0
100
%
AA-hFG-MS1-950306 Sm (SG, 3x10) 1: Scan ES+
TIC
Sinomenium acutumn-9501
175 200 225 250 275 300 325 350 375 400 425 450 475 500 525 550 575 600 625 650 675 700 m/z
206.3 241.4 298.4
272.4
522.4 652.4
624.4 596.4 523.4 566.4
660.4 661.4 693.5
Sinomenium acutumn-9501 100
373.5 652.5
434.4 508.4 520.4 584.5 624.4
660.4 661.4 683.5
2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 Time
0
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
652.4 > 358.3 4.00e5 12.11
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
577.4 > 561.3 1.73e4 14.40
7.51
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
563.4 > 532.4 6.46e4 15.10
0.32 6.37
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
418.4 > 298.2 2.58e6 12.86
6.91
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
342.4 > 265.1 2.03e7 4.37
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
334.4 > 285 2.43e6 3.25
2.41
AA-mFG-MRM-950302 Sm (SG, 3x9) 1: MRM of 7 Channels ES+
314.4 > 107.1 3.11e6 5.01
3.80
47
Sinomenium acutumn-9501
260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 m/z 0
100
%
AA-hFG 253 (4.642) Cn (Top,4, Ht); Sm (Mn, 2x0.75); Sb (1,40.00 ); Cm (242:271-108:138) 1: Scan ES+
1.33e8 342.3
297.4
265.3
255.3 286.4 298.4
439.4 459.4 488.4 583.4 652.4
Sinomenium acutumn-9501
240 260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 m/z
255.4 297.4
315.4
419.4 522.4 569.4 598.4 624.5 652.4
Sinomenium acutumn-9501
260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 620 640 660 680 700 0 m/z
100
%
AA-hFG1 302 (5.540) Cn (Top,4, Ht); Sm (Mn, 2x0.75); Sb (1,40.00 ); Cm (292:350-76:125) 1: Scan ES+
6.90e7 314.4
311.3 284.4 269.3 300.4
342.4
431.4 439.4 492.4 510.2
Fig.24：The ESI
+
/MS 1 spectrums of Sinomenium acutumn herb extract 3. 漢防己之液相層析串聯式質譜分析指紋圖譜建立3-1.日本多數文獻所稱「漢防己」即為青藤，為防己科（Menispermaceae）
植物漢防己 Sinomenium acutumn Rehd. et Wils .之根或根莖。因此由日 本價購而得(Fig.9 )，其一為原植物之藤莖，另一為切成小塊之粗碎片 (邊長約4 mm 之立方體)，並經張永勳所長及張憲昌博士鑑定，再經 切片染色後顯微鏡下觀察(Fig.10) 與文獻資料
(4, 11)
比對，以及萃取液經 TLC 分析與 Sinomenine 對照標準品比對均相符(Fig.11 )，其基原可確 定為 Sinomenium acutumn，以此作為標準藥材，進行液相層析串聯式 指紋質譜圖之建檔，以及模擬處方配製。3-2.以漢防己標準藥材萃取溶液經正離子電灑法第一段全掃描質譜分析 結果觀察，其全掃描質譜圖所獲得之 TIC 圖有數支明顯之離子峰，
經扣除基線之干擾裂片，獲得數張離子峰之第一段全質譜圖(MS1 spectrum) (Fig.24 )，由其中選取 m/z 314, 330, 342, 356, 522, 652 及 660 等離子強度(abundance)較大之離子裂片為源頭離子，用以進行正離子 電灑法子代離子質譜分析(ESI
+
Daughter ion scan)。3-3.子代離子質譜圖製作: 製作過程，援用 ES+/MS1 所設定之毛細管電 壓為 3 kV，錐口電壓(Cone voltage) 設定為固定 60V，進行分析各別 選定源頭離子之子代離子質譜掃瞄，適時調整 collision energy，使獲 得典型之子代離子質譜圖(Fig, 25)，並將子代離子質譜圖連同儀器分 析之參數建入質譜圖庫(LC/ MS/MS Fingerprint Database)中。綜合漢 防己六個選定源頭離子之子代離子質譜掃瞄儀器分析參數集合製作 成儀器分析指令(Tab.5)，存入電腦中以執行分析，一次同時掃瞄 6 個 管道，可獲得該選定源頭離子之子代離子質譜圖，並與標準質譜圖庫 作比對，並顯示比對相似度。為摒除其他成分之干擾，提高分析之感 度，另編輯漢防己藥材之親代離子裂片與子代離子裂片之配對分析之 巨集指令(Tab.5)，以進行多重離子裂解監控分析（Fig.27），稱之為漢 防己 MRM 掃瞄巨集指令(MRM screen macro-method)。
由以上之子代離子質譜圖觀之，ESI
＋
D600 與 ESI＋
D330 之離子 峰滯留時間同為3.7 分鐘，且 ESI＋
D660 裂解獲得之主要裂片為 m/z 330，m/z 660 裂解所須之碰撞能量(collision energy)為 10eV，而 m/z 330 則須 30 eV，足見 m/z 330 結構較 m/z 660 安定，且 m/z 660 恰為 m/z 330 之雙倍質量，因此 m/z 660 應為 m/z 330 之雙聚合物(Dim- mer)。由文獻資料顯示青藤(漢防己)含青藤鹼 Sinomenine(C19
H23
NO4
MW : 329)，在 MS 1 中有明顯之 m/z 330 為[M+H]
+
離子裂片，且其 子代離子質譜圖與Sinomenine 完全相同(Fig.26 )，足見藥材之正確性。49
2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 Time
0
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 7: Daughters of 356ES+
TIC 1.06e8 5.54
3.65 6.17
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 6: Daughters of 314ES+
TIC 1.14e8 3.50
2.45
5.04 14.91
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 5: Daughters of 330ES+
TIC 2.33e8 3.70
4.47
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 4: Daughters of 342ES+
TIC 6.20e8 4.18
3.55 5.09
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 3: Daughters of 695ES+
TIC 1.96e7 12.57
3.12 4.31 4.94 5.99 7.74 16.84
18.10
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 2: Daughters of 522ES+
TIC 1.87e7 5.56
3.04
7.10 9.41 10.60 17.25
AA-hFG-MS2-950306 Sm (SG, 3x3) 1: Daughters of 660ES+
TIC 2.28e8 3.66
3.03