GC/MS 定量分析實驗步驟

（一）製作檢量線：製作檢量線的方法有以下三種 1、標準添加法（standard addition method）： 2、外標準法（external addition method）：

3、內標準法（internal addition method）：最有效普遍採用的方法

（二）萃取法：將欲分析物萃取出來的方法有三種

1、液相-液相萃取法(liquid-liquid extraction, LLE)：

指溶質在互不相溶的兩種溶劑間的分配會達到平衡，將要萃取的物質由尿液 的水層轉移至有機層，可移除干擾物、將分析物萃取至適當溶劑系統、濃縮分析 物至適當體積以便分析，但現在較少用。

2、固相萃取法(solid-phase extraction, SPE)

目前臨床實驗室與鑑識毒物實驗室所常用的方法，干擾物少，可提高分析物 濃度及回收率，僅需數毫升溶劑，可避免污染，大量減少有機溶劑的使用、避免 乳化現象、可自動化操作以減少人力與時間，適於尿液的檢驗的純化。

固相萃取原理：包括五步驟

（1）、樣品製備：加入適量的緩衝溶液，並調整 pH 值。

（2）、管柱調適：使用有機溶劑做預洗，使吸附劑中鍵結的官能基產生融 合，使管柱處於較佳之萃取狀態。

（3）、檢體裝載：為使待測物與吸附劑充分吸附，可用低流速，讓流速<

2mL/min。

（4）、管柱洗滌：用適當溶劑將雜質從管柱中沖洗出來，以增加回收率。

（5）、分析物沖提：用沖提液將填充劑吸附的分析物沖提出來並收集之。依 沖提液的極性、選擇性、沖提強度來選擇。

3、超臨界流體萃取法(supercritical fluid extraction, SFE)

純物質呈現有固相、液相和氣相等三態。在沸點液-氣共存時，液相的密度 大於氣相的密度，且隨著系統溫度的上升而隨之減少，同時氣相的密度也隨系統 壓力的升高而增加。當系統的溫度及壓力達某一特定點時，其液-氣兩相的密度 趨於相同，以致兩相合併為一均勻相。此一特定點即定義為該物質的臨界點 (Critical Point)，若超過此點時，壓力增加仍無法使之液化，溫度升高亦無法 使汽化，稱此高於臨界溫度及臨界壓力的均勻相為超臨界流體(Supercritical Fluid)。超臨界流體具有以下特點：密度、黏度介於液體與氣體間，擴散係數高 於液體一個數量級數、黏度小於液體一個數量級數。且具有較高的密度值 (0.2-0.5 g/cm³)對大而不具揮發性分子有較好之溶解度，例超臨界二氧化碳可 溶解 5-30 個碳之正烷類、咖啡因、尼古丁等，且價廉、無害、無毒，最常用的 是 CO2的超臨界流體。超臨界流體萃取法之優點：通常 SFE 的操作速率都很快，

擴散速率大黏度小 10-60min，可藉改變壓力來改變超臨界流體之溶劑能力(改變 溫度效果較差)，且樣品回收簡單。

（三）化學衍生法

目的：將分析物反應成另一種更有利偵測之化合物。衍生後產物分離效果更

高，在氣相層析儀中波峰更具特異性，減少波峰拖曳的現象，提高定性分析的確 生 化 試 劑 ： N-methyl-butyldimethylsilyl-trifluoroacetamine(MTBSTFA) 、 bistrimrthylsilyacetamide(BSA)、trimethylchlorosilane(TMCS)

3、醯化：適用於胺類、醇類、酚類，常見衍生劑：pentafluoropropinic(PFPA)、

N-methyl-N-trimethylsilyltrifluoro acetamide(TMS)。

N

圖 2.5.2.3 醯化的反應機構