傳染性疾病及訊息研究中心

國立成功大學「邁向頂尖大學計畫」

　 　 延攬優秀人才工作報告表

NCKU’s “Aim for the Top University Project” Work Report Form for Distinguished Scholars □續聘continuation of employment □離職resignation

100 年 7 月 13 日更新 受聘者姓名

Name of the Employee

鄒志成 Male Female 聘 期 Period of Employment from 102 年(y) 1 月(m) 1 日(d) to 102 年(y) 3 月(m) 31 日(d) 研究或教學或科技研發與 管理計畫名稱 The project title of research,

teaching, technology development and management

傳染性疾病及訊息研究中心 計畫主持人 （申請單位主管） Project Investigator (Head of Department/Center) 林以行 補助延聘編號

Grant Number HUA 102 - 3 – 22 -130

一、 研究、教學、科技研發與管理工作全程經過概述。（由受聘人填寫）

Please summarize the entire research, teaching, or science and technology R&D and management work process (To be

completed by the employee)

登革病毒屬於黃病毒科，會導致嚴重的登革出血熱與登革熱休克症候群。有關於登革熱的研 究已超過 50 年，近年來雖然科學家對登革病毒的特性漸漸有所瞭解，在加上登革病毒的高變異 性，所以至今還無可用的疫苗上市。而其疫苗的研發受阻於免疫反應，登革病毒感染會引起自體 免疫反應，目前世界各國都有學術單位或者生物科技公司進行登革疫苗的開發，而其疫苗候選標 的主要是以重組 DNA 方法、減毒活性疫苗等為主。現有試驗中的減毒疫苗未來一定有安全的顧慮， 對登革疫苗的研發需要全新的觀念及方法。當小鼠免疫登革病毒膜蛋白的 domain III(EDIII)，可 以產生中和性的抗體，因此 EDIII 是很好的疫苗研發候選標的。從國衛院技轉會表現四種不同血 清型膜蛋白一致性蛋白質(cEDIII)的質體，將此重組蛋白質體送入 BL21 菌株，初步我們測試了不 同濃度的誘導物 IPTG，以及不同的誘導時間，找到最佳的誘導蛋白質表現的條件 (0.5 mM IPTG, 25 ℃ , 4 h) 。 接 著 於 大 腸 桿 菌 中 大 量 表 現 cEDIII 重 組 蛋 白 ， 利 用 Metal Chelate Affinity Chromatography (MCAC)之方法純化 cEDIII 重組蛋白質 (Fig. 1)。將親和力管柱收集之蛋白，濃 縮至 5 ml 後，通入 HiLoadTM

2 我們也從另外一個角度進行開發登革疫苗之研究，將構築不同血清型的登革病毒之 EDIII 的 重組蛋白表現載體，進而開發出四價之登革疫苗，目前我們已經成功將四種血清型之 EDIII 重組 蛋白構築於 pET21b，並將會將其大量表現於大腸桿菌。後續將測試其最佳表現情形（Fig 6）。 有 cEDIII 與抗體蛋白質結構的立基，未來將可以針對 cEDIII 進行蛋白質修飾，開發安全與 確效性佳的疫苗。

Fig. 1. Expression and purification of cEDIII protein by nickel-chelating column.

Fig. 3. Analysis of fractions from gel filtration by SDS-PAGE.

Fig. 4. Crystals of cEDIII. cEDIII crystals grown in 0.18 M NH4Cl, 0.01 M CaCl2

4 Fig. 5. Crystal structure of cEDIII.

二、研究或教學或科技研發與管理成效評估（由計畫主持人或單位主管填寫）

Please evaluate the performance of research, teaching or science and technology R&D and management Work: (To be completed

by Project Investigator or Head of Department/Center) (1)是否達到延攬預期目標？

Has the expected goal of recruitment been achieved?

是

(2)研究或教學或科技研發與管理的方法、專業知識及進度如何？

What are the methods, professional knowledge, and progress of the research, teaching, or R&D and management work?

研究進度有符合預期

(3)受延攬人之研究或教學或科技研發與管理成果對該計畫(或貴單位)助益如何？

How have the research, teaching, or R&D and management results of the employed person given benefit to the project (or your unit)?

能夠加速計劃之執行

(4)受延攬人於補助期間對貴單位或國內相關學術科技領域助益如何？

How has the employed person, during his or her term of employment, benefited your unit or the relevant domestic academic field?

對於登革疫苗研發有助益

(5)具體工作績效或研究或教學或科技研發與管理成果：

Please describe the specific work performance, or the results of research, teaching, or R&D and management work:

1. 以四種血清型登革膜蛋白質 cEDIII 的相同序列為登革疫苗開發之候選標的: 有別於以往疫苗研發方

向，此候選標的將可以單價免疫原的方式，對抗四種血清型的登革病毒，為創新的概念進行疫苗的研發。

2. 以蛋白質結構為疫苗研發立基: 完成測試重組蛋白質 cEDIII 於大腸桿菌表現的最佳條件，並大量表現

及純化登革膜蛋白質 cEDIII，得到純度高於 95%的 cEDIII。

3. 初步已經得到解析度為 3.1 Å 的晶體結構，後續仍須得到更佳之晶體以得到更高解析度之結構。

(6)是否續聘受聘人? Will you continue hiring the employed person? □續聘Yes□不續聘No

※ 此報告表篇幅以三～四頁為原則。This report form should be limited to 3-4 pages in principle.

※ 此表格可上延攬優秀人才成果報告繳交說明網頁下載。