墨點櫻桃(Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.)枝梢生長及氰醣苷含量之變動

國立臺灣大學生物資源暨農學院園藝暨景觀學系 碩士論文

Department of Horticulture and Landscape Architecture College of Bio-Resources and Agriculture

National Taiwan University Master Thesis

墨點櫻桃(Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.)枝梢生長 及氰醣苷含量之變動

Shoot Growth and Cyanogenic Glycosides Contents of Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.

劉炳志 Bing-Jhih Liou

指導教授：陳右人 博士 Advisor：Iou-Zen Chen, Ph.D.

中華民國一百零三年七月

July, 2014

i

致謝

昨日 所完成的崎嶇

已是眼前 明媚的風光 ……2012《海岸線》

大屯山、七星山、象山、和美山、劍南山、福州山、中埔山、劍潭山、烘爐 地及碧山巖。陪我走到這些地方的是自己的心，沒有自己愛爬山的心，不會看到 這麼精彩的台北景色。

在這兩年研究的生涯中，不管是獨自作實驗配音樂的孤單，還是出差大家一 起做事的感覺難以忘記。在實驗室做實驗或許不需忍受外頭的雨打太陽曬，在外 面出差就是要經歷冬天冷夏天熱，但所經歷的一切都讓自己學習到很多，了解我 們經過練習都是會有所成長。感謝家人做我最大的靠山，讓我可以無後顧之憂完 成學業。感謝指導教授給我一個有興趣的題目，並在我做實驗的過程適時的提點 教導。感謝走在我前面的前輩、口試委員及學長姐，教給我許多寶貴的經驗。感 謝這片土地孕育這麼有意思的植物。

以下感謝：

我的家人爸爸劉德旺、媽媽鄭惠文、姊姊劉純嘉。指導教授陳右人老師。口 試委員：李金龍老師、石正中老師、李國譚老師及阮素芬老師。實驗室的美玲姊、

曾阿姨。學長姐：書妍學姊、于瑩學姊、于姍學姊、可馨學姊、怡伶學姊、柏安 學長、毓翔學長、鼎峰學長、聖峰學長。我的同學：侑橋、千惠、郁珺。學弟妹：

利巧、弼丞、旻叡、萌芬。蓮華池的黃志堅先生、林試所的陳國章先生。我的朋 友們：琬珊、宏文、佩蓉、培民、閔涵以及超出名單外的中興保育社夥伴。

光陰似箭，兩年的時光很快就到了。在這段期間除了自己的想完成學業的心，

還有大家，不管是陪伴、幫忙、建議亦或是批評指教。這本論文要獻給在這段間 幫助過我的你們。最後，參考這本書的人，也感謝你。

ii

中文摘要

墨點櫻桃(Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.)為臺灣原生樹種，廣泛分布全臺 海拔700 至 2000 公尺的林地。其最大特色為葉片搓揉後會造成氰醣苷受到水解酶 催化產生苯甲醛及氫氰酸，產生杏仁味。墨點櫻桃葉片所含的氰醣苷種類包括野 黑櫻醣苷(prunasin)及苦杏仁苷(amygdalin)。目前食品加工業中主要的杏仁味來源 為杏樹的種仁，如能開發墨點櫻桃葉作為杏仁味的來源，就能較方便取得具有濃 郁杏仁味的材料。本試驗主要分為四個部分，第一部分為墨點櫻桃植株生育調查，

以了解植株基本生育特性。調查結果顯示在地區方面，臺大校園內，一年會抽出 三次枝梢，陽明山竹子湖地區，一年會抽出二次枝梢；墨點櫻桃枝條、葉片長寬、

葉綠素計讀值及單位葉片之乾物重累積，在枝梢萌出後，均有一快速生長時期，

其後會達至恆定狀態。第二部分為墨點櫻桃葉片年齡與氰醣苷含量關係，以了解 最適合採集葉片的時機及含量變化與植物生育之關係。以苦味酸鈉法分析葉片總 氫氰酸含量回推氰醣苷含量。結果顯示，在葉片快速生長時期，葉片內總氰醣苷 含量有上升的趨勢，於葉片完全展開後，總氰醣苷含量約有21 天停滯期，而後含 量累積與葉片乾物累積具有相同的趨勢，兩者關係是一典型雙 S 型曲線；由此推 估適宜採集葉片的時機為葉片完全展開前，葉背墨點尚未大量形成的階段及葉齡 超過一年的葉片。第三部分為高杏仁味植株篩選，以篩選葉片揮發性杏仁味較濃 的植株。第四部分為墨點櫻桃果實性狀調查，目的為建立未來應用之基礎。墨點 櫻桃果實於每年10 月至隔年 1 月成熟，成熟果實中果肉重占 59.8%，種子重占 40.2%，

果實高約0.7 至 0.8 公分，寬約 0.8 至 0.9 公分，果實總重約 0.45g，果實體積約 0.36 cm³，果肉味道像櫻桃。

關鍵字：杏仁味、苦杏仁苷、苯甲醛、野黑櫻醣苷、氰醣苷、墨點櫻桃

iii

Abstract

Prunus phaeosticta (Hance) Maxim. is a native to the altitude of 700 to 2000

meters height in Taiwan. Leaves generate apricot scent. We can infer that the apricot scents are the benzyaldehyde and hydrogencyanid originated from cyanogenic glycosides catalyzed by the enzyme reaction. The cyanogenic glycosides in Prunus

phaeosticta are amygdalin and prunasin. The source of apricot scent in food-processing

industry is obtained mainly from apricot seeds. If we can develop a method to get the apricot scent from the leaves of Prunus phaeosticta, it will be more convenient to get the source with strong apricot scent. There are four parts in this study. In the first part, we investigated the growth and development of Prunus phaeosticta plants. The plants we investigated in NTU grew flushes three times and in Jhuzihhu grew flushes two times. The numbers of branch length, leaf length, leaf width, leaf SPAD value, and dry weight increased shaply and then they leveled off. In the second part, we analysed the cyanogenic glycoside contents of leaves in different ages to infer the suitable picking moment. The result showed that the cyanogenic glycoside contents of a leaf increase sharply as leaf grew. After the blade fully extended, the cyanogenic glycoside contents of a leaf remain steady for at least 21 days. After 21 days, the cyanogenic glycoside contents of a leaf increased sharply as leaf dry weight increased. According to the result, there are two suitable picking monments. One is when leaves expanded fully or around that time; the other is when leaves ages are over 1 year. In the third part, we selected the plants whose leaves generate strong apricot scent. In the fourth part, we investigated the fruit characteristics of Prunus phaeosticta in order to establish the basis for future applications.

Key words：apricot scent、amygdalin、benzyaldehyde、prunasin、cyanogenic glycoside、

Prunus phaeosticta

iv

目錄

致謝 ... i

中文摘要 ... ii

Abstract ... iii

圖目錄 ... vi

表目錄 ... vii

第一章 前言 ... 1

第二章 文獻回顧 ... 2

2.1.墨點櫻桃介紹 ... 2

2.1.1.植物特徵 ... 2

2.1.2.分類地位 ... 3

2.1.3.相關病蟲害 ... 3

2.1.4.繁殖方法 ... 4

2.1.5.目前應用 ... 4

2.2.杏仁味物質之研究 ... 5

2.2.1.種子中之杏仁味物質 ... 5

2.2.2.葉片中之杏仁味物質 ... 6

2.3.氰醣苷之介紹 ... 6

2.3.1.氰醣苷之介紹 ... 6

2.3.2.氰醣苷之生合成與代謝 ... 7

2.3.3.氰醣苷之運移 ... 8

2.3.4.產氰之現象(cyanogenesis) ... 8

2.3.5.水解產物氫氰酸之毒性 ... 9

第三章 材料與方法 ... 11

3.1.材料 ... 11

3.1.1.植物材料 ... 11

3.1.2.試驗藥品 ... 11

v

3.1.3.試驗器材 ... 11

3.2.試驗方法 ... 11

3.2.1.生育調查 ... 12

3.2.2.葉片氰醣苷含量分析 ... 13

3.2.3.高杏仁味植株篩選 ... 16

3.2.4. 墨點櫻桃果實調查 ... 17

3.2.5.統計方法 ... 17

第四章 結果與討論 ... 18

4.1.墨點櫻桃生育調查 ... 18

4.1.1.墨點櫻桃枝梢發育 ... 18

4.1.2 葉片生長調查 ... 21

4.2.葉片氰醣苷含量 ... 42

4.2.1.氰醣苷及其衍生物氫氰酸之分析條件 ... 42

4.2.2.葉齡對葉片氰醣苷含量之影響 ... 44

4.3.高杏仁味植株篩選 ... 58

4.4.墨點櫻桃果實調查 ... 69

第五章 結論 ... 73

參考文獻 ... 75

附錄 ... 82

vi

圖目錄

圖1、 墨點櫻桃芽自萌發至抽出枝條不同階段……….…… 24

圖2、 墨點櫻桃當年生一次梢開花及結果節位……….…… 25

圖3、 2013 年臺大地區，墨點櫻桃枝條生長曲線 ………..…… 26

圖4、 2013 年陽明山竹子湖地區，墨點櫻桃枝條生長曲線..……….……. 27

圖5、 墨點櫻桃不同節位芽萌出第一次稍比例之變化………..…… 25

圖6、 陽明山地區，不同節位芽於萌發第一次稍比例………..….. 26

圖7、 2014 年陽明山竹子湖地區，墨點櫻桃枝條一次梢生長曲線……… 30

圖8、 2013 陽明山竹子湖地區一、二次梢葉片數及總節位之關係……… 31

圖9、 墨點櫻桃萌定芽後，不同葉齡葉片狀態………..…….. 32

圖10、 陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節葉之平均長及寬生長曲線..… 33

圖11、 陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節上葉片之葉綠素計讀值…….. 34

圖12、 陽明山地區，2013 年二次梢第 3 至 5 片葉之葉長及葉寬生長曲 線……...……….……….. 35

圖13、 陽明山地區，2013 年二次梢第 3 至 5 片葉片葉綠素計讀值..…….… 36

圖14、 陽明山地區，2014 年一次梢第 1 至 6 節葉之葉長及葉寬生長曲 線……….. 37

圖15、 陽明山地區，2014 年一次梢第 1 至 6 節葉之葉綠素計讀值變化曲 線……….. 38

圖16、 陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節葉片，葉片乾重變 化………..……… 39

圖17、 陽明山地區，2013 年二次梢第 3 至 5 節葉片，葉片乾物重變 化……….. 40

圖18、 陽明山地區，2014 年一次梢第 3 至 5 節葉片，葉片乾重變 化……….…. 41

圖19、 墨點櫻桃葉片節位與苦杏仁苷含量………….………. 47

圖20、 烘乾溫度對葉片苦杏仁苷含量之影響……….……… 47

圖21、 烘乾溫度(50℃)對葉片氰醣苷水解酶活性之影響………... 48

圖22、 pH 值對墨點櫻桃葉片氰醣苷水解酶活性之影響……… 48

圖23、 氰醣苷水解酶反應時間與氫氰酸之關係……….. 49

圖24、 2013 年 陽 明 山 竹 子 湖 地 區 一 次 梢 葉 齡 與 苦 杏 仁 苷 含 量 之 關 係……….. 51

圖25、 2013 年陽明山竹子湖地區一次梢上葉片年齡與平均葉片苦杏仁苷 含量之關係……….. 52

圖26、 2013 年陽明山竹子湖地區，葉片生長曲線及平均葉片苦杏仁苷含 量之關係……….………. 53

vii

圖27、 2014 年陽明山竹子湖地區，標定後一次梢上葉片生長曲線及葉片 苦杏仁苷之關係……….………. 54 圖28、 2013 年一次梢上，葉片苦杏仁苷含量與葉片長及寬之關係…… 55 圖29、 2014 年 一 次 梢 上 ， 葉 片 苦 杏 仁 苷 含 量 與 葉 片 長 及 寬 之 關

係……….……… 55 圖30、 2013 年陽明山竹子湖地區一次梢，葉齡與苦杏仁苷含量之關

係……….. 56 圖31、 2013 年陽明山竹子湖地區，一次梢葉片乾物重累積曲線及苦杏仁

苷含量之關係……….. 57 圖32、 2013 年葉片苦杏仁苷含量與乾重之關係……… 58 圖33、 2014 年葉片苦杏仁苷含量與乾重之關係………... 58 圖34、 2014 年 3 月 29 日陽明山竹子湖地區墨點櫻桃，葉片氫氰酸生成速

率及苦杏仁苷總量……….. 66 圖35、 陽明山竹子湖地區墨點櫻桃個體，葉片氫氰酸生成速率及苦杏仁苷

總量………..……… 67 圖36、 臺大地區墨點櫻桃個體，葉片氫氰酸生成速率及苦杏仁苷總量…… 68 圖37、 感官品評與每單位氫氰酸生成所需時間之關係……… 69 圖38、 陽明山竹子湖地區，同一植株上墨點櫻桃果實……… 72 圖39、 果實不同階段果肉及種子重量比例變化……… 73

表目錄

表1、 陽明山竹子湖地區墨點櫻桃個體，葉片氫氰酸生成速率及苦杏仁苷總 量……… 62 表2、 陽明山竹子湖地區墨點櫻桃個體，葉片氫氰酸生成速率及苦杏仁苷總

量……… 63

表3、 臺大地區墨點櫻桃個體，葉片氫氰酸生成速率及苦杏仁苷含量…....………... 64

表4、 陽明山竹子湖地區及臺大地區的植株，感官品評之平均分數………… 65 表5、 陽明山地區，墨點櫻桃果實性狀調查……… 70 表6、 蓮華池地區，墨點櫻桃果實性狀調查……… 71

1

第一章 前言

墨點櫻桃(Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.) 屬於薔薇科(Rosaceae)桃李屬 (Prunus)小喬木。原生於臺灣及中國華南地區，臺灣分佈在海拔 700 至 2000 公尺 的地區，最大特色為葉片搓揉後有杏仁味，但目前應用上只限於作為香菇椴木，

也木材具有抗白蟻特性。

目前食品加工業主要的杏仁味來源為杏樹(Prunus armeniaca L.)的種仁，由於 種仁的獲得，需經過較長時間開花結果過程，且臺灣並無生產僅能依靠進口，每 年自國外進口約7549 公噸(2013 年)。除了杏樹果實種仁外，許多植物的葉片即具 有杏仁味，例如與杏樹同屬的墨點櫻桃、黃土樹(Prunus zippeliana Miq.)、刺葉桂 櫻(Prunus spinulosa Sieb et Zucc.)或是茶科的烏皮茶(Pyrenaria shinkoensis (Hayata) Keng)等，都因杏仁味而受到注意，而臺灣原生的墨點櫻桃葉片具有更濃郁的杏仁 味，值得建立完整的生長資訊，與杏仁味物質於葉片生長期間變化，以作為未來 利用之基礎。

墨點櫻桃在臺灣有紀錄的發現的地點有北部陽明山、福山；中部蓮華池、日 月潭；南部扇平、大武山等地(呂等，1999)。在陽明山竹子湖族群，屬於第二層林 相，上有較高的柳杉遮蔽，下有矮灌木像燈秤花、山桂花雜生，以接近公路易於 標記的植株作為墨點櫻桃族群生長的調查標的。

墨點櫻桃葉片內產生杏仁味的前趨物為野黑櫻醣苷及苦杏仁苷，瞭解枝條抽 梢習性及葉片成熟過程中杏仁味前驅物的變化，就能提供開發墨點櫻桃葉做為杏 仁味新來源的材料品質依據。

2

第二章 文獻回顧

2.1.墨點櫻桃介紹

2.1.1.植物特徵

墨點櫻桃(Prunus phaeosticta (Hance) Maxim.)，屬於薔薇科，桃李屬(Prunus)。

種名中的phaeo-表示褐色，-sticta 表示為細點，為其葉部的特徵(劉與郭， 1971)；

英名為brown punctate cherry-laurel 或 dark-spotted cherry (應，1991)，俗名有桃仁、

黑星櫻、山杏仁等(陳與簡，2002)。

墨點櫻桃原生於中國華南地區及臺灣全島海拔700 至 2000 m 地區，臺灣有紀 錄的發現的地點有北部的陽明山、福山；中部的蓮華池、日月潭；南部的扇平、

大武山等地(呂等，1997)。墨點櫻桃多分布在向陽地區，性喜溫暖、潮濕。生育適 溫15-28℃，日照充足，在高冷地生育較為良好，平地的高溫易造成生長遲緩(薛，

2006)。

墨點櫻桃為常綠小喬木(附錄圖 1)，全株無毛。葉革質，長橢圓狀卵形至長橢 圓狀披針形，長7-12 cm，寬 2-4 cm，先端漸尖，全緣具波浪狀；葉上表面具蠟質，

下表面佈有褐色細點(附錄圖 2 及 3)；側脈 10 至 12 對，葉柄長 0.5 cm。葉片具有 褐色斑點，此褐色細點由解剖同屬植物野黑櫻(Prunus serotina Ehrh.)的葉片後，

Halarewicz (2011)認為是聚合單寧所造成，聚合單寧主要於海綿組織及維管束的單 寧細胞中生合成；托葉披針型，早落；葉搓揉後富有杏仁香味，為本種之特色；

花期3 至 5 月，總狀花序，著生於葉腋，花序長 2.5 至 7 cm；小花花徑 0.6 -0.8 cm，

雄蕊數 16-24，心皮數 1；花瓣 5 瓣，呈圓形白色，花萼卵形，先端鈍，呈白色；

果實為核果，成熟果實由綠色轉為紫黑色，果徑 0.7-1.0 cm，於十月至十二月成熟，

果實內之種仁含油率達35%，是具潛力的油脂原料(大橋與謝，1996 ;鄭，1998) 墨點櫻桃樹皮灰色，皮孔顯著，髓心充實，木材由淡黃白色、淡黃土色至淡 褐色，心邊材界限不明顯，鮮材與葉片一樣具有濃郁的杏仁味，多具髓斑。墨點 櫻桃之木材為散孔材或紋樣孔材，導管管孔單獨或2-3 個，多呈徑向複合，平均弦

3

向直徑32.4±43.4 μm，平均長度 404.6±50.3 μm，螺旋加厚紋明顯，穿孔單一，穿 孔板端壁傾斜，導管側壁紋孔互生，平均值徑2.47±0.19 μm。木質線與導管間紋孔 平均直徑2.51±0.19 μm，具豐富結晶(黃等，2006)。

2.1.2.分類地位

薔薇科(Rosaceae)約有 124 屬 3375 種，主要分布北半球溫帶地區(林，2006)；

主要特徵為花萼5、花瓣 5、雄蕊 10 個至多數，雌蕊 1、2、5 個或多數。心皮及 子房位置種屬間雖有變化，但都具有花托筒的構造。根據子房上下位、心皮離合 生、數目和果實形態，可將薔薇科分為四個亞科，分別為珍珠梅亞科(Spiraeoideae)、

薔薇亞科(Rosoideae)、李(櫻或桃)亞科(Prunoideae or Amygdaloideae)和蘋果亞科 (Maloideae)。臺灣有 24 屬原生之薔薇科植物，計 170 餘種 (呂等，2000)。其中，

臺灣原生的墨點櫻桃歸屬為李亞科。

李亞科下種類約有12 種。目前對於李亞科植物分類的界定上尚有爭論。大橋 與謝(1996)編撰的台灣植物誌針對台灣李亞科植物有 2 屬即扁核木屬(Prinsepia)和 李屬(Prunus)，墨點櫻桃為歸屬於李屬之一種；Li(1963)主張應分為 3 屬，即扁核 木屬、李屬及櫻屬(Cerasua)；林(2006) 則主張應分為 5 屬，分別為櫻屬(Cerasus)、

桂櫻屬(Laurocerasus)、稠李屬(Padus)、扁核木屬(Prinsepia)及腎果木屬(Pygeum)。

呂(2000)則主張分為 2 屬 6 亞屬，兩屬為李屬及扁核木屬，在李屬下又分為桂櫻亞 屬(Laurocerasus)、稠李亞屬(Padus)、櫻亞屬(Cerasus)、李亞屬(Prunus)、杏亞屬 (Armeniaca)、桃亞屬(Amygdalis)。 在這些分類中，墨點櫻桃屬於李屬(應，1991; 大 橋與謝，1996 )或桂櫻亞屬(林，2006; 呂，2000)。目前，墨點櫻桃的學名多以 Prunus

phaeosticta ( 應， 1991; 大橋與謝， 1996 ) 為主，因分類系統差異也有書寫為 Laurocerasus phaeosticta (呂，2000; 林，2006)。

2.1.3.相關病蟲害

李(1990)發現子囊菌 Microcyclus pruni 會寄生在冬青葉桃仁(Prunus phaeosticta var. ilicifolia)上， M. pruni 造成的病徵是在葉片表面佈滿黑色病斑。由於冬青葉桃

4

仁為墨點櫻桃的變種，雖尚無文獻提出此兩種子囊菌會寄生於墨點櫻桃的紀錄，

但值得注意其在墨點櫻桃上的可能危害(附錄圖 4a)。

野外的墨點櫻桃常見的蟲害有金斑龜金花蟲(Cassida crucifera Kraatz)。金斑龜 金花蟲的危害對象還包括山櫻花等其他櫻花類植物(Kimoto and Chu, 1996)。主要取 食葉片，取食後會在葉面留下一條一條褐色的啃食後的條紋，造成啃食處乾枯(附 錄圖4b)。

2.1.4.繁殖方法

目前墨點櫻桃種苗生產多以實生苗為主，較少使用無性繁殖的方法。桃李屬 植物，包括桃、梅及櫻花，種子皆具有休眠性，須經由低溫或暖溫處理後，再低 溫層積處理1-5 個月，才能打破休眠。通常山櫻花種子置於經過 25/15℃存放 2 個 月後，再於5 ℃層積處理三個月後，種子發芽率可達 100 % (簡，2004)。

陳和簡(2002)欲建立打破墨點櫻桃種子休眠使之整齊萌發的適合條件，將種子 在5℃低溫濕冷層積 4 個星期，種子發芽率即可達 90 %，如延長到 12 或 16 星期，

種子發芽率均可以達94 %以上，但其發芽速率(germination speed)較層積 4 個星期 者快。簡(2011)進一步將種子先在 30/20℃分別處理 4、6 及 8 星期，再以 5℃分別 層積4、6 及 8 星期，結果顯示加入暖溫處理，可使未成熟的種子繼續發育生長；

因此暖溫後再層積處理，不僅會提高發芽率，也會加快種子的發芽速率。最後的 結論認為30/20℃處理 4 星期，再以 5℃層積 4 星期，就足以解除種子休眠，且發 芽率可達98.9%，此適合做為種子萌芽整齊且打破休眠的方法。

2.1.5.目前應用

墨點櫻桃目前最常見的應用，是用作為商用菇木，最常見的是栽培香菇。黃 等(1990)比較 29 種速生樹種與 11 種已知的商用菇木，記錄用於生產香菇時的產量 及品質。結果顯示以墨點櫻桃作菇木，可生產24.64 公斤乾菇(公斤(乾重)/噸(木材 鮮重))，產量為商用菇木的前 5 名；所培養出的傘徑約 6.51±0.28 cm、表面淺灰褐

5

色，肉厚約1.16±0.17 cm，菇柄長約 5.54±0.29 cm，菇傘較大且香菇品質屬於上等，

為生產香菇的良好菇木。

林 與 尹(1992)等以墨點櫻桃等 10 種闊葉樹材，進行抗白蟻抗性與醇苯 (Alcohol-Benzene)抽出物(%)及木材比重(W/V)間的關係，並以臺灣二葉松作為對照 組(對白蟻無抗性)，分析結果顯示，墨點櫻桃的木材比重為 0.56，在十一種樹種中 排名第七，木材結構上並不為良好的抗白蟻木材，不過其木材醇苯抽出物高，仍 是一種良好的抗家白蟻木材選擇。

2.2.杏仁味物質之研究

雖然李亞科很多植物具杏仁味，但目前商用的天然杏仁味多來自種仁，而墨 點櫻桃全株均具有杏仁味，可能是杏仁香味的良好來源。這些杏仁味主要來自苯 甲醛。植物體內的苯甲醛，主要是自其體內氰醣苷經水解後的產物。李亞科植株 所有之氰醣苷主要有野黑櫻醣苷(prunasin)及苦杏仁苷(amygdlain) (附錄圖 5a、b) ( Conn, 1980; Frehner et al., 1990；Santamou, 1998)。

2.2.1.種子中之杏仁味物質

杏仁(apricot kernel)為杏樹(Prunus armeniaca L.)的種仁，具有特殊的風味，受 到消費者喜愛。杏仁可分為甜杏仁與苦杏仁兩類，事實上，只有苦杏仁帶有杏仁 味，甜杏仁並無杏仁特有的氣味，而是帶有堅果的香味及甜味（林與葉，2003）。

商業宣傳上，常用作零食用的「杏仁」，實為扁桃果實的種仁。扁桃(Prunus dulcis (Mill.) D. A. Webb)也有甜品種與苦品種之分，主要差別為種仁中苦杏仁苷 (amygdalin)含量高低(Raquel et al., 2008 )。

Raquel 等(2008)藉由分析及切片組織定位法觀察甜品種扁桃種子種皮氰醣苷 水解酶活性，較苦扁桃品種之種子高；並指出種皮上水解酶活性高，會水解由植 體運移至種子的野黑櫻醣苷，使之含量降低；由於，野黑櫻醣苷為苦杏仁苷的前 趨物，當前趨物野黑櫻醣苷含量降低，種子能生合成的苦杏仁苷含量亦降低。苦 杏仁含有醣類、纖維素、不飽和脂肪酸、維生素、苯甲醛及苦杏仁苷等成分(張，

6

2007)，其中苦杏仁苷受到酶催化裂解，產生的最終產物為苯甲醛及氫氰酸(Swain and Poulton, 1994)；即是杏仁味的來源。Guichard 與 Souty (1988) 分析杏仁揮發性 化合物，共鑑定出82 種化合物，其中以苯甲醛及萜烯醇類含量較高，其中苯甲醛 為杏仁香氣的主要成分。

2.2.2.葉片中之杏仁味物質

在扁桃植株中，野黑櫻醣苷多在根、葉以及內果皮中生合成，而苦杏仁苷則 多於種子內生合成(Dicenta et al., 2002)。Santamou (1998)分析野黑櫻(Prunus

serotina L. )葉片，發現葉中除野黑櫻醣苷外，亦會存有苦杏仁苷，苦杏仁苷含量

會隨著氣溫降低及準備開花而相對增加；Santamou 等(1998)利用濾紙層析法(paper chromatogram)分析葉中野黑櫻醣苷與苦杏仁苷的含量後，於層析濾紙上加入水解 酶，使氰醣苷分解生成氫氰酸及苯甲醛，再利用苦味酸鈉法來對氫氰酸進行定量 分析；分析結果顯示，野黑櫻嫩葉所產生的氫氰酸量以3 月中最高達 7432 μg/ g D.W.，隨著葉齡增加，葉中野黑櫻醣苷含量有下降的趨勢；但苦杏仁苷的含量則 會逐漸上升。Lúcia 等(2013)分析野黑櫻(Prunus serotina L. )葉片，氰醣苷種類與含 量與上述結果相同。

利用純水蒸餾法(Hydrodistillation)萃取墨點櫻桃葉片精油後，利用頂空氣相層 析法(headspace gas chromatography)，並使用 Kovats 指數(Kovats retention index)及 部分標準品，比對鑑定分析精油的成分、含量及產量，共可鑑定出76 個揮發性化 合物；精油內最主要的成分分別為苯甲醛(相對含量 73.3%)、桉油酚 (1.8-cineole，

5.4%)和乙酸-α-松油醇酯(α- terpinyl acetate，4.4%)，而精油產量方面，每 100g 的墨點櫻桃葉片可以萃取出0.9±0.03 mL 的精油(Ho et al., 2009)。

2.3.氰醣苷之介紹 2.3.1.氰醣苷之介紹

Lechtenberg 與 Nahrstedt(1999)指出，1802 年德國藥劑師 Bohm 發現苦扁桃種 仁會產出氫氰酸；加上 1830 年，Robiquet 和 Boutron-Chalard 故將之命名為

7

amygdalin，為第一個被發現的氰醣苷，中文因這個成分以苦杏仁含量最高，而譯 成苦杏仁苷，否則應定名為苦扁桃苷。

氰醣苷為含氮及結構具有氰基(nitrile, C≡N)的二次代謝物，主要結構式含有 配醣基的羥腈。羥腈(cyanohydrin)是醛或酮分子中羰基發生氰化氫加成反應生成的 化合物，但結構並不穩定，故植物體內存在較多的是羥腈與醣類鍵結形成氰醣苷，

少部分是與脂質鍵結形成的氰脂基(cyanolipid)物質(附錄圖 6)。目前，在植物中已 發現超過 75 種氰醣苷，約有超過 2500 種植物會於植物體內合成氰醣苷，包括許 多重要的作物，例如杏仁、樹薯、高粱等 (Bak et al., 2006; Seigler and Brinker, 1993)，

而 氰 脂 基 只 在 無 患 子 科(Sapindaceae) 、 七 葉 樹 科 (Hippocastanaceae) 及 紫 草 科 (Boraginaceae)植物的種子中發現(Møller and Seigler, 1999; Seigler et al., 1970)。

2.3.2.氰醣苷之生合成與代謝

氰醣苷主要由必需胺基酸如Phenylalanine、Tyrosin、Leucine 等，少部分由其 他胺基酸(2-(2-cyclopentenyl) glycine)或菸酸(nicotinic acid)為原料所生成(Seigler, 1991)；氰醣苷的種類則根據胺基酸種類、接上的醣基數量及掌性結構差異(chiral construction)來決定(Conn, 1980; Nahrstedt et al., 1987; Tower, et al., 1964 )。

苦杏仁苷及野黑櫻醣苷皆由苯丙胺酸(phenylalanine)生合成，不過苦杏仁苷具 兩個醣基結構，野黑櫻醣苷只具有一個；蜀黍氰醣苷(dhurrin)及紫杉氰醣苷 (taxiphyllin)皆由酪胺酸(tyrosine)生合成，不過兩者互為光學異構物。氰醣苷裂解後 會產生氫氰酸、單醣及醛類或酮類(饒, 1999)。

在薔薇科植物中，主要會生成兩種氰醣苷，分別為苦杏仁苷和野黑櫻醣苷 (Conn, 1980)。Mentzer and Favre-Bonvin (1961)利用同位素標定法，了解野黑櫻醣 苷及苦杏仁苷生合成路徑，最初是從苯丙胺酸開始生合成。苯丙胺酸受到內質網 膜上酶催化而生成扁桃腈(mandelonitrile)。扁桃腈為羥腈的結構，與一分子葡萄糖 鍵結，生成野黑櫻醣苷；若野黑櫻醣苷再進一步鍵結一分子葡萄糖，則生成苦杏 仁苷(Dewick, 1984)。苦杏仁苷、野黑櫻醣苷及扁桃腈分別受到 amygdalin hydrolase、

8

prunasin hydrolase 及 mandelonitrile lyase 催化，會裂解出最終產物為葡萄糖、苯甲 醛及氫氰酸(Swain and Poulton, 1994)，整個苦杏仁苷與野黑櫻醣苷之生合成與代謝 途徑見附錄圖7。

2.3.3.氰醣苷之運移

苦扁桃品種之果實於生育前期，具有一定含量的野黑櫻醣苷，生育中後期含 量開始下降至無；隨著野黑櫻醣苷的下降，苦杏仁苷含量則開始上升；苦扁桃品 種中野黑櫻醣苷含量的上升，主要是由種皮新生合成，而後藉由共植體運移至種 仁生合成苦杏仁苷 (Raquel et al., 2008)。

樹 薯(Manihot esculenta Crantz) 葉 片 所 生 合 成 的 亞 麻 苦 苷 (linamarin 及 lotaustralin)，會藉由篩管運移至塊根貯藏(Jørgensen et al., 2005) 由氰醣苷裂解的產 物醣類可供植物利用，而氫氰酸及醛類或酮類即可作為植物本身防禦生物逆境之 用(Jones, 1962)。

2.3.4.產氰之現象(cyanogenesis)

植 物 於 生 合 成 乙 烯 過 程 ， 在 1- 氨 基 環 丙 烷 -1- 羧 酸 (aminocylopropane-1-carboxylic acid , ACC)氧化形成乙烯時，會產生微量的氫氰酸 約5.4×10^-3 mg/g (Yang et al., 1984)；由於大部植株具有此生合成路徑，故大部分植 物皆會產生氫氰酸。不過在定義上，所謂具產氰現象的植物，為每公斤植體鮮重，

會產生10 mg 氫氰酸以上的量者(Shore and Obrist, 1992)。大部分具產氰現象的植 物，是能生合成大量氰醣苷或氰脂基的植物。

在未受任何外力傷害的自然情況下，完整的組織並無產氰現象，主要是因為 氰醣苷與水解氰醣苷的β-glucosidase 及 hydroxynitrile 存在部位不同，而被區隔 (compartment)，並無法反應生成氫氰酸。例如高粱葉片所生合成的蜀黍氰醣苷 (dhurrin)，主要貯存於葉片表皮細胞中的液泡內 (Saunders and Conn, 1978)，而水 解酶則存在於葉肉細胞的液泡中(Kojima et al., 1979)。Elisabeth 等 (1994)利用免疫 法，了解野黑櫻葉片中氰醣苷水解酶(prunasin hydrolase 及 mandelonitrile lyase)主要

9

是位於維管束的薄壁細胞的液泡中，當植物遭受逆境或外力破壞，例如昆蟲取食，

導致細胞破裂，氰醣苷與水解酶因接觸而被催化生成氫氰酸；氫氰酸會抑制呼吸 作用，而導致侵害的外來生物因缺氧而死亡(Cheeke and Shell, 1985)。

植株必須同時能生合成氰醣苷及水解酶，才易具備大量產氰能力。自然情況 下，氰醣苷種類多且水解酶的專一性差異，造成產氰現象的多型性(polymorphism) (Jones, 1972)。另外，產氰現象的多型性還受到植物年齡、部位之影響。薔薇科植 物果實隨著成熟度增加，會累積苦杏仁苷於種子中，但由實證年輕的種子並不具 有產氰現象(Frehner et al., 1990)；而紫杉氰醣苷(taxiphyllin)只在竹筍頂芽生合成，

使竹筍具有產氰能力，成熟竹子中並不生合成紫杉氰醣苷，故亦不具有產氰現象(張 與孫, 1989)。苜蓿(Trifoleum repens L.)中有發現具有產氰及非產氰的族群，此現象 主要是受基因控制，其中Ac 基因決定氰醣苷 linamarin 及 lotaustralin 的生合成，

Li 基因則控制β-glucosidase 之生合成與否(Jones, 1972)。

2.3.5.水解產物氫氰酸之毒性

氫氰酸的毒性，主要是因為氫氰酸易與細胞內血紅蛋白(hemeoprotein)結合，

尤其是與細胞色素氧化酶(cytochrome oxidase)作用，因而抑制細胞之呼吸作用 (Cheeke and Shell, 1985)。人若暴露在有氰氫酸的環境中，會出現頭痛、暈眩、噁 心、嘔吐及顫抖等典型的中毒症狀，但只要遠離此環境，這些症狀就會慢慢減緩，

低劑量的氫氰酸不會在人體內累積，而會被硫氰酸酶(rhodanase, EC.2.8.1.1)轉化成 硫氰根離子(SCN-, thiocyanate)，再隨尿液排出。由於硫氰酸酶效率高，故氫氰酸 在動物體內可以很快被解毒，只有當毒性超過解毒作用之負荷時，才發生中毒反 應。氫氰酸對人體的致死劑量為每單一口服劑量公斤體重 0.5-3.5 mg (Conn, , 1981a)，75 公斤成年人之致死計量約在 37.5 mg 至 265.5 mg 間。

微量的氰氫酸，能輕度抑制呼吸中樞，使呼吸加深，減輕咳嗽症狀，達到鎮 咳平喘之作用（張與蔡，1984）。苦杏仁苷及野黑櫻醣苷水解產物除氰氰酸外，還 有苯甲醛，兩產物皆具有杏仁味，苯甲醛被廣泛用作商業食品調味品和工業溶劑，

10

也是生產香水、香料和合成某些苯胺染料的重要中間產物。兩物質皆具有杏仁味，

但為了避免氫氰酸中毒的疑慮，可以利用氫氰酸沸點低(26℃)的特性，來去除氫氰 酸。

植 物 也 具 有 特 有 的 機 制 來 避 免 氫 氰 酸 危 害 。 在 植 物 體 中 氫 氰 酸 會 受 到 β-cyano-L-alanine synthase 催 化 與 cysteine 結 合 形 成 3-cyano-L-alanine ； 3-cyano-L-alanine 會再進一步受到酶催化生成 L-asparagine 或 ammonium 和 L-aspartate 供植物利用(Rodgers and Knowles, 1978)。

11

第三章 材料與方法

3.1.材料

3.1.1.植物材料

植物材料採用位於臺大實生盆栽苗及竹子湖及蓮華池野生族群。盆栽苗購自 彰化田尾鄉田尾玫瑰園。2013 年 1 月將植株換至七吋塑膠盆，栽植於國立臺灣大 學。介質配方為泥炭苔：根基旺=1:1，並施用好康多 1 號(Hi-control 180 天型，

N:P2O5:K2O=14:12:14，臺和園藝企業有限公司)1 kg/m³ (附錄表一)。

野生族群位於陽明山國家公園竹子湖頂湖地區，海拔約700 m。分布於竹子湖 路0+900 m (25°10'27.3" N 121°32'15.8" E)至 0+1000 m (25°10'29.8"N 121°32'13.7" E) 間，路旁北側的柳杉林地內。總共標定墨點櫻桃植株共20 棵，分布區如附錄表二。

果實採集地區，除陽明山地區之外還包括蓮華池(23°55'05.9"N 120°53'19.9"E)處兩 株植株。

3.1.2.試驗藥品

3.1.2.1.苦味酸鈉法測定所需藥品

苦味酸(Picric acid, C6H3N3O7)：購自 Fluka 公司。GR 等級。

碳酸鈉(Sodium carbonate, Na2CO3)：購自 Merck 公司。Pro analysis 等級。

醋酸(Acetic acid, CH3COOH)：購自 Merck 公司。GR 等級。

氰化鉀(Potassium cyanide, KCN)： 購自 Alfa Aesar 公司。GR 等級。

氫氧化鈉(Sodium hydroxide, NaOH)：購自 Merck 公司。GR 等級。

3.1.3.試驗器材

直尺：PASS 30 公分直尺

游標尺：Mitutoyo Absolute Digimatic 500-196-20 分光光度計(Spectorphotometer)：Prema Pro-729

葉綠素計(Chlorophyll meter)： SPAD-502, Konica Minolta INC., Japan 3.2.試驗方法

12

3.2.1.生育調查

生育調查主要目的為觀察墨點櫻桃枝梢及葉片發育情形，以期了解枝梢及葉 片生長與葉片氰醣苷含量之關係。調查地點為竹子湖及臺灣大學。調查期間由2013 年2 月至 2014 年 6 月。將春季由去年枝條上所萌發的枝條定義為一次梢；一次梢 上萌發的枝條定義為二次梢，依此類推。

3.2.1.1.調查方式：

臺灣大學：

2013 年 2 月 14 日標定四株植株，每株標定四枝枝條。調查枝條上芽萌發 後枝梢之生長，節數及葉片生長節位，及當年萌發枝梢次數。2014 年 1 月 27 日標定五株植株，每株標定三枝枝條，調查項目如2013 年，再加入萌發枝條 上葉片長、葉寬及葉綠素讀值。

竹子湖地區：

2013 年 2 月 21 日標定九棵株植株共 720 個芽，標定標準為已露白的芽。

待芽抽出枝條(約標定後 30 天)，且枝條上葉片可供調查後，於葉片快速生長 階段(標定後 30 至 75 天)每 14 天進行調查，快速生長階段過後，每 30 天調 查一次。每次採十枝枝條上，調查枝條長度、總節位數、葉片生長的節位數，

枝條上三至五節上葉片的葉長、寬及葉綠素計讀值。

2014 年 1 月 24 日選定 4 株植株(編號 16、17、18 及 19)，各標定 30 枝枝 條，枝條上芽體尚未露白，調查包括頂芽算起1 至 6 節芽體萌發情形，比較 節位間萌芽率差異。從標定的30 枝枝條，挑選固定 10 枝枝條調查 1 至 6 節 上已萌發的新梢長度。將生長狀態(植株高度、萌芽情況)相近的植株分為同 組(編號 16、17 為 A 組；編號 18、19 為 B 組)，各組於萌芽極大期，標定 200 個已露白的芽。B 組於 2014 年 2 月 16 日； A 組 於 2014 年 2 月 22 日 標定。

3.2.1.2.調查項目介紹：

13

a. 枝條長度：測量芽體及枝梢基部至頂端之長度。

b. 枝條節位：計算枝條上總節位及生長葉片的節位 c. 葉片數。

d. 葉片長寬：葉長為直尺測量葉片基部至葉尖之長度；葉寬為直尺測量葉 片最寬處之長度。

e. 葉綠素計讀值：以葉綠素讀值儀器(Chlorophyll meter, Konica Minolta INC., Japan)測量，每片葉測 10 次，將數值取平均，作為一片葉片之讀值。

f. 葉片乾物重比例：測定葉片鮮重及乾重，以公式計算葉片乾物重。

公式：葉片含水量：(葉片乾重/葉片鮮重)×100%

g. 葉片含水量：測定葉片鮮重及乾重，以公式計算葉片含水量。

公式：葉片含水量：100-(葉片乾重/葉片鮮重)×100%

3.2.2.葉片氰醣苷含量分析 3.2.2.1.苦味酸鈉法分析

本研究所使用的方法為苦味酸鈉法(Picric acid method)，方法修改自 AOAC (1984)及 Bradbury 等 (1999)之方法。本分析原理是利用氰醣苷裂解後 產生氫氰酸，以苦味酸(Picric acid, C6H3N3O7)吸收氫氰酸後，形成異氰紫酸鈉 (isopurpuric acid)，顏色會由黃色變為橘色至磚紅色，變色深淺與氫氰酸含量 多寡有顯著相關，因此可利用分光光度計測定吸光值，並以標準品製作檢量 線，推估氫氰酸含量(附錄圖 8)。

a. 苦味酸鈉溶液配置：秤取 1.5g 苦味酸(Picric acid)及 2.5g 碳酸鈉(Sodium carbonate, Na2CO3)，並將兩藥品分別溶於約 30 mL 去離子水中。將碳酸鈉 水溶液緩慢加入苦味酸水溶液中。混和均勻後，以定量瓶定量至100 mL。

b. 苦味酸鈉試紙製作：將試紙(Whatman ^® NO.1)浸漬到苦味酸鈉溶液，取出 後於室溫下陰乾，即為苦味酸鈉試紙。將苦味酸鈉試紙裁成 3×3 cm 後，

14

放置低溫下以備分析。分析時，將裁切後的試紙放入LC vial (Agilent Co.) 中。

c. 分析：乾燥磨粉之樣品秤取約 0.1 g；鮮葉樣品則秤取 0.05 g，並放入玻璃 離心管，加入0.3 M pH 值 3.73 醋酸緩衝溶液，每管加入 2 mL，並把裝 有試紙的LC vial 倒扣於離心管瓶口，使兩者密合。為了增加接合處的密合，

以石蠟膜(Parafilm)包裹接合處。將分析裝置置入 30℃水浴，至少反應一天 (附錄圖 9)。

d. 配置 100 mL 0.3 M 的醋酸緩衝液。首先，取 1.76 mL 冰醋酸加入定量的水 中。再加入2.56 mL 1 N 的氫氧化鈉。將溶液定量至 100 mL。

e. 製作檢量線：本實驗以氰化鉀標準品製作檢量線。精秤 0.1g 氰化鉀，以去 離子水溶解後定量至100 mL，配置成 1000 mg/L 之氰化鉀標準液。將標準 液稀釋成500、250、125、61.5、31.25、15.125 mg/L 之氰化鉀標準液，分 別取2 mL 標準液於離心管中，再加入 2 mL 緩衝液，將離心管與樣品一 同放置於 30℃水浴，利用氰離子(CN-)於 26℃即到達沸點，苦味酸鈉試紙 可與汽化的氰離子產生顏色變化。

f. 分光光度計測定：取平底試管，將反應後的試紙放入，加入 10 mL 去離子 水，靜置30 min.。以波長 510 nm 測定吸光值。

3.2.2.2.氰醣苷及其衍生物氫氰酸之分析條件 3.2.2.2.1.葉片節位與氰醣苷含量之關係

於2013 年 11 月 9 日採集位於陽明山竹子湖地區同一株墨點櫻桃枝 葉片，採集未萌發二次梢的枝梢，依葉片所屬節位分為1 至 7 節上之葉片 (由枝條頂芽開始計算)，並以 50℃熱風烘乾至恆重，將乾燥葉片磨粉，將 乾燥葉片磨粉經20 目篩，精秤 0.1±3% g。以苦味酸鈉法(見 3.2.2.1)分析其 總氫氰酸含量。

3.2.2.2.2.烘乾溫度對葉片氰醣苷含量之影響

15

葉片採集自同一株墨點櫻桃植株，取植株最新生長且成熟的枝條上第 3 至 5 片葉，並將葉片以 50、60、70、80 及 90℃熱風烘乾至恆重，將乾 葉分為一半，其中一半以 105℃烘乾至恆重秤取乾重，了解不同溫度烘乾 後剩餘含水量。一半乾燥葉片磨粉後經20 目篩，精秤 0.1±3% g。以苦味 酸鈉法(見 3.2.2.1)分析其總氫氰酸含量，並於分析時，加入額外的水解酶 以確保氰醣苷能完全反應生成氫氰酸。

3.2.2.2.3.烘乾溫度對葉片氰醣苷水解酵素活性之影響

葉片狀態及採集方式如3.2.1.2 節。樣品分為鮮葉與乾葉兩部分，採集 後直接以鮮葉秤取 0.05 g；將同批葉片以 50 ℃烘乾至恆重將乾燥葉片磨 粉經20 目篩，精秤 0.1±3% g 間。兩份樣品以苦味酸鈉法分析(見 3.2.2.1)，

分析樣品中氰醣苷水解酵素活性。

3.2.2.2.4.氰醣苷水解酵素反應最適 pH 值

葉片狀態及採集方式如3.2.1.2 節。葉片以 50℃熱風烘乾至恆重，將乾 燥葉片磨粉經20 目篩，精秤精秤 0.1±3% g。並分別加入 pH 值 1.11、2.11、

3.11、3.78、4.78、5.7 及 6.8，並以苦味酸鈉法(見 3.2.2.1)分析其總氫氰酸 含量。緩衝溶液配置如下：pH 值 1.11、2.11、3.11 及 6.8，利用磷酸配置，

將0.3 mL 的磷酸加入 30 mL 的水中，利用 pH 酸鹼度計測定溶液 pH 值，

並以1 N 的氫氧化鈉 調整至目標 pH 值，後定量至 50 mL，配置成 0.3 N 的磷酸緩衝溶液；pH 值 3.78、4.78 及 5.7 利用醋酸配置，將約 0.9 mL 的 冰醋酸加入30 mL 的水中，利用 pH 酸鹼度計測定溶液 pH 值，並以 1 N 的氫氧化鈉 調整至目標 pH 值，後定量至 50 mL，配置成 0.3 N 的醋酸緩 衝溶液(王等, 1987)。

3.2.2.2.5.氰醣苷水解酵素活性測定

酵素活性以測定初始反應速率(V0)作為代表，初始反應速率以接近反 應起始點(t=0)的產物生成速率。葉片狀態及採集方式如 3.2.1.2 節。鮮葉以

16

葉圓片秤取0.05 g，在反應 10、20、40、60、80、160、320、640 及 1280 min.後，以苦味酸鈉法分析(見 3.2.2.1)其總氫氰酸含量。

3.2.2.3.葉齡與葉片總氰醣苷含量之影響

目的為了解葉片年齡與氰醣苷含量之影響，以期得到適宜採集葉片之時 機。調查時間由2013 年 3 月至 2014 年 7 月，調查 2013 年萌發之一次及二次 梢，2014 年萌發之一次梢上之葉片，葉片年齡與氰醣苷之關係。葉片採自陽 明山竹子湖頂湖地區已標定之芽。 2013 年一、二次梢標定的時間點分別在 2013 年 2 月 21 日及 2013 年 9 月 6 日；2014 年一次梢標定時間，B 組為於 2 月16 日， A 組為 2 月 22 日。標定後，待芽體抽出枝條後，採集枝條中段 3 至5 節上的葉片。

將採集之葉片調查葉長寬後，以去離子水擦拭乾淨並秤取鮮重，放入烘 箱以50℃烘乾至恆重(約需兩天)，秤取乾重，以磨粉機打碎至可以通過 20 目 篩網。過篩之粉末以塑膠連接盒封裝後放置於-20℃凍箱保存，以供後續分析 工作之用。另有以鮮葉分析，則將葉片擦拭乾淨後，以打洞機打出葉圓片(0.34 cm²)，秤取定量的葉圓片進行分析。本研究之分析方法分為苦味酸鈉法(見 3.2.3.2 節)。

3.2.3.高杏仁味植株篩選

本試驗調查葉片杏仁味濃淡，並以苦味酸鈉法(見 3.2.3.2 節)分析氫氰酸生成速 率、氰醣苷總量及感官品評，並以上述三種指標期望可篩選出葉片揮發較濃郁杏 仁味的植株。氫氰酸生成速率的分析方式為精秤0.05±3% g 的鮮葉，加入 pH 值 3.73 的醋酸緩衝液，並以冷凍破壞細胞以模擬葉片受到搓揉，並以苦味酸鈉法分析氰 氰酸於五小時內的釋放量。

氫氰酸總量之分析方法與生成速率相同，不同的地方為此分析為使氰醣苷會 被完全反應產生氫氰酸，會使反應至少一天。感官品評的方式為秤取0.5 g 鮮葉，

後加入定量去離子水，冰入-20℃凍箱，藉由冷凍破壞細胞以模擬葉片受到搓揉，

17

而產生杏仁味。品評依其杏仁味濃淡進行排名，依其排名給予積分，品評結束將 各品評員給予的積分平均作為單株之評分。

試驗採集竹子湖地區及臺大地區的植株，分別10 及 15 株。於 2014 年 3 月 29 日及2014 年 5 月 20 採集陽明山地區同一群植株；臺大地區於 2014 年 5 月 10 日 採集一次。3 月 29 日採集陽明山地區植株於 2013 年萌發最後一次梢上第三片葉；

5 月 10 日及 5 月 20 則採集 2014 年一次梢上第三片葉。

3.2.4. 墨點櫻桃果實調查

本試驗調查果實基本性狀，以期作為未來應用之基礎。調查時間於果實成熟 階段(約 10 月至隔年 1 月)，採集陽明山地區及蓮華池，採集有成熟果的果串，並 將果實依紫黑色佔果皮的比例分為未熟(0-30%)、半熟(30-60%)及全熟(60-100%)。

調查項目：果高、果寬、果肉重(外及中果皮)、內果皮重、種子重、果實體積及果 核(內果皮與種子)體積。

3.2.5.統計方法

實驗數據是使用SAS 軟體，進行變異數分析(analysis of variance, ANOVA)，以 LSD’s multiple range test 進行調查及樣品內容物含量之差異顯著性分析。作圖則以 SigmaPlot 10.0 繪圖與分析回歸方程式及其差異顯著性。

18

第四章 結果與討論

4.1.墨點櫻桃生育調查

4.1.1.墨點櫻桃枝梢發育

墨點櫻桃萌芽至抽出枝梢可分為四個時期。第一個時期，芽的褐色鱗片將芽 包裹緊密，芽外觀顏色偏向褐色。第二個階段，為本試驗定義芽開始發育的起始 階段，此階段芽會膨大且鱗片間開始產生綠色稱為露白；隨後完全褐色的鱗片脫 落，保留下端綠色，但尖端為褐色之鱗片葉，此時芽呈現綠白色的狀態稱為萌芽。

第二階段大約經過 7 日，芽進入第三個階段。第三階段初期殘存的鱗片展開，枝 條開始快速抽長，可見正常葉與枝梢；墨點櫻桃為典型抽梢生長模式，此時期初 期已可見當次梢所有完整葉片，此階段葉片及枝條皆呈紅色稱為新梢生長期。第 二階段再經過約 7 日會進入第四個時期，此階段枝條已完全抽出，可見明顯的葉 片、托葉及鱗片葉、葉片仍呈現紅色，而枝條已轉為綠色。枝條由頂芽算起上端 約3 至 11 個節位會生長葉片，靠近基部的 5 個節位著生基部綠色尖端褐色之鱗片 葉，並不生長正常葉片，此階段枝條葉片及總節位已固定，枝條長度還持續生長。

有些枝梢在此階段，不生長葉片之節位上萌生花序(圖 1、2)。枝條長度長至恆定後，

鱗片葉及托葉會脫落，枝條會逐漸木質化，芽體長至飽滿，葉片生長恆定，等待 抽出下一次的枝梢。

墨點櫻桃植株於臺大，即平地的環境下，一年會萌發三次枝梢，分別於 2 月 至3 月間、5 月至 6 月間及 7 月至 8 月間(圖 3)。由圖 3 結果顯示，在平地生長的 墨點櫻桃植株，萌出第一次枝梢後15 日，枝條長度不再伸長，平均有 9.85±1.56 cm；

第二次枝條萌出後15 日，枝條即達到最大長度為 11.12±1.17 cm；第三次枝條萌出 後 15 日，枝條即達到最大長度為 10.48±2.55 cm。三次枝梢之生長曲線均為典型 的 S 型曲線(sigmoidal curve)，迴歸方程式分別為 y=9.85/(1+exp(-(x-7.1)/3.13；

y=11.12/(1+exp(-(x-78.04)/1.54 及 y=10.48/(1+exp(-(x-199.77)/2.79；R²皆為0.99，P 值均小於0.01，亦即均達極顯著水準。

19

陽明山地區之墨點櫻桃植株在2013 年萌發二次枝梢，分別於 2 月至 3 月間及 7 月至 8 月間(圖 4)。植株於萌出第一次枝梢後 37 日，枝條長度不再伸長，平均長 度9.15±2.20 cm；第二次枝條萌出後 60 日，枝條即達到最大，長度 7.98±2.51 cm。

兩次枝梢之生長曲線亦均為 S 型曲線(sigmoidal curve)，迴歸方程式分別為 y=9.15/(1+exp(-(x-21.13)/7.38 及 y=7.98/(1+exp(-(x-237.08)/13.8，R²分別為0.94 及 0.94，P 值均小於 0.01，均達極顯著水準。

2014 年觀察陽明山竹子湖墨點櫻桃植株，植株 2013 年生長的二次梢上，由頂 端向下算起 1 至 6 節芽，著生正常葉之節位，會萌發當年一次梢，而芽序與萌出 一次梢之狀態，如圖5 所示。狀態除第二芽之外，在標定後 23 天始見萌芽，其餘 節位均開始萌芽，標定後36 天新梢發育即達到穩定狀態，第二節位芽在標定後 29 天見萌芽，標定後 44 天新梢發育達至恆定狀態。標定後 64 天統計，不同節位芽 之萌芽率顯然有差異，因此將最終萌芽率進行變方分析及組別間顯著性比較，結 果如圖6。圖 6 的結果顯示 1 至 6 節芽的萌芽比率分別為 86.67、3.33、60、76.6、

63.33 及 63.33。第 1 節芽之萌芽率顯著高於其他節位，第 2 節位芽之萌芽率顯著 低於其他節位，可能受到頂芽優勢的抑制，3、4、5 及 6 節上芽的萌芽率則無差異。

2014 年調查陽明山地區之墨點櫻桃植株，枝梢上由頂端數起 1 至 6 節位芽所 萌發的一次梢生長曲線均為S 型曲線(圖 7)。依據枝條長至恆定時枝條長度，將同 一節位所有萌發的枝條根據長度分為長枝條及短枝條兩組。其中，枝條長度高於 所有枝條的平均值者為長枝條及低於平均值者為短枝條，再將兩組分別製作生長 曲線。1 至 6 節位芽萌發不論長枝條或短枝條，皆於標定後 21 天開始萌發抽出枝 條。其中，第 2 節位芽之萌出短枝條，其餘各節位萌出之新梢兩者均有。長枝條 組1 至 6 節芽去除第 2 節，分別於芽開始萌發後 61、56、58、59 及 56 日新梢長 至恆定，長度分別為11.19±1.89、10.18±2.28、10.07±1.73、11.57±2.04 及 8.99±2.73 cm。短枝條組別 1 至 6 節芽，分別於芽萌發後 56、66、57、58、57 及 48 日長至 恆定，長度分別為5.24±1.82、3.17、4.41±1.33、4.57±1.66、5.98±1.38 及 3.88±0.10

20

cm。1 至 6 節位的芽所抽出的枝條於長至恆定後，長枝條間與短枝條間枝條長度 並無顯著差異，迴歸方程式如圖7 上所示，P 值均小於 0.01，均達極顯著水準。

墨點櫻桃新梢基部通常不生長葉片，而主要著生基部綠色，尖端褐色之鱗片；

這些非正常葉在枝梢生長至恆定後即脫落。由圖 8 顯示葉片數及總節位之關係呈 正相關，節數比葉片恆定多 4.87，即每次枝梢平均約有 5 節沒有葉片。由 430 枝 條調查結果估算，平均每枝梢上具有6.2±2.2 枚葉片；共 10.5±2.5 節。花序會生長 於一次梢近基部的節位上，通常此節位並不生長葉片，但有些花序也會生長在靠 近基部的葉片的葉腋(圖 2)。花序與枝條一同抽出，枝條長至恆定後開花，而果實 在當年10 月至隔年 1 月成熟。

由以上結果觀察可看出，墨點櫻桃常綠樹種，且具有間歇性生長的抽梢習性。

每次梢可能依枝梢營養與分化狀況，長出帶有3 至 15 片葉，平均具有 6.2±2.2 枚 葉片；共 10.5±2.5 節。由於墨點櫻桃芽上具有數枚褐色鱗片與苞片葉，故前者會 再枝梢基部分別留下一段節間短縮莖和正常節間但無葉片的莖段。墨點櫻桃在春 梢萌出後，無葉的節位與基部的有節葉，即有可能萌出花序，並常年結實而後果 實成熟。第二次與第三次梢不萌出花序。因此墨點櫻桃屬於典型的結果母枝型之 落葉樹，與其他李亞科植物不同。

21

4.1.2 葉片生長調查

陽明山地區，墨點櫻桃葉片於不同生育日數的型態如圖9。芽露白時剝除芽外 的鱗片，可看到芽內部已具有葉片，此階段(標定後第七日)芽內之葉片顏色為黃綠 色偏黃，葉片長寬約達完全展開時長寬的 4.3 及 4.8%。待枝條抽出，葉片會進入 快速生長時期。露白後第 15 日，葉片尚未展開，處於對折的狀態，顏色呈紅色，

長寬約達完全展開時期的14.5 及 14%。露白後 28 日，葉片已展開，葉片顏色漸漸 轉成淡綠色，葉綠素計讀值約15.85，長寬分別約達完全展開時期的 60.2 及 52.6%。

露白後 35 日，葉片顏色已完全由紅色轉變為綠色，葉綠素計讀值約 21.66，長寬 約達完全展開時期的83.1 及 75.8%。露白後 63 日，葉片已達完全展開長，葉長寬 分別約8.92；寬約 2.76 (以第三節葉片之數值代表)，葉色呈墨綠色，葉綠素計讀值 約42.93。

陽明山竹子湖地區生長的墨點櫻桃，2013 年一次梢上葉片之葉長與寬，分別 於標定後50、54 日(圖 10)，達完全展開程度，長度分別為 8.58、2.67 公分；葉綠 素計讀值約於240 日後，達恆定值 68.19 (圖 11)。此三項目的生長曲線均為典型的 S 型曲線(sigmoidal curve )，回歸方程式分別為 y=8.58/(1+exp(-(x-27.53)/9.53；

y=2.67/(1+exp(-(x-28.79)/10.75)及 y=68.19/(1+exp(-(x-50.16)/41.11；R²為0.92、0.95 及0.95，P 值皆小於 0.01，達極顯著水準。

陽明山竹子湖地區生長的墨點櫻桃，2013 年二次梢上葉片枝葉長與葉寬及葉 綠素計值分別於標定後54、58 及 92 日(圖 12、13)達到恆定狀態，此時長寬分別 為8.86、2.83，葉綠素計讀值達 61.95。此三項目的生長曲線均為 S 型曲線(sigmoidal curve ) ， 迴 歸 方 程 式 分 別 為 y=8.86/(1+exp(-(x-39.75)/8.05 ； y=2.83/(1+exp(-(x-40.08)/7.58 及 y=61.95/(1+exp(-(x-57.71)/15.19；R²為 0.95、0.96 及0.9，，P 皆小於 0.01 均達極顯著水準。

2014 調查陽明山竹子湖地區 A 組墨點櫻桃植株，一次梢上葉片之葉長、葉寬 及葉綠素計讀值之生長曲線均為 S 型曲線。標定後，生長至恆定天數隨著節位增

22

加而減少(圖 14、15)。葉片節位係由頂梢向基部算起之葉序結果(以下均以相同方 法表示葉序)，葉片長度部分，由頂端起算第一節至第六節，分別於標定後 55、52、

51、50、50 及 47 日生長達恆定狀態，此時葉長分別為 8.43、8.91、8.92、8.66、

8.19 及 7.67 公分。葉片寬度部分，由頂端起算第一至第六節葉片，分別於標定後 58、

56、55、51、50 及 48 日生長達恆定狀態，此時葉寬分別為 2.44、2.80、2.76、2.62、

2.34 及 2.17，葉寬至恆定天數較葉長多約 1 至 4 天。兩者與生長日數間之迴歸方 程式如圖14 及 15 上所示， R²皆達0.97 以上，P 值均小於 0.01，均達極顯著水準。

葉綠素計讀值部分，由頂端起算第一節葉片至第六節葉片，於標定後約 94、

87、84、83、82 及 73 日達至恆定狀態，此時數值分別為 55.89、55.72、55.24、55.26、

57.21 及 52.38 (圖 15)，這些數值皆低於 2013 年所調查的結果，推測可能是調查時 間長短所導致。墨點櫻桃為常綠樹種，葉片年齡會超過一年，隨著葉齡增加葉片 綠色會有持續加深的現象，數值較低的原因，可能是調查時間較短，數值雖然已 達恆定，但葉片綠色還呈現微幅增加的趨勢，恆定後的綠色變深的變化較不如快 速生長時期明顯。迴歸方程式如圖15 上所示 R²皆達0.97 以上，P 值均小於 0.01，

均達極顯著水準。

隨著葉片生育日數增加，葉片乾物重在葉齡180 日以前會有一快速累積時期。

超過180 日葉齡後，葉片乾重仍會持續緩慢增加最終達至恆定狀態(圖 16 及 17)。

2013 年，一、二次梢上，第 3 至 5 節上葉片分別於標定後 410 及 290 達恆定，每 片葉約累積 0.11g 乾物重。2013 年兩次梢葉片乾重與葉齡間之迴歸方程式分別為 y=0.11/(1+exp(-(x-85.38)/65.78 及 y=0.11/(1+exp(-(x-68.65)/37.16 ；R²為0.83 及 0.82，

P 皆小於 0.01，均達極顯著水準。2014 年 2 至 6 月間，一次梢上平均葉片於標定 後，有一快速累積乾物重的時期，預期會持續累積至恆定(圖 18)，預計趨勢與 2013 年同期之葉片相近。

在葉片生長過程，除葉片長寬的變化，葉片顏色及質地，葉背墨點的生長，

皆有所變化。葉綠素計讀值用以代表綠色深淺，葉片顏色於生長階段，會由紅色

23

轉變為綠色，而後持續變深而至恆定。葉片生育日數增加，葉片質地由紙質變為 革質，於完全展開前呈紙質，完全展開後，葉表面蠟質生成、乾物重累積及厚度 增加，而漸轉變為革質。在葉片露白後 35 至 49 日間，葉背墨點會快速生合成，

可能代表著葉片已開始生合成酚類化合物。

圖1

Fig.

、墨點櫻桃 芽 (枝條) 1. The brea

桃芽自萌發至 )的狀態。標 king stages

至抽出枝條 標芽日期為 of Prunus p

24

條不同階段 為2014 年 2

phaeosticta

。由上至下 月22 日。

a buds after

下分別為標定 黑及白色底 0, 7, 14 and

定芽後不同 底線代表1

d 21 days.

同日數 公分

25

圖2、墨點櫻桃當年生一次梢開花及結果節位。(a)開花節位,(b)結果節位 Fig. 2.The flowering and fruit setting nodes of first flush of Prunus phaeosticta

(a) inflorescences setting nodes, (b) fruits setting nodes.

a b

26

Days aftrer observation

0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300

Length (cm )

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20

Feb. Mar. Apr. May. Jun. Jul. Aug. Sep. Oct.

first flush second flush third flush

First flush：y= 9.85/(1+exp(-(x-7.1)/3.13)) R²=0.99, P<0.01 Second flush：y= 11.12/(1+exp(-(x-78.04)/1.54)) R²=0.99, P<0.01 Third flush：y= 10.48/(1+exp(-(x-199.77)/2.79)) R²=0.99, P<0.01

圖3、2013 年臺大地區，墨點櫻桃枝條生長曲線。一次梢()、二次梢()及三次 梢(▼)。2 月 14 日為開始觀察觀察的日數，並以此日作為觀察起始點 Fig. 3.The growth curves of Prunus phaeosticta flushes at National Taiwan University,

2013. First flush () started investigation on February 14, 2013. Second flush () and third flush (▼) started in fellowing day.

27 y= 9.15/(1+exp(-(x-21.13)/7.38)) R2=0.94, P<0.01

Days after bud break

0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360 390 420

Leng th (cm)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

2013

Feb. Mar. Apr. May. Jun. Jul. Aug. Sep. Oct. Nov. Dec. Jan. Feb. Mar. Apr.

First flush Second flush

y= 7.98/(1+exp(-(x-237.08)/13.8)) R2=0.94, P<0.01

2014

圖4、2013 年陽明山竹子湖地區，墨點櫻桃枝條生長曲線。一次梢()，以 2 月 21 日為觀察起始日；二次梢()以 8 月 28 日(188 日)為觀察起始日

Fig. 4.The growth curves of Prunus phaeosticta flushes at Jhuzihhu Yangmingshan National Park. First flush() started investigation on February 21, 2013. Second flush() started investigation on February 21, 2013.

28

Days after labelling

0 10 20 30 40 50 60 70

Bud breaki ng rate ( % )

10 20 30 40 50 60 70 80 90

The 1

^st

node The 2

^nd

node The 3

^rd

node The 4

^th

node The 5

^th

node The 6

^th

node

圖5、墨點櫻桃不同節位芽萌出第一次稍比例之變化。試驗於 2014 年 1 月 24 日標 定枝條

Fig. 5.The first flushes bud bursting of different nodes at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park, 2014. Investgation started on Juanary 24, 2014.

29

Nodes order

1 2 3 4 5 6

Bud breaking rate ( % )

0 20 40 60 80

100 a

c

b

ab

b b

圖6、陽明山地區，不同節位芽於萌發第一次稍比例。試驗於 2014 年 1 月 24 日標定 枝條，於3 月 29 調查

Fig. 6.The first flush buds bursting rate of different nodes order at Jhuzihhu,

Yangmingshan National Park. Investgation started on March 29, 2014. Mean separation within colmns by LSD multiple range test, 5% level.

30

The 5^th node

Days after bud labelling

0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91

Length (cm)

2 4 6 8 10 12

Above average Below average

The 6^th node

Days after bud labelling

0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 Above average

Below average The 2^nd node

0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 91 98 0.5

1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5

The 3^rd node

Length (cm)

0 2 4 6 8 10 12

Above average Below average The 1^st node (terminal bud)

Length (cm)

0 2 4 6 8 10 12

Above average Below average

The 4^th node

Above average Below average y= 11.19/(1+exp(-(x-53.36)/5.48))

R2=0.99, P<0.01 y= 5.24/(1+exp(-(x-50.65)/7.06))

R2=0.98, P<0.01

y= 3.17/(1+exp(-(x-55.87)/7.47)) R2=0.93, P<0.01

y= 10.18/(1+exp(-(x-50.8)/5.46)) R²=0.98, P<0.01 y= 4.41/(1+exp(-(x-51.13)/6.79))

R²=0.98, P<0.01

y= 10.07/(1+exp(-(x-51.74)/5.82)) R²=0.98, P<0.01

y= 4.57/(1+exp(-(x-51.78)/8.27)) R²=0.96, P<0.01

y= 11.57/(1+exp(-(x-52.39)/5.33)) R²=0.99, P<0.01 y= 5.98/(1+exp(-(x-51.09)/5.32))

R²=0.97, P<0.01

y= 8.99/(1+exp(-(x-50.63)/5.74)) R²=0.97, P<0.01 y= 3.88/(1+exp(-(x-46.75)/7.64))

R²=0.98, P<0.01

圖 7、2014 年陽明山竹子湖地區，墨點櫻桃枝條一次梢生長曲線。2014 年 1 月 24 日標定枝條，並作為觀察起始日。枝條長度高於所有枝條的平均長度 () 及低於平均()

Fig. 7.The growth curves of first flush of Prunus phaeosticta at Jhuzihhu Yangmingshan National Park. Investigation started on January 24, 2014.

31

圖8、2013 陽明山竹子湖地區一、二次梢葉片數及總節位之關係

Fig. 8. The relationship of total leaves and nodes of first and second flush at Jhuzihhu Yangmingshan National Park in 2013.

y=1.03*x+4.15 R ² =0.80, P<0.01

Leaves number

0 2 4 6 8 10 12 14 16

Nodes num ber

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

22

24

32

圖9、墨點櫻桃萌定芽後，不同葉齡葉片狀態。調查於 2014 年 2 月 22 日標定芽，

並以此日為觀察起始日。黑色底線代表1 公分

Fig. 9. The leaf appearance changes of Prunus phaeosticta after bud burstdifferent stages of

Prunus phaeosticta leaf appearance after bud break. Investigation started on February

22, 20.

33

y= 8.58/(1+exp(-(x-27.54)/9.53)) R

²

=0.92, P<0.01

Days after bud break

0 60 120 180 240 300 360 420

Length (cm)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

12 Leaf length Leaf width

y= 2.67/(1+exp(-(x-28.79)/10.75)) R

²

=0.90, P<0.01

圖10、陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節葉之平均長及寬生長曲線，葉長 () 葉寬 ()，調查起始日數為 2013 年 2 月 21 日

Fig. 10.The leaf growth curve of first flush of Prunus phaeosticta leaf length () and width() at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park. Investigation started on February 21, 2013.

34

Days after bud break

0 60 120 180 240 300 360 420 480

SPAD

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90

y= 68.19/(1+exp(-(x-50.16)/41.11)) R

²

= 0.95, P<0.01

圖11、陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節上葉片之平均葉綠素計讀值 調查起始天數為2013 年 2 月 21 日

Fig. 11.The changes of leaf SPAD values of first flush leaves at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park. Investigation started on February 21, 2013.

35

y= 2.83/(1+exp(-(x- 40.8)/7.56)) R ² =0.955, P < 0.01

Days after bud break

0 30 60 90 120 150 180 210 240

Length (cm)

2 4 6 8 10 12

Leaf length Leaf width

y= 8.86/(1+exp(-(x-39.57)/8.05)) R ² =0.95, P < 0.001

圖12、陽明山地區，2013 年二次梢第 3 至 5 片葉之平均葉長()及葉寬()生長曲 線，調查起始日為2013 年 9 月 06 日

Fig. 12.The growth curve of second flush leaves of Prunus phaeosticta at Jhuzihhu,

Yangmingshan National Park. Leaf length () and width() Investigation started on September 6, 2013.

36

Col 1 vs Col 2

x column vs y column

Days after bud break

0 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300

SPAD

10 20 30 40 50 60 70 80

y= 61.95/(1+exp(-(x-57.71)/15.19)) R

²

= 0.90, P<0.01

圖13、陽明山地區，2013 年二次梢第 3 至 5 片葉之平均葉綠素計讀值 調查起始日期為2013 年 9 月 06 日

Fig. 13. The changes of leaf SPAD values of second flush leaves at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park, Taipei. Survey started on September 6, 2013.

37

The 5^th leaf

Days after bud break

0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77

Length (cm)

0 2 4 6 8 10

The 6^th leaf

Days after bud break

0 7 14 21 28 35 42 49 56 63 70 77 84 The 3^rd leaf

Length (cm)

0 2 4 6 8 10

The 1^st leaf

Length (cm)

0 2 4 6 8 10 12

Length Width

The 4^th leaf y= 8.43/(1+exp(-(x-27.23)/5.34))

R²=0.99, P<0.01

y= 2.44/(1+exp(-(x-28.94)/6.11)) R²=0.99, P<0.01

y= 2.76/(1+exp(-(x-27.07)/6.75)) R²=0.99, P<0.01

y= 8.92/(1+exp(-(x-25.3)/5.92))

R²=0.98, P<0.01 y= 8.66/(1+exp(-(x-24.70)/5.86))

R²=0.98, P<0.01

y= 2.62/(1+exp(-(x-25.43)/6.36)) R²=0.98, P<0.01

y= 8.19/(1+exp(-(x-24.83)/6.05)) R²=0.97, P<0.01

y= 2.34/(1+exp(-(x-24.54)/5.68)) R²=0.98, P<0.01

y= 2.17/(1+exp(-(x-23.75)/4.59)) R²=0.97, P<0.01

y= 7.67/(1+exp(-(x-23.43)/4.35)) R²=0.97, P<0.01

The 2^nd leaf y= 8.91/(1+exp(-(x-25.68)/5.57)) R²=0.99, P<0.01

y= 2.80/(1+exp(-(x-27.52)/5.34)) R²=0.99, P<0.01

圖14、陽明山地區，2014 年一次梢第 1 至 6 節葉之平均葉長()及葉寬()生長曲 線，調查起始點日為2014 年 2 月 22 日

Fig. 14.The growth curves of first flush leaves of Prunus phaeosticta at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park. Leaf length () and width() Investigation started survey on February 22, 2014.

38

The 5^th leaf

Days after bud break

0 14 28 42 56 70 84 98 112 126

SPAD

10 20 30 40 50

60 The 6^th leaf

Days after bud break

0 14 28 42 56 70 84 98 112 126 140

The 3^rd leaf

SPAD

0 10 20 30 40 50 60

The 1^st leaf

SPAD

0 10 20 30 40 50 60 70

The 4^th leaf The 2^nd leaf

y= 55.89/(1+exp(-(x-46.97)/16.06)) R²=0.97, P<0.01

y= 55.72/(1+exp(-(x-43.37)/16.29)) R²=0.99, P<0.01

y= 55.24/(1+exp(-(x-41.53)/17.32)) R²=0.98, P<0.01

y= 55.26/(1+exp(-(x-41.20)/17.66)) R²=0.99, P<0.01

y= 57.21/(1+exp(-(x-40.85)/18.34)) R²=0.99, P<0.01

y= 52.38/(1+exp(-(x-36.25)/12.99)) R²=0.97, P<0.01

圖15、陽明山地區，2014 年一次梢第 1 至 6 節葉之葉綠素計讀值變化曲線，調查 起始點日為2014 年 2 月 22 日

Fig. 15.The change of leaf SPAD values first flush leaves of Prunus phaeosticta at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park. Investigation started survey on February 22, 2014.

39

y= 0.11/(1+exp(-(x-85.38)/65.78)) R ² =0.83, P<0.01

Days after bud break

60 120 180 240 300 360 420 480

Dry weight (g D.W./ leaf)

0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 0.12 0.14

圖16、陽明山地區，2013 年一次梢第 3 至 5 節葉片，葉片乾重變化。調查起始日 為2013 年 2 月 21 日

Fig. 16.The change of leaf dry weight of first flush leaves at Jhuzihhu, Yangmingshan National Park. Investigation started on February 21, 2013.