Src kinase

1911 年 Peyton Rous 於 Rous sarcoma virus（RSV）發現第一個 oncogene，為 v-src [27]。而後科學家在正常細胞中發現其類似的 c-src 為 proto-oncogene。本論文提及之 Src 為 c-src 的蛋白產物。其

分子量為60 kDa，為 non-receptor protein-tyrosine kinase，是 Src family kinase（SFKs）的其中一員。可接受例如：細胞激素（cytokines）、

生長因子（growth factor）、黏附（adhesion）和抗原接受體（antigen receptor ） 的 刺 激 ， 而 產 生 細 胞 生 長 （ cell growth ）、 分 化

（differentiation ）、 細 胞 形 狀 改 變 （ cell shape alteration ）、 移 行

（migration）及生存（survival）等生理反應 [28]。Src 的蛋白質結 構從N-端到 C-端，依序為 SH4 domain、unique domain、SH3 domain、

SH2 domain、SH2-kinase linker、protein-tyrosine kinase domain（SH1 domain）和 C-terminal kinase domain。SH4 的 myristylation 可讓 Src 透過長鏈脂肪酸與細胞內膜結合；unique domain 為整個家族中的成 員各自不同之處；SH3 可與 proline rich 的胺基酸序列結合；SH2 則 是 與 phosphorylated tyrosine 有 很 強 的 鍵 結 ； kinase domain 與 regulatory domain 則是主要調控 Src 活性的功能區塊 [29]。

在調控 Src活性方面，有兩個最重要的磷酸化胺基酸，其分別是

（C-terminal Src kinase）及Chk（Csk的homolog）磷酸化後，pTyr527 結合至Src的SH2 domain，使Src存在於不活化狀態。當pTyr527與 SH2-binding pocket分開後，催化區就會顯露出來 [30]，此時位於 activation loop的Tyr416就可以進行自體磷酸化，Src就能穩定存在於 活化態。因此藉由Tyr416與Tyr527兩個胺基酸的磷酸化可調控Src的 活性。此外若Src缺乏C端的tyrosine磷酸化則會使proteasome對Src造 成ubiquitination和degradation，因此在某種狀態下Csk對Src kinase是 正向調控的 [31, 32]。

Src family tyrosine kinases（SFKs）共有 11 個家族成員，分別為 Src、Yes、Fyn、Lyn、Fgr、Hck、Frk、Lck、Srm、 Blk 及 Brk。其 中Src、Fyn 和 Yes 存在於所有的細胞中 [33]，Blk、Fgr、Hck、Lck 和Lyn 主要表現在造血細胞（hematopoietic cells）。其中 Lck 在 T 細 胞、Hck 在骨髓單核球細胞、Srm 存在角質細胞（keratinocytes）。

在過去文獻中認為Lyn、Hck、Fgr這三這Src family成員在巨噬細 胞中扮演不可或缺的角色。但在1997年Lowell的實驗室中 [34]，使 用Lyn、Hck、Fgr這三種蛋白knockout的老鼠，取其腹腔和骨髓的巨 噬細胞，在LPS刺激下卻發現NO的釋放和IL-1、IL-6、TNF-α等類發 炎前驅物質的分泌，和對照組之巨噬細胞並無差別，所以他們認為 在這三種蛋白不存在下，應該有其他的tyrosin kinase取而代之來活化

巨噬細胞。本實驗室發現，巨噬細胞受LPS刺激下Src表現量增加並 且NO的釋出也增加，所以認為Src在巨噬細胞活化中扮演重要角色 [35]。

在許多人類的癌症像乳癌、大腸癌、胰臟癌、肺癌等，皆可以 發現Src蛋白表現量增加和其活性增加的現象 [36]。這些研究都突顯 出Src在人類癌症的發展（development）和進展（progression）有重 要 的 關 聯 性 。Src 可 以 和 一 些 tyrosine kinase receptors 、 cytokine receptors、steroid receptors、integrin receptors and G-protein coupled receptors作用，藉由這樣的調控讓Src參與了細胞生長、存活、黏附 和移行 [37-39]。在癌症的轉移（metastasis）中，Src藉由和focal adhesion kinase（FAK）的交互作用而參與在其中。一般而言，FAK 磷酸化後會使Src聚集，之後吸引Crk-associated substrate（Cas）。而 Paxillin（Pax）使Crk II聚集到Cas而影響DOCK180（180-kDa protein downstream of Crk）-ELMO（engulfment and cell motility）複合體，

其後刺激Rac-GTP使肌動蛋白聚合（actin polymerization）。另外 Paxillin刺激p21-activated kinase（PAK）促進細胞migration。另外，

透過phosphatidylinositol 3（PtdInsP3）-kinase（PI3K）的路徑也可使 細胞增加黏附和移行 [40]。