實驗藥材

一、藥材

本實驗所使用之中藥材是購台中欣榮藥材行：

蘭科植物天麻 Gastrodiae elata Blume 之乾燥塊莖。

二、藥品及試劑

天麻素 (Gastrodin, GA) 本所吳金濱教授研究室抽出品，純度 90 % 天麻苷元 (ρ-Hydroxybenzyl alcohol, HBA) Sigma

乙醯胺酚 (Acteaminophenol, ASA) Sigma 甲醇 (Methanol, CH3OH) Merck

乙腈 (Acetonitrile) Merck

鹽酸 (Hydrochloric acid, HCl) Merck

氫氧化鈉 (Sodium hydroxide, NaOH) 德國 R.D.H.

磷酸二氫鉀 (Potassium dihydrogen phosphate, KH2PO4) Merck

*使用於高效液相層析儀之水 (Mini-Q) 經 Millipore 公司之 Milli-RO-60 製造之純水，再經Millipore 0.45µm 過濾膜過濾。

三、儀器及材料

1. 高效液相層析儀之裝備

幫浦 (Pump)：Jasco Model PU-980

偵測器 (Detector)：Jasco Model UV-970 Intelligent UV/VIS

積分儀 (Integrator)：Scientific Information Service Corporation Integrator 自動取樣機 (Auto Sampler)：Jasco Model AS-950

層析管 (Column)：Merck LichrospherR 100 RP-18e

保護層析管 (Pre-column)：Merck LichrospherR 4-4 guard column 2. 實驗室裝備

電子天平 (Electronic Balance)：Sartorius Type 1810 減壓抽氣機 (Aspirator)：Eyela, Aspirator A-2S, Tokyo

減壓濃縮機 (Vacuum Evaporator)： Rotavapor R-200, BUCHI 流動層噴霧包衣機 (Fluid Bed)：YC-FBDW-2

微量移液管 (Micropipette)：Socorex Transferpette 1-10µl 20-200µl 100-1000µl 觸動式震盪器 (Vortex)：Maxi Mix ⅡThermolyne Type 37600 Mixer 高速離心機 (Centrifuge)：Hettich Zentrifugen D-7200 Tuttlingen, Germany

(5000 rpm)

酸鹼測定儀 (pH meter)：Suntex Microprocessor pH meter Model-2200 純水製造裝置 (Water purification)：Operting and Maintenance manual For

RiOs^TM and Elix^TM Water purification System, Millipore Co. Operting and Maintenance manual Milli-Q^®, Millipore Co.

超 音 波 震 盪 器 (Ultrasonic Cleaner) ： BRANSON 5510, BRANSON ULTRASONIC Co., USA

過濾膜 (Filter)：Millipore Typa HV, 0.45 μm, Millipore Co.

硬度測試儀 (Hardness Tester)：AE-30 capacity 30 Kg model Aikoh 脆度測試儀 (Friabilator)：40J10GA-A Oriental (Japan)

厚度測試儀 (Thickness Tester)：PC-440 Teclock (Japan) 溶離機 (Dissolution Test)：DT-610 Jasco (Japan)

烘箱 (Oven Dryer)：KS-21AC Kwang Shan (Taiwan)

Moisture Determination Balance：FD-600 Kett (Japan)

篩網：20、30、50、80、100 mesh (篩號係按照平行篩線 2.54 cm 距離內 之篩孔數目訂定之)

3. 電腦/軟體設備

個人電腦：Intel Pentium IV 1.5G 雷射印表機：Laser Jet 1200.

微軟視窗 98：Microsoft^®98 SE.

微軟文書Microsoft^® (R) Word 2000.

微軟式計算表：Microsoft^® (R) Excel 2000.

圖形軟體：SigmaPlot2000 for Windows Version 6.0.

四、溶液及賦型劑製備

(一) 天麻素 (GA ) 及天麻苷元 ( HBA) 之 stock 標準溶液

1.天麻素：精稱相當於 6.4 mg 的 GA，置入一個 10 mL 的容量瓶中，添加 甲醇至刻度，得濃度為640 µg/mL 的 GA 標準溶液。使用時再 以甲醇倍半稀釋成所需濃度之標準溶液。

2. 天麻苷元：精稱相當於 6.4 mg 的 HBA，置入一個 10 mL 的容量瓶中，

添加甲醇至刻度，及得濃度為640 µg/mL 的 HBA 之標準溶 液。使用時再以甲醇倍半稀釋成所需濃度之標準溶液。

(二) 人工胃液、人工腸液、弱酸性溶液之配製

1.人工胃液：量取濃鹽酸 21 mL 加水稀釋至 3000 mL，經標化為 0.1N HCl，

作為溶離試驗用之人工胃液 (pH=1.2)。(不加 pepsin)。

2.人工腸液：量取磷酸二氫鉀 20.5 克，加 1N NaOH 67.2 mL，再加水稀釋 至3000 mL，經標化為 0.02M 磷酸鹽溶液 (pH=6.8)，作為溶 離試驗用之人工腸液。

3.弱酸性溶液：取磷酸二氫鉀 13.6 克，加水成 200 mL，配製成 0.5N 磷酸 二氫鉀，再加水稀釋至 900 mL，經標化為弱酸性磷酸鹽溶

液 (pH=4.5)，作為溶離試驗用之弱酸性溶液。

(三)天麻浸膏之製備

取天麻藥材 18 kg，切片磨成粉狀，將藥材放入二重鍋中加入 10 倍 體積之70% 乙醇於 60 °C 煮 1 小時，收集第一次濾液，藥渣再加入 10 倍 水量，再以60 °C 煮 1 小時，收集第二次濾液，合併兩次濾液。所得濾液 18 公升，再經減壓濃縮成浸膏，減壓濃縮機設定條件溫度為 45 ± 5 °C，轉 速為65 r.p.m.，萃取最後得到的浸膏約 1 公斤備用，4 °C 冰箱儲存之。圖 示於Fig.1。

(四)賦型劑的選擇

1.微晶纖維素 (Avicel 102) Mingtai Chemicals, Japan

2.澱粉 (Corn starch, Starch ) Borculo Domo Ingredients, Holland 3.磷酸鈣 (Dicalcium phosphate) Borculo Domo Ingredients, Holland 4.乳糖 (Lactose) Borculo Domo Ingredients, Holland

5.硬脂酸鎂 (Magnesium stearate) Wako Pure Chemical, Japan