、
姚銘輝、高靜華、張淑貞、張哲銘、陳健忠、陳祁男、陳淑佩、陳怡如、許北 辰、許秀惠、黃毓斌、黃維廷、曾美容、詹富智、楊舜臣、楊崇民、鄭櫻慧、
劉則言、盧秋通、簡淑貝、羅淑卿、蘇秋竹 出 版 者：行政院農業委員會農業試驗所
地址：臺中市霧峰區中正路 189 號 電話：(04) 2330-2301
傳真：(04) 2333-8162 網 址：http://www.ari.gov.tw 出版年月：中華民國 106 年 4 月初版 定 價：非賣品
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