地耳草為傳統中草藥，其味甘、微苦，性涼，具有清熱利濕，消腫 解毒的功效，在民間用途十分的廣泛，用於治療急、慢性肝炎、闌尾炎 等症狀。主要用於治療傳染性肝炎、瀉痢、小兒驚風、瘡積、喉蛾、腸 癰、癤腫、蛇咬傷等(4,8-11)。對其藥理作用之研究有諸多報導，主要包括 以下幾個方面，茲將文獻整理如下：
1. 抗氧化作用。蔣等在研究中藥對大鼠離體肝臟脂質過氧化的影響中，
發現地耳草對大鼠離體肝臟MDA 生成有抑制作用，並呈量效關係。
抗脂質過氧化在保肝過程中起著重要作用，進一步證明了地耳草具有 保肝作用(73)。
2. 保肝作用：地耳草對 CCl4及D-Gal 所致的大鼠血清 ALT、AST 活性 升高有明顯的抑制作用，顯示其對大鼠急性肝損傷具有保護作用(74)。 口服給予小鼠不同濃度的地耳草水煎劑能不同程度地降低 CCl4所致 異常升高的小鼠血清中的 ALT、AST、NO、TNF-α、IL-6 含量，升 高 SOD 活性，並且改善肝臟組織的病理損傷(75,76)。地耳草中槲皮苷 (Quercetin-3-β-D-rhamnose)、異槲皮苷(Quercetin-3-β-D-glucoside)、地 耳草苷(Quercetin-7-β-D-rhamnose) 3 個黃酮類化合物均能顯著抑制 CCl4和D-氨基半乳糖胺(D-Gal)所致的大鼠血清 ALT 和 AST 升高,對 α-萘異硫氰酸酯(ANIT)所致的小鼠血清總膽紅素升高有明顯的降低 作用，顯示其均有保肝退黃作用(77)。地耳草注射液對氯仿(CCl4)所致 肝損傷有明顯保護作用，表明地耳草注射液可能有抗脂質過氧化，保 護肝細胞超微粒結構及細胞色素P-450 系統(78)，對醋氨酚肝中毒，地 耳草注射液也有保護作用，能提高肝細胞 GSH 的含量和保護微粒體 GSH 的活性，使生成的醋氨酚親電子代謝產物與 GSH 結合而排出，
從而抑制醋氛酚肝.民間常用地耳草治療肝炎脂質過氧化，致使肝臟 免疫受損害(79)。
3. 抑菌作用。地耳草對正常細胞無毒副作用，並有增強免疫功能的作
用，其中提取的地耳草乙素對牛型結核桿菌(無毒株)、肝炎雙球菌、
金黃色葡萄球菌、鏈球菌、結核桿菌、猪霍亂桿菌等均有不同程度的 抑制作用，特別是對牛型結核桿菌作用明顯(80)。地耳草煎劑對傷寒、
副傷寒有抑制作用，最低抑菌濃度為2.5-20%之間。地耳草靈素 A、
B、C（Sarothralen A,B,C）對金色葡萄糖球菌、蠟樣芽孢桿菌和偌卡 氏菌屬有顯著的抑制作用(81,82)。
4. 抗病毒作用。口服給予小鼠地耳草可明顯抑制 H3N2流感病毒引起的 小鼠肺組織發炎性病變，降低 H3N2流感病毒感染小鼠的死亡率(83)。 地耳草對第二型單純疱疹病毒(HSV-2)的複製有明顯的抑制作用，阻 止病毒複製週期中的吸附—穿入階段，呈現抗病毒活性(84)。
5. 抗瘧作用。地耳草素（japonicine）A 和 B 對鼠瘧伯式原蟲有顯著的 抑制作用(85)
6. 免疫作用。地耳草能明顯提高外周血嗜中性白血球(PMN)吞噬率及 T 淋巴細胞百分率，提高支氣管肺泡灌洗液(BALF)中 T 淋巴細胞百分 率，提高大鼠全身的特異性和非特異性細胞免疫功能，促進T 淋巴細 胞的分化與成熟，從而增強機體的特異性細胞免疫和免疫調節作用，
還能增強嗜中性白血球的吞噬殺菌功能(86,87)。
7. 抗痛風作用。地耳草提取物對尿酸(MSU)所致大鼠足爪腫脹有較好的 抑制作用，能減輕尿酸所致家兔急性關節炎炎癥，降低高尿酸血症模 型小鼠之尿酸值，有一定的抗炎作用(88)。
8. 抑制腫瘤作用：地耳草能夠抑制人低分化鼻咽癌細胞株 CNE-2 細胞 的增殖,能使 CNE-2 細胞阻滯於 S 期,可誘導 CNE-2 細胞發生一定程
度的凋亡(89,90)。地耳草能有效地抑制人類肝癌細胞株 HepG2 細胞增
殖，阻滯細胞周期進入 S 期(91)。地耳草對人舌癌細胞株 TSCCa 有明 顯的殺傷作用，並且隨藥物濃度的增加其殺傷能力增強(92,93)。地耳草 對人喉癌Hep-2、宮頸癌 Hela 和子宮頸癌細胞株也有抑制作用，其抑 制以及殺傷作用也與藥物濃度和作用時間的依賴性(94,95)。經超微結構
觀察發現，地耳草具有抗癌活性的原因主要是干擾癌細胞粒線體和粗 糙內質網之正常運作，使癌細胞無法複製
第六節 植物組織培養學之考察
「生物技術」(biotechnology)，一詞源於英文 bio(生命、生物)及 technology (工藝、技術)兩字，涵蓋了醫藥工業、食品發酵工業、化學 工業、能源工業、礦業、農業及環境工程等。就應用層面而言，生物 技術乃是指利用生物細胞或其代謝物質製造產品及改進人類生活品 質的科學技術。因而蘇遠志教授將生物技術定義為：利用生物程序、
生物細胞或其代謝物質來製造產品及改進人類生活素質的科學技術
(96,97)。其中又以植物生物工程的興起，不僅為生理學、醫學、藥學、
遺傳學及化學等科學的基礎理論研究提供了新方法；更為這些科學的 發展及應用開闢了新途徑，因此受到世界各國高度重視。
植 物 組 織 培 養 係 利 用 植 物 體 的 細 胞 具 有 分 化 全 能 性 (totipotency)，即每個細胞具有該植物全部遺傳信息的特性，以及離體 細胞在適當培養條件下，具有發展成為完整植株的潛在能力，以人工 培養基在人為的環境中，進行植物體的器官、組織、細胞增殖或分化 培養之一種技術(96,98)。即利用植物體之組織或器官為培殖體(explant)，
如胚、花器、莖頂、生長點、芽體、葉、根、根莖、或其衍生的細胞 及原生質體等，在含有無機鹽類、糖類、植物生長調節劑等人工培養 基上，以無菌方式培養，並觀察其生理及型態之反應，得到大量的繁 殖個體或進行育種、生理等之研究與改良(98)。
植物組織培養的發展史可分成五個階段：
第一階段為思想準備期：可追溯至1667 年 Hooke 發現細胞開始，
此為生物學中首次出現細胞的概念。其後 1756 年 Duhamel 發現癒合 組織；1838 年 Schleiden 提出植物細胞學說；1839 年 Schwann 認為細 胞學說亦可適用於動物細胞範疇，提出了細胞是生物體的基本結構，
具有生理及發育上潛在全能性功能的論點，亦即每個細胞係一單位之 生活物質團塊，此論點遂成為植物組織培養研究的思想基礎(99)。
第二階段為理論奠基期：1902 年德國植物學家 Haberlandt 首次以
人工分離培養植物單細胞，提出植物單細胞具有分化全能特性的理 論，1908 年 Goebel 以薯蕷屬(Dioscerea sp. )及罌粟科紫菫屬(Corydalis sp. )為材料進行試驗，發現切口上部發芽，而下部長根，同時發現其 體細胞具有分化全能特性(100)。1904 年德國植物胚胎學 Hanning 以胡 蘿蔔為材料，首次獲得成功的胚培養，提早了植株的形成。1922 年 Knudson 報導將蘭花種子以無菌播種法成功的獲得植株。1925 年 Laibach 進行亞麻種間雜種幼胚培養，成功地得到了雜種植物。1933 年李等進行銀杏離體胚培養，可於3 mm 以上之胚長成小植株，並發 現胚乳抽出物能促進銀杏離體胚的生長，為後人利用植物體組織抽出 液促進培養物之生長，提供了試驗的根據，此階段由於分化細胞全能 性學說及許多學者的探索性實驗研究，獲得不少有價值的結果，讓後 來的學者有所依據，而邁入第三階段(99)。
第三階段為技術建立期：當1934 年 White 用無機鹽類、糖類和酵 母抽出物的培養基，進行蕃茄根尖離體培養，繼代培養建立了第一個 活躍生長的無性繁殖系之後，1937 年 White 發現維生素 B 群對培養之 離體根生長具有重要性，同時，Went 等發現 IAA 及其控制植物生長 中之作用，1942 年 Overbeek 等首次利用椰子汁培養蔓陀羅的幼胚，
此液體胚乳含豐富滋養胚生長的養分外，並認為對細胞的增殖有極佳 的效果，因此在培養基中添加未知成分的抽出物，該配方歸為自然培 養基(natural medium)，而椰子汁和其它抽出物至今仍被沿用。此階段，
由於 White、Gautheret 及 Nobecourt 等人，在基礎上建立了植物組織 培養的綜合培養基，其中包含無機鹽類、有機成分和生長調節因素，
這是隨後創立的各種培養基的基礎，成為當今各種植物組織培養的技 術基礎(99)。
第四階段為因應植物實驗形態學方面的需求，組織培養進入探討 調控細胞培養物器官分化之研究。1948 年 Skoog 與 Tsuei 在煙草莖切 段和髓培養研究中，發現腺嘌呤與腺苷可以解除培養基中生長素(IAA) 對芽的抑制作用，進而發現腺嘌呤與生長素的比例是控制芽體和根分
化的決定性因素之一(99)。1957 年 Skoog and Miller 調節 auxin 與 cytokinin 的使用濃度，得到再生植株(101)。1958 年 Steward 等學者將細 胞誘導成體胚(102)。而後陸續建立MS (Murashing and Skoog, 1962)、
White (White, 1963)、LS (Linsmaier and Skoog, 1965)、B5 (Gamborg et al., 1968)、N & N (Nitsch and Nitsch, 1969)、SH (Schenk and Hildebrandt , 1972)、N6 (Chu et al., 1975) 與 WPM (Lloyd & McCown, 1980)等綜合 性植物組織培養基(103)。此階段開始研究培養細胞的發生，同時證實細 胞培養的全能性，這是植物組織培養的關鍵時期，也是組織培養的全 盛時期。
自1950 年獲得培養細胞分化成功後，證明植物分化全能的特性，
以及每一個細胞均攜帶有完全的遺傳基因之理論，自此進入組織培養 的應用研究時期的第五階段。組織培養發展至今，已建立了一套完整 的植物組織培養技術，現正朝向擴大各種經濟作物上的研究，如加強 細胞生長、生化機理和遺傳變異的研究，將傳統植物組織培養帶入另 一個嶄新的遺傳工程世界(99,103)。
1974 年 Murashige 提出植物組織培養分成三大階段，即無菌培殖 體之建立、大量繁殖及移植前之瓶苗馴化(104)。由於植物組織培養具 有：1. 節省大量的空間及時間；2. 培養過程不受外在環境因子的影 響，且終年均可進行；3. 可重複性等三大優點。因此常被廣泛推展與 應用於下列範疇：
(1)利用莖頂培養技術於短時間內，可獲得無病毒苗及大量繁殖的植 株。
(2)利用花葯培養獲得單倍體植株，並利用染色體倍加技術，獲得同質 雙倍體植株，以縮短育種年限及提高選拔效率。
(3 以試管授精與胚培養技術，克服植物遠緣雜交不親合之障礙，拯救 瀕臨死亡或退化的幼胚。
(4)利用組織培養細胞從事誘變，以擴大親代種質或篩選有價值的新品 種。
(5)細胞培養形成之擬胚體，可製造人工種子或應用超低溫冷凍保存技
(5)細胞培養形成之擬胚體，可製造人工種子或應用超低溫冷凍保存技