第二章 研究方法及材料
第三節 探討臨床 DHF 病患,加護病房嚴重發炎反應的病患,發炎反應物質
本研究是橫斷面研究的方式來探討血漿中發炎反應物質在舒張性心衰竭的病 素轉化劑阻斷劑,乙型阻斷劑 (beta-blocker),鈣離子阻斷劑 (calcium channel blocker)。 高血壓及糖尿病的定義如第一部分實驗所述。所有病人都做 M-mode 二 維心臟超音波併用都卜勒測量,紀錄的項目亦如同前面實驗所敘述,另外,我們 也用都卜勒的方式,計算各項舒張功能及心臟功能指標。舒張性心衰竭的定義:採 用歐洲心臟科學會 2007 年最新的共識(Paulus, Tschope et al. 2007)(圖 2-2),符合 NYHA 心衰竭症狀 II~III 以上,沒有排除條件,以都卜勒超音波為主要診斷工具,
E/E’ > 15 或者如果 E/E’在 8~15 之間時,需要加上其他超音波的客觀標準,二尖瓣 血流都卜勒(病患 50 歲以上,E/A 比值<0.5,deceleration time > 280 ms),另外就是 收縮功能正常,也就是左心室心搏輸出率≧50%。本研究經由台大醫院倫委會審核 並通過,病人也都有簽署同意書。所有加入實驗的病患都測量血清中的發炎指標,
包括 TNF-α 及 IL-6。排除條件:有心肌梗塞病史或有明顯冠狀動脈疾病 (冠狀動 脈狹窄大於 50%,coronary artery stenosis >50%),中度以上的瓣膜疾病,心肌病變,
心包膜疾病,慢性肺病,腎衰竭,心電圖顯示寬 QRS 波 (>120ms),慢性心房震顫 (chronic atrial fibrillation)。實驗組 VS 對照組條件:對照組選擇沒有排除條件,無 心衰竭症狀,超音波顯示沒有心臟舒張功能不良證據者,同時根據性別,年齡(差 距五歲以內),和實驗組做 1:2 的對照。群體二: 另外選擇 30 位加護病房(ICU)的
患者,在進入加護病房時,測量左心室的舒張功能,超音波的測量指標如上述, 心臟科最新的定義(Paulus, Tschope et al. 2007)。
測定血漿中的 TNF-α 及 IL-6
的病患,皆在沒有明顯感染,發炎反應的情況下接受抽血,經過 12hr 的禁食之 後,經由前臂靜脈抽血,經由標準程序分離離心之後,測定血漿中的 TNF-α 及 IL-6,
使用高敏感度的酵素免疫吸收法(high-sensitivity enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),IL-6 選用 catalog no. HST600B; R & D Systems, Minneapolis, MN, USA 測定,TNF-α 選用 catalog no. HSTA00D; R & D Systems 測定。以 IL-6 為例,
最小偵測的範圍是 0.016 to 0.110 pg/mL,TNF-α 則是 0.038 to 0.191 pg/mL。整體的 偵測變異範圍試驗間,以及試驗外以 IL-6 為例是 6.5-9.6%及 6.9-7.8%,TNF-α 則 是 7.4-10.6% 及 3.1-8.5%。
心臟超音波
所有病人都做 M-mode 二維心臟超音波併用都卜勒測量,紀錄左心房大小 (Left atrium diameter),左心室舒張末期收縮直徑 (Left ventricular end diastolic diameter, LVEDD),左心室收縮末期直徑 (Left ventricular end systolic diameter, LVESD),心 室中隔和左心室後壁厚度 (Interventricular septum, IVS and Left ventricular posterior wall diameter,PWD)。用都卜勒超音波測量二尖瓣血流和流速遞減時間 (mitral inflow E/A ratio and deceleration time)。另外加做組織超音波檢查 (tissue Doppler examination),測定病患二尖瓣環中隔之組織都卜勒(Tissue Doppler)來評估左心室 的舒張功能,主要是計算 E’和 A’波之比值,以及二尖瓣 E 血流波和 E’波比值。
此外同時根據公式計算左心室質量指數 (Left ventricular mass index)。另外,我們 也用都卜勒的方式,計算收縮末期的二尖瓣膜進入血流流速。
統計數據分析
分析數據的軟體是 SPSS 15.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA),連續變項用平均值±
標準差表示,類別變項則是用表格和所占的比例來表現。並且分別用學生 t-test 和 the Chi-square 來計算實驗組和對照組連續變項和類別變項的組間差異性。使用 Kolmogorov-Smirnov 試驗來計算數據是否為平均分布。如果是平均分布就用學生 t-test 如果不是的話就用 Mann-Whitney U test 來計算組間差異性。激素和舒張性心 衰竭超音波指標的相關性利用Pearson’s correlation coefficient 或者 Spearman’s correlation test 來測定。計算燒盪傷以及加護病房病患超音波以及激素改變與否,
則使用 paired-t test 來比較轉出加護病房前後的差異。接下來計算左心室舒張功能 是否影響燒燙傷病患的存活,根據存活的資料,分別計算出 2 個組的死亡人數,
總追蹤時間,及死亡率。接下來可以畫出 2 個組的 Kaplan-Meier 存活曲線,以及 用 Log-rank test 來比較 2 個組間的存活曲線在統計上有無顯著的差異。利用 Cox proportional hazard model 來試著計算左心室舒張功能不良(LVDD)和總死亡風險的 危險比(Hazard ratio)。將可能的干擾因子如年紀,主要併發症,燒燙傷面積,吸入
性肺炎,等等加入模式分析。在所有的研究中,定義 P 值<0.05 為統計上顯著的指 標。