第四章 結果
4.2 神經導管接合術實驗
4.2.2 再生組織長過 10 mm 間隙之成功率
4.2.2.1 神經再生成功率
死亡的動物不列入統計,神經管內有白色再生管狀物通過者(表 4.4),視為再生成功。在此定義下,本實驗三組大鼠的再生成功率如表 4.5。
表4.4 三組大鼠神經管內之白色再生管狀物
Silicone 組 ENG 組 CCG 組
表4.5 三組大鼠的再生成功率
組別 代號 成功率
Gelatin + EDC/NHS E 100%
Gelatin + Genipin G 100%
Control (silicone) C 54%
4.2.2.5 再生神經組織切片評估
silicone 組
Silicone 組之再生神經成熟度高,組織已有神經外膜,圍神經膜,
神經內膜等結構。神經內膜中可見多數髓鞘化軸突成形,亦有多數新生 之血管。其周圍無明顯之纖維斑痕組織。圖 4.4、圖 4.5、圖 4.6 分別為 放大40×、100× 及 400×之組織切片圖。
圖 4.4 Silicone 組之再生神經切片,放大倍數 40×,圖中比例尺為 0.5 mm
圖4.5 Silicone 組再生神經切片,放大倍數 100×,圖中比例尺為 0.1 mm
圖 4.6 Silicone 組再生神經切片,放大倍數 400×,圖中比例尺為 0.05 mm
ENG 組
ENG 組之再生神經亦有神經外膜,圍神經膜,神經內膜等結構。
神經內膜中再生單元的型態頗為成熟,Schwann 細胞、未髓鞘化軸突及 髓鞘化軸突分布其中。再生神經周圍有一層纖維化斑痕組織存在(如圖 4.7 之雙箭號所示)。圖4.7、圖 4.8、圖 4.9 分別為放大 40×、100× 及 400×
之組織切片圖。
圖 4.7 ENG 組之再生神經切片,放大倍數 40×,圖中比例尺為 0.5 mm
圖4.8 ENG 組之再生神經切片,放大倍數 100×,圖中比例尺為 0.1 mm
圖4.9 ENG 組之再生神經切片,放大倍數 400×,圖中比例尺為 0.05 mm
GGC 組
GGC 組之再生神經纖維成熟度偏低。G3 及 G8 再生組織仍處於 早 期 階 段 或 神 經 細 胞 未 成 功 再 生 。 沒 有 血 管 組 織 與 神 經 組 織 細 胞 (Schwann 細胞與軸突)形成(如圖 4.10、圖 4.11、圖 4.12 所示);G9 及 G10 向心狀排列的纖維母細胞較為緻密,有將形成神經外膜的趨勢,但 神經外膜、神經內膜界線仍不清楚。核心區仍有許多新生血管,有少許 鬆散 Schwann 細胞柱形成(如圖 4.13、圖 4.14、圖 4.15 所示);G7 及 G12 可以看到大多數為 Schwann 細胞,其具有中度染色的細胞質和一個 卵圓形的細胞核,並可見少數軸突和髓鞘。最早期的髓鞘化已發生。再 生神經周圍也有一層纖維化疤痕組織存在(如圖 4.16、圖 4.17、圖 4.18 所示)。
圖 4.10 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 40×,圖中比例尺為 0.5 mm
圖4.11 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 100×,圖中比例尺為 0.1 mm
圖4.12 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 400×,圖中比例尺為 0.05 mm
圖 4.13 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 40×,圖中比例尺為 0.5 mm
圖4.14 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 100×,圖中比例尺為 0.1 mm
圖4.15 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 400×,圖中比例尺為 0.05 mm
圖 4.16 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 40×,圖中比例尺為 0.5 mm
圖4.17 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 100×,圖中比例尺為 0.1 mm
圖4.18 GGC 組之再生神經切片,放大倍數 400×,圖中比例尺為 0.05 mm
4.2.3 西方墨點法蛋白質分析
4.2.3.1 Synapsin Ι
Synapsin Ι 表現量 silicone 組最多,ENG 組次之 GGC 組最少。(如圖 4.19)
重複 5 次實驗後將所得結果經電腦軟體量化,以 SPSS 統計軟體進 行 one-way ANOVA 以及 Bonferroni 事後檢定,結果 Synapsin Ι 表現量 silicone 組較 ENG 及 GGC 兩組多,皆達顯著差異;ENG 組及 GGC 組 兩組間的差異則無統計意義。(如表 4.6、圖 4.20)
圖4.19 三種神經導管中再生神經之Synapsin Ι 表現量
表4.6 三種神經導管中再生神經之 Synapsin Ι 表現量比較
Silicone 組 ENG 組 GGC 組 F 值 P 值 事後檢定
平均值a 0.697384 0.143733 0.044831 39.798 0.000* Silicone 組>ENG 組
標準差 0.213119 0.01572 0.03085 Silicone 組>GGC 組
統計方法:one-way ANOVA;事後檢定:Bonferroni;*:P<0.05 a:平均值單位為 fold to actin
圖4.20 三種神經導管中再生神經之Synapsin Ι 表現量統計分析
4.2.3.2 GAP-43
GAP-43 表現量 silicone 組最多,ENG 組次之,GGC 組最少。(如 圖4.20)
重複 5 次實驗後將所得結果經電腦軟體量化,以 SPSS 統計軟體進 行 one-way ANOVA 以及 Bonferroni 事後檢定,結果 GAP-43 表現量 silicone 組比 ENG 及 GGC 兩組多,皆達顯著差異;ENG 組及 GGC 組 兩組間的差異則無統計意義。(如表 4.7、圖 4.22)
圖4.21 三種神經導管中再生神經之 GAP-43 表現量
表4.7 三種神經導管中再生神經之 GAP-43 表現量比較
Silicone 組 ENG 組 GGC 組 F 值 P 值 事後檢定
平均值a1.188945 0.254029 0.168214 27.769 0.000* Silicone 組>ENG 組
標準差 0.412553 0.037983 0.038838 Silicone 組>GGC 組
統計方法:one-way ANOVA;事後檢定:Bonferroni;*:P<0.05 a:平均值單位為 fold to actin
圖 4.22 三種神經導管中再生神經之 GAP-43 表現量統計分析
4.2.3.2 TGF-β
1TGF-β1表現量 ENG 組最多,GGC 組次之,silicone 組最少。(如圖 4.21)
重複 5 次實驗後將所得結果經電腦軟體量化,以 SPSS 統計軟體進 行one-way ANOVA 以及 Bonferroni 事後檢定,結果 TGF-β1表現量 ENG 組比GGC 及 silicone 兩組多,皆達顯著差異;GGC 組及 silicone 組兩組 間的差異則無統計意義。(如表4.8、圖 4.24)
圖4.23 三種神經導管中再生神經之 TGF-β1表現量
表4.8 三種神經導管中再生神經之TGF-β1表現量比較
Silicone 組 ENG 組 GGC 組 F 值 P 值 事後檢定
平均值a0.43316 1.697749 0.581192 87.500 0.000* ENG 組>Silicone 組
標準差 0.139405 0.218101 0.122208 ENG 組>GGC 組
統計方法:one-way ANOVA;事後檢定:Bonferroni;*:P<0.05 a:平均值單位為 fold to actin
圖4.24 三種神經導管中再生神經之TGF-β1表現量統計分析