動物實驗 第一段 動物模型

作者使用雄性大鼠（Wistar rat, 400-500 克）進行實驗。所有 大鼠依實驗室標準程序飼養以及處理。利用腹膜內注射

Pentobarbital （45 mg/ Kg）麻醉大鼠。於手術處理時，利用電毯 控制大鼠肛門溫度於37℃。利用 PE 200 導管（Angiocath, Becton Dickinson）進行大鼠氣管插管。呼吸器的潮氣量設定在 2 ml，呼 吸速率每分鐘100 下，以及吸入氧氣濃度（FiO2）21%。於左股 動脈置入PE-50 導管監測動脈壓；於右頸靜脈置入另一 PE-50 導 管以利給予藥物或是輸液。利用電腦自動監測系統（Biobench,

National Instruments, Inc）記錄血壓以及心電圖資訊。手術處理 後，動物將在呼吸器控制狀態下被觀察50 分鐘。

藉關閉呼吸器且鉗緊氣管內管，作者利用窒息方式誘導大鼠 心跳停止。窒息後不久，心搏過慢以及低血壓會接著發生，並很 快進行至心搏停止以及血壓消失。這過程通常僅需三至四分鐘。

總共窒息的時間會被維持八分鐘左右。在窒息約八分鐘後，重啟 呼吸器，接上100%氧氣，並開始注射腎上腺素（epinephrine, 0.005 mg/100g）。腎上腺素經由右頸靜脈導管給予，心肺復甦經由 徒手進行胸部按壓（速率200 beats/ min，深度小於 17 mm，壓胸 位置介於大鼠劍突頭側2.8 至 4.2 公分間）。利用監視器監控大鼠

主動脈舒張壓並微調壓胸位置，使主動脈輸張壓得以維持在20

mm Hg 以上。通常在心肺復甦開始進行一分鐘以內，大鼠可以恢 復自主循環。但如果大鼠在六分鐘內無法恢復自主循環，則此大

鼠將被剔除實驗之外。大鼠恢復自主循環後約10 分鐘，將吸入氧

氣分壓自100%調降至 50%，直到四小時的復甦後觀測期結束。

大鼠經過四小時的侵襲性監測後，實驗者移除氣管內管和血管內

導管，並且縫合手術傷口。恢復自主循環的大鼠將被觀測24 小

時，接受存活率以及神經學預後的評估。

第二段 實驗方式

作者利用OxyFLO 2000E（Oxford Optronic Ltd, England）測 量心肺復甦前中後的局部腦組織灌流。OxyFlo 的定位方式係利用 大鼠腦立體定位儀予以定位，定位參數如下：以前囟門為參考 點，於前後軸-3.5 mm，側邊 2.0 mm 處，自硬腦膜往腹側 2 mm 插入之點即為觀測處，亦為Hippocampus CA1 區域(Nishijima et al. 2012)。一般使用 OxyFLO 2000E 測量腦部血流是在大鼠趴著的

時候測量。但是因為進行心肺復甦術時，大鼠需要仰躺。因此，

作者設計一特製實驗用鐵板，於大鼠頭部位置開洞，使大鼠仰躺 時，OxyFLO 2000E 可以自開洞處進入老鼠伸入大鼠腦部測量。

並且在實驗用鐵板開洞處兩側設置顱部固定器，使大鼠頭部在心 肺復甦前/中/後能維持不動，以確保 OxyFLO 2000E 所監測的位置 也是固定的(Figure 1; Figure 2)。

作者分別於大鼠恢復自主循環後15 分鐘以及兩小時的時間

點，自左股動脈各抽取0.15 ml 的動脈血利用血氧氣體分析儀

（epoc® BGEM Test Card epoc® Reader，Alere Inc.）進行血氧氣 體以及乳酸值的分析。作者利用Norepinephrine 對恢復自主循環 後的大鼠進行平均動脈壓的調控。Norepinephrine 泡製方法為，16 支Norepinephrine (4 mg norepinephrine/4 mL/amp)，加入 5%

Dextrose 溶液至總體積為 250 ml，以流速 0.1ml/hr 開始滴注（以 老鼠體重400 克計算，則起始輸注速度約為 1.07µg/kg/min）。自 恢復自主循環後十分鐘開始使用Norepinephrine；Norepinephrine 調整方式為，每5 分鐘，調整一次流速(增減 0.05ml/hr)，使恢復 自主循環後OxyFlo 測得的局部腦組織灌流值與心跳停止前的基礎 值大約相同。

本實驗將大鼠分為實驗組以及控制組。實驗組接受侵襲性手 術後，進行窒息性心跳停止以及心肺復甦。並且利用

Norepinephrine 滴注調控血壓，注射藥物期間為一小時、兩小時以 及四小時。控制組接受同實驗組的手術程序，進行窒息性心跳停 止以及心肺復甦，但是不進行同實驗組的血壓調控。

第三段 結果評估

本實驗以臨床預後為結果指標。主要結果指標為恢復自主循

環後24 小時的神經學功能預後。神經學功能的評估方式為大鼠版 本的神經學功能評分表(Huang et al. 2007)。

第四段 統計分析

使用R-2.15.3 software （R Foundation for Statistical

Computing, Vienna, Austria）進行統計分析。首先進行敘述統計。

類別變項以次數以及百分比表示；連續變項以平均值和標準差呈 現。在單變數分析，類別變項以Fisher’s exact test 檢定；連續變 項以Wilcoxon rank-sum test 檢定。利用廣義線性模型比較實驗組 以及控制組在平均動脈壓以及局部腦組織灌流的型態以及改變。

雙尾

p value 小於 0.05 表示統計上達顯著水準。

第三章 結果