結果

一、地耳草不定芽之誘導

（一）Cytokinins 對地耳草誘導不定芽之影響

將地耳草的莖節培養於含1 mg/L kinetin、ZT、BA 及 TDZ 之 MS 培養基中 28 天，觀察不定芽增殖的情形(表 1)。結果顯示，培養基添 加ZT 對芽體分化較為有利，當莖節培養於含有 1 mg/L ZT 之培養基 培養可誘導出較多的芽體，大於 2mm 的芽體約 8.3 個 (圖 14)。再將 此芽體團塊移植至不含生長調節劑之MS 培養基中 28 天，大於 2mm 的芽體增加至68.6 個(圖 15)，若無移植，則芽體不再生長。

（二）培殖體對地耳草誘導不定芽之影響

取自莖節所建立之無菌苗不同部位（葉片、葉柄、根及莖節）為 培殖體，接種於含有1 mg/L ZT 之 MS 固體培養基中，培養於光照條 件下，經28 天後誘導出不定芽(圖 16)。芽體誘導率最高者為莖節，可 達100%，其次為莖 66.7%，而以葉片之誘導率最低為 13.3% (表 2)。

（三）ZT 濃度對地耳草誘導不定芽之影響

將地耳草的莖節培養於含 0、0.5、1、2 mg/L 等不同濃度 ZT 之 MS 培養基中 28 天後，再將培植體移植至不含生長調節劑之 MS 培 養基中 28 天，觀察不定芽增殖的情形(表 3)。結果顯示，培養基不添 加 ZT 只能誘導 3.1 個芽體，而以添加 1 mg/L ZT 對芽體分化最為有 利，可誘導出65 個芽體 (圖 17)。

（四）基本鹽類對地耳草誘導不定芽之影響

將地耳草的莖節培養於含不同濃度1 mg/L ZT 之 MS 培養基中 28 天後，再將培植體移植至含B₅、MS、N₆、WPM 各種不同基本鹽類之 培養基中 28 天，觀察不定芽增殖的情形(表 4)。結果顯示，移植至 WPM 培養基之培殖體可獲得最多的芽體，達 96.4 個，其次是移植至

MS 培養基之培殖體，可獲得 62.1 個芽體，移植至 B₅培養基可獲得 37.8 個芽體。N₆培養基不適合地耳草不定芽之生長，只能獲得9 個芽 體。

（五）蔗糖濃度對地耳草誘導不定芽之影響

將地耳草的莖節培養於含不同濃度1 mg/L ZT 之 MS 培養基中 28 天後，再將培植體移植至含1%、3%、5% 不同蔗糖濃度之 WPM 培養 基中 28 天，觀察不定芽增殖的情形(表 5)。結果顯示，降低蔗糖濃度 可促進芽體生成，移植至含1% 蔗糖培養基之培殖體可獲得最多的芽 體，達115.3 個，隨著蔗糖濃度提高，獲得的芽體越少 (圖 18)。

二、地耳草不定芽之發根

（一）基本鹽類對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於含B₅、MS、N₆、WPM 各種不同基本鹽 類之培養基中 28 天，觀察不定芽發根的情形(表 6)。結果顯示，培養 於MS 培養基之不定芽發根數最多，平均達 10.6 條，根長也最長，平 均根長達1.43 cm 條，地上部也最健壯，平均株高達 4.35cm，故以 MS 基礎鹽類最適宜地耳草不定芽之發根(圖 19)。

（二）MS 基本鹽類濃度對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於含1/4X、1/2X、1X、2X 等不同濃度之 MS 基本鹽類培養基中 28 天，觀察不定芽發根的情形(表 7)。結果顯 示，2X MS 濃度之培養基不適合地耳草植株生長，使植株褐化死亡；

培養於1/4X、1/2X、1X MS 培養基之不定芽平均皆能獲得 7 條以上的 根數，但以培養於1/2X MS 培養基獲得的根最長，平均根長達 1.5 cm，

地上部位也最健壯，平均株高達 4.65cm，故以 1/2X MS 基礎鹽類最適 宜地耳草不定芽之發根(圖 20)。

（三）碳源對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於各含 3% sucrose、glucose 或 fruoctose 等不同碳源之1/2 MS 培養基中 28 天，觀察不定芽發根的情形(表 8)。

結果顯示，添加fruoctose 之培養基不適合地耳草植株生長，使植株褐 化死亡；培養於添加 sucrose 及 glucose 培養基之不定芽平均皆能獲得 3.5 cm 以上的植株，但以培養於添加 sucrose 培養基獲得的根最長，平 均根長達1.8 cm，發根數也最多，達 11.3 條，故以 sucrose 做為碳源 最適合地耳草不定芽之發根(圖 21)。

（四）蔗糖濃度對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於各含 1%、3%、5%、7%、9% sucrose 之1/2 MS 培養基中 28 天，觀察不定芽發根的情形(表 9)。結果顯示，

以添加 5% sucrose 之培養基最適合地耳草不定芽發根，獲得的根最 長，平均根長達1.9 cm，發根數也最多，達 13.1 條，植株也最高，平 均株高達5.3 cm，故以 5% sucrose 做為碳源最適合地耳草不定芽之發 根(圖 22)。

（五）Auxins 對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於各含 1 mg/L IBA、IAA、NAA、2,4-D 之培養基中28 天，觀察不定芽發根的情形(表 10)。結果顯示，培養於 添加1 mg/L IAA 培養基之植株獲得的根最長，平均根長達 1.49 cm，

發根數也最多，達10.7 條，其次是添加 IBA 之植株，平均根長達 1.31 cm；培養於添加 IAA 及 IBA 培養基之植株平均皆能再生 13 個以上的 側芽；NAA 及 2,4-D 不利於植株的生長與發根(圖 23)。

（五）Cytokinins 對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於各含1 mg/L kinetin、ZT、BA、TDZ 之 培養基中28 天，觀察不定芽發根的情形(表 11)。結果顯示，培養於添 加1 mg/L kinetin 培養基之植株獲得的根最長，平均根長達 2.09 cm，

側芽數也最多，達13.7 條；ZT、BA、TDZ 皆不利於植株發根，不定 芽基部長出似癒合組織的細胞團塊(圖 24)。

（六）Kinetin 濃度對地耳草不定芽發根之影響

將地耳草的不定芽培養於各含 0.5、1、2、4、8 mg/L kinetin 之 MS 培養基中 28 天，觀察不定芽發根的情形(表 12)。結果顯示，培養 於添加1 及 2 mg/L kinetin 之培養基皆適合植株的發根，平均根長約 1.8 cm，平均根數也達 9 條以上，但 2 mg/L kinetin 較利於側芽增生，

平均側芽數達18.3 條；1 mg/L kinetin 較利於植株長高，平均株高 5.4 cm；Kinetin 濃度太高反而不利於發根及植株生長(圖 25)。

三、地耳草癒合組織之誘導與繼代培養

（一）培殖體對地耳草癒合組織之誘導之影響

取自莖節所建立之無菌苗不同部位（葉片、葉柄、根及莖節）為 培殖體，接種於含有1 mg/L BA 之 MS 固體培養基中，培養於光照條 件下，經28 天後誘導出癒合組織(圖 26)。癒合組織率最高者為莖節，

可達100%，其次為莖 50%，而以葉片之誘導率最低為 13.3%(表 13)。

（二）光照對地耳草癒合組織生長之影響

將 200 mg 之地耳草癒合組織分別培養於光照(100 μE/m²s)與黑 暗下，經培養10 天後測其鮮重(表 14)。結果顯示於光照(100 μE/m²s) 與 黑暗下培養，其平均鮮重並無顯著差異，分別為 587.7 mg 與 587.6 mg，

但從外觀可見光照處理的癒合組織顏色呈現綠色部分偏褐，質地較 硬，黑暗下培養的癒合組織顏色呈現黃白色且質地較鬆軟(圖 27)，故 於黑暗下較適合地耳草癒合組織之繼代。

（三）不同凝膠物質對地耳草癒合組織生長之影響

將 200 mg 之地耳草癒合組織培養於含不同凝膠物質(0.4% gelrite 及 1% Difco agar)培養基中，經暗培養 10 天後測其鮮重(表 15)。結果顯 示培養於含 0.4% gelrite 培養基之癒合組織生長較好，其平均鮮重為

671.1 mg，而培養於含 1% Difco agar 培養基之癒合組織生長較差，其 平均鮮重為587.6 mg。因此得知以 gelrite 來作為凝膠物質，最適合地 耳草癒合組織之生長(圖 28)。

（四）基礎鹽類對地耳草癒合組織生長之影響

將200 mg 之地耳草癒合組織培養於含 B₅、MS、N₆、WPM 各種 不同基本鹽類之培養基中，經暗培養 10 天後測其鮮重(表 16)。結果顯 示培養於MS 培養基之癒合組織生長較好，其平均鮮重為 624.5 mg，

培養於 N₆培養基之癒合組織次之，其平均鮮重為 535.8 mg，培養於 WPM 培養基之癒合組織再次之，其平均鮮重為 516.8 mg，而培養於 B₅ 培養基之癒合組織則最差，其平均鮮重為 422.7 mg。因此以 MS 為基礎鹽類，最適合地耳草癒合組織之生長(圖 29)。

（五）MS 鹽類濃度對地耳草癒合組織生長之影響

將200 mg 之地耳草癒合組織培養於含 1/4X、1/2X、1X、2X 等 不同濃度之 MS 基本鹽類培養基中，經暗培養 10 天後測其鮮重(表 17)。結果顯示培養於 MS 培養基之癒合組織生長較好，其平均鮮重為 620.3 mg，培養於 1/2 MS 培養基之癒合組織次之，其平均鮮重為 454.6 mg，培養於 2 MS 培養基之癒合組織再次之，其平均鮮重為 404.1 mg，而培養於 1/4MS 培養基之癒合組織則較差，其平均鮮重為 300.8 mg。由此得知含 1 倍 MS 鹽類濃度之培養基，最適宜地耳草癒合組織 生長(圖 30)。

（六）碳源對地耳草癒合組織生長之影響

將200 mg 之地耳草癒合組織培養於各含 3% sucrose、glucose 或 fruoctose 等不同碳源之培養基中，經暗培養 10 天後測其鮮重(表 18)。

結果顯示培養於 sucrose 培養基之癒合組織生長較好，其平均鮮重為 745.0 mg，培養於 glucose 培養基之癒合組織次之，其平均鮮重為 739.5 mg，顯示 sucrose 及 glucose 皆適合地耳草癒合組織之生長，而培養於

fruoctose 培養基之癒合組織則最差，其平均鮮重為 418.3 mg。因此以 sucrose 為碳源，最適合地耳草癒合組織之生長(圖 31)。

（七）蔗糖濃度對地耳草癒合組織生長之影響

將200 mg 之地耳草癒合組織培養於各含 1%、3%、5%、7%、9%

sucrose 之培養基中，經暗培養 10 天後測其鮮重(表 19)。結果顯示培 養於含 3% 蔗糖培養基之癒合組織生長較好，其平均鮮重為 700.1 mg，其次為培養於添加 1% 及 5% 蔗糖培養基之癒合組織，平均鮮重 為534.3 mg 及 532.5 mg，蔗糖濃度過高或太低皆不利於地耳草癒合組 織生長，可得知含3% 蔗糖之培養基，對地耳草癒合組織生長最佳(圖 32)。

（八）地耳草癒合組織之生長曲線

將200 mg 癒合組織接種於含 1 mg/L BA 之 MS 固體培養基置於 黑暗中培養，每隔 5 天取出癒合組織稱重觀察，得生長曲線如圖 34 所示。地耳草癒合組織之鮮重隨培養天數增加而提高，在 15 天生長 達到最高峰，平均鮮重約915 mg。於最高峰後癒合組織生長緩慢或幾 乎不生長，重量不再增加且色澤逐漸轉成棕色，25 天時約有 50% 癒 合組織呈現暗褐色。35 天後，癒合組織褐化殆盡無法繼代培養(圖 33)。

以上結果顯示地耳草癒合組織繼代培養的時間以10 -15 天之間為佳。

（九）Gelrite 濃度對地耳草癒合組織生長之影響

將200 mg 之地耳草癒合組織培養於各含 0.3、%、0.4%、0.5%及 0.6% 不同 gelrite 濃度之培養基中，經暗培養 15 天後測其鮮重(表 20)。

結果顯示培養於含0.3% 及 0.4% gelrite 培養基之癒合組織生長較好，

其平均鮮重為924.3 mg 及 918.1 mg，培養於含 0.5% gelrite 培養基之 癒合組織次之，其平均鮮重為 819.3 mg，而培養於含 0.6% gelrite 培養 基之癒合組織生長較差，其平均鮮重為737.5 mg，gelrite 濃度越高越

其平均鮮重為924.3 mg 及 918.1 mg，培養於含 0.5% gelrite 培養基之 癒合組織次之，其平均鮮重為 819.3 mg，而培養於含 0.6% gelrite 培養 基之癒合組織生長較差，其平均鮮重為737.5 mg，gelrite 濃度越高越