實驗材料

一、地黃之萃取過程

本實驗所用之地黃，經邱年永技正鑑定，確定其基原如下：

Rehmannia glutinosa L^IBOSCH. F. hueichingensis (C^HAO et S^CHIH) H^SIA 懷 慶地黃為玄參科植物的塊根。

本研究將生地黃以甲醇浸潤後，在50℃下迴流抽取四∼五次，

每次約四小時，合併抽取液，經減壓濃縮乾燥後，即得地黃甲醇粗 抽物(以下簡稱R_M) 。另以正丁醇分離地黃甲醇粗抽物，即得正丁醇 層(以下簡稱R_B )與水層(以下簡稱R_W)

二、實驗試劑及配製

1. Catalpol Standard，購自米山藥品工業株式會社。

2. Amyloid ß-peptide 1-40（human），購自 Tocris，實驗前以 35%

acetonitrile/0.1% trifluoacetic acid 製備（25 pmole/µl）。 3. Pentobarbital Sodium，購自東京化成工業株式會社。

4. Monosodium phosphate 、 Disodium phosphate 、 EDTA 、 Acetonitrile、Trifluoacetic Acid、Ortho-Phosphoric acid，以上購 自 J.T. Baker。

5. Sodium 1-Octanesulfonate，購自 TCI。

6. 4-Hydroxy-3-methoxymandelic acid (VMA）、Norepinephrine

（NE）、Dopamine（DA）、Dehydroxyphenylacetic acid（DOPAC）、

Serotonin（5-HT）、5-Hydroxyindoleacetic acid（5-HIAA），以上 均購自 Sigma。

Table 2. 實驗試劑之簡稱、作用機制、購買公司一覽表

試劑全名 簡稱 作用機制 公司

Scopolamine hydrobromide SCOP 毒蕈鹼接受器拮抗劑 Sigma

Propranolol PROP

β

Phenoxybenzamine hydrochloride

PHEN 選擇性

α

Acetylcholine mustard hydrochloride

AF64A cholinergic neurotoxin RBI

6-Hydroxydopamine 6-OHDA noradrenergic neurotoin RBI 5,7-Dihydroxytryptamine 5,7-DHT serotonergic neurotoxin RBI

Yohimbine YOH 選擇性

α

三、實驗動物

本研究所採用之動物為行政院國家科學委員會動物中心所提供 Sprague-Dawley系雄性大鼠，體重約250∼300 g，飼養在空調的房間，

溫度維持在23 ±1℃，燈光控制採12小時亮12小時暗( 08:00燈亮、20:00 燈暗)，食物與水不予限制。

四、實驗儀器 (一)被動迴避儀：

使 用 「 被 動 迴 避 學 習 反 應 測 定 裝 置 （ Coulbourn Instruments U.S.A），此裝置分成兩部份：實驗箱係為一經中間閘門分隔為相同 大小二室（48×20×30 cm）的箱子及其控制器在實驗裝置處置上，於 相同大小二室之其中一室上方置一20W之電燈泡，將相同大小二室區

分為明暗二室，中以門閘控制，箱底設有間隔1.5cm平行排列的金屬 桿(直徑1.5cm)，並接上電流器。

(二)ALZET 幫浦：

由滲透壓幫浦(Mini-Osmotic Pump，Model 2002，輸注速率 0.5 µl/hr，內容量 200 µl，Alzet ^®)、軟管（長約 4-5 cm，內容量約 80 µl）、 輸注針頭（Brain Infusion Kit II，3-5 mm，Alzet ^®）所構成，如圖所示。

Fig. 2、腦部輸注裝置 (三)水迷宮之設備：

由一直徑160 cm、高50 cm、壁厚 15 mm不銹鋼泳池及一個逃逸平 台（直徑11 cm、高22 cm，當泳池滿水時，置於水面下 1 cm處）所組 成，水溫保持23 ± 1℃。水池由電腦劃分為四個象限（I、II、III、IV）

三個環（A、B、C）如圖所示。水迷宮所用之紀錄儀器為:

幫浦調節器

滲透壓幫浦 輸注管

腦部輸注頭

移除用頭

墊片

Columbus Instruments VIDEOMEX-V video tracking, video camera,video monitor(COLUMBUS INSTRUMENTS INTERNATIONAL CORPORATION）

象限II 象限I

象限III 象限IV

（三）主動迴避儀：使用「主動迴避學習反應測定裝置」

（Coulbourn Instruments U.S.A），此裝置分成兩部份：

實驗箱係為從中間分隔為相同大小二室（48×20×30cm）的箱 子及其控制器；在實驗裝置處置上，於二室上方各置一20W之電 燈泡及一發聲器，中有通道可相通，箱底設有間隔1.5cm平行排列的 金屬桿(直徑1.5cm)，並接上電流器。

（四）酵素免疫分析儀：使用Microplate Spectrophotometer （Powerwave X 340，Bio-Tek instruments INC.）。

（五）HPLC之設備：使用High performance liquid chromatography

（HPLC PM80, BAS）、檢出器（Electrochemical Detectors LC-4C，

BAS）、分離管柱為 Bioanalytic system MF-6026測定之。

C B

A