【19】中華民國 【12】專利公報 （B）
【11】證書號數：I347362
【45】公告日： 中華民國 100 (2011) 年 08 月 21 日
【51】Int. Cl.： C12N15/11 (2006.01) A61K31/713 (2006.01)
發明 全 4 頁
【54】名 稱：干擾素誘導之表現雙股ＲＮＡ之核酸分子
【21】申請案號：094102265 【22】申請日： 中華民國 94 (2005) 年 01 月 26 日
【11】公開編號：200626719 【43】公開日期： 中華民國 95 (2006) 年 08 月 01 日
【72】發 明 人： 吳文鑾 (TW) WU, WEN LAUN；楊玫琳 (TW) YANG, MEI LIN；蕭璦莉 (TW) SHIAU, AI LI；吳昭良 (TW) WU, CHAO LIANG
【71】申 請 人： 國立成功大學 NATIONAL CHENG KUNG UNIVERSITY
臺南市東區大學路 1 號
【74】代 理 人： 陳長文
【56】參考文獻：
WO 2004/092383A2
Taniguchi T., et al., Regulation of the interferon system and cell growth by the IRF transcription factors, J Cancer Res Clin Oncol. 1995;121(9-10):516-20
[57]申請專利範圍
1. 一種核酸分子，包含：一調控區，其包含可受 α 或 β 干擾素誘導啟動之啟動子，其中該 啟動子係為 2'-5'寡腺苷酸合成酶之啟動子；及一編碼區，其包含編碼一目標基因片段之 正股、一間隔片段及編碼該目標基因片段之反股，其中編碼該目標基因片段之正股及反 股係以該間隔片段連結，其中該目標基因係為腸病毒之 2A 蛋白切酶；其中該調控區係 操作性連結至該編碼區。
2. 根據請求項 1 之核酸分子，其中該目標基因之片段長度係大於 30 bp。
3. 根據請求項 2 之核酸分子，其中該目標基因之片段長度係介於 200 至 800bp 間。
4. 一種載體，其包含如請求項 1 至 3 中任一項之核酸分子。
5. 一種用以抑制腸病毒特異基因之表現之醫藥組合物，其包含如請求項 1 至 3 中任一項之 核酸分子，其係於干擾素活化表現時，抑制該腸病毒特異基因之表現。
6. 根據請求項 5 之醫藥組合物，其係於干擾素活化表現時，表現雙股 RNA。
7. 根據請求項 5 之醫藥組合物，其係用以抑制病毒複製。
8. 一種用以抑制腸病毒特異基因之表現之醫藥組合物，其包含根據請求項 4 之載體，其係 於干擾素活化表現時，抑制該腸病毒特異基因之表現。
9. 根據請求項 8 之醫藥組合物，其係於干擾素活化表現時， 表現雙股 RNA。
10. 根據請求項 8 之醫藥組合物，其係用以抑制病毒複製。
11. 一種體外抑制腸病毒特異基因表現之方法，其係以如請求項 1 至 3 中任一項之核酸分子 或如請求項 4 之載體轉染一細胞，並提高該細胞中干擾素之量。
12. 根據請求項 11 之方法，其中該細胞係為一哺乳動物細胞。
13. 一種體外表現雙股 RNA 之方法，其係以如請求項 1 至 3 中任一項之核酸分子或根據請求 項 4 之載體轉染一細胞，並提高該細胞中干擾素之量。
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14. 根據請求項 13 之方法，其中該細胞係為一哺乳動物細胞。
圖式簡單說明
圖 1 為細胞轉染 ds2A 後的抗病毒能力測試之結果圖；Mock 為未感染病毒的各個細胞株。
圖 2 為 RNAi 抗病毒專一性實驗結果圖。NC 為正常 Vero 細胞；A 和 B 為轉染 dsE1A 的 細胞株；C 為 Vero/pTCY－ds2A－2；D 為 Vero/p2－5A－ds2A－2；＋表示受病毒感染，－
表示未受病毒感染。
圖 3 為 RNAi 抑制病毒複製能力持續效用之 10X 光學顯微鏡觀察結果圖；(A)為未感染之 細胞；(B)為感染病毒之正常 Vero 細胞；(C)與(D)為轉染 ds2A 之細胞。
圖 4 為轉染 ds2A 的細胞株在不同時間點下抑制腸病毒 71 型複製能力之檢測結果圖；α－
tubulin 為內控制組，大小為 819 bp。
圖 5 為轉染 ds2A 細胞株之 PKR 生成測試結果圖；α－tubulin 為內控制組。
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