研究方法

一、天麻成分之基本理化性質分析 1.實驗條件波長之選擇

取GA stock 標準溶液 (640 µg/mL) 1 mL，置於 10 mL 的容量瓶中，

加水 (Mini-Q) 稀釋成濃度 64 µg/mL，再逐步稀釋成濃度為 8 µg/mL。注 入石英貯液管1mL，以水為空白溶液，用紫外光分光光度法在 200~400 nm 波長之間掃描，判定在何波長有最佳的吸收峰。

2.不同波長下紫外光譜分析

取GA stock 標準溶液 (640 µg/mL) 1 mL，置於 10 mL 容量瓶中，加水 (Mini-Q) 稀釋成濃度為 64 µg/mL，再倍半稀釋成濃度為 32 µg/mL，另取 濃度為 64 µg/mL 的 GA 溶液 0.391 mL 加水至 1mL，配製成濃度 25 µg/mL。利用紫外光分光光度計測定含 GA 的 64、32、25 µg/mL 三種濃度 溶液的吸光值 (Abs)，觀察在不同波長 (200、220、240、260、280 及 300 nm) 下之吸光值並記錄之。重複操作三次，求其平均值及標準差。

3.標準溶液檢量線之製作

取GA stock 標準溶液(640 µg/mL)，分別加適量水 (Mini-Q) 稀釋成濃 度為64、32、16、8、4、2、1，0.5、0.25 µg/mL 的標準溶液。取 1mL 分 別注入石英貯液管，以水當空白溶液，利用紫外光分光光度計在固定波長 (220 nm) 下測定各濃度的吸光度 (Abs) ，由所得的 ABS 在和已知濃度的 標準溶液作線性迴歸以製作檢量線，以供溶離試驗方法之建立。

4.不同 pH 值下紫外光譜分析

以 0.1N 鹽酸溶液 (pH=1.2) 為人工胃液，及 0.02 M 磷酸鹽溶液 (pH=6.8)為人工腸液與弱酸性磷酸鹽溶液 (pH=4.5) 等三種不同 pH 值之緩 衝溶配製成含GA 濃度為 32 µg/mL 的溶液，測定其紫外光光譜，觀察在 不同pH 下之吸光值並記錄之。重複操作三次，求其平均值及標準差。

5.賦型劑對紫外光譜分析之影響⁽⁶⁷⁾

取 錠 劑 配 方 所 需 的 賦 型 劑 ， 包 括 Avicel 102 、 Starch 、 Dicalcium phosphate 和 Lactose，以處方所需賦型劑之最大量，用水 (Mini-Q) 溶解 之。在選定波長 220 nm 下，測量賦型劑有無吸光值的變化。重複操作三 次，求其平均值及標準差。

6.標準溶液安定性試驗⁽⁶⁸⁾

稱取適量的 GA，依上述方法配製成濃度分別為 64、32、2 μg/mL 的 標準溶液。於室溫分別在0、1、2、3、4、5、6 小時測定吸光值的變化。

重複操作三次，求其平均值及標準差。

二、天麻藥材乾粉、天麻濃縮液和天麻浸膏之含量測定 1.天麻濃縮浸膏製備

取半成品天麻濃縮液，經減壓濃縮數小時，溫度調節在45 ± 5°C，轉 速為65 r.p.m.，收集之後所得到的浸膏，並裝於塑膠瓶中，放置保存於 4 °C 冰箱備用。

2.含量測定

利用先前實驗對GA 和 HBA 的 HPLC 分析法的測定條件⁽⁹⁾，包括層 析管柱：Merck Lichrospher^® 100 RP-18e、保護層析管：Merck Lichrospher^® 4-4 guard colum、檢測波長：220 nm、移動相：Acetonitrile：H2O=2：98 (以 85% phosphoric acid 調 pH 2.83-2.85)、流速：0.7 mL/min、加入 20μl 乙醯 胺酚 (Acetaminophen, ASA 15μl/mL) 當內標、注入體積：20μl、分析時 間：15 min.，來檢測天麻藥材乾粉、濃縮液和浸膏的含量。另外天麻浸膏 含量測定，可用來計算一顆天麻錠劑所需浸膏多少mg

取未知濃度的天麻藥材乾粉5 mg 溶於含水 (Mini-Q) 10 mL 的容量瓶 中，於溶解後，以0.45 µm 濾模過濾，利用 HPLC 法測定以估算含量。重 複操作六次，求平均值。

取未知濃度的天麻濃縮液5 mL 於含水 (Mini-Q) 100 mL 的容量瓶中，

溶解後，以0.45µm 濾模過濾，利用 HPLC 法測定以估算含量。重複操作 六次，求平均值。

取未知濃度的天麻浸膏1 mL 於含水 (Mini-Q)100 mL 的容量瓶中，先 稀釋成100 倍，再取 1 mL 於含水 (Mini-Q) 100 mL 的容量瓶中，加移動 相再稀釋成100 倍，總共稀釋 10000 倍。溶解後，以 0.45µm 濾模過濾。

利用HPLC 法測定以估算含量。天麻浸膏含量測定，可用來計算一顆天麻 錠劑所需浸膏多少mg。重複操作六次，求平均值。

三、天麻浸膏顆粒之製備

本實驗是採用全膏製粒的組成，皆屬於濕式造粒法^{(55, 56)}製粒。處方依 Table 2 所示，其中 R1~R10 及 RB 採用盤式乾燥法，RA 採用流動床乾燥 法。分成兩個方法來比較加入不同賦型劑 (Avicel 102、Starch、Dicalcium phosphate、Lactose) 之顆粒和製成錠劑的物理性質。R1~R10，RA、RB 的 配方組成示於Table 2。

A. 本實驗盤式乾燥法過程可分成三個步驟：製粒、乾燥、整粒。

a.製粒

依配方比例，稱取適當量浸膏，再依各組成分之成分用量，按比例與 賦型劑混合。將所有成分混合物以20 mesh 篩網進行造粒。

b.乾燥

將新製粒出的中藥粒劑，平鋪於鐵盤中，使呈均勻分散的薄層，在恆 溫箱中40 ± 5℃進行乾燥，經 8 小時處理，乾燥。

c.整粒

乾燥所得的顆粒再以20 mesh 篩網整粒成大小均一的顆粒，在做基本 物性測試，以做為打錠前的準備。

B. 流動床乾燥法過程：

RA 稱取適量浸膏，加入一倍量溫水稀釋，與賦型劑置入台車內，調

整噴槍、設定噴液條件、設定溫控時間、控制風量、風壓、儀表指示、啟

phosphate Lactose Starch Total mg 260 120 80 40 0 500

四、天麻浸膏顆粒之物性測定

2.顆粒密度 (particle density) 之測定

取 100 mL 的量筒，稱其重量。將預測之顆粒充填入量筒至 100 mL 刻 度，然後稱其總重量。用拍擊方式振盪 10 分鐘後紀錄其體積，依公式分 別計算鬆密度 (Bulk density) 和緊密度 (Trapped density) ，所得之值可用 於計算壓縮性指數 (Compressibility index) 公式如下。重複操作三次，求 其平均值及標準差。Table 4 為顆粒流動性與壓縮指數的關係，可作一參

Table 3 顆粒流動性與壓縮指數的關係(Carr 法)⁽⁴⁹⁾ 壓縮指數 (%) 流動性

5~12 極易流動(自由流動的顆粒)

12~16 易流動(自由流動的小顆粒) 18~21 流動(適度粉碎的顆粒)

23~28 較差(粉末)

28~35 差(黏著性粉末)

35~38 很差(黏著性較大的粉末)

>40 極差(黏著性很大的粉末)

3.顆粒粒徑 (particle size distribution) 之測定

使用一套由20、30、50、80 及 100 mesh 組成的標準篩，擺在上層的 篩孔最大，擺在底層的篩孔最小。將含不同賦型劑的顆粒劑型處方分別置 於最上層，經連續振盪五分鐘後，測量並紀錄每個篩網上滯留的顆粒重 量。顆粒的大小與藥物的溶離有相互的關係，因此造粒所產生的顆粒直徑 可以作為錠劑製造後，藥物溶離速率的預測指標⁽⁷¹⁾。重複操作三次，求其 平均值及標準差。

4.顆粒吸收水分(moisture sorption) 之測定

將含不同賦型劑的顆粒劑取五克重，置於 80 °C 烘箱一天，取出放置 於室溫下，於 0、30、60、90、120、150、180、360 min，分別於各時間 點監測重量變化，計算公式如下⁽⁷⁰⁾。求其水分吸收百分比(吸濕程度)重複 操作三次，求其平均值及標準差。

% Wa 100

Wb R= Wa− ×

Wa：顆粒乾燥之前的重量 Wb：顆粒乾燥之後的重量

5.含水量 (moisture content) 之測定

將含不同賦型劑的顆粒劑各取 5 克重，置入溫度為 80°C 的烘箱中。

於0、30、60、90、120 min，測量顆粒的含水量百分比。重複操作三次，

求其平均值及標準差。

五、天麻浸膏錠劑之製備

一般製造錠劑的方法有三種，即濕粒法、乾粒法與直接壓製法。每種 方法有各自的優、缺點。本實驗的製造錠劑方法採濕粒法。整粒後之顆粒 皆混合0.5 % 硬脂酸鎂為潤滑劑以利打錠。而錠劑壓製是利用單銃模的打 錠法⁽⁷²⁾，需選用適當銃模，調整打錠壓力。實驗操作上，銃模直徑為 8.5mm，打錠壓力固定在 10 kg/cm²。

設計成十種配方 (R1~R10) 的錠劑，是選擇不同的賦型劑及不同含量 和天麻浸膏組成，主成分 (GA) 含量固定為 25 mg。每顆錠劑總重為 500 mg。分別以 Avicel 102、Starch、Dicalcium phosphate 和 Lactose 為賦型劑 之不同配方錠劑，依濕式造粒法造粒。各種配方內容見Table 2。

另外設計成兩種配方 (RA 和 RB) 的錠劑，分別採用流動床乾燥法和 盤式乾燥法製粒。組成依 R4 處方設計，大約一倍量天麻浸膏混合兩倍量 的賦型劑造粒。配方內容如Table 2 所示。每顆錠劑以 500 mg 計算，經換 算主成分 (GA ) 應含 16.89 mg。錠劑的物性也進行相關試驗。

六、天麻浸膏錠劑的物性測定

本實驗錠劑物性的研究⁽⁶⁰⁾包含了硬度試驗、厚度試驗、重量差異試 驗、含量均一度試驗、脆度試驗、崩離度試驗、溶離試驗、溶出度均一性 試驗、錠劑之安定性試驗等。

1.硬度試驗 (Hardness test)

在生產中常用經驗檢查方法，即將錠劑置中指與食指間，以拇指輕 壓，根據錠劑的抗壓程度，大概了解錠劑的硬度，做為第一階段的篩選。

通過後再進一步測試錠劑的硬度。含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取十顆 錠劑，使用Monsanto hardness 測試儀器測定硬度，Monsanto hardness 測試 儀器具有刻紋握把之螺旋裝置，由旋轉螺旋柱壓來壓錠，以壓碎錠劑時，

在彈簧所能承受的壓力下來測量錠劑的硬度。其單位為 (kg)。重複操作六 次，求其平均值及標準差。

2.厚度試驗 (Thickness test)

含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取十顆錠劑，使用Micrometer 測試儀 器，測量錠劑厚度，單位為 (mm)。重複操作六次，求其平均值及標準差。

3.重量差異試驗 (Weight variation test)

含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取二十顆錠劑，分別以天秤稱重，並 計算其平均重量，以每一錠之重量與平均重量的差異計算，兩者差異若超 過重量差異百分率5 %，不得超過兩粒，且不能有任何錠劑有超過 5 %之 一倍者。其單位為 (mg)。重複操作六次，求其平均值及標準差。

4.含量均一度試驗 (Content uniformity test)

含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取十顆錠劑，分別置於1000 mL 之容 量瓶中，以水 (Mini-Q) 超音波振盪溶解，取適量上清液過濾後，利用 HPLC 法測定。不同配方錠劑中GA 含量。

依中華藥典規定含量須在85.0 ~ 115.0 %之間 (製品之平均含量或效 架規定為100.0 %)，且相對標準差 R.S.D. (Relative standard deviation)必須 小於 6.0 %，及符合含量均一度試驗。如有一顆錠劑超出上述含量範圍，

但所有十顆錠劑含量均未超出標誌含量之75.0 ~ 125.0 %，或相對標準差超

過 6.0 %，或上兩項均不符規定，則取另外二十顆錠劑予以測定。如合計 三十顆錠劑含量僅一顆超過標誌含量之85.0 ~ 115.0 %，但均為超出 75.0 ~ 125.0 %，三十顆錠劑之相對標準差異為超過 7.8 %，及符合含量均一度試 驗。

5.脆度試驗 (Friability test)

含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取十顆錠劑先秤重，放在 Friabilator 內，以25 r.p.m.旋轉，轉四分鐘，然後再取出稱重，測量錠劑遭磨損情形，

計算其脆度(%)，計算公式如下。重複操作六次，求其平均值及標準差。

(%)

%

100 脆度 錠劑原先重量

錠劑遭磨損後重量 錠劑原先重量

=

− ×

6.崩散試驗 (Disintegration test)

含不同賦型劑的錠劑，各隨機選取六顆錠劑，置於崩散度測離器內。

六顆錠劑分別置於網架之每一玻璃管中，再加入塑膠片各一片，使固定錠 片，然後開動測定器，使網架上下升降按規定速度進行試驗。以水為浸溶 劑，並維持溫度37 ± 2 ℃。由於中藥錠劑無正文規定崩散時限，所以存留 於測定器篩網上之殘餘錠既已成稀軟團塊，且其中已無可察覺之硬質部 份，則可視為完全崩散。其單位為 (min.)。重複操作六次，求其平均值及 標準差。

7.溶離試驗 (Dissolution test)

溶離度試驗裝置^{(73, 74)}採美國藥典之paddle method﹝USP 25﹞，分別以

溶離度試驗裝置^{(73, 74)}採美國藥典之paddle method﹝USP 25﹞，分別以