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2009 年九月獲得之華中五味子之酒精萃取溶液 40 公升經減壓濃縮後,得到之

粗萃物再以乙酸乙酯與水以1:1 的比例進行液液分配萃取三次,獲得乙酸乙酯層與

水層。其中乙酸乙酯層再以正己烷與75 %甲醇進行第二次液液分配萃取,獲得甲

醇層350 公克與正己烷層。而甲醇層接著利用快速管柱層析法(flash column),以粒

徑小於0.063 公釐之矽膠填充管柱,並以正己烷、乙酸乙酯與甲醇進行梯度沖提,

先從100 %正己烷逐漸提高極性至 100 %乙酸乙酯,再以 100 %甲醇沖提管柱,並 以薄層色層分析法(TLC)檢測合併相同的極性片段,共獲得 SC9-1~SC9-10 共十個 分離片段。初步利用核磁共振光譜分析後,針對片段SC9-1 (17.6 g)、SC9-3 (40.3 g)、

SC9-5 (23 g)做進一步的分離純化。SC9-1 使用 SephadexTM LH-20 以 100 %甲醇進 行沖提,得到分離片段SC9-1-2。SC9-3 使用 SephadexTM LH-20 以 100 %甲醇進行 沖提,得到分離片段SC9-3-2 與 SC9-3-3。SC9-5 使用 SephadexTM LH-20 以 100 % 甲醇進行沖提,得到分離片段SC9-5-3。

SC9-1-2 (14.2 g)片段利用矽膠管柱層析法(Silica gel open column),以正己烷與

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乙酸乙酯85:15 進行等度沖提,最後再以 100 %甲醇沖提,經 TLC 檢測後得到三 個分離片段SC9-1-2-1~SC9-1-2-3。SC9-1-2-1 (1260 mg)再利用矽膠管柱層析法,以 正己烷與丙酮 97:3 進行等度沖提,經 TLC 檢測後得到二個分離片段 SC9-1-2-1-4 與SC9-1-2-1-5。SC9-1-2-1-4 (162 mg)利用高效能液相層析儀(HPLC)以正己烷與乙 酸乙酯96:4 進行沖提,得到新化合物 A3 (9.6 mg)。SC9-1-2-1-5 (162 mg)利用 HPLC

以正己烷與乙酸乙酯95:5 進行沖提,獲得之不純物再以二氯甲烷與乙酸乙酯 99:1

進行沖提,得到新化合物 A2 (3.7 mg)。SC9-1-2-2 (557 mg)利用 HPLC 以正己烷與

乙酸乙酯 95:5 進行等度沖提,獲得之不純物再利用 HPLC 以正己烷與二氯甲烷

70:30 進行沖提,得到化合物 A22 δ-Cuparenol (2.5 mg)。SC9-1-2-3 (412 mg)利用矽

膠管柱層析法以正己烷與丙酮90:10 進行等度沖提,經 TLC 檢測後得到三個分離

片段SC9-1-2-3-2~ SC9-1-2-3-4。SC9-1-2-3-2 (44 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙 酯90:10 進行等度沖提,得到化合物 A19 Chamigrenal (4.9 mg)。SC9-1-2-3-3 (159 mg) 利用HPLC 以正己烷與乙酸乙酯 90:10 進行等度沖提,得到新化合物 A6 (5 mg)與 新化合物 A7 (3 mg),不純物再利用 HPLC 以二氯甲烷與乙酸乙酯 97:3 進行沖提,

得到新化合物 A4 (7.2 mg)與新化合物 A5 (3.1 mg)。SC9-1-2-3-4 (107 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙酯 85:15 進行等度沖提,得到化合物 A18 Campherenol (12.2 mg)。

SC9-3-3 (4.8 g)片段利用矽膠管柱層析法,以正己烷與乙酸乙酯 60:40 進行等 度沖提,最後再以 100 %甲醇沖提,經 TLC 檢測後得到二個分離片段 SC9-3-3-1 與SC9-3-3-4。SC9-3-3-1 (126 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙酯 90:10 進行沖提,

得到新化合物 A1 (12.2 mg)、新化合物 A8 (5 mg)、化合物 A13 Methylgomisin R (3.3 mg)、化合物 A15 Interiotherin A (21.6 mg)、化合物 A16 Macelignan (33.1 mg)與化 合物 A20 γ-Cuparenal (19.8 mg)。SC9-3-3-4 (87 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙70:30 進行沖提,得到化合物 A12 Gomisin C (5.9 mg)、化合物 A21 Cuparenic acid

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(4.8 mg)與化合物 A24 Kadsuric acid (12.5 mg)。

SC9-5-3 (2.7 g)片段利用矽膠管柱層析法,以正己烷與乙酸乙酯 60:40 進行等 度沖提,最後再以100 %甲醇沖提,經 TLC 檢測後得到三個分離片段 SC9-5-3-2、

SC9-5-3-7 與 SC9-5-3-8。SC9-5-3-2 (42.7 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙酯 85:15 進行沖提,得到化合物 A9 Methylgomisin O (5.7 mg)。SC9-5-3-7 (783 mg)利用矽膠 管柱層析法以正己烷與丙酮70:30 進行等度沖提,得到化合物 A10 Arisantetralone A (320.8 mg)與化合物 A11 Arisantetralone C (101.7 mg)。SC9-5-3-8 (89.9 mg)利用 HPLC 以正己烷與乙酸乙酯 55:45 進行沖提,得到化合物 A14 Gomisin S (10.3 mg) 與化合物 A23 p-Hydroxybenzoic acid (25.1 mg)。

SC9-3-2 (37 g)片段利用矽膠管柱層析法,以正己烷與乙酸乙酯 80:20 進行等度

沖提,最後再以 100%甲醇沖提,獲得之不純物以甲醇再結晶得到化合物 A17

Deoxyschizandrin (1.48 g)。

以下為華中五味子(

. sphenanthera)果實之分離流程圖 I~V:

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