第 參 章 結果與討論

第一節 吳茱萸萃取率之探討

植物的生長受產地的環境之影響甚鉅，同名藥材可能來自多種不同基原植物。已知不 同基原的同名藥材，其組成成分或成分含量比例有很大差異，也因而具有不同療效。不同 產地的同種藥材，雖然其組成成分類別與成分含量比值差異不大，但不同種藥材其組成成 分類別與成分含量比值差異則有很大不同；同時藥材品質不一，我們懷疑其是否在製程中 使用不同的萃取方法所致，中藥成品講求均一性與穩定性，也就是品質都能保持一致性。

以往有關吳茱萸之研究，提出有 DeHE，Evo，Rut 單獨或多種活性成分之研究報告，

亦有使用不同方法來分別檢測 Syn 與 DeHE，Evo，Rut 等活性成分，本實驗為了使四種活 性成分之吸光度能同時呈現，並為了避開生藥材樣品中其他成分雜訊的干擾，所以本實驗 採用波長 270 nm 來檢測，四種活性成分在 60 分鐘內即可完成分離。在實驗中吳茱萸四種 活性成分的確認，是比對標準品之滯留的時間，並以 Photodiode array 比對 UV 圖譜確認 其純度，以及應用 LC-MS 來確認其成分。Syn 及 Evo 有較低波長區的吸收，而 DeHE 及 Rut 有 N 原子參與共振，在長波長區有較長的吸收。Syn 及 DeHE 極性較高，而 Evo 及 Rut 屬中極性化合物，Rut 具平面化學結構，其極性較低，其滯留時間較 Evo 長。DeHE 是 四級銨鹽生物鹼，加入磷酸使溶液呈酸性，DeHE 呈離子狀態，極性變高，有拖尾現象，

加入 SDS 後 DeHE 之 N⁺ 與酸作用增強，極性降低，使滯留的時間變長。實驗中以 10, 20, 30, 40, 60 分鐘超音波測試萃取方法，10~30 分鐘萃取含量差異不大，但是 40, 60 分鐘時顯 示 Evo 含量降低，所以為了能萃取完全，採用 30 分鐘超音波萃取方法。

本研究使用吳茱萸藥材，用 hexane、ethylacetate、butanol、ethanol、methanol、water 等溶劑提取，按前述方法進行測定。結果顯示在不同溶媒的吳茱萸四種活性成分之含量。

經統計分析結果顯示，吳茱萸不同溶媒中四種活性成分含量有明顯差異 (表 9)。

Groups Syn (mg/g) Evo (mg/g) DeHE (mg/g) Rut (mg/g) Hexane N.D. 0.41±0.06 N.D. 1.06±0.09 Ethylacetate N.D. 6.95±1.06 0.82±0.73 6.48±0.95 Butanol N.D. 7.23±0.80 2.10±1.82 6.23±0.69 Ethanol 0.30±0.03 6.70±0.83 5.00±0.56 5.56±0.64 Methanol

Hexane Ethyl acetate Butanol Ethanol Methanol water

Syn. Evo.

DeHe. Rut.

表 9. 吳茱萸在不同溶媒之萃取含量表

在本實驗中發現用六種提取溶劑提取後測得四種成分之含量均有差異，說明中藥選用 不同溶媒萃取，都會影響化學成分之萃取率 (圖 5)。由於用甲醇提取後製備的樣品溶液雜 質含量少，干擾小，處理方便，所以選擇甲醇作為萃取溶劑。在台灣中藥製劑規定使用水 萃取，事實上能藉由各種萃取之方法，改變不同成分組合之含量比例，進而探討其與生物 活性之關係，以驗証中醫藥之療效。本研究建立一個簡易、精確、快速之高效液相層析方 法。

第二節 產地對吳茱萸成分之影響

歷代醫家十分重視中藥的產地和採集，並在長期的工作中，積累了許多寶貴的知識和 經驗。因此，針對藥物活性成分的含量，應用現代科學技術，加以研究及發展，證明中藥 的產地、採收，與藥物活性成分的含量之關係，保證中藥應用品質的一致性及可靠性。

經實驗結果 (表 10)，四種活性成分在中國大陸產吳茱萸之含量分別︰I 為 3.00±0.06 mg/g，II 為 3.39±0.18 mg/g，III 為 4.02±0.30 mg/g；台灣產吳茱萸之含量︰I 為 1.02±0.06 mg/g，II 為 0.40±0.01 mg/g，III 為 0.69±0.03 mg/g；同屬植物賊仔樹果實之含量︰I 為 0.76

±0.13 mg/g，II 為 1.79±0.37 mg/g，III 為 0.92±0.19 mg/g， 而 IV 僅在中國大陸產吳茱萸中 發現，含量為 0.62±0.06 mg/g。

Groups Syn (mg/g) Evo (mg/g) DeHE (mg/g) Rut (mg/g) ERC

ERT

0.620.06 N.D.

3.390.18 0.400.01

3.000.06 1.020.06

4.020.30 0.690.03 TGL N.D. 1.790.37 0.760.13 0.920.19 N.D.：表未偵測到.

圖6 大陸吳茱萸(ERC)，台灣吳茱萸(ERT)與台灣賊仔樹(TGL)之四種活性成份 比較圖

0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00

Conc.(mg/g)

ERC ERT TGL

Synephrine Evodiamine Dehydroevodiamine Rutaecarpine

表10 大陸吳茱萸(ERC)，台灣吳茱萸(ERT)與台灣賊仔樹(TGL)之四種活性成份表

本實驗證實大陸產吳茱萸中萃取出有升壓成分 Syn 以及降壓成分 DeHE、Evo 和 Rut，

而台灣吳茱萸中未檢測出 Syn 之含量(圖 6)。資料顯示大陸、台灣吳茱萸及同屬植物賊仔 樹中活性成分含量變化很大，大陸吳茱萸含量很高、台灣吳茱萸及同屬植物賊仔樹中活 性成分含量偏低，有可能大陸吳茱萸經過人工栽培，重用肥料、定期施肥、而台灣吳茱 萸及同屬植物賊仔樹是野地自然成長之緣故。在台灣的兩種植物，不同品種相互間活性 成分含量有差異。另外發現大陸產吳茱萸 DeHE、Evo 和 Rut，三種成分之含量比，顯示 中國大陸產吳茱萸之三種活性成分含量比相近，台灣產吳茱萸與賊仔樹之三種活性成分 含量差異較大。由於 Syn 具升血壓作用，所以不含 Syn 之台灣賊仔樹屬植物，在臨床上，

應可適用於高血壓患者。

植物中所含之藥效成分，隨品種、產地、氣候、採收時間、儲存、運輸及製備等情 況而有所差異。吳茱萸為常用之傳統中藥，在大陸產吳茱萸 Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth. ，除原植物外，尚有台灣產吳茱萸及同屬植物賊仔樹等不同品種，經乾燥加工後 不易辨識，易於混淆，故本實驗可證明藥材之含量與環境之相關性，可做為中藥真偽之 辮識及品質管制的參考。

第三節 採收期對成分之影響

中藥材因產地、栽培、採收季節及加工處理過程的不同，往往在品質上有很大的差異。

傳統上以外觀判斷品質之優劣，缺乏科學數據評估，常有謬誤，直至最近十餘年才注意到 品質管制的重要，我們應建立一套快捷、便利、準確又嚴謹的品質評估方法。

A. 台灣吳茱萸採收期實驗

經實驗分析結果 (圖 7)，台灣吳茱萸花苞內檢測結果證明含有 I and IV 為 1.11±0.00 mg/g and 0.52±0.00 mg/g; 在花中檢測結果證明含有 I and IV 為 1.08±0.01 mg/g and 0.40±

0.00 mg/g; 在未成熟果中檢測結果證明含有 I, II and IV 為 0.86±0.02 mg/g, 0.33±0.00 mg/g and 0.20±0.01 mg/g; 在未成熟綠果中檢測結果證明含有 I, II and III 為 1.09±0.03 mg/g, 0.26

±0.00 mg/g and 0.61±0.01 mg/g; 在未成熟紅果中檢測結果證明含有 I, II and III 為 1.65±0.00 mg/g, 1.23±0.00 mg/g and 1.35±0.00 mg/g, 在成熟果中檢測結果證明含有 I, II and III 為 0.87

±0.04 mg/g, 0.50±0.01 mg/g and 1.27±0.01 mg/g (表 11) 。

min

附註：I: Dehydroevodiamine , II: Evodiamine , III: Rutaecarpine, IV: Synephrine.

ERT1=>花苞；ERT2=>開花；ERT3=>剛成果 (綠)；ERT4=>未成熟果 (綠)；

ERT5=>未成熟果 (紅)；ERT6=>成熟果；N.D. =>未偵測到。