98 年公務人員高等考試三級考試試題 代號：37940
類 科： 生物技術 科 目： 微生物學
考試時間： 2 小時 座號：
※注意： 禁止使用電子計算器。
不必抄題，作答時請將試題題號及答案依照順序寫在試卷上，於本試題上作答者，不予計分。
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一、下列各舉一個微生物病原（microbial pathogen）為例，它於複製其核酸（replication of nucleic acid）時所需的主要酵素為 RNA-dependent RNA polymerase（RdRP）
者？（3 分）為 Reverse transcriptase（RT）者？（3 分）為 DNA-dependent ＤNA polymerase 者？（3 分）
簡述 RdRP、RT 及ＤNA-dependent RNA polymerase 三者在功能上主要相異之處。
（10 分）
簡述 RT 在現代生物科技（Biotechnology）的運用。（11 分）
二、動物與人類所使用的疫苗常可分類為死或去活性疫苗（killed or inactivated vaccines）
與減毒活疫苗（live attenuated vaccines）兩類型，請舉例說明並比較此兩種疫苗如 何誘發宿主保護性免疫力（protective immunity）。（20 分）
三、王先生研究發現某土壤野生菌之Ｘ蛋白質具有高度醫用的潛力，並於搜尋網路資料 後找到其 DNA 基序，他決定利用大腸桿菌（E. coli）選殖（cloning）該 X 基因以 便更進一步評估。請敘述如何選用下列適當的材料及方法為王先生設計一個可行之 選殖策略及實驗步驟。（25 分）
材料： 大腸桿菌DH5α菌株、細菌質體（plasmid DNA）其具完整之轉錄單位（
transcriptional unit）且在該 動子（promoter）後含一個多重選殖插位（
multiple cloning site）、抗生素（antibiotics）、限制酶（restriction enzymes）、
DNA結合酶（T4 DNA ligase）、DNA聚合酶（T4 DNA polymerase）、T4 聚 核苷酸激酶（T4 polynucleotide kinase），去磷酸基酶（phosphotase），Tag DNA polymerase、自行設計之DNA引子（primers）、抽取菌體DNA或質體 DNA之套件（chromosomal DNA or plasmid DNA purification kit）、純化DNA 片段之套件（DNA fragment purification kit），Ｘ蛋白質的專ㄧ抗體（anti-X protein-specific antibodies）、瓊膠（agarose gel）、SDS-PAGE、及電泳分析 設備等、或你認為其他選殖必備的材料。
方法： 細菌轉形法（transformation）、電穿透法（electroproration）、聚合酶連鎖 反應（polymerase chain reaction，PCR）、含細菌蛋白質萃取物之製備、西 方點墨法（western blotting）、DNA序列分析（DNA sequencing）等、或你 認為其他選殖必須使用的方法。
四、微生物病原針對抗生素產生的抗藥性（antibiotic resistance）常是因為長期或不當使 用該抗生素所造成，請以細菌基因改變（genetic changes）的機制簡述細菌是如何對 各類抗生素形成抗藥性，（15 分）並請簡述細菌是如何將具抗藥性之基因以水平傳 播（horizontal gene exchange）的方式傳給另一細菌體。（10 分）
