分子遺傳學實驗分子遺傳學實驗分子遺傳學實驗分子遺傳學實驗

分子遺傳學實驗 分子遺傳學實驗 分子遺傳學實驗 分子遺傳學實驗

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◎ ◎ 目的 目的 目的 目的

1. 了 解 DNA 粗 萃 取 的 基 本 原 理 2. 學 習 簡 單 的 DNA 萃 取 方 法

◎ ◎

◎ ◎步 驟 步 驟 步 驟 步 驟 一 一

一 一 、 、 、 萃 取 奇 異 果 、 萃 取 奇 異 果 萃 取 奇 異 果 萃 取 奇 異 果 DNA

1. 製 備 奇 異 果 汁製 備 奇 異 果 汁 ： 奇 異 果 削 皮 後 放 入 果 汁 機 中製 備 奇 異 果 汁製 備 奇 異 果 汁 2. 破 壞 果 肉 細 胞破 壞 果 肉 細 胞 ：破 壞 果 肉 細 胞破 壞 果 肉 細 胞

果 汁 倒 入 200 mL 燒 杯 中

勻 ， 則 細 胞 膜 及 核 膜 可 破 壞 釋 出 染 色 體 3. 溶 解 染 色 體溶 解 染 色 體 ：溶 解 染 色 體溶 解 染 色 體

上 述 混 合 液 加 5 M 食 鹽 水 5 分 鐘 。

4. 純 化純 化純 化純 化 DNA：

上 述 混 合 液 加 5 mL 新 鮮

5. 收 集收 集收 集收 集 DNA 濾 液濾 液 ： 雙 層 紗 布 過 濾 混 合 液 至濾 液濾 液 中 ） 。

6. 析 出析 出析 出析 出 DNA：

取 15 mL 濾 液 置 入 50 mL

% 冰 酒 精 ， 溶 液 分 層 且 在 酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物 DNA， 以 吸 管 吸 起 保 存 於 盛 有

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分子遺傳學實驗 分子遺傳學實驗 分子遺傳學實驗

分子遺傳學實驗： ： ： ： DNA 的粗萃取 的粗萃取 的粗萃取 的粗萃取

粗 萃 取 的 基 本 原 理 。 萃 取 方 法 。

奇 異 果 削 皮 後 放 入 果 汁 機 中 ， 加 100 mL 蒸 餾 水 攪 碎

燒 杯 中，加 2.5 mL 洗 碗 精，用 玻 棒 攪 拌 則 細 胞 膜 及 核 膜 可 破 壞 釋 出 染 色 體 。

食 鹽 水 （29.25 g NaCl＋100 mL 蒸 餾 水 ）

新 鮮 鳳 梨 汁 ， 持 續 攪 拌 至 少 5 分 鐘 。 雙 層 紗 布 過 濾 混 合 液 至 100 mL 燒 杯 中 （

50 mL 乾 淨 燒 杯 中，沿 著 燒 杯 內 壁，緩 慢 倒 入 溶 液 分 層 且 在 酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物 以 吸 管 吸 起 保 存 於 盛 有 70 % 酒 精 的 小 玻 璃 瓶 中 。

在 酒 精 與水 的 交 界 處 出 現白 色 雲 狀 物 的 DNA

以 玻 棒 或 吸 管 收 集DNA保 存 於 盛 有 小 玻 璃 瓶 中

國中卓越計畫 李江德老師教學資料

的粗萃取 的粗萃取 的粗萃取 的粗萃取

蒸 餾 水 攪 碎 。

5 分 鐘 使 其 混 合 均

）5 mL， 用 玻 棒 攪 拌

（DNA 存 在 於 濾 液

緩 慢 倒 入 30 mL 的 95 溶 液 分 層 且 在 酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物 ， 即 凝 聚 析 出 之

在 酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物，即 凝 聚 析 出

保 存 於 盛 有 70 % 酒 精 的

二 二

二 二 、 、 、 萃 取 唾 液 、 萃 取 唾 液 萃 取 唾 液 萃 取 唾 液 DNA

1. 準 備 唾 液 ：

用 10 mL 清 水 漱 口 1 多 口 腔 黏 膜 細 胞 ） 。 2. 製 備 緩 衝 液 ：

在 100 mL 燒 杯 內 加 入

mL 新 鮮 鳳 梨 汁 ， 用 玻 棒 輕 輕 攪 拌 3. 純 化 DNA：

用 50 mL 量 筒 取 20 mL 混 合 均 勻 。

4. 析 出 DNA：

用 吸 管 吸 取 95 %冰 酒 精 沿 著 燒 杯 內 壁 酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物 有 70 %酒 精 的 小 玻 璃 瓶 中

◎ ◎

◎ ◎問題 問題 問題 問題

1. 加 入 洗 碗 精 的 目 的 為 何 2. 加 入 濃 食 鹽 水 的 目 的 為 何 3. 加 入 鳳 梨 汁 的 目 的 為 何

4. 最 後 為 何 要 加 入 95 %冰 酒 精 5. 所 析 出 的 雲 狀 物 是 一 條

6. 唾 液 中 析 出 的 DNA 是 否 都 是 口 腔 黏 膜 細 胞 的

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DNA聚 集 成 絲 狀 構 造

分 鐘 後，將 漱 口 水 吐 在 乾 淨 的 50 mL

燒 杯 內 加 入 50 mL 蒸 餾 水、5 mL 洗 碗 精、5 mL 的 用 玻 棒 輕 輕 攪 拌 1 分 鐘 後 備 用 。

20 mL 緩 衝 液 加 入 漱 口 水 中，以 玻 棒 輕 輕 攪 拌

冰 酒 精 沿 著 燒 杯 內 壁，緩 慢 加 入 上 述 混 合 液 中

酒 精 與 水 的 交 界 處 出 現 白 色 雲 狀 物，即 凝 聚 析 出 的 DNA，以 吸 管 吸 起 保 存 於 盛 酒 精 的 小 玻 璃 瓶 中 。

加 入 洗 碗 精 的 目 的 為 何 ？ 加 入 濃 食 鹽 水 的 目 的 為 何 ？ 加 入 鳳 梨 汁 的 目 的 為 何 ？

冰 酒 精 ？

DNA 分 子 嗎 ？ 為 什 麼 ？

是 否 都 是 口 腔 黏 膜 細 胞 的 DNA ？ 為 什 麼

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燒 杯 中（ 其 中 含 許

的 5 M 食 鹽 水 及 5

以 玻 棒 輕 輕 攪 拌 2 分 鐘，使 其

緩 慢 加 入 上 述 混 合 液 中，溶 液 分 層 且 在 以 吸 管 吸 起 保 存 於 盛

為 什 麼 ？