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BSL3 實驗室操作規範

2.1 進入實驗室前應遵循事項

2.1.1 非經實驗室安全管理人員及實驗室負責人之許可,任何人不得進 入。

2.1.2 生手人員必須先經過訓練後,才可以進入實驗室進行實驗工作。

2.1.3 實驗室門口需標示實驗室負責人姓名、職位、聯絡電話、實驗之病 原體。

2.1.4 工作人員有任何身體之異常或不適,必須向實驗室安全管理人及實 驗室負責人報告並暫停入內工作。

2.1.5 工作人員進出實驗室必須登錄姓名、日期、時間及工作項目。

2.1.6 同一時間最多只能 4 人(二台生物安全櫃)進入室內工作。

2.1.7 預先列出實驗器材清單,進入實驗室之前逐項核對器材是否齊備。

2.1.8 進入實驗室前。先查看儀錶控制板上之室內溫、濕度及負壓顯示值 是否合乎設定值。

2.1.9 查看室外氣體壓力桶(二氧化碳、氮氣或氧氣)之壓力錶是否氣體 快要耗盡。

2.1.10 實驗用器材經由高壓蒸氣滅菌鍋或傳遞箱之 UV 照射後送入室內。

2.1.11 嚴禁攜帶私人手機入內使用。

2.1.12 取下手錶、手環、戒指、耳環及髮飾。

2.1.13 脫下影響穿著防護衣之個人外套。

2.1.14 脫鞋進入更衣室(Anteroom)。

2.1.15 換拖鞋後先載 N95 口罩(必要時載安全眼鏡、護目鏡或面罩),著 防護衣、穿膠鞋、戴手套(雙層)。

2.2 進入實驗室內

2.2.1 啟動生物安全櫃運轉至少 5 分鐘後才可開始實驗操作。

2.2.2 先準備吸水性良好之紙巾、酒精棉及消毒液。

2.2.3 嚴守生物安全櫃內勿置放非必要之器材。

2.2.4 準備棄置吸管類容器,預盛適量消毒液。

2.2.5 所有與傳染源有關的開放操作,都應在生物安全櫃或其他物理保護 設備中進行,不可在開放的實驗台上進行。為便利清潔,生物安全 櫃內可舖不透水之抗污紙墊。

2.2.6 實驗操作應注意盡量減少會產生氣霧(Aerosols)之動作,如培養 液之更換或上清液移至另一容器、用吸管吸吹液體、使用高速旋轉 之機具、滴加細菌懸浮液於固體培養基表面、注射器抽取感染性液 體推出氣泡等。

2.2.7 操作中,如手套有任何污染之虞時,立刻更換外層手套。

2.2.8 使用室內通話機、無線電話機應避免用手持聽筒,如無法避免,必 須先脫去外層手套才可手持話機通話。

2.2.9 使用吸管輔助器(Pipette Aid)應選用有加裝過濾器者。

2.2.10 使用吸管輔助器用過之吸管應插入吸管盤(Pipette Tray),吸入消 毒液後才可以退棄吸管。

2.2.11 吸管輔助器使用時因不慎受污染,應立即消毒處理並更換過濾膜,

以防他人不知情而繼續使用,致受污染。

2.2.12 操作感染性液體使用的微吸管頭(Micro Pipettor Tip)應選用有 Filter 者。

2.2.13 使用過之吸管頭先吸入消毒液才可退入吸管盤。

液面適當之高度處,混合時液體才不會衝到蓋子。

2.2.15 實驗操作過程盡可能避免使用易傷手之尖銳物。非使用注射器不可 時,用過之針頭不可用手套回針筒。

2.2.16 使用注射器抽取感染性液後,如需排除氣泡部分,針頭必須朝上,

並插入底部填塞棉花之滅菌短試管,以避免產生氣霧。

2.2.17 開冷凍乾燥菌種(或毒株)安瓶前,安瓶需先用玻璃切割器,切割 欲折斷部位,(手要戴防割材質手套),酒精棉擦拭後將安瓶插入套 管內,外面覆蓋滅菌紗布,再套上塑膠袋,才可折斷安瓶。

2.2.18 培養物、組織、體液標本、或具有潛在傳染性的廢棄物一律放入內 舖耐高溫塑膠袋的不銹鋼桶,以利處理滅菌。

2.2.19 病毒培養瓶整瓶凍結時,解凍前應先套上塑膠袋才可放進 37℃恆 溫水槽解凍,以防培養瓶龜裂,瓶內病毒四處流散。

2.2.20 病毒或細菌株進出實驗室時,須先經生物安全委員會之同意,且其 容器外部必須用消毒液浸泡後,始可進行。

2.2.21 實驗操作中遇到停電,來電重新啟動空調 30 分鐘後才可進入室內 工作。

2.2.22 工作中,意外受感染性物濺到或割傷,應立即作消毒處理並向安全 管理人及實驗室負責人報告及製作紀錄,以利後續追蹤。

2.2.23 實驗操作中遇有感染性液體小量溢出或濺灑,應立即以紗布或棉花 沾消毒液覆蓋,經過 10-15 分鐘後再行清理。

2.2.24 意外大量感染性液傾倒或不慎打破盛感染性液玻璃容器時,人員儘 速依程序離開實驗室,並報告安全管理人及實驗室負責人,由實驗 室負責人決定處理方式,並作成紀錄以利後續追蹤、監視及評估。

並依生物安全管理辦法(草案)相關規定,進行通報程序。

2.3 準備離開實驗室

2.3.1 實驗紀錄攜出應經由電腦網路、傳真機或 PDA 傳送,不得以紙本傳送。

2.3.2 當天工作完畢,實驗室現場必須整理乾淨,使用過之器材,除了不 能用高溫滅菌之可重複使用器材,可用 UV 照射、1%Virkon 液或其他適 當消毒液浸泡外,其他器材一律採用高壓滅菌處理。

2.3.3 離開實驗室前關閉非必要之電源。

2.3.4 登記離開實驗室時間。

2.3.5 工作完或中途需要暫時離開,應在實驗室內先脫去外層手套,才開 房門進入更衣室,腳先踩消毒液(強力吸水性腳墊浸消毒液,鋪在淺槽 內),依序脫掉面罩(眼罩)、防護衣、內層手套、口罩、雨鞋。

2.4 離開實驗室前

2.4.1 洗手或用溫和消毒液噴手。

2.4.2 離開更衣室,著外套。

2.4.3 調整並確認實驗室室內溫度及負壓值後離開。

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