（一） 、五爪金英簡介
五爪金英 Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gary 是一種多年生 的菊科(Compositae)植物（圖 V），又稱小向日葵、提湯菊、假向 日葵、腫柄菊、王爺葵、金花菊。原產地來自墨西哥，至今生長 遍布於非洲、澳洲、亞洲以及北美國家，在台灣生長海濱至海拔 一千公尺陽光充足之處(Wu, et al., 2001)。
五爪金英在民間傳統使用上，依照部位有不同之功效，葉部 具有清熱解毒，消腫止痛、治療急、慢性肝炎、B 型肝炎、黃疸、
急性腸胃炎、膀胱炎、瘡傷腫毒效用；根及莖具有消炎，解毒、
治療急性肝炎、青春痘、癰腫毒瘡、糖尿病、瘧疾(Tona, et al., 1998)、婦女經痛(Kuroda, et al., 2007)效用。書中記載，民間食療 法中取五爪金英莖葉一把，水煎加黑糖服用，用以治療肝炎；取 適量之五爪金英、猪薟草、小山號葡萄、土牛膝、耳鉤草、馬鞭 草、黃水茄、蒼耳根、化石草、大風草、青果根，水煎服，用以 治療肝癌(Chiu, et al., 1992)。
圖V、五爪金英(Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gary)圖。 (Chiu, et al., 1992)
（二） 、五爪金英生物活性與成分
late phase 均有抑制小鼠舔足的時間(Owoyele, et al., 2004)；由上述 證實五爪金英具有保肝與抗炎以及鎮痛的活性。 生蟲血症(parasitemia)症狀且延長其壽命(Oyewole, et al., 2008)。比 利時學者研究發現五爪金英葉部之水粗萃物，能有效抑制阿米巴 原蟲(Entamoeba histolytica)的生長 (Herrera, et al., 2007)。將五爪 金英乙醇粗萃物餵食第二型糖尿病鼠(KK-Ay Diabetic Mice)，顯示 能夠降低老鼠血糖值並能減低胰島素阻抗(insulin resistance)改善 血糖代謝功能(Miura, et al., 2005)。此外五爪金英葉部之甲醇粗萃 物 對 急 性 骨 髓 血 癌 細 胞 (HL-60) 也 具 有 細 胞 毒 性 (ED50=15g/ml)(Kuo, et al., 1997)。至今五爪金英已經被發現不少的化合物，主要以萜類化合物 (Terpenoids)、黃酮類(flavonoid)為主(表II)。其中有些成分被證實
具抗癌活性。如 1β-methoxydiversifolin(IC50=0.13M)毒殺急性骨 髓血癌細胞(HL-60)效果，比Etoposide (IC50=0.43M)高出許多 (Kuroda, et al., 2007) 。 tithofolinolide, 3β-acetoxy-8β-isobutyryloxyreynosin,
4α,10α-dihydroxy-3-oxo-8β-isobutyryloxyguaia-11(13)-en-12,6α-olid e 有 誘 導 急 性 骨 髓 血 癌 細 胞(HL-60) 分 化 作 用；tagitinin-C, 1β,2αepoxytagitinin C 抑 制 人 類 結 腸 癌(col2) 增 生 (Gu et al., 2002)。同時Tagitinin-F對人類肝癌細胞 HepG2 具有細胞毒性(IC
具
能
50
6.5×10-5 mg/ml) (Wu, et al., 2001)。
表 II、五爪金英化學成份
Compound Acetyltagitinin E
Tagitinin-F Tagitinin C
2α-hydroxytirotundin Tithofolinolide
3α-acetoxydiversifolol
3β-acetoxy-8β-isobutyryloxyreynosin 1β,2αepoxytagitinin C
4α,10α-dihydroxy-3-oxo-8β-isobutyryloxyguaia-11(13) -en-12,6α-olide
3α-acetoxy-4α-hydroxy-11(13)-eudesmen-12-oic acid methyl ester
17,20-dihydroxygeranylnerol Tagitinin A
Tirotundin
Tirotundin 3-O-methyl ether
1α-hydroxytirotundin 3-O-methyl ether Deacetylviguiestin
1β-methoxydiversifolin
1β-methoxydiversifolin 3-O-methyl ether
1α-hydroxydiversifolin 3-O-methyl ether
4β,10α-dihydroxy-3-oxo-8β-isobutyroyloxyguaia-11(1
1,3-dihydroxy-3,10-epoxy-8-(-2-methylpropanoyloxy)-germacra-11(13)-ene-6,12-olide (1)
1,3-dihydroxy-3,10-epoxy-8-(2-methylpropanoyloxy)-germacra-4,11(13)-diene-6,12-olide (2)
1,3-dimethoxy-3,10-epoxy-8-(2-methylpropanoyloxy)-germacra-4,11(13)-diene-6,12-olide (3)
1-hydroxy-3-methoxy-3,10-epoxy-8-(2-methylpropano yloxy)-germacra-4,11(13)-diene-6,12-olide (4)
1-acetyltagitinin A
8β-isobutyryloxycumambranolide
Methy 4α-hydroxy-11(13)-eudesmen-12-oate Diversifolol
Luteolin Nepetin flavonoids
Hispidulin
(Kuo, et al., 1997; Kuo, et al., 1998; Wu, et al., 2001; Gu, J. Q, et al., 2002; Kuroda, et al., 2004; Herrera, et al., 2007; Ragasa, C, et al., 2008)
第貳章 研究目的
肝癌之所以發生率如此高，主要是因為肝臟是更新與修復受 損細胞以維持人體正常解毒與代謝的器官。如前文所述，正常情 況下細胞會不斷的分裂與死亡，而當如長期受到某些致癌因素刺
激，造成肝臟的受損，極可能DNA 因此突變，如此一來一往形成
肝腫瘤的機率就相當大。有鑒於目前治療肝癌方法有限，從植物 不論是粗萃或分離取得的成分物質，希望能夠從中尋找有效且安 全，能夠讓癌細胞以細胞凋亡方式死亡，進一步抑制癌細胞增殖 的化合物為本論文研究目的。
實 驗 所 挑 選 使 用 的 植 物 為 五 爪 金 英 Tithonia diversifolia (Hemsl.) A. Gary。五爪金英在民間傳統偏方使用以全草來治療 急、慢性肝炎、B 型肝炎與肝癌，具有清熱解毒等效用。最早於 1993 年 Lin 以動物實驗證實五爪金英水萃取物在四氯化碳(CCl4) 誘導急性肝損傷下，具有保肝，抗發炎活性作用。近幾年Wu(2001) 發表的報告也指出分離自五爪金英之 Tagitinin-F 能抑制人類肝癌 細胞 (Hep-G2)生長的活性。除此之外，目前尚未有任何相關五爪 金英涉及肝癌細胞凋亡相關機制之研究。
本論文建立以人類肝癌細胞 HepG2 為肝癌篩選模式。實驗初 步證實五爪金英葉部之乙酸乙酯層 Td-L-EA 具有毒殺作用，將其 萃取物經管柱層析法，篩選出五爪金英葉部之乙酸乙酯萃取物第 二分劃Td-F2 具有更強抑制人類肝癌細胞株 Hep-G2 生長外，且具 有選擇性毒殺作用，因此未來進一步的來探討此分劃是否具有誘 導細胞凋亡的活性，期待五爪金英不再僅使用於民間偏方，而能 作為具有潛力的化學預防劑，造福全球數百萬肝癌的病患。