地黃及其成分梓醇對大鼠改善學習記憶障礙作用之研究; The attenuating effects of Rehmanniae Radix and catalpol
135
0
0
全文
(2) 因此，本研究擬以由 Scopolamine、大鼠雙側頸動脈永久結紮與 Amyloid ß-peptide-(1-40) 連續側腦室輸注等方法誘發之學習操作障 礙。以主動、被動暨水迷宮學習記憶測定模式，來評估地黃與其成分 梓醇改善學習操作障礙，並測定大鼠雙側頸動脈永久結紮與 amyloid ß peptide-(1-40)之腦內 monoamine 的變化。再於腦室給予梓醇後，觀察 neurotoxin：5,7-DHT 損壞 dorsal raphe 之 serotonin 神經元、6-OHDA 損壞 locus coeruleus 之 noradrenaline 神經元、或 AF64A 損壞海馬迴之 acetylcholine 神經元；並於海馬迴投以 noradrenergic 阻斷劑 a 1 阻斷劑 phenoxybenzamine (17)、ß 阻斷劑 propranolol (18)、a 2 阻斷劑 yohimbine (19) 等觀察大鼠於水迷宮學習記憶能力之變化，藉以探討梓醇在改善學習 記憶中樞神經系統所扮演之角色與機制。. -2-.
(3) 第二章 總 第一節. 論. 地黃之本草文獻考察. 一、地黃之本草考察 (20-28) 依歷代諸家本草及有關文獻，地黃之本草系統圖如下表 雷公集注神農本草經 4 卷(乾地黃、地髓) 山海經、列仙傳 廣雅、書經 說文、爾雅. 名醫別錄(乾地黃、生地黃、? 、巳). 陶弘景校定神農本草經 3 卷 雷公藥對. 陶弘景校定神農本草經 7 卷 藥性論(乾地黃) 四聲本草(乾地黃、熟地黃) 日華子(天黃、人黃、地黃). 本草拾遺. 新修本草(乾、生地黃) 產寶 淮南子 傅濟方 子母秘錄 肘後方 食療本草 聖惠方 梅師方 抱朴子 外台秘要 孫兆方 千金方 食醫心鏡 肘後百一方 雷公炮炙論. 神仙方 延年方 海上方 傳信方. (開寶本草). 嘉祐補注神農本草 20 卷 圖經本草(生、熟、乾地黃) 經史証類備急本草（31 卷）. 本草蒙荃 崔氏方 聖惠方 潔古珍珠 婦人良方 湯液本草 保命集 肘後方 千金方 驗方集 普濟方 危氏方 聖濟總錄. 經史証類大觀本草（31 卷） 本草衍義(牛奶子). 重修政和經史證類備用本草 30 卷 本草品彙精要… … 用藥法象 （生、乾、熟地黃、葉、實、花）本草綱目 本草備要 救荒本草(婆婆 嬭 狗 嬭 子). 植物名實圖考 本草從新. 植物名實圖考長編. -3-.
(4) 地黃藥用歷史久遠。漢代，據神農本草經記載，其有生、乾之分， 並云“生者（即鮮地黃）尤良。又金匱要略用地黃亦分生、乾，乾者多 入丸散，生者多取汁用。 南朝劉宋雷公炮炙論雖載有以酒拌蒸地黃的方法，但一因醫史學 界對是書的成書年代還有爭議；二因是書被後人增修過，故難以確定 熟地黃始見於是書。 南齊劉涓子鬼遺方。卷一中又有將“乾地黃切、蒸焙”之記載，但因 文字過簡，亦不能確定所云“蒸焙”的地黃即是今之熟地黃。 至唐朝初期，孫思邈備急千金要方。卷二十七養性項明載製熟地 黃方法。其云：採地黃，去其鬚、葉及細根，搗取汁以漬肥者。著甑 中，… … 蒸之一時出，暴燥，更內汁中，又蒸，汁盡止，便乾之。亦 可直切蒸之半日，數以酒灑之，使周匝至夕出，暴乾。可搗蜜丸服之。 稍後，孫氏千金翼方除在卷二本草項中將地黃分為乾地黃與生地 黃兩條記述外，在卷十二養性項與卷十四退居項中亦均載有製作熟地 黃的方法。卷十二的記述內容與千金方同。卷十四與造生乾地黃並述， 並將“造熟乾地黃法”列於“造生乾地黃法”之後。在“造熟乾地黃法”中， 既描述了用生地黃蒸製熟乾地黃的具體方法，又提出了質量要求。其 中，“古法蒸九遍止，今但看汁盡色黑熟，蒸三五遍亦得”一句，含義 尤深(20)。 陳藏器本草拾遺云：“本草云乾地黃，本經不言生乾及蒸乾，今方 家所用二物（有）別，蒸乾即溫補，生乾則平宣，當依此用之。”這說 明蒸製熟乾地黃（即熟地黃）的方法，並非唐人首創，唐以前的醫藥 學家已經掌握了將生地黃蒸製為熟地黃的方法，臨床所用乾地黃除生 乾地黃外，又出現了熟、乾地黃。但到底始於唐以前何時？尚難定論。 至唐炮製熟乾地黃的方法和對熟乾地黃的應用已逐步推廣，並通過臨 床應用已認識到二者性能不同。鑒此，似可認為熟地黃最早見於唐備. -4-.
(5) 急千金要方。 今之所用地黃分鮮、生、熟三種。三者均能滋陰生津，治陰血津 液虧處諸證。所不同的是： (1)鮮地黃，甘苦大寒，滋陰力稍差，而清熱涼血止渴除煩之功過 之，且滋膩性較小，血熱陰虧屬熱邪較盛者多用； (2)乾地黃，甘寒質潤，長於滋陰而清熱涼血力較鮮地黃為差，滋 膩性亦較小，凡血熱津傷或精血陰液虧虛有熱者宜用 (3)熟地黃則味甘性微溫，功專養血滋陰、填精益髓，凡一切精血 陰液虧虛偏寒或熱不甚者宜之，且滋膩性強，每與少量砂仁或陳皮同 用，以保胃氣，促進藥力吸收(20)。. -5-.
(6) 1、藥名之考訂 乾地黃，乃本經首先著錄之藥名，爾後歷代諸家本草，諸如別錄 (21). 、集注 (22) 、開寶、嘉祐、大觀(23)、證類(24) 、精要(25) 、綱目(26)、. 圖考及圖考長編(27,28)等皆有收載，沿用迄今，至綱目始以地黃為名;另 外，歷代本草因加工不同尚有生地黃、熟地黃之名，茲考訂如下: 生、乾地黃。本經:「乾地黃，味甘、寒」，別錄曰:「乾地黃，味 甘、寒… … … 苦，無毒… … .生地黃，大寒」，別錄乃首先指出生、乾 之別。而圖經曰:「陰乾者，是生地黃」至時珍曰:「別錄復云。生地黃 者。乃新掘鮮者。」，由此知生地黃應是新鮮或陰乾者。 至於熟地黃，集注引雷公之文曰:「… … 作乾者有法，搗汁和蒸殊 用工意」，至開寶引拾遺曰:「乾地黃本經不言生乾及蒸乾，方家所用 二物別，蒸乾即溫補，生乾則平宣，當依此用之」 。至此已言蒸乾、生 乾之別。至於熟地黃之名乃首見於證類引圖經曰:「二月八月採根。蒸 三二日令爛，暴乾謂之熟地黃」 。然而，直至綱目、品彙始將熟地黃分 條。如品彙曰:「熟地黃，出神農本經，主折跌絕筋傷中，逐血痺，填 骨髓，長肌肉，作湯除寒熱積聚除痺，久服輕身不老」 ，此為本經論乾 地黃之文，足見品彙之熟地黃乃本經之乾地黃。 又綱目曰:「諸家本草皆指乾地黃為熟地黃。雖主治證同。而涼血 補血之功稍異。故今別出熟地黃一條於下」，又引圖經曰:「作熟地 黃… … 甑上浸三四過。時時轉蒸訖。又暴使汁盡」 。又引炮炙論曰:「采 生地黃去皮。甑鍋上抑木甑蒸之。攤令氣歇，拌酒再蒸。又出令乾」 足見綱目所言之熟地黃即圖經及炮炙論之熟地黃之意，而綱目將之別 出一條。 至於地黃之別名，本經曰:「一名地髓」 。別錄目「一名下。一名芭」 ， 衍義曰:「地黃如甘露子花… 比人謂之奶子」。圖考引救荒曰:「地黃苗 俗名婆婆嬭，北地謂之狗嬭子」。. -6-.
(7) 另據集注曰:「生渭城乃有實，子實如小麥，淮南七精散用之」 ，證 類引圖經「四月採其實，陰乾篩末。水服錢七」 。又曰:「花名地髓花， 延年方有單服二法」，綱目引山居錄曰:「地黃嫩苗，摘其旁葉作菜。 甚益人」時珍曰:「花… 腎虛，腰脊痛。為未。酒朋方寸七」。曰三」， 又引聖惠方曰:「風赤生腎及墜眼日久。瞞損失明。地頭花曬。… … … 」 。 綜如上述。地黃之名稱，歷代諸家本草概指其根或根莖供藥用， 其地上部份葉、苗、花、果實亦供藥用或食用。而地黃因加工法不同 而有生地黃、乾地黃及熟地黃之別。而地髓、芊、芭、牛奶子、婆婆 嬭、狗嬭子、乃其別名。. 2、形態、種類及產地之考訂: (1)地黃之形態、種類. (22-28). :. 地黃之形態，集注曰:「生渭城者，乃有子實實如小麥」指出果 實之形態。 圖經曰:「二月生，葉布地便出，似車前葉，上有皺紋而不光，高 者及尺餘。低者三四寸」，不但指出葉之形態。同時顯示地黃可能 為草本，且葉為根生葉，地下部份可能含根莖。 又曰:「花似油麻花，而紅紫色，亦有黃花者」指出地黃花可能有 紅紫、黃花二種。 又曰:「其實作房如連翹子。甚細而沙褐色」 又曰:「根如人手指，通黃色，蟲細長短不常」，指出根或根莖為黃 色。 衍義曰： 「地黃葉如甘露子。花如脂麻花，但有細斑點，比人謂之牛 嬭子花，莖有微細短白毛」 ，指出葉、花、莖形態，莖上有白毛，然 甘露子、脂麻花己不可考。 綱目曰： 「地黃初生塌地。葉如山白菜而毛濇。葉面深青色。又似小. -7-.
(8) 芥葉而頗厚。不叉了。葉中攛莖。上有細毛。莖稍開小筒子花。紅 黃色。結實如小麥粒。根三四寸。細如手指。皮赤黃色。如羊蹄根 及葫蘿蔔根。曝乾乃黑」 ，由上知，地黃原植物，乃由地下部份直接 攛出，開筒子花，根赤黃色，曬乾呈黑色。 圖考引救荒曰：「苗初塌地，葉如山白菜而毛澀。葉面深青色。又 似芥菜葉而不花。又比芥菜葉頗厚。葉中攛莖，上有細毛。莖稍開筒 子花，紅黃色，比人謂之牛嬭子花。結實如小麥粒，根長四五寸，細 如手指，皮赤黃色，此段文與綱目所論相似，想必綱目乃亦引救荒之 說。 綜觀地黃之形態，並參考圖經、證類、綱目及圖考之藥圖，由其 習性，葉花、莖、根之形態，可推定其為玄參科（Scrophulariaceae） 地黃屬(Rehmannia)之地黃植物無疑。 (2)地黃之產地(22-28) 地黃之產地，本經曰：「生咸陽黃土地者佳」，集注曰：「咸陽即長 安也，生渭城者乃有子實」 ，渭城即咸陽，位於今陝西省長安縣。又曰： 「以彭城乾地黃最好，次歷陽，今用江寧，板橋者為勝」 ，彭城在今江 蘇銅山縣。別錄引郭璞曰： 「江東呼? 」 ，江東乃長江以東。圖經曰： 「地 黃生咸陽川澤黃地者佳… … 以同州者為上」 ，同州為今陝西大荔縣。另 據大觀之藥圖尚有冀州地黃及沂州地黃，冀州指今河北、山西、河南、 黃河以北；遼寧遼河以西；沂州則在今山東臨沂縣。自時珍以降則以 懷慶為主要產地，懷慶乃今之河南沁陽縣。如綱目曰： 「今人惟以懷慶 地黃為上」 ；又引嘉謨曰「江浙壤地種者，受南方陽氣。質雖光潤而力 微。懷慶府產者。稟北方純陰。品彙曰：「道地-今懷慶者為勝」。圖考 曰：「今產懷慶」。長編引集注曰：「今用江南、板橋者為勝」，按集注 之文應為江寧，而江南為今江蘇、安徽、江西三省。此外據甘(29)尚產 於浙江、河北、山西、甘肅、陝西、四川、湖北、杭州等地。綜上知. -8-.
(9) 地黃古多產於中國北方。. 3、性味、藥能之考訂： (1)地黃之性味(22-28)： 地黃性味歷代諸家有生、乾、熱之別，茲分別考訂如下： 生地黃而論，別錄首載：「生地黃，大寒」 。至開寶引拾遺曰：「生乾平 宣」。嘉祐引日華子曰：「生地黃… … 味甘平無毒」。至綱目曰：「鮮用 則寒」 ，又引元素曰： 「生地黃，大寒」 ，由上知生地黃乃大寒、寒、甘、 平、無毒。 乾地黃而論，本經曰：「乾地黃，味甘寒」。別錄曰：「乾地黃，味 甘寒」 ，又曰：「苦無毒」 。至開寶引拾遺曰：「生乾平宣」 。嘉祐引藥性 論曰： 「乾地黃… … 溫中下氣」 ，又引日華子曰： 「口乾者平，火乾者溫」 。 而後證類引食療曰：「地黃微寒」。至綱目曰：「乾用則涼」，又引甑權 曰： 「… … 甘平」，又引好古曰： 「甘苦寒，氣薄味厚。沉而降。陰也。 入手足少陰厥陰及手太陽之經」，又引元素曰：「… … 甘微苦寒」。 綜上所述，如歷代諸家對乾地黃之性味乃有甘、溫、平、苦、寒、 微苦寒，而歸經乃入手足太陰厥陰及手太陽經。 至於熟地黃，首由開寶引拾遺曰：「蒸乾即溫補」，至證類引圖經 曰：「作熟地黃… … 甑上浸三四過… … 味甘如飴糖」。而綱目首將熟地 黃分條曰： 「熟地黃、甘微苦。微溫。無毒」 ，又引元素曰： 「甘微苦寒， 假酒力酒蒸。則微溫而大補。味厚氣薄。陰中之陽。沉也。入手足少 陰厥陰之經」。 綜上知熟地黃之歸經與乾地黃相似，性味乃甘、微溫、微苦、溫 而大補。. -9-.
(10) (2)地黃之藥能(22-28)： 本經曰：「乾地黃… … 主折跌，絕筋傷中，逐血痺，填骨髓，長肌 肉。作湯除寒熱積聚。除痺。生者尤良。久服輕身不老」。 別錄曰：「乾地黃… … 主男子五勞七傷，女子傷中，胞漏下血，破 惡血，溺血，利大小腸，去胃中宿，飽力斷絕，補五藏，內傷不足， 通血脈，益氣力，利耳目」，又曰：「生地黃… … 主婦人崩中血不止及 產後血上薄心悶絕，傷身胎動，下血胎不落，墜墜踠折，瘀血、留血、 衄鼻、吐血皆擣飲之」，別錄乃分別指出生、乾地黃之藥能。 嘉祐引藥性論曰：「乾地黃，君能補虛損，溫中下氣，通血脈，久 服變白延年，治產後腹痛，主吐血不止」 ，又曰： 「生地黃… … 解諸熱， 破血、通利月水閉絕，不利水道，擣薄心腹，能消瘀血，病人虛而多 熱加用之」，又引蕭炳曰：「乾生二種皆黑鬚髮良藥」指出生、乾地黃 相同之作用。又引日華子曰： 「乾地黃，助心膽氣，安魂定魄，治驚悸， 勞劣，心肺損，吐血鼻衄，婦人崩中血運，助筋骨長志」。 至證類引圖經曰：「延年方… … 治傷折金瘍」，又曰：「肘後方療踠 折四肢骨破碎，及筋傷蹉跌爛，搗生地黃熬之裹所傷處」，又曰：「海 上方，治一切心痛… … 以生地黃一味」。 而後在乾地黃條下，綱目引元素曰： 「涼血、生血、補腎水，真陰。 除皮膚躁。去諸濕熱」，又引好古曰：「主心病掌中熱痛。脾氣痿? 嗜 臥。足下熱而痛」，又曰：「錢仲陽瀉丙火與木通同用以導赤也。諸經 之血熱與他藥相隨。亦能治之。溺血便血皆同」 ，又引載原禮曰： 「… … 虛火之證者，宜地黃之屬以滋陰退陽」 ，以上所述乃歷代諸家對乾地黃 及生地黃之論述，直至李時珍首將熱地黃分條而論述之。如綱目引元 素曰： 「熟地黃。補血氣。滋腎水。益真陰。去臍腹急痛。病後脛股酸 痛」，又引好古曰：「坐而欲起。目. A A無所視」，又引元素曰：「地黃. 生則大寒而涼血。血熱者須用之。熟則微溫而補腎。血衰者須用之。. - 10 -.
(11) 又臍下痛屬腎經。非熟地黃不能除。乃通腎之藥也。」 ，又引好古曰： 「生地黃。治心熱手足心熱。入手足少陰厥陰。能益腎水。涼心血。 其脈洪實者宜之。若脈虛者。則宜熟地黃… … 能補腎中元氣」 ，又引易 簡方曰：「男子多陰虛。宜用熟地黃。女子多血熱。宜用生地黃」，又 曰「生地黃能生精血… … 熟地黃能補精血」，又引醫學正傳曰：「生地 黃生血… … 熟地黃補血。」 綜上述知地黃生用主涼血、生血、瀉熱，熟用則主補精血、補腎。 而乾地黃，時珍曰：「諸家本草皆指乾地黃為熟地黃。雖主治證同。而 涼血補血之功稍異」 ，乃指出乾、熟地黃之主治證同，只在乾地黃涼血 而熟地黃補血。. 4、採收、修治及禁忌之考訂 (21-28)： (1)地黃之採收： 本經曰：「二月八月採根陰乾」。圖經曰：「四月采其實陰乾」。至 時珍曰：「八月殘葉猶在葉中。精氣未盡歸根。二月新苗已出。根中精 氣已滋於葉。不如正月九月採者殊好」指出二月八月不適採收。依實 際，地黃多在 9∼11 月採為佳，因地下根莖已充份成長，肥大者良(25) 。 (2)地黃之修治： 地黃之加工和用法，集注、證類引外臺秘要及千金方、百一方、 梅師方、食醫心鏡、博濟方、子母秘錄、產寶等諸家本草皆暴乾用或 取汁或搗碎或研末用。至於較特殊之加工法及用法茲引據如下： 證類引圖經曰： 「二月八月采根蒸三二日令爛，暴乾謂之熟地黃」， 又曰： 「令乾之法，取肥地黃三二十斤淨洗，更以揀去細根及根節瘦短 者，亦得三二十斤搗絞取汁，投銀銅器中，下肥地黃浸漉令挾飯上， 蒸三四過，時時浸漉轉蒸乾。又暴使汁盡」 ，文中飯上綱目作甑上。又 引雷公曰： 「採生地黃去白皮? 鍋上柳木甑蒸之，攤令氣歇… … 拌酒再 - 11 -.
(12) 蒸，又出令乾」此似已有反復蒸曬之論。 又引食療曰：「地黃微寒以少蜜煎或煎湯或入酒飲並炒」。 又引肘後方曰：「… … 以紙裹微灰中煨之用良」。 又引百一方曰： 「妊娠漏胎，生地黃汁一升，漬酒四合，煮三五沸」 。 又引衍義曰：「以細碎者洗出，研取汁將漉地黃，蒸出曝乾， 投汁中浸三二時，又曝再蒸，如此再過為勝，亦不必多」。 至綱目曰：「或火焙乾用」，又曰：「薑汁浸則不泥膈，酒制則不妨 胃」，又曰：「揀取沉水肥大者。以好酒入縮砂仁末在內。拌勻。柳木 甑於瓦鍋內蒸氣透晾乾。再以砂仁酒拌蒸哏。如此九蒸九哏乃止。」， 又引醫學正傳曰：「生地黃酒炒則不妨胃。熟地黃薑汁炒則不泥膈。」 長編引東坡雜記：「肥嫩地黃一二寸截去，薄紙裹面頭，以生豬腦 塗其膚，周匝。置小盤中，置通風處，十餘日自乾。抖擻之，出細黃 粉，其膚獨一一如鵝管狀。」 綜如上述，地黃有取汁、研粉，而因其性味有薑製、酒製、煨製、 蜜製。而炮炙論有反復蒸曬之說，直至綱目更有拌酒、砂仁九蒸九晾 之論，故炮製多端，至今仍以生地黃、乾地黃及熟地黃等製劑入藥。 (3)地黃之配伍禁忌： 集注引雷公藥對曰：「得麥門冬清酒良，惡具母畏蕪荑」。 嘉祐引藥性論曰：「生地黃忌三白」，又引日華子曰：「煎忌鋼鐵器」， 又引炮炙論曰：「勿令犯銅鐵器」。 至綱目引甄權曰：「忌蔥蒜蘿蔔諸血」，又引醫學正傳曰：「生地黃 生血。而胃氣弱者服之恐妨食。熟地黃補血。而痰飲多者服之恐泥膈」 ， 又引元素曰：「得牡丹皮當歸。和血生血涼血。滋陰補髓」。 綜上如述，三白據甄權，可能為蔥白、蒜白、白蘿蔔。胃氣弱者 服生地黃恐妨食，痰飲多者服熟地黃恐泥膈。. - 12 -.
(13) 至於地黃之方用，歷來用之頗多，綱目引舊 12 方新 51 方。. - 13 -.
(14) 第二節 地黃之藥用植物學文獻考察 1、地黃之分布 地黃隸屬玄參科（Scrophulariaceae）植物，約 200 屬，3000 種廣 佈於全世界尤以溫帶為多。我國約 60 屬，634 種分部於西南部，地黃 屬 Rehmannia LIBOSCH .ex FISCH. et MEY. 我國約 6-8 種產於西北部、西南部， 於台灣引進 1 屬 1 種. (29-32).. 2、地黃科屬之特徵(33) 科特徵:草本、灌木或喬木；葉互生、對生或輪生，無托葉；花兩 性，常左右對稱，排成各式的花序；萼 4∼5 齒裂，宿存；花冠合瓣， 輻狀或闊鐘狀或有圓柱狀的管，4∼5 裂，裂片多少不等或二唇形，或 廣展；雄蕊通常 4，2 長 2 短，有時 2 或 5 枚發育或第 5 枚退化；花盤 存在或無；子房上位，不完全或完全的 2 室，每室有胚珠多顆；果為 一蒴果或漿果。 屬特徵:多年生草本，有根莖，被多細胞長柔毛及脾毛；葉互生， 倒卵形至長橢圓形，有粗齒；花大，具短柄，生於葉腋內或排成頂生 的總狀花序；萼鐘形，頂部 5 裂，裂片不等長，通常後方一枚最長， 全緣或再分裂；花冠 2 唇形，稍彎，管一側腫脹，裂片偏斜；雄蕊 4， 有時 5 枚，但 1 枚較小，內藏；子房基部托有一環或淺杯狀花盤，2 室，或幼時 2 室，老時 1 室，花柱頂部 2 淺裂；胚珠多數；蒴果具宿 萼，室背開裂；種子小，具網眼。. - 14 -.
(15) 3、語源 本草所載語源詳前本草藥名之考訂。 Rehmannia 為紀念德國人 Joseph Rehman（1779∼1831） ，當時蘇聯 皇帝之御醫。glutinosa：黏著性的。Purpurea：紅紫色的（花）(34)。 4、形態 (一)、地黃 〔異名〕生地黃、鮮地黃、山菸根 〔來源〕為玄參科植物地黃的新鮮塊根。 〔原植物〕地黃 Rehmannia glutinosa LIBOSCH 地黃為多年生草本，高 20 至 30 cm，全體密被灰白色細長柔毛及 腺毛。根莖肉質肥厚，鮮時黃色，粗細長短不一。呈塊狀、圓柱形或 紡錘形。莖單一或由基部分生數枝。根生葉叢生、倒卵形或長橢圓形。 長 3∼10 cm，寬 1.5∼4 cm，先端鈍，基部漸狹成長葉柄，邊緣具不整 齊鈍齒，葉面有皺紋，莖生葉較根生葉小，腺毛於邊緣及脈上分佈較 密。初夏頂生總狀花序，密佈腺毛，花柄長 1 至 3 cm，通常花芽時柄 短，花開放後伸長，柄基部著生線狀苞片一枚；花萼鐘狀，上部五裂， 裂片三角形，先端尖；花冠筒狀而微彎，外面呈紫紅色，內面黃色有 紫斑，下部漸狹，中部以上漸寬，頂部唇形開裂，內唇二裂，外唇三 裂，裂片頭鈍或近於截形，展開或稍反捲。 雄蕊 4，2 強，著生冠管的近基部處；子房上位，卵形，2 室，花 柱單一，柱頭膨大。蒴果卵形或卵圓形，先端尖，上有宿存花柱，外 有宿存花萼。種子多數，卵形，細小，表面具蜂房狀膜質凸起物，淡 棕色。開花期在 4∼5 月間，果期 5∼6 月(35)。 於 河 南 栽 培 者 ， 稱 懷 慶 地 黃 Rehmannia glutinosa LIBOSCH. f. hueichingensis (CHAO et SCHIH) HSIA，主要與湖北地黃之區別為植株大;根莖. - 15 -.
(16) 較肥大，呈塊狀、圓柱形或紡垂形;花不密集於莖頂，或稀疏之總狀花 序(36)。 (二)、湖北地黃 〔異名〕鄂地黃、岩白菜。 〔來源〕為玄參科植物湖北地黃的根。 〔原植物〕湖北地黃 Rehmannia henryi N. E. BROWN. 多年生草本，高 15∼40 cm。全株被多細胞長柔毛及腺毛。根略增 粗。莖單一或多條。葉多基生，蓮座狀；葉柄長 1∼6 cm；葉片橢圓狀 長圓形，長 3∼18 cm，羽狀淺裂，裂片有尖齒；莖生葉很小，淺裂至 齒狀缺刻。總狀花序頂生，花少；苞片葉狀，向上漸小；花梗長約 5 cm， 上升，近基部具 1∼2 枚絲狀小苞片；花萼鐘狀，長約 2 cm，筒長為 1/2 餘，萼齒 5，狹披針形，先端鈍，全緣或有齒，後面 1 枚較長；花 冠淡黃色，有紅色斑點，花冠筒長 4∼5 cm，背腹略扁，稍弓曲，外面 被脾毛，內僅腹部兩皺褶處及花絲著生處有毛，上唇長 1cm，2 裂，向 外反卷，下唇長約 1.5cm，3 裂，兩面疏被毛；雄蕊 4，內藏。蒴果闊， 幾乎包藏於宿存的萼內。種子多數。花期 4∼5 月，果期 5∼6 月。 生於平地及路旁。分布於湖北(37)。. - 16 -.
(17) 第三節. 地黃之生藥學文獻考察. 一、懷慶地黃 (一)鮮地黃: 呈紡錘形或條狀，長 8∼24cm，直徑 2∼9cm。外皮薄，表面 淺紅黃色，具彎曲的縱皺紋、芽痕、橫長皮孔及不規則疤痕。肉 質，易斷，斷面皮部淡黃白色，可見橘紅色油點，木部黃白色， 導管呈放射狀排列。氣微，味微甜、微苦。 (A)鑑別: 本品橫切面：木栓細胞數列。皮層薄壁細胞排列疏鬆；散有較 多分泌細胞，含橘黃色油滴；偶有石細胞。韌皮部較寬，分泌細 胞較少。形成層成環。木質部射線寬廣；導管稀疏，排列成放射 狀(36)。 (B)鮮生地:掘起根後除去莖葉及鬚根並予洗淨，作為飲片即可(38)。. (二)生地黃: 多呈不規則的團塊狀或長圓形，中間膨大，兩端稍細，有的細 小，長條狀，稍扁而扭曲，長 6∼12 cm，直徑 3∼6 cm。表面棕 黑色或棕灰色，極皺縮，具不規則的橫曲紋。體重，質較軟而韌， 不易折斷，斷面棕黑色或烏黑色有光澤，具黏性。無臭，味微甜。 (A)鑑別:生地黃粉末深棕色。木栓細胞淡棕色，斷面觀類長方形， 排列整齊。薄壁細胞類圓形，內含類圓形細胞核。分泌細胞形狀 與一般薄壁細胞相似，內含橙黃色或橙色油滴狀物。具緣紋孔及 網紋導管直徑約至 92µm(36)。 (B)乾地黃(生地黃):將生地用火焙成八分乾後，重壓使根心變為黑 色或者先曬為半乾，再用炭微火焙軟後整型為圓形。. - 17 -.
(18) (1)焦生地:將生地片投入灼熱120℃之熟鍋中，炒至略呈焦色 (2)生地炭: (a)炒炭:將生地片投入熟鍋中炒至成炭黑色，如見外皮 接生小泡部略予灑水放冷即可。 (b)? 炭:將生地片投于熟鍋，倒伏另一小鍋作為蓋並 予密閉後用? 火加熟，見鍋頂白紙片變黃燒焦即予 息火，再經一夜冷? 開鍋取出即可(38)。. (三)熟地 :本品為不規則的塊片、碎塊，大小、厚薄不一。表面烏黑色， 有光澤，黏性大。質柔軟而帶性，不易折斷，斷面烏黑色， 有光澤、無臭、味甜。 (A)鑑別:取本品粉末 1 g，加乙醇 10 ml，浸泡 24 小時，過濾，濾 液作為供試品溶液。另取 5-羥甲基糠對照品，加乙醇製成每 1 ml 含 0.5mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取 試品溶液 10µl、對照品溶液 5µl，分別點於同一硅膠 GF254 薄層 板上，以石油醚-醋酸乙酯（1：1）展開劑，展開，取出，晾乾， (Rf=0.8)置紫外光燈（254nm）下檢視。供試色譜中，在與對照 品色譜相應的位置，顯相同顏色的斑點(36)。 (B) 熟地黃:如蒸熟地黃即將生地黃投入蒸桶，加插竹筒2~3支以利 蒸氣交流後加蓋密閉。蒸鍋加水(需補充2~3次)後架上木甑，以 ? 火開蒸至克蒸氣上昇則應轉用微火，蒸6~8小時後悶潤一夜次 日略施攪拌再作第2次蒸4~8小時及悶潤12小時，取出切片或小 段，曬乾(38)。 (四)炮製後主要成分確有變化，尤其是catalpol與stachyose會隨蒸曬次數 之增加而降低，部分市售熟地品更難分析出catalpol成分，同時發 現炮製品比生地黃多了較低極性之furan型化合物，此外蒸曬次數 越多之降血糖效果亦似乎不弱於生地黃，唯其相差不大(39)。. - 18 -.
(19) 第四節 地黃之藥理學及臨床應用文獻考察 一、地黃之藥理學研究文獻考察 1、對血液系統的影響 地黃寡糖可促進快速老化模型小鼠骨髓粒系巨噬系母細胞，早期 和晚期紅系母細胞的增殖，特別是造血微環境中的某些細胞，促進其 分泌多種造血生長因子而增強造血母細胞的增殖(40)。地黃多糖可明顯 促進正常小鼠骨髓造血幹細胞的增殖，對粒單系母細胞和早、晚期紅 系母細胞的增殖和分化亦有明顯促進作用(41)。由此可見地黃寡糖和多 糖對造血系統均具有刺激作用。另外鮮地黃汁或鮮地黃煎液及乾地黃 煎液給小鼠灌胃，均在一定程度上拮抗阿司匹林誘導的小鼠凝血時間 延長，且鮮地黃汁的作用明顯強於乾地黃，顯示其具有止血作用(42) 2、對免疫系統的影響 鮮地黃汁和鮮地黃水煎液可對小鼠的免疫能力明顯增強，對於甲 狀腺素造成的小鼠陰虛模型，鮮地黃汁還能增強 ConA 誘導的脾臟淋 巴細胞轉化功能(42)。地黃低聚糖可明顯增強正常小鼠的 (PFC)反應， 提示地黃低聚糖可明顯增強免疫抑制小鼠的体液免疫和細胞免疫功能 (43). 。. 3、對心腦血管系統的影響 地黃之心腦血管藥理學研究，依許鴻源博士著(44)：中藥成分最近 的研究一書及顏焜熒博士著(45)：常用中藥之藥理所引文獻。整理如下： 地黃浸膏，試驗於青蛙、蟾蜍、家兔等動物，得到結論如下： •小劑量對於蛙心無明顯作用；‚中等劑量對於蛙心有顯著張心作 用，在衰弱的心臟更為顯著；ƒ大劑量能使正常蛙心中毒；„對於蛙 心的作用，主要似在心肌；…注射於動物的靜脈，能使血壓上升，上. - 19 -.
(20) 升的原因與中樞心臟及血管各方面皆有關；†小劑量能使血管收縮； ‡大劑最能使血管擴張；ˆ利尿作用，利尿的原因由強心作用或與擴 張腎臟血管有關。 另地黃可明顯對抗甲狀腺素灌胃誘導的大鼠心肌肥厚，抑制心、 腦之線粒體 Ca2 +，Mg2 + ATP 活力，從而保護心腦組織避免 ATP 耗竭 和缺血損傷(46)，同時地黃煎劑對異丙腎上腺素誘導的大鼠腦缺血，亦 可明顯抑制 Ca2 +，Mg2 + ATP 活力升高 (47)。懷地黃水提取液給大鼠腹腔 注射，對急性實驗性高血壓有明顯降壓作用，對寒冷(室溫 23℃)情況 下的血壓則有穩定作用，從而提示地黃對血壓具有雙向調節作用(48)。 而對於懷地黃不同提取成分，研究認為懷地黃水提取物有顯著降壓、 鎮靜和抗炎作用，而乙醚、乙醇提取物無上述作用，水提取物的酸性 部分有降壓、鎮靜作用. (49). 。. 4、抗腫瘤作用 地黃多糖可抑制 S180 荷瘤小鼠細胞毒性Ｔ淋巴細胞活力下降，促 進白細胞介素 2 分泌能力，顯示地黃多糖可明顯增強細胞毒性Ｔ淋巴 細胞對腫瘤的殺傷能力(50)。 5、降血糖作用 生地黃煎劑、浸劑或醇浸膏能明顯降低家兔正常血糖和由腎上腺 素、氯化銨引起的高血糖，懷慶地黃根莖的熱水提取物中乙醇沉澱組 分，主要由果膠多糖組成，對正常和鏈佐菌素誘導的小鼠血糖均有降 低作用(51) 6、抗衰老作用 採用 Fe2. +. 半胱氨酸系統誘發肝微粒體脂質過氧化反應，TBA 螢. 光法測定丙二醛 (MDA)含量，生地水提物和醇提取物可不同程度的對 抗肝微粒體脂質過氧化，醇提取物作用強於水提取物(52)。通過對小鼠 腦組織中一氧化氮 (NO)，超氧化物歧化(SOD)和過氧化脂質 (LPO)的 - 20 -.
(21) 檢測，結果顯示熟地的氯仿及乙醇提取液均能明顯提高 D 半乳糖誘導 的衰老模型小鼠腦組織中 NOS 和 SOD 活性，使 NO 含量增加，LPO 含量明顯降低 ,從而發揮熟地氯仿提取液延緩衰老的作用(53)。另有研 究表明，懷地黃多糖可明顯拮抗 D 半乳糖所致衰老模型小鼠胸腺及脾 臟的萎縮 ,甚至使免疫器官有關指標和胸腺皮質厚度和細胞數、脾小 結及淋巴細胞數明顯升高，以至超過正常水平，提示懷地黃多糖可能 是懷地黃補益抗衰的主要活性成分，其拮抗衰老模型小鼠免疫器官的 萎縮、興奮免疫的作用可能是其補益抗衰的機制之一(54)。 7、抗胃潰瘍，保護胃粘膜作用 利用幽門結紮致使大鼠胃酸分泌增多及胃潰瘍形成，乾地黃和熟 地黃水煎液分別注入胃潰瘍大鼠十二指腸內，二者均可明顯抑制胃液 量、總酸度及總酸排出量，且呈一定量效關系，並能減少胃潰瘍的發 生率和潰瘍數，潰瘍抑制率乾地黃為 69 .6% ,熟地黃為 89.2 % ,熟地黃 的抑酸作用強于乾地黃(55)。. 二、地黃之臨床應用研究文獻考察 地黃為玄參科植物，地黃新鮮或乾燥塊根。始載于神農本草經， 列為上品。 在藥材上地黃可分為鮮地黃、乾地黃和熟地黃三种。三种均具滋 陰生津功效，但各有側重。鮮地黃性寒、味甘苦、能清熱生津、涼血、 止血。生地黃性寒、味甘、能清熱涼血、養陰生津。熟地黃性微溫、 味甘，能滋陰補血，益精填髓。可用於治療陰血津液虧虛諸証，成為 中醫臨床上一味應用十分廣泛的補益類中藥。現代藥理研究發現 :地 黃及其有效成分具有調節免疫功能，影響心血管系統、造血系統及內 分泌系統等多方面的活性，並具有抗腫瘤、抗衰老及降血糖等功效(56)。. - 21 -.
(22) 第五節 地黃之成分文獻考察 根據顏焜熒教授(45) 著常用中藥之藥理所引文獻指出，大島氏報導 地黃醚浸膏部分含 sitosterol 及類似 carotene，而藤田路一等將之檢驗 出乃為 ß-sitosterol, campesterol 及 stigmasterol 3 種混合物。Reaol 報導 地黃含維生素類物質，其含量按維生素 A 計算為 0.0053%。北川氏等 由懷慶地黃分離出 D-mannitol 及 catalpol。 地黃中主要化學成分: (1)? 類成分:其中又以環烯醚? ? 類為主。已從鮮地黃及乾地黃中分 離鑑定了 23 種? 類:梓醇(catalpol)、二氧梓醇(dihydro-catalpol)、 益母草? (leonuride)、桃葉珊瑚? (aucubin)、地黃? A、B、C、 D (rehmannioside A、B、C、D),美利妥單? 美利妥雙?. (monometittoside),. (melittoside),洋丁香酚? (acteoside),異洋丁香酚?. (iso acteoside),筋骨草?. (ajugoside),焦地黃素 (jioglutin) D、E,. 梓醇? 元 (cataepolgenin),洋地黃葉?. (purpureaside)等(57)。. (2)糖類:另尚含大量 fructose, glucose, galactose, mannitol, sucrose ,manniotriose, raffinose, stachyose, verbascose, glucosamine 等碳 水化合物。其中水蘇糖(stachyose)含量甚高，佔懷慶地黃乾重 32.1%(58)。 (3)胺基酸:Tomoda et al.(58)發現懷慶地黃之成分。其中含 lysine, histidine, arginine,aspartic acid, glutamic acid 等胺基酸。而以 Arginine 含量最高，佔懷慶地黃乾重 4.2%。 (4) 有 機 酸 : 棕 櫚 酸 (palmitc acid), 苯 甲 酸 (benzoic acid), 苯 乙 酸 (phenylacetic acid),辛酸(caprylic acid),琥珀酸(succinic acid),桂 皮酸(cinnamic acid),月桂酸(lauric acid)等(57)。. - 22 -.
(23) 第六節 地黃成分梓醇之理化性質與藥理作用文獻考察 一、梓醇之理化性質化學結構 1.梓醇(catalpol):異名脫對羥基苯甲酸梓? ，catalpinoside。 2.分子式及分子量 分子式 Cl5H22010 分子量 362.45。 3.理化性質 mp:207℃~209℃ 〔a〕22 D -122(稀乙醇) 。 結構式（catalpol），其化學式如下(57)：. Fig 1、梓醇化學成分結構. 梓醇的化學性質不穩定，遇熱易分解。並且生地和熟地在加工炮 炙過程中經過高溫處理，導致梓醇分解，所以梓醇的含量與生地黃相 比下降了 1 / 2 ~ 2 / 3(59)。. - 23 -.
(24) 二、梓醇之藥理作用 日本學者從鮮地黃中分離得到 23 種以上的成分(60)，其中梓醇系環 烯醚? ? 類，含量較高。但其極性大，穩定性差，製備、收集一定量 供藥理、藥效研究十分困難。通過地黃中梓醇的分離方法比較，採用 常規柱層析法得到含量 80 %。採用低壓柱層析與高壓反相柱層析結合 的方法，更有效地分離、收集地黃中降血糖活性成分梓醇。 地黃中所含的梓醇具有利尿和緩瀉作用，並發現梓醇對四氧嘧啶 所致的實驗性糖尿病有降血糖作用(61)，並顯示具有抗 B 型肝炎病毒， 改善小鼠末梢循環等功能。但梓醇的化學性質不穩定，遇熱易分解(62)。 研究發現炮製後主要成分確有變化，尤其是 catalpol 與 stachyose 會隨 蒸曬次數之增加而降低，部分市售熟地品更難分析出 catalpol 成份. - 24 -.
(25) 第七節 學習記憶之文獻考察 一、學習記憶之形成過程 學習與記憶一指經驗的獲得與發展，另一為記憶則為經驗的保存 與 再 現 。 記 憶 之 保 存 時 間 可 分 為 三 類 ， 即 短 期 記 憶 (short-term memory)、中期記憶(intermittent-term memory)、及長期記憶(long-term memory). (63). ；另就訊息刺激後之學習記憶形成階段，則可分為四期. (64). ：感覺記憶期(sensory memory)-在事件發生後數秒鐘內的記憶；初. 級記憶期(primary memory)-在事件發生後數分鐘內的記憶，此類記憶 僅能維繫數小時；二級記憶期(secondary memory)-在事件發生後數月 內的記憶，此類記憶可維繫數年之久；三級記憶期(tertiary memory)在事件發生後數十年內之記憶，此類的記憶形態可長達終生不忘。 當外界之刺激訊息輸入後以至記憶之形成，通常都需要經歷下述 之階段，即學習獲得(acquisition)、記憶鞏固(consolidation)、記憶再現 (retrieval)及再學習獲得(reacquisition)之過程；一旦新訊息經學習獲得 記憶鞏固後，便進入中期記憶形態，若再經不斷之再學習獲得或記憶 之再現，而使記憶形態再次鞏固便可進入長期記憶(65)。對不同記憶類 型的腦內解剖結構定位進行總結(Table.1) (66) ，使大腦結構與記憶的相 關性有了更進一步的了解。. - 25 -.
(26) Table 1.記憶的腦內解剖結構定位 (66). 記 憶. 1.陳述性記憶 a.事實、活動事件. 內側顳葉 medial temporal lobe，間腦 diencephalon. 2.非陳述性記憶. 紋狀體(striatum). a.技巧、習慣 b.非聯合型學習. 反射通路(reflex pathway). c.簡單的經典條件反射 杏仁核(amygdala)，小腦(cerebellum). 二、神經傳遞物質與學習記憶 (一)、Cholinergic system 對記憶形成之影響 1971 年 Deutsh 指出，在新訊息之儲存和再現過程，乙醯膽鹼神經 元突觸有明顯增加及改變之現象 (67) 。而在近期之行為藥理學之研究 中，Drachman 及 Leavitt 發現年輕人在服用乙醯膽鹼接受器拮抗劑 SCOP 後，會 產 生 類 似 老 年 癡 呆 症 之 進 行 性 健 忘 症 狀 (68) ；同時 Quartermain 及 Leo 亦發現給予大鼠 SCOP 後，可使腦內 cholinergic neuron 之減少而誘發學習行為操作之障礙(69~72)；亦發現 SCOP 初期的 影響過程是在學習獲得的成形過程(73)；實驗結果亦顯示，SCOP 會加 強滯留行為的障礙，同時提供了 SCOP 的障礙和學習成形相互關聯(74)。 近來在 basal forebrain 的 cholinergic neurons，特別是 nucleus basalis magnocellularis (NBM)與記憶過程的支配相關聯。在大鼠腦室給予乙 醯膽鹼神經毒素 AF64A，會降低 hippocampal 和 frontal cortex 之間 acetylcholine 的水平，且造成被動迴避學習記憶的障礙(75)；另在乙醯 膽鹼神經毒素 AF64A 所造成之腦內乙醯膽鹼神經元之萎縮及大鼠學 習行為操作障礙，發現若植入富含乙醯膽鹼之神經元便可使記憶減退 之現象得到恢復(76)。此外在 1990 年 Goto 指出，乙醯膽鹼之周邊接受 器拮抗劑 meth-SCOP，可造成痛覺、感受及運動量之改變，但不會造. - 26 -.
(27) 成學習記憶之障礙(77)。因此，在學習記憶之能力上，中樞乙醯膽鹼神 經系統，確具重要參與之角色. (78). 故本研究使用 SCOP 等作為誘發學. 習獲得障礙之動物模式。. (二)、Catecholaminergic system 對記憶形成之影響 根據 Oei 之報告指出，周邊及中樞 noradrenergic system 在學習記 憶中扮演一定的角色(77)。在大鼠迴避學習記憶行為操作模式觀察，發 現老化引起的大腦 NE 含量缺乏，會促成老化相關的迴避行為障礙； 若給予大腦 NE 取代治療則可改善老化動物的迴避行為障礙(79)。 1991 年 Harley 提出，在成年哺乳類大腦，作用於 perforant path-dentate gyrus synapse 可提供一個神經可塑性的模式。當內生性或 外生性 NE 被輸入，從 dentate gyrus 作用到 perforant path，可促發短 期和長時期的加強，促發這個加強作用依賴β-接受器的活化。另外增 加 locus coeruleus(LC)的活性，可進入 perforant path 短期和長時期加強 的作用，降低 LC 的活性則不影響 baseline perforant path 的作用(80)。 Oei 及 King以 6-OHDA 造成腦部區域損壞之研究中，Pisa 及 Fibiger 指出 dorsal noradrenergic bundle (DNB)之 noradrenaline 在空間性記憶 能力及注意力，扮演一定之角色(81)。另 Mason 和 Fibiger 在大鼠 food reinforced spatial delayed alternation task 中，注射 6-OHDA 於 dorsal noradrenergic bundle，發現 cortex-hippocampus 的 NE 有 95%的下降。 更有報告指出注射 6-OHDA 於 A10 catecholamine 神經，對於大鼠的 delayed alternation task、T-maze (food reinforcement)等造成行為障礙 (82). 。 報告指出，週邊 epinephrine 的釋放，可調節新訊息成形的貯存和. 促進記憶的調節。訓練前給予 PROP 及 PHEN，為β及α接受器拮抗劑， 會減弱 epinephrine 的記憶增強作用 (83) ；另給予大鼠β接受器拮抗劑. - 27 -.
(28) PROP，會阻礙行為的改善；當 PROP (10 mg/kg) 併用 intrahippocampal SCOP (0.32 µg/side)，明顯增加 working memory 的錯誤，顯示 working memory 的行為，是經由 muscarinic 和 β-adrenergic 共同調節神經傳遞 的作用機轉(84)。 (三)、Serotonergic system 對記憶形成之影響 serotonin 的細胞體是在 raphe nuclei(85)。在無脊椎動物如海蝸牛所 進行之條件學習反應研究中，認為記憶鞏固係 5-HT 釋出後，作用於 突觸後接受器導致突觸後神經內 protein kinase 之活化，以促進蛋白質 合成及基因之複製 (86) 。研究數據指出，個別刺激或阻斷 5-HT1B 和 (或)5-HT2A/2C 接受器，會抑制或加強學習(87)；另外文獻指出 serotonin 在辨識過程，是經由過度釋放而非耗盡來產生滯留行為的障礙(88)。 PCA 為 serotonin 釋出促進劑，可增加中樞 serotonin 之活性而誘 發學習獲得障礙。在大鼠 one-way 主動迴避模式的學習和滯留及被動 迴避模式的滯留，PCA 會造成一個劑量和時間相關的障礙；一聯串的 研究亦指出，PCA 會導致迴避學習的 缺乏，是藉由刺激突觸後的 serotonin 接受器而產生 serotonin 的釋放所致。由 PCA 導致的主動迴 避模式的學習獲得不足，被認為是經由刺激 5-HT2 接受器而促成；被 動迴避模式的滯留則被認為是經由 5-HT1 接受器而促成(89)；另外 PCA 所引起的健忘，可被小鼠訓練後給藥 5-HT2 接受器拮抗劑：ritanserin、 miaserin 逆轉，但 SCOP 引起的健忘則不行(90)。5-HT1A 接受器作用劑： 8-OH-DPAT，明顯增加 three-panel task 的錯誤次數，但在參考記憶 (reference me mory)測試，則沒有作用；這提供當活化 hippocampus 的 5-HT1A 受體會障礙 working memory 但不影響 reference memory 的保留 (91). 。另以 serotonergic neurotoxin 5,7-DHT 投在 raphe 會造成學習記憶. 損傷(92)。. - 28 -.
(29) 三、腦缺血與學習記憶 臨床上，癡呆症以阿爾滋海默氏症和血管性癡呆症最多，腦部缺 血、缺氧或出血容易引起中樞神經系統之神經元損害，產生神經功能 喪失，嚴重者會導致神經元死亡，此神經功能失常常反應於行為及記 憶功能失常。 大腦的小動脈硬化 (cerebral arteriosclerosis)是老年性智力減退的 原因，這點已經得到眾多學者的肯定。動脈粥樣硬化時發生的多發性 腦梗塞。有時只是很小的腔隙性腦梗塞，可導致癡呆症。當軟化的腦 實質總量超過 50 ml 時即可出現明顯的癡呆症。 早老性癡呆 (Alzheimer 病)與腦血管多發梗塞所致之癡呆 (MID) 是不同的。Alzheimer 病是由於代謝的全面降低而腦血流代償性地減 少，MID 卻是器質性變化之結果。二者對血 CO 2 分壓變化的反應均保 存著，但對血 CO2 分壓增高的反應則 MID 減弱，二者在思維活動時腦 血流量的增加量均比正常者減少(93)。 腦血管疾病促使早老性癡呆症患者的認知能力下降，尤其在早老 性癡呆症患者的早期。早老性癡呆症的發展一般比較緩慢，在早期多 無臨床症狀，這時腦血管疾病對認知能力的影響超過該病本身對病情 的影響，所以預防腦血管疾病就成為延緩減輕早老性癡呆症的一個治 療手段(94)。 Kogure等在微血栓法製成的大鼠腦缺血模型上，發現缺血 4小時 後雙側鼠腦組織中NE含量均下降(95)，Robinson則認? 大鼠腦缺血早期 缺血則NE升高，在發生腦組織不可逆損傷後又下降(96)。Calderini在大 鼠雙側頸總動? 阻斷加低血壓法造成全腦缺血，發現缺血15分鐘時腦 組織中NE升高，5-HT及5-HTAA無變化，再灌流靶分鐘後NE及5-HT 均下降(97)。. - 29 -.
(30) 5-HT與缺血性腦水腫密切相關。5-HT同血管壁5-HT受體結合可發 揮? 烈的縮血管作用，更加重腦缺血，同時5-HT降解? 物5-HIAA彌散 于神經元間隙也加重腦水腫，腦水腫又可使腦組織血供進一步? 少， 形成缺血性腦損傷的惡性循環。另外，腦實質小血管壁上含NE能神經 末梢及a、ß受體，大量NE及E主要激活a 受體引起腦血管? 烈收縮 (98) ; Magnoni研究表明腦缺血時停受體數目? 少，這樣a受體即相對增加， 更加? 了NE及E的縮血管作用從而加重腦缺血及腦水腫(99)。. - 30 -.
(31) 第八節 阿爾滋海默氏症與腦內神經傳遞物質之關係 阿爾滋海默氏症是一種大腦退化和導致癡呆的疾病，其病理過程 可能是下列因素引起：1.在神經病理(neuropathology factor)方面，在大 腦 nucleus basalis of meynert (NBM) 區 發 現 神 經 退 化 斑 塊 (senile plaques)、神經纖維纏繞(NFT)及膽鹼能神經的喪失等現象。2.在基因 (genetic factor)方面，神經退化斑塊的形成是因為β-amyloid protein 的 沉澱增長或促進，而神經纖維纏繞則是 Tau protein 的異常磷酸化反應 造成。在生化(biochemical factor)方面，如發炎、氧化、壓力、荷爾蒙 缺乏(如 estrogen)和其它未確切的危險因子(如老化)。但導致阿爾滋海 默氏症最危險的二個因子，一個是老化和陽性家族史，另一個危險因 子則是頭部外傷(100)。另在早發性、遲發性的 AD，已確定老化、家族 史、apolipoproten E gene-e4 的遺傳突變基因是危險因子(101)。 更進一步的研究顯示，在大腦 basal forebrain 區阿爾滋海默氏症病 人在該區之 cholinergic neurons 有顯著之神經纖維病變及神經末梢退 化現象，且在其支配區 hippocampus 之 CA1 區及 neocortex 之 temporal cortex、frontal cortex 區均有斑塊形成及顯著之神經纖維病變。另在 brain stem 區，阿爾滋海默氏症病人在中樞 noradrenergic system 之前 locus coeruleus 區的神經細胞數目明顯減少並出現神經纖維病變而中 樞 serotonergic system 之 raphe nuclei 區亦出現神經纖維病變；顯示 noradrenergic system 及 serotonergic system 與阿爾滋海默氏症病人之 記憶能力減退有密切之關係。由此顯示 hippocampus 區神經之損害， 在阿爾滋海默氏病人之記憶能力減退現象中，扮演極重要之角色；而 neocortex 區神經之損害，則與阿爾滋海默氏病人之運動機能及視力有 較密切之關係(102~103)。另有實驗證明雙側海馬迴注射β-amyloid protein 亦會造成單類神經傳遞物質顯著下降(104) 。茲將阿爾滋海默氏症與中. - 31 -.
(32) 樞神經傳遞物質間之關係敘述如下： 1、在 cholinergic system 方面 阿爾滋海默氏病人腦內 basal forebrain 之 nucleus basalis of Meynert( NBM)區及其支配之 frontal cortex、parietal cortex、basolateral. amygdala 區等有極廣泛之細胞損減現象，而膽鹼乙醯轉移? (CHAT)、 乙醯膽鹼酯解? (AchE)之密度及乙醯膽鹼之濃度亦有明顯降低現象 (103、 105). 。由此可知在阿爾滋海默氏病人其中樞 cholinergic system 之功. 能明顯下降(102,103,106)，特別是 NBM 區及其支配之 frontal cortex、parietal cortex、basolateral amygdala 區之軸突及神經末梢。 2、在 catecholaminergic system 方面 阿爾滋海默氏病人腦內 forntal cortex 及 hypothalamus 區之前 norepinepherine 濃度有明顯降低而其代謝物 MHPG 之濃度則有增加現 象(102)；另根據 Tomlinson 氏等研究指出在阿爾滋海默氏病人，其腦內 noradrenergic system 主要分佈區域 locus coeruleus (LC)有明顯之細胞 減損現象(107)。由此可知在阿爾滋海默氏病人中樞 noradrenergic system 之活性明顯下降。 3、在 serotonergic system 方面 阿爾滋海默氏病人腦內 temporal cortex 及 frontal cortex 區之 5-HT 及 5-HIAA 濃度有明顯降低(102)，而在中樞 serotonergic system 接受器鍵 結能力及受體密度之研究上亦指出腦內 ascending serotonergic system 包括 hippocampus、neocortex、amygdala 之接受器密度有明顯之降低， 且在 temporal cortex 及 frontal cortex 區突觸前之 5-HT2 receptors 亦有顯 之減損(108、109)。另外在阿爾滋海默氏患者中的 dorsal raphe nucleus (DRN). - 32 -.
(33) 及 hippocampus 的 CA2 區域及 entorhinal 皮質，都可發現 serotonin transporter (5-HTT)部位亦明顯減少(110)。由此可知在阿爾滋海默氏病人 中樞 serotonergic system 之活性明顯下降(111)。. - 33 -.
(34) 第三章 實驗材料與方法 第一節 實驗材料 一、地黃之萃取過程 本實驗所用之地黃，經邱年永技正鑑定，確定其基原如下： Rehmannia glutinosa LIBOSCH. F. hueichingensis (CHAO et SCHIH) HSIA 懷 慶地黃為玄參科植物的塊根。 本研究將生地黃以甲醇浸潤後，在50℃下迴流抽取四∼五次， 每次約四小時，合併抽取液，經減壓濃縮乾燥後，即得地黃甲醇粗 抽物(以下簡稱RM) 。另以正丁醇分離地黃甲醇粗抽物，即得正丁醇 層(以下簡稱RB )與水層(以下簡稱RW ). 二、實驗試劑及配製 1. Catalpol Standard，購自米山藥品工業株式會社 。 2. Amyloid ß-peptide 1-40（human），購自 Tocris，實驗前以 35% acetonitrile/0.1% trifluoacetic acid 製備（25 pmole/µl）。 3. Pentobarbital Sodium，購自東京化成工業株式會社 。 4. Monosodium phosphate 、 Disodium phosphate 、 EDTA 、 Acetonitrile、Trifluoacetic Acid、Ortho-Phosphoric acid，以上購 自 J.T. Baker。 5. Sodium 1-Octanesulfonate，購自 TCI。 6. 4-Hydroxy-3-methoxymandelic acid (VMA）、Norepinephrine （NE） 、Dopamine（DA） 、Dehydroxyphenylacetic acid（DOPAC）、 Serotonin（5-HT） 、5-Hydroxyindoleacetic acid（5-HIAA） ，以上 均購自 Sigma。. - 34 -.
(35) Table 2. 實驗試劑之簡稱、作用機制、購買公司一覽表 試劑全名. 簡稱. 作用機制. 公司. Scopolamine hydrobromide SCOP. 毒蕈鹼接受器拮抗劑. Sigma. Propranolol. PROP. β-接受器拮抗劑. Sigma. Phenoxybenzamine. PHEN. 選擇性α 1-接受器拮抗劑 Sigma. AF64A. cholinergic neurotoxin. hydrochloride Acetylcholine mustard. RBI. hydrochloride 6-Hydroxydopamine. 6-OHDA noradrenergic neurotoin. RBI. 5,7-Dihydroxytryptamine. 5,7-DHT serotonergic neurotoxin. RBI. Yohimbine. YOH. 選擇性α 2-接受器拮抗劑 Sigma. 三、實驗動物 本研究所採用之動物為行政院國家科學委員會動物中心所提供 Sprague-Dawley系雄性大鼠，體重約250∼300 g，飼養在空調的房間， 溫度維持在23 ±1℃，燈光控制採12小時亮12小時暗( 08:00燈亮、20:00 燈暗)，食物與水不予限制。. 四、實驗儀器 (一)被動迴避儀： 使 用 「 被 動 迴 避 學 習 反 應 測 定 裝 置 （ Coulbourn Instruments U.S.A），此裝置分成兩部份：實驗箱係為一經中間閘門分隔為相同 大小二室（48×20×30 cm）的箱子及其控制器在實驗裝置處置上，於 相同大小二室之其中一室上方置一20W之電燈泡，將相同大小二室區. - 35 -.
(36) 分為明暗二室，中以門閘控制，箱底設有間隔 1.5cm平行排列的金屬 桿(直徑1.5cm) ，並接上電流器。 (二)ALZET 幫浦： 由滲透壓幫浦(Mini-Osmotic Pump，Model 2002，輸注速率 0.5 µl/hr，內容量 200 µl，Alzet ® )、軟管（長約 4-5 cm，內容量約 80 µl）、 輸注針頭（Brain Infusion Kit II，3-5 mm，Alzet ® ）所構成，如圖所示。. 幫浦調節器 腦部輸注頭. 移除用頭 滲透壓幫浦. 輸注管. 墊片 Fig. 2、腦部輸注裝置. (三)水迷宮之設備： 由一直徑160 cm、高50 cm、壁厚 15 mm不銹鋼泳池及一個逃逸平 台（直徑11 cm、高22 cm，當泳池滿水時，置於水面下 1 cm處）所組 成，水溫保持23 ± 1℃。水池由電腦劃分為四個象限（I、 II、 III、 IV） 三個環（A、B、C）如圖所示。水迷宮所用之紀錄儀器為:. - 36 -.
(37) Columbus Instruments VIDEOMEX-V video tracking, video camera,video monitor(COLUMBUS INSTRUMENTS INTERNATIONAL CORPORATION）. 象限 II. 象限 I. C B A. 象限 III. 象限 IV. （三）主動迴避儀：使用「主動迴避學習反應測定裝置」 （Coulbourn Instruments U.S.A），此裝置分成兩部份： 實驗箱係為從中間分隔為相同大小二室（48×20×30cm）的箱 子及其控制器；在實驗裝置處置上，於二室上方各置一20W之電 燈泡及一發聲器，中有通道可相通，箱底設有間隔 1.5cm平行排列的 金屬桿(直徑1.5cm) ，並接上電流器。 （四）酵素免疫分析儀：使用Microplate Spectrophotometer （Powerwave X 340，Bio-Tek instruments INC.）。 （五）HPLC之設備：使用High performance liquid chromatography （HPLC PM80, BAS） 、檢出器（ Electrochemical Detectors LC-4C ， BAS）、分離管柱為 Bioanalytic system MF-6026測定之。. - 37 -.
(38) 第二節 實驗方法 一、被動迴避學習反應 （Passive Avoidance Learning） 將大鼠置入明室，同時開啟閘門，待大鼠進入暗室後，關閉閘門， 同時於底板通以電流（1 mA,2 sec），待電刺激後 5 秒，自暗室取出大 鼠，歸回飼養籠；如老鼠一直沒進入暗室，待 90 秒後將老鼠推至暗室 後，關閉閘門，同時於底板通以電流，再歸回飼養籠。測定期：於訓 練後 24 小時，再將大鼠置入明室，同時並開啟閘門，記錄大鼠在明室 之滯留時間（Step-Through Latency，STL）。當於明室之滯留時間大於 5 分鐘（300 秒）時，則稱大鼠之學習記憶能力正常(112)。. 二、主動迴避試驗 本實驗使用「雙向主動迴避學習反應測定裝置」，此裝置分成兩 部份：實驗箱(shuttle box) 係為一經中間閘門分隔為相同大小二室的 鋁箱；其中央有一小閘門中隔可相通，箱底設有間隔平行排列的金 屬桿，並接上電流器，整個實驗過程全由電腦程式設計控制其時間、 聲光及電擊等動作，並進行記錄大鼠之迴避反應(avoidance response) 次數、逃避反應(escape response)次數及穿梭(inter-trial crossing)次 數。測試訓練共進行五天;第一天將大鼠置於其中一室，待探索30秒 後(exploration) ，電腦隨即出現10秒鐘的光及聲音刺激(conditional stimulus ;CS) ，此時大鼠將有兩種反應結果產生:若大鼠在光及聲音 刺激(CS系統下)之10秒鐘後仍停留在同一邊，無任何動作反應，則隨 即 給 予 持 續 電 流 (0.8mA,5sec) 電 擊 一 次 (unconditional stimulus ;UCS)，此時，大鼠在UCS系統下所表現來回穿梭的行為， 稱之為逃脫反應(escape response);若大鼠在 CS系 統 下 以 進 入 另 一 室，則電腦不會給予任何電擊，此時，大鼠於CS系統期間所表現來 - 38 -.
(39) 回穿梭的行為，稱之為迴避反應(avoidance response)，實驗中CS或 UCS刺激會隨著大鼠之穿梭反應而予以終止，在經過20秒inter-trial interval 後 則 進 行 下 一 次CS-UCS 訓 練。每隻 大 鼠 每 天 接 受 30次的 CS-UCS測試訓練，之後將大鼠歸回飼養籠;第二天後至第五天及第八 天進行測試訓練時，則不再有30秒之探索期(exploration)，而直接進 入10秒鐘的光及聲音刺激(conditional stimulus ;CS)以進行測試訓練。 在整個實驗過程中，大鼠接受CS系統刺激下仍留於同一邊，表示 其尚未學會，則會給予電擊，此為學習訓練的歷程;若大鼠受CS刺激後 移動至另一邊，表示已經學會(稱：條件反射已經建立)，則不會受到電 擊，此行為反應是記憶能力的表現。電腦會依大鼠的反應情況，自動 出現CS及UCS的狀態，並自動記錄大鼠反應的次數，實驗根據大鼠在 CS系統下的迴避反應次數及UCS系統下之逃脫反應次數，以評估大鼠 之學習記憶能力。若逃脫反應次數越多，表示學習能力較差;若迴避反 應次數越少，表示記憶能力越不好(113)。. 三、大鼠雙側頸動脈結紮腦缺血實驗 實驗大鼠以pentobarbital麻醉，將麻醉大鼠仰臥，由腹頸部中線切 開，並避開迷走神經游離出頸動脈，以縫合線將兩側頸動脈作永久結 紮，實驗期間以恆溫板及40W檯燈光照控制實驗動物肛溫在攝氏36-37 (114). 度，手術後動物置於飼養籠，並給予光照至其翻正反射產生為止. ，. 動物於頸動脈阻塞後10天開始進行學習行為評估，其中於手術後11-12 天，進行被動迴避學習反應；手術後12-14天進行水迷宮空間學習操 作；手術後15天進行非空間操作；於手術後16天進行水迷宮之記憶能 力評估。. - 39 -.
(40) 四 、大鼠 amyloid ß peptide-(1-40)側腦室輸注實驗 製 備 好 之 amyloid ß-peptide 1-40 solution 灌 入 Alzet osmotic pump，接上brain infusion kit，並使 amyloid ß-peptide 1-40 solution充滿 連接Pump及Kit之PE管。其次，以sodium pentobarbital（45 mg/kg）進 行大鼠麻醉，麻醉後，置於立體定位儀上，進行側腦室之定位；待側 腦室定位後，將Brain infusion kit置上，並將Alzet osmotic pump 置於頸 後皮下區。最後進行縫合，並歸回飼養籠中照顧。對照組（Sham）則 於 Alzet osmotic pump 填充35% Acetonitrile/0.1% Trifluoacetic Acid。 治療組於埋置好後之次日，持續於每天固定時刻給予，直至實驗完成 (10). 。. 五、 Morris水迷宮實驗（ Morris Water Maze） 實驗於手術完後第十日開始進行，泳池由電腦分成四個象限，逃 逸平臺固定置於第四象限上，大鼠頭向外依序分別置入四個象限，每 天訓練4次，每次 2 分鐘；若大鼠於 2 分鐘內即找到逃逸平臺，讓大 鼠休息 30 秒鐘後，抓出泳池休息 30 秒鐘，然後進行下一次之訓練； 但若大鼠於 2 分鐘尚未找到逃逸平臺，則將大鼠抓到逃逸平臺，休息 30 秒鐘後，移出泳池休息 1 分鐘，再進行下一次之訓練；共訓練 3 天，此三天（實驗第10-12天）謂「學習操作」(115)。 水迷宮第三天（實驗第12天）於訓練完4小時後將逃逸平臺自水面 下取走，再將大鼠置於第一象限，連續測定60 秒鐘，記錄大鼠於泳池 內游泳之軌跡及於原逃逸平臺所花之時間及游泳距離，此謂之「參考 記憶（Reference memory）」(116)。 水迷宮第四天（實驗第13天）再將逃逸平臺置入第四象限並使其 露出於水面 1 cm，訓練 4 次，此謂之 「非空間性記憶 （ Non-spatial memory）」(115)。. - 40 -.
(41) 水迷宮第五天（實驗第14天）將逃逸平臺置於第二象限，加水使 其沈入水面下1 cm，大鼠先置入第一象限，連續測定120秒鐘或至大鼠 找到逃逸平臺，此謂之「再學習（Reacquisition）」(117)。 水迷宮第五天（實驗第14天）於第一次實驗完成後休息4小時，再 將大鼠先置入第三象限，亦連續測定120秒鐘或至大鼠找到逃逸平臺。 所有大鼠游泳之軌跡及實驗資料均由電腦自動記錄。第5天稱為「工作 記憶（Working memory）」(117)。. Fig 3.雙側頸動脈結紮大鼠實驗流程. - 41 -.
(42) Fig 4. .大鼠 amyloid ß peptide-(1-40)側腦室輸注實驗流程. - 42 -.
(43) 六、梓醇改善學習記憶障礙與中樞神經系統之關係 1.雙側腦部 dorsal rape 區投與 serotonergic neurotoxin 5,7-DHT 對梓醇 改善學習記憶之影響 腦部 dorsal raphe 區(座標：bregma 往後 7.8 mm，往兩側 0.3 mm， 深度 6.4 mm)給予 5,7-DHT (25 µg/brain)破壞兩側 dorsal raphe 區 serotonin 神經元，7 天後；於訓練前側腦室 (座標：bregma 往後 0.9 mm， 往兩側 1.4 mm，深度 3.6 mm) (118)給予梓醇 (10 µg/brain)，病理對照組 給予 5,7-DHT。而空白對照組則給予 vehicle，並進行假手術組以比對 之。 2.雙側腦部 locus coeruleus 區投與 noradrenergic neurotoxin 6-OHDA 對 梓醇改善學習記憶之影響 腦部 locus coeruleus 區(座標：bregma 往後 9.8 mm，往兩側 1.3 mm，深度 7.2 mm) 給予 6-OHDA(6 µg/brain)破壞兩側 locus coeruleus 區 noradrenaline 神經元，7 天後；於訓練後於於訓練前側腦室 (座標： bregma 往後 0.9 mm，往兩側 1.4 mm，深度 3.6 mm) (118)給予梓醇 (10 µg/brain)。病理對照組給予 6-OHDA 。而空白對照組則給予 vehicle， 並進行假手術組以比對之。 3.雙側腦部海馬迴區投與 cholinergic neurotoxin AF64A 對梓醇改善學 習記憶之影響 海馬迴區(座標：bregma 往後 5.6 mm，往兩側 4.8 mm，深度 3.6 mm) 給予 AF64A (3 nmol/brain)破壞 hippocampus 區 acetylcholine 神經，7 天後；於訓練前側腦室 (座標：bregma 往後 0.9 mm，往兩側 1.4 mm， 深度 3.6 mm). 給予梓醇 (10 µg/brain)。病理對照組給予 AF64A。而. (118). 空白對照組則給予 vehicle，並進行假手術組以比對之。. - 43 -.
(44) 4.雙側腦部海馬迴投與乙醯膽鹼拮抗劑 scopolamine、腎上腺素 ß 拮抗 劑 PROP、腎上腺素 a 2 拮抗劑 YOH、a 1 拮抗劑 PHEN 改善學習記憶 之影響之影響 海馬迴區(座標：bregma 往後 5.6 mm，往兩側 4.8 mm，深度 3.6 mm) 給予 SCOP (3.2 ng/brain)、PROP (80 ng/brain)、YOH (80 ng/brain)、 PHEN (80 ng/brain)，7 天後；於訓練前側腦室 (座標：bregma 往後 0.9 mm，往兩側 1.4 mm，深度 3.6 mm) (118)給予梓醇 (10 µg/brain)。病理 對照組給予 SCOP (3.2ng/brain)、PROP (80 ng/brain)、YOH (80 ng/brain) 、PHEN (80 ng/brain)而空白對照組則給予 vehicle，並進行假手術組以 比對之。 七、單胺濃度測定 1.腦組織之處理 實驗完成後，將老鼠斷頭取腦，按Glowinski 方法 (119)分成cortex、 hippocampus 區域，分別加入25 mM phosphate buffer solution（pH=7.4） （4 ℃）均質。cortex分兩次，每次加入750 µl buffer後，均質離心（14000 rpm ，30 min,4℃）；再合併兩次之上清液，以25 mM phosphate buffer solution（pH＝7.4）定量至1.5 ml。 hippocampus 加入1 ml buffer後，均 質、離心（14000 rpm ,30 min） （4℃） ，以25 mM phosphate buffer solution （pH＝7.4）定量至1 ml 。保存於-80 ℃的冰箱中，待需要時解凍離心 （10000 rpm,5 min,4℃ ），取上清液使用。使用 high performance liquid chromatography （ HPLC PM80,BAS ）、 檢出器（ electrochemical Detectors LC-4C,BAS）、分離管柱為 Bioanalytic system MF-6026測定之。. 2.測定方法 酵素免疫分析儀：使用 microplate spectrophotometer（power wave X 340,Bio-Tek instruments INC.）。. - 44 -.
(45) 採 Lowery 之方法 (120) ，以 bovine serum albumin 為標準品，將 protein standard 以 50 mM phosphate buffer 稀釋 3 到 5 個濃度，取 5 µl sample 和 standard 分別置入 microplate 中，每一小格中先後加入 25 µl 試劑 A 及 200 µl 試劑 B（試劑購自 Bio-RAD）混合均勻，靜置 15 分 鐘後於波長 750 nm 下測其吸光值。爾後以吸光度求出標準檢量線及公 式，再將 Sample 的 Slope 帶入反推 protein 含量。. - 45 -.
(46) 第三節. 數據統計. (一 ) 被動迴避反應所獲得的數據，先以無母數法統計，各組間以. Kruskal-Wallis 分析變異數再以 Mann-Whitney U-test 檢定，並分析 其間差異之顯著性；凡 P 小於 0.05 以下時，則認為有統計意義。 (二)水迷宮空間性學習操作、參考記憶、工作記憶與單胺濃度等檢測所 獲得的數據，以單因子變異數分析法分析各組之變異數差異，再 以 Scheffe test 來作檢定；凡 P 小於 0.05 以下時，則表示有統計意 義。. - 46 -.
(47) 第四章實 驗 結 果 一、地黃甲醇、水、正丁醇層粗抽物對被動迴避學習之影響 地黃甲醇粗抽物(RM 30-300mg/kg s.c.) 於訓練前30分鐘皮下 注射給予大鼠可明顯增強低刺激 (0.8 mA, 1 sec)之被動迴避學習 反應(如Fig.5)，而正丁醇層(RB 10-30mg/kg s.c.)於訓練前30分鐘皮 下注射給予大鼠亦可明顯增強低刺激 (0.8 mA, 1 sec)之被動迴避 學習反應但水層(RW 30-300mg/kg s.c. )並無增強作用(如Fig. 6)。. *** (17). Step-through latency (sec). 300. 200. **. (17). **. (17). 100 (17). 0. VEH. 30. 100. 300. R M (mg/kg). Fig. 5. Effect of methanol extract of Rehmanniae Radix (RM ) on passive avoidance performance with low stimulus (0.8 mA, 1 sec) footshock in rats ** P < 0.01, ***P < 0.001 compared with VEH group.. - 47 -.
(48) Step-through latency (sec). 300. 200 **. *. (12). (12) (12) (16). 100 (14). (17). 0. VEH. 30. 100 R w (mg/kg). (10). 300. 3. 10. 30. R B (mg/kg). Fig. 6. Effect of water and butanolic layers of methanol extract of Rehmanniae Radix (R W and RB) on passive avoidance performance with low stimulus (0.8 mA, 1 sec) footshock in rats. *P < 0.05, **P < 0.01 compared with VEH group.. - 48 -.
(49) 二、地黃甲醇、水、正丁醇層粗抽物對scopolamine誘發學習操 作障礙之影響 乙醯膽鹼拮抗劑SCOP (1 mg/kg i.p.)於訓練前30分鐘腹腔注 射給予大鼠可造成被動迴避學習障礙，同時於訓練前 30分鐘皮 下 注 射 地 黃 甲 醇 粗 抽 物 (RM100-300 mg/kg s.c.)與 其 水 層(RW 100-300 mg/kg s.c.)、正丁醇層 (RB 10-30 mg/kg s.c.)，結果顯示地 黃甲醇粗抽物 (RM 300 mg/kg s.c.)(如Fig.7)與其 正丁醇層(RB 10-30mg/kg s.c.)( 如 Fig. 8) 可 明 顯 改 善 因 乙 醯 膽 鹼 拮 抗 劑 scopolamine誘導之大鼠被動迴避學習障礙，而乙醯膽鹼拮抗劑 scopolamine亦可誘導大鼠水迷宮學習操作、參考記憶、工作記憶 障 礙 ， 實 驗 前 30 分 鐘 皮 下 注 射 地 黃 甲 醇 粗 抽 物 之 水 層(RM 100-300 mg/kg s.c.)並無法明顯改善乙醯膽鹼拮抗劑 SCOP造成 大鼠於水迷宮學習操作 (如Fig.9)、參考記憶與工作記憶障礙 (如 Fig.10、Fig.11)，僅正丁醇層(RB 30 mg/kg s.c.)可明顯改善乙醯膽 鹼拮抗劑 SCOP造成大鼠於水迷宮學習操作 (如Fig. 12)、參考記 憶與工作記憶障礙 (如Fig.13、Fig.14)。. - 49 -.
(50) 300. (14). Step-through latency (sec). 250. 200. 150. 100. ### (8) 50. 0. VEH. *** (14). (10). VEH. 100. 300. RM mg/kg SCOP 1mg/kg. Fig. 7. Effect of methanol extract of Rehmanniae Radix (RM ) on scopolamine (SCOP)-induced impairment of passive avoidance performance with high stimulus (1 mA,2 sec) footshock in rats. ***P < 0.001 compared with VEH group. ###P < 0.001 compared with SCOP/VEH group.. - 50 -.
(51) 300. (14). Step-through latency (sec). 250. 200. ### (8) 150. 100. ## (8). 50. *** (14). (14). (10). VEH. 100. 300. 0 VEH. RW. 10. 30. RB. SCOP 1mg/kg. Fig. 8. Effect of water and butanolic layers of methanol extract of Rehmanniae Radix (R W and RB) on scopolamine (SCOP) -induced impairment of passive avoidance performance with high stimulus (1 mA,2 sec) footshock in rats. ***P < 0.001 compared with VEH group. ##P < 0.01, ###P < 0.001 compared with SCOP/VEH group.. - 51 -.
(52) VEH SCOP RW 100 mg/kg +SCOP RW 300mg/kg +SCOP. 120. Time to hidden platform(sec). ** 100. 80. 60. 40. 20 0. 1. 2. 3. 4. Days. Fig. 9. Effects of water layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (Rw) on the spatial learning in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats. (n=12). **P< 0.01 compared with the VEH group.. - 52 -.
(53) 16. Time spent in the target ring (sec). 14 12 10 8 6 4. ***. 2 0. VEH. VEH. 100. 300 RW mg/kg SCOP (1mg/kg). Fig.10.Effects of water layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (Rw) on reference memory in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats.(n=12). ***P < 0.001 compared with the VEH group.. - 53 -.
(54) VEH SCOP 1mg/kg RW 100 mg/kg +SCOP. 150. RW 300 mg/kg+SCOP. Time to hidden platform (sec). 120. *** **. 90. 60. 30. 0 Reacquisition. Retrieval. Fig. 11. Effects of water layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (RW ) on the working memory in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats. (n=12). **P< 0.01, ***P< 0.001 compared with the VEH goup.. - 54 -.
(55) 100. RB 30mg/kg + SCOP. Time to hidden platform(sec). 120. VEH SCOP RB 10mg/kg +SCOP. **. 80. 60. 40. ##. 20 0. 1. 2. 3. 4. Days Fig. 12. Effects of butanolic layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (RB) on the spatial learning in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats.( n=12 ). **P < 0.01 compared with the VEH goup. ##P < 0.01 compared with the SCOP group.. - 55 -.
(56) 14 12. Time spent in the target ring (sec). # 10 8 6. * 4 2 0. VEH. VEH. 10 30 RB(mg/kg) SCOP(1 mg/kg). Fig. 13.Effects of butanolic layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (R B) on the reference memory in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats. ( n=12 ). *P <0.05 compared with VEH goup. #P<0.05 compared with the SCOP/VEH group.. - 56 -.
(57) ***. ***. VEH SCOP 1mg/kg RB10 mg/kg+SCOP. Time to hidden platform (sec). 90. RB 30 mg/kg+SCOP ##. 60. ###. 30. 0. Reacquisition. Retrieval. Fig.14.Effects of butanolic layer of methanol extract of Rehmanniae Radix (R B ) on the working memory in the water maze test in scopolamine (SCOP)-treated rats. ( n=12). ***P <0.001 compared with the VEH goup. ##P <0.01, ###P < 0.001 compared with the SCOP group .. - 57 -.
(58) 三、地黃甲醇、水、正丁醇層粗抽物對腦缺血誘發學習記憶障 礙之影響 於訓練前10天將大鼠雙側頸動脈結紮，將造成大鼠在被動迴 避學習操作之障礙，於訓練前30分鐘皮下注射給予地黃甲醇粗抽 物(RM 100-300 mg/kg s.c.)與其正丁醇層(RB 10-30 mg/kg s.c.)、水 層(RW 300 mg/kg s.c.)可明顯改善雙側頸動脈結紮大鼠被動迴避 學習操作障礙(如Fig. 15、Fig. 16)，而於水迷宮學習操作實驗中， 於訓練前12天將大鼠雙側頸動脈結紮，亦可造成大鼠在水迷宮學 習操作參考、工作記憶之障礙；當於訓練前30分鐘皮下注射給予 (RM 100-300 mg/kg s.c.)劑量下之地黃甲醇粗抽物可明顯改善雙 側頸動脈結紮大鼠水迷宮學習操作之障礙(如Fig. 17)，而僅(RM 300 mg/kg s.c.) 可改善雙側頸動脈結紮大鼠水迷宮之參考、工作 記憶之記憶再現障礙(如Fig. 18、Fig. 19)。 ### (6). Step-through latency (sec). 300. 250. 200. 150. 100. *** (6). 50. (6). 0. Sham. VEH. 100 300 RM mg/kg Ischemia. Fig. 15. Effect of methanol extract of Rehmanniae Radix (RM ) on Passive avoidance performance with high stimulus (1 mA,2 sec) footshock in ischemia rats. ***P<0.001 compared with Sham group. ### P <0.001 compared with Ischemia group.. - 58 -.
(59) 300. ### (6). (6). ### (6). ### (6). Step-through latency (sec). 250. 200. 150. 100. (6) *** (6). 50. 0 Sham. VEH. 100. 300 RW. 10. 30 (mg/kg) RB. Ischemia. Fig. 16. Effects of water and butanolic layers of methanol extract of Rehmanniae Radix (R W and RB) on passive avoidance performance with high stimulus (1 mA, 2 sec) footshock in rats. ***P< 0.001 compared with Sham group. ###P< 0.001 compared with Ischemia group.. - 59 -.
(60) Sham Ischemia RM 100mg/kg+Ischemia 120. **. Time to hidden platform(sec). **. RM 300mg/kg+Ischemia **. 90. #. 60. # 30. 0 0. 1. 2 Days. 3. 4. Fig. 17. Effects of methanol extract of Rehmanniae Radix (RM ) on the spatial learning in the water maze test in Ischemia rats.( n=12). **P<0.01 compared with the Sham group. #P < 0.05 compared with Ischemia group.. - 60 -.
(61) Time spent in the target ring(sec). 8 #. 6 4 2 0. * Sham. VEH. 100. 300 RM mg/kg. Ischemia. Fig. 18. Effects of methanol extract of Rehmanniae Radix (RM ) on the reference memory in the water maze test in ischemia rats.( n=12). *P<0.05 compared with the Sham group.#P<0.05 compared with the Ischemia group .. - 61 -.
(62) Sham Ischemia RM 100 mg/kg +Ischemia. 150. RM 300 mg/kg +Ischemia. Time to hidden platform (sec). *** 120. ***. 90. 60 #. 30. 0 Reacquisition. Retrieval. Fig. 19. Effects of methanol extract of Rehmanniae Radix (R M ) on the working memory in the water maze test in ischemia rats. ( n=12). ***P<0.001 compared with the sham goup. #P<0.05 compared with the Ischemia group.. 另於訓練前30分鐘皮下注射給予地黃甲醇粗抽物之水層(RW 100-300 mg/kg s.c.)與正丁醇層(RB 10-30 mg/kg s.c.)，水層並不 能明顯改善雙側頸動脈結紮大鼠水迷宮學習操作與參考、工作 記憶障礙，而正丁醇層於10-30 mg/kg 可改善雙側頸動脈結紮大 鼠水迷宮之學習操作(如Fig.20)與參考、工作記憶障礙(如 Fig. 21、Fig. 22)。. - 62 -.
(63) Sham Ischemia R W 100 mg/kg +Ischemia. Time to hidden platform(sec). 120. R W 300 mg/kg +Ischemia **. ** **. 90. 60. 30. 0 0. 1. 2. 3. 4. Days. Time to hidden platform(sec). 120. Sham Ischemia R B 10mg/kg+Ischemia R B 30mg/kg+Ischemia. ** **. **. 90. 60. ##. 30. ## 0 0. 1. 2. 3. 4. Days. Fig. 20. Effects of water and butanolic layers of methanol extract of Rehmanniae Radix (R W and RB) on the spatial learning in the water maze test in ischemia rats. (n=12). **P< 0.01 compared with the Sham group. ##P<0.01 compared with Ischemia group.. - 63 -.
數據
+7
相關文件
在大地上流浪的過程中，他教會農民們釀酒，因此成為酒
拾荒其實就是進行物質再使用與再生利用的 一個流程；依據這個條文的精神，比起能源 回收與妥善處理 拾荒更符合 十
視覺障礙依衛生署「身心障礙等級」定義為：由於先天
IRB 編號 SE20156A-1 計畫主持人 許佳茵 計畫名稱 思覺失調症病患疾病觀感對其遵囑服藥及精神症狀之影響 審查意見
其實，過去一般人都以為佛教講四大皆 空，應該只重視精神生活，而不重視物質生
包含神經系統症狀及呼吸衰竭等 1 。腸病毒 D68 型最早是 1962 年時在美
精緻化飲食也日益增多。然而不良的生 活與飲食習 慣，正是導致各種慢性病、文明病的
近年來，大蒜對人體保健及疾病治療的研究陸續發表，許多人開始重視大蒜在醫療上，以及保健方面
