由皮下移植腫瘤模式的實驗結果指出， CHM-1-P 能明顯的抑制 SKOV3 腫瘤之生長，因此委託國家衛生研究院進一步以原位移植卵巢癌 SKOV3 細胞膜式，測詴 CHM-1-P 對 ICR-Foxn1/nu SKOV3 tumor-bearing mice 存活時間之影響。實驗結果如圖 23 所示，經靜脈血管注射 10 次 CHM-1-P (10 和 20 mg/kg) 治療的卵巢癌小鼠，相較於對照組，其存活時 間明顯延長，平均存活率分別提昇達 142% 和 150%。
Figure 23 CHM-1-P prolongs the survival time of SKOV3/ICR-Foxn1/nu orthotopic xenograft model. Female nude mice (ICR-Foxn1/nu) were i.p.
inoculated with human ovarian cancer SKOV3 cells at 3× 106 cells per mice.
After 1 week, the tumor-bearing mice were administered 5, 10, and 20 mg/kg CHM-1-P intravenously via the tail vein on 5 days per week for 2 consecutive
weeks. Each value represents the survival ratio of the animals.
第四章 結論
CHM-1 對人類卵巢癌細胞有明顯的抗腫瘤活性，本研究主論述其抗 腫瘤作用之生化和藥理活性機制。由實驗發現 CHM-1 能以濃度依賴的方 式抑制多種不同癌症之細胞株，尤其是對人類卵巢癌 SKOV3 細胞之毒殺 作用最強，但對人類正常二倍體皮膚纖維原 Detroit-551 細胞之細胞毒性 則相對較弱，此結果初步指出 CHM-1 是安全、強效的治療卵巢癌藥劑。
本研究為首次報導 CHM-1能藉由DR5介導的調控機制誘發人類卵巢 癌SKOV3細胞之凋亡，主要根據如下之發現：1. CHM-1能誘發caspase-8 之活化；2. CHM-1能誘發DR5 和TRAIL之表現。由PARP 之蛋白質代謝 退化(Proteolytic degradation) 指出，CHM-1誘發人類卵巢癌SKOV3細胞之 凋亡之機制包括caspase的活化。CHM-1能誘發caspase-3和caspase-8之活 化，被活化的caspase-8會分裂並活化caspases之效應物，如caspase-3和 caspase-7，而誘導細胞凋亡。既有文獻證實p38能調控DR5的表現[33]，本 研究發現，SKOV3細胞經CHM-1處理6小時後，p38的磷酸化程度會增加，
p38磷酸化後會緊接著觸發caspase cascade的活化，由此推測在卵巢癌 SKOV3細胞，p38應是作用於caspase cascade之上游。根據以上之發現明 確的指出，CHM-1上位調節死亡接受器5之表現，並誘導TRAIL的表現，
且CHM-1誘發細胞凋亡之分子機制，與p38居間上位調節死亡接受器5之 表現有密切關聯，因此，CHM-1有潛力成為治療癌症的理想藥物。
由於卵巢癌主要局部發生於女性腹腔，臨床表現也相當獨特，傳統 的測量腫瘤總質量之藥物抗腫瘤活性評估方法，並無法做正確的評估。
有鑑於此，我們除應用傳統的皮下移植 SKOV3 腫瘤模式之外，還應用原 位移植腫瘤模式，以期對 CHM-1 在活體內的抗腫瘤活性做正確的評估。
皮下移植腫瘤模式之實驗結果指出，CHM-1 和 CHM-1-P 具有相同的抗腫 瘤效力，是安全、有效的抗腫瘤藥物。應用 IVIS 監控之原位移植腫瘤模 式指出，CHM-1(i.p) 除能抑制 SKOV3 ip1/luc BALB/c nude mice 之腫瘤 生長外，並能延長卵巢腺癌小鼠之壽命。以靜脈注射 CHM-1-P (i.v)治療 經原位移植腫瘤之 ICR-Foxn1/nu mice，CHM-1-P 亦能明顯增加 SKOV3 tumor-bearing mice 之存活期。
綜合以上的發現，證實CHM-1具有獨特之誘發SKOV3細胞凋亡的生 化和藥理活性機制，在活體內CHM-1和親水性之CHM-1-P同樣展現良好 的抗腫瘤活性，因此，值得進一步臨床詴驗評估，以發展成為治療人類 卵巢癌之理想藥物。