第三章 研究結果
第二節 比較六種典型鈣黏蛋白及生殖腺類固醇
正常卵巢表面上皮細胞的表現
(Comparison of six classical cadherin subtypes and gonadal steroid recetpors in ovarian mucinous cystadenoma and OSE )
因為要比較 mRNA 的量,所以先要求出每一個典型鈣黏蛋 白及生殖腺類固醇接受體適當的 PCR cycle 數,GAPDH 為 22 cycles,其餘 cadherins 和 steroid receptors 為 30 cycles,
結果如 Fig. 19 至 Fig.29。六種典型鈣黏蛋白及生殖腺類固 醇接受體的 mRNA 經過電腦的比較及以 Wilcoxon signed ranks test 作檢定後,發現 E-cad 及 P-cad 在卵巢黏液性囊 腺瘤的表現比正常卵巢表面上皮細胞明顯增加,但 N-cad、
R-cad 及 Cad-6 卻明顯減少,至於 Cad-11 的表現兩者都沒差 異(Fig.30 及 Fig. 31);所有生殖腺類固醇接受體(ER-α、
ER-β、AR & PR)的表現,卵巢黏液性囊腺瘤都此 OSE 多 (Fig.32 及 Fig.33)。
Fig.19 GAPDH 的半定量(semiquantitative) RT-PCR 理想 cycl 數。
Fig.20 E-cad 的半定量 (semiquantitative) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性增加發現,當 cycle 數為 30 時,為理想
Fig.21 N-cad 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle
Fig.22 P-cad 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性增加發現,當 cycle 數為 30 時,為理想
Fig.23 R-cad 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle
Fig.24 Cad-6 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性增加發現,當 cycle 數為 30 時,為理想
Fig.25 Cad-11 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle (semiquantitative) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性 增加發現,當 cycle 數為 30 時,為理想的定量 cycle 數。
Fig.27 Estrogen receptor-beta (ER-β) 的 半 定 量 ( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線 性增加發現,當 cycle 數為 30 時,為理想的定量 cycle 數。
Fig. 28 Progesterone receptor 的半定量( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性增加發現,當 cycle 數 為 30 時 , 為 理 想 的 定 量 cycle 數 。
Fig.29 Androgen receptor(AR)的 半 定 量 ( semiquantitative ) RT-PCR 理想 cycle 數。由圖中的線性增加發現,當 cycle 數 為 30 時 , 為 理 想 的 定 量 cycle 數 。
28 30 32
0 1 2 3 4 5
6 Androgen receptor
Number of cycles
Relative optical density
Fig.30 比較 E-cad、N-cad 及 P-cad mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正 常卵巢表面上皮細胞的表現。圖中 a 表示 negative control,
b 為正常卵巢表皮上皮細胞,c 為卵巢黏液性囊腺瘤。DNA marker(M) 在 gel 的 最 左 邊 。 Photographs of ethidium bromide-stained gel 上 都 有 顯 示 用 specific primers ( E-cad、N-cad 及 P-cad)所生成的 PCR products。而 E-cad、
N-cad 及 P-cad 分別位在 361、373 及 357 base pairs 的位 置上,而 GAPDH 則位於 359 base pairs 的地方。每一個 cadherin subtype 的 absorbance value,都會以相對應的 GAPDH 作 標 準 化 (normalized) , 算 出 他 們 的 比 值 後 , 以 Wilcoxon signed ranks test 作檢定,最後所得到的結果以 Bar chart 的方法呈現(* 代表 p < 0.05)。結果發現 E-cad 及 P-cad 的 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤的表現比正常卵巢表面 上皮細胞明顯多,而 N-cad 則明顯減少。
Fig.30 比較 E-cad、N-cad 及 P-cad mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正
Relative ratio of cadherin/GAPDH
* *
*
cadherins
GAPDH
Fig.31 比較 R-cad、Cad-6 及 Cad-11 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及 正常卵巢表面上皮細胞的表現。圖中 a 表 示 negative control,b 為正常卵巢表皮上皮細胞,c 為卵巢黏液性囊腺 瘤 。 DNA marker(M) 在 gel 的 最 左 邊 。 Photographs of ethidium bromide-stained gel 上都有顯示用 specific primers ( R-cad、Cad-6 及 Cad-11)所生成的 PCR products。
而 R-cad、Cad-6 及 Cad-11 分別位在 291、275 及 742 base pairs 的位置上,而 GAPDH 則位於 359 base pairs 的地方。
每一個 cadherin subtype 的 absorbance value,都會以相 對應的 GAPDH 作標準化(normalized),算出他們的比值,以 Wilcoxon signed ranks test 作檢定,最後所得到的結果 以 Bar chart 的方法呈現( * 代表 p < 0.05)。結果發現 R-cad 及 Cad-6 的 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤的表現比正常卵巢表 面上皮細胞明顯減弱,而 cad-11 則無明顯差異。
Fig.31 比較 R-cad、Cad-6 及 Cad-11 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正
Relative ratio of cadherin/GAPDH
*
*
Cadherins
GAPDH
Fig.32 比較 ER-α、ER-β 及 PR mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正常 卵巢表面上皮細胞的表現。圖中 a 表示 negative control,
b 為正常卵巢表面上皮細胞,c 為卵巢黏液性囊腺瘤。DNA marker(M)在 gel 的最左邊。Photographs of ethidium bromide-stained gel 上都有顯示用 specific primers (ER-α、ER-β 及 PR )所生成的 PCR products。而 ER-α、
ER-β 及 PR 分別位在 263、259 及 741 base pairs 的位置 上,而 GAPDH 則位於 359 base pairs 的地方。每一個 steroid receptors 的 absorbance value,都會以相對應的 GAPDH 作標準化(normalized),算出他們的比值後,以 Wilcoxon signed ranks test 作檢定,最後所得到的結果以 Bar chart 的方法呈現(* 代表 p < 0.05)。結果發現 ER-α、ER-β 及 PR 的 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤的表現比正常卵巢表面上 皮細胞明顯增多。
Fig.32 比較 ER-α、ER-β 及 PR mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正常
Relative ratio of steroid receptor/GAPDH
Steroid receptors
GAPDH
Fig.33 比較 AR mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正常卵巢表面上皮細 胞的表現。圖中 a 表示 negative control,b 為正常卵巢 表皮上皮細胞,c 為卵巢黏液性囊腺瘤。DNA marker(M)在 gel 的最左邊。Photographs of ethidium bromide-stained gel 上都有顯示用 specific primer (PR )所生成的 PCR product。而 AR 位在 365 base pairs 的位置上,而 GAPDH 則位於 359 base pairs 的地方。AR 的 absorbance value,
會以相對應的 GAPDH 作標準化(normalized),算出其比 值,以 Wilcoxon signed ranks test 作檢定,最後所得到 的結果以 Bar chart 的方法呈現( * 代表 p < 0.05)。結 果發現 AR 的 mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤的表現比正常卵巢 表面上皮細胞明顯增多。
Fig.33 比較 AR mRNA 在卵巢黏液性囊腺瘤及正常卵巢表面上皮細
Relative ratio of steroid receptor/GAPDH
*
androgen receptor
GAPDH