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圖 3 研究流程圖

圖 4 下坡跑實驗流程圖

內。

(五) 檢視抽血針筒、止血帶、靜脈留滯針等用具是否清潔、安全,並確定醫護人員 的支援時間。

三、實驗流程

(一) 最大攝氧量測量 1. 施測方法

所有受試者皆須先接受一次原地跑步機之最大攝氧量測量,測量方法是 4 mile/hr (水平角度) 跑 2 分鐘,之後每 2 分鐘,加速 1 mile,當增加到 10 mile 後,改 以每 2 分鐘增加 2 % 坡度,直到受試者衰竭為止。本研究測驗最大攝氧量之運 動流程係修改自 Park 等 (2011) 的研究。

2. 最大攝氧量之判定

根據測量的結果配合下列最大攝氧量的判定基準 (達到下列四項中的任三項,則 視為達到最大攝氧量),判定受試者的最大攝氧量: (1) 當運動強度增加時,耗氧 量並無明顯增加; (2) 每分鐘換氣量超過 100 升; (3) 呼吸交換率在 1.1 以上; (4) 心跳率在最大預測值 ± 10 次/分範圍。

3. 運動強度 (70% V‧

O2 max) 之設定

以最大攝氧量測量所得之各個跑步速度及其相對耗氧量,求得攝氧量與跑步速度 之簡單直線迴歸方程式,再依內插法分別求得每位受試者在 70% V‧

O2 max 運動 強度時之跑步速度。

(二) 下坡跑

將跑步機設置在 -15% 斜度,再讓受試者以 70% V‧

O2 max 的強度進行 30 分鐘 下坡跑,以誘發受試者之股四頭肌產生肌肉損傷,本研究下坡跑運動流程係修改 自 Park 等 (2011) 的研究。下坡跑前給予受試者在水平的跑步機上以 4 mile/hr 熱身 5 分鐘,下坡跑設施與施測情形如圖5 與圖6 所示。

圖5 下坡跑設備圖

圖6 下坡跑施測圖 圖7 最大自主等長收縮肌力施測圖 (三) 最大自主等長收縮肌力 (MVIC)

本研究是使用 Biodex 等速肌力分析系統 (System 3 Pro, Biodex Medical Systems Inc, America) 來測量慣用之膝伸肌 (knee extensors) 的最大自主等長收縮肌力,

先設定受試者膝關節活動角度範圍 (0-90 度),之後將膝關節彎曲在 70 度的測 試起始位置,開始接受 3 次測量,每次測量時受試者須做最大向心等長自主收

縮 3 秒鐘,次與次之間休息 1 分鐘,最後取 3 次之平均值做為肌力標準 (Maridakis 等, 2007),肌力施測情形如圖7 所示。

(四) 增補劑

本研究以支鏈胺基酸粉末、甲基纖維素粉末與葡萄糖水溶液做為下坡跑後攝取的 成分,支鏈胺基酸的攝取劑量為每天每公斤體重攝取 232.5 mg (Jackman 等, 2010; Moore 等, 2009),其中白胺酸、異白胺酸與纈胺酸粉末比例為 50%、25% 與 25%; 葡萄糖的劑量為每天每公斤體重攝取 464.0 mg (Breen 等, 2011); 安慰劑 為甲基纖維素粉末,其增補劑量為每天每公斤體重攝取 232.5 mg。目前沒有關於 支鏈胺基酸毒性與運動的報告出現 (Shimomura, Murakami, Nakai, Nagasaki, &

Harris, 2004)。

(五) 增補方式

三組皆是膠囊搭配一瓶水溶液增補,其中支鏈胺基酸與安慰劑以膠囊形式吞服,

葡萄糖以水溶液形式攝取。 各組所攝取的水溶液成分如下: 10 mg 阿斯巴甜 + 5 mg 檸檬酸 + 600 ml 瓶裝水 (BCAA 與安慰劑組); 464.0 mg/kg BW 葡萄糖 + 10 mg 阿斯巴甜 + 5 mg 檸檬酸 + 600 ml 瓶裝水 (BCAA+CHO 組)。膠囊與水溶液 由實驗者配製,但增補過程、採血與相關肌肉功能檢測交由專業護士或實驗執行 者進行,受試者與實驗執行者皆不知增補何種配方,本研究以此方式達到雙盲的 實驗操控。

(六) 飲食控制

為確保血液分析結果之準確性,受試者進行每次實驗時必須在前一天禁食隔夜空 腹 8 小時。此外,在抽血前 48 小時不得從事激烈的身體活動或飲用含酒精、

咖啡因與支鏈胺基酸之飲料; 實驗期間切忌服用任何消炎藥品; 為了避免食物中 碳水化合物干擾本研究的增補設計,研究者會叮嚀所有受試者在進行增補 1.5 小 時後才可以進食,以降低食物中碳水化合物所產生的干擾。

第五節 第五節

第五節 第五節 採血及血液分析 採血及血液分析 採血及血液分析 採血及血液分析

一 一一

一、、、 採血、採血採血採血

本研究的採血點共 6 次,分別是下坡跑運動前立即、運動後立即、45、60 分鐘、

運動後第 24 與 48 小時,每次採血皆委託合格護士,以靜脈留滯針或注射針筒進行肘

部橈骨或尺骨附近靜脈抽血 5 c. c.,所取得血液置入離心管後立即以高速離心機進行離 心 20 分鐘後,抽取上清液血漿,接著放入 -70 ℃ 冰箱冷凍保存,所有檢體皆在當天 實驗完成後立即送至臺北市邱內科臨床醫事檢驗中心進行檢驗。

二二二

二、、、 分析方法、分析方法分析方法分析方法

本 研 究 中 胰 島素、 睪 固 酮 與皮 質 固 醇等 荷 爾 蒙 濃度 皆 是 採用 放 射 免 疫分 析法 (Radioimmunoassay) 以 γ 閃爍計數器進行分析,血中尿素氮、肌酸酐濃度與肌酸激酶 是利用乾式化學法以全自動生化分析儀進行分析,主要檢測方式簡述如下:

(一) 血清胰島素

1. 檢測方法: 放射免疫分析法

2. 使用儀器: γ-閃爍計數器 (PerkinElmer Automatic Gamma Counter)。

3. 使用試劑: DIAsource INS-IRMA。

4. 檢測極限: 最低濃度 1.0 µU/ml。

5. 精密度:CV<10%。

(二) 血清睪固酮

1. 檢測方法: 放射免疫分析法

2. 使用儀器: γ-閃爍計數器 (PerkinElmer Automatic Gamma Counter)。

3. 使用試劑: TESTO-CT2 Testosterone 放射免疫分析試劑組。

4. 檢測極限: 最低濃度 0.03 ng/ml。

5. 精密度:CV<10%。

(三) 血清皮質固醇

1. 檢測方法: 放射免疫分析法

2. 使用儀器: γ-閃爍計數器 (PerkinElmer Automatic Gamma Counter)。

3. 使用試劑: DPC Cortisol Coat-A-Count 放射免疫分析試劑組。

4. 檢測極限: 最低濃度 0.3 µg/dl。

5. 精密度: CV<12%。

(四) 血清尿素氮

1. 檢測方法: 乾式化學法

2. 使用儀器: 全自動生化分析儀 (VITROS 950)。

3. 使用試劑: 維特司生化尿素氮試藥片 (Vitros Chemistry Products BUN slides)。

4. 檢測極限: 最低濃度 0.2 mg/dl。

5. 精密度: CV<3.5%。

(五) 血清肌酸酐

1. 檢測方法: 乾式化學法

2. 使用儀器: 全自動生化分析儀 (VITROS 950)。

3. 使用試劑: 維特司生化肌酸酐試藥片 (Vitros Chemistry Products CREA slides)。

4. 檢測極限: 最低濃度 0.05 mg/dl。

5. 精密度: CV<6%。

(六) 肌酸激酶

1. 檢測方法: 乾式化學法

2. 使用儀器: 全自動生化分析儀 (VITROS 950)。

3. 使用試劑: 維特司生化肌酸激酶試藥片 (Vitros Chemistry Products CK slides)。

4. 檢測極限: 最低濃度 20 U/L。

5. 精密度: CV<10%。