本研究以 RT-PCR 和基因定序在卵巢良性黏液性囊腺瘤的檢體 中確認有六種鈣黏蛋白存在，也就是 E-cad、N-cad、P-cad、R-cad、
Cad-6 及 Cad-11。Patel 等人的報告也同樣指出這六種鈣黏蛋白存在 於正常卵巢表面上皮細胞和卵巢癌組織中[Patel IS et al.2003]。
由於鈣黏蛋白主導組織、器官的形態學表現，因此我們推斷這六種鈣 黏蛋白的消長導致 OSE 化生(metaplasia)或異生(dysplasia)成不同 的卵巢上皮腫瘤。
E-cad 表現在一般正常的上皮細胞[Marrs JA & Nelson WJ.
1996]，但在正常卵巢表面上皮細胞的表現卻比較特別。有文獻指出 以免疫細胞染色檢測卵巢表面上皮細胞時，沒有發現 E-cad 蛋白質的 表現[Wong AST et al.1999; Auerseprg N et al.2001]，但是有文 獻以較敏感的 RT-PCR 方法，可以檢測出少量的 E-cad mRNA [Patel IS et al.2003] 。本研究利用 RT-PCR 的確檢測出少量的 E-cad mRNA 存 在正常 OSE，以這麼少量的 mRNA 可能無法轉譯(translation)成蛋白 質表現或是少到無法用免疫細胞染色來偵測。又有文獻指出有 E-cad 表 現 在 卵 巢 柱 狀 化 (columnar shape)上 皮 細 胞 [Auersperg N &
al.1998]。因此我們確信 OSE 是的確存在少量的 E-cad mRNA。
本研究顯示卵巢良性黏液性囊腺瘤的 E-cad mRNA 與 OSE 比較，
有明顯的增加(Fig.30)。表示 OSE 化生成黏液性囊腺瘤時，E-cad 基 因被強化(upregulation)。有文獻指出 E-cad 不但是密勒管上皮 (Mullerian epithelium)組織轉化的標記，同時也會誘導 OSE 細胞產 生密勒管上皮的化生[Marrs JA & Nelson WJ.1996; Auersperg N et al.1999; Ong A et al.2000]，根據他們的結論，再加上我們的研究 結果， E-cad 在卵巢黏液性囊腺瘤中的表現比正常卵巢表面上皮細 胞強很多，因此我們可以推論正常卵巢表面上皮細胞發生密勒管上皮 的化生，可能是卵巢黏液性囊腺瘤形成的機轉之一。
過去很多文獻指出 E-cad 消失或弱化(down-regulation)現象 存在於不同的惡性腫瘤，包括乳癌[Moll R et al.1993; Rasbridge SA et al.1993; Takayama T et al.1994]、胃癌[Mayer B et al.1993;
Yasui W et al.1995]、肺癌[Bringuier PP et al.1993; Bohm M et al.1994,]等；對於卵巢癌的研究，大部分的文獻都認為分化愈差、
分期愈後的卵巢癌，其 E-cad 的表現愈弱[Davies BR et al.1998;
Fujioka T et al, 2001; Patel IS et al.2003]，因此 E-cad 被視
為癌症抑制積基因。本研究顯示黏液性囊腺瘤的 E-cad 基因反而被強 化，可能與它的良性特質有關。
N-cad 屬於 typeI 典型鈣黏蛋白，是中胚層細胞與細胞間接合的 主要物質[Peralta SA et al.1995; Gulati R & Peluso JJ.1997; Wong AST et al.1999]，它會形成不穩定的 junction[Hazan RB et al.
2000]，因此可促進細胞的移動。最近的文獻顯示 N-cad 的過度表現，
會 增 加 乳 癌 的 侵 犯 力 [Nieman MT et al.1999; Hazan RB et al.2000]。文獻指出 N-cad 是 OSE 主要的鈣黏蛋白之一[Peralta SA et al.1995; Gulati R & Peluso JJ.1997; Wong AST et al.1999]。本 研究顯示黏液性囊腺瘤的 N-cad mRNA 量與 OSE 比較，的確有顯著的 減少(Fig. 30)。Peralta 的報告也指出黏液性腫瘤有很強的 E-cad 表現，卻沒有 N-cad 蛋白質表現[Peralta SA et al.1997]。我們的 研究顯示 N-cad mRNA 在黏液性囊腺瘤只是減少並沒有完全消失。其 間的差異可能是我們使用較敏感的 RT-PCR 而他們是用免疫細胞染色 法。
有研究指出 N-cad 的不同表現可以主導不同腫瘤的形成，例如 N-cad 的強化表現與腎上腺惡性 pheochromocytoma 有關，而其弱化
表現則與腎上腺 adrenocortical carcinoma [Khorram-Manesh A et al.2002] 及胃癌[Yanagimoto K et al.2001]有關。我們推論 N-cad 的弱化表現(down-regulation)應該與 OSE 化生成黏液性囊腺瘤的形 成有關。
至 於 P-cad ， 文 獻 顯 示 它 主 要 表 現 在 複 層 上 皮 細 胞 (Stratified epithelium)的副基底層(parabasal layer)，這與細胞 的分化有關[Shimoyama Y et al.1989]。我們這個研究顯示 P-cad mRNA 在黏液性囊腺瘤的表現與 OSE 比較，有非常明顯的增加(Fig.30)，我
們知道 P-cad 的蛋白質不存在於正常的 OSE 中[van der Linden PJ et al.1994; van der Linden PJ et al.1995; Wong AST et al.1999]。只有文獻以較敏感的 RT-PCR 方法，可以檢測出少量的 P-cad mRNA [Patel IS et al.2003]。本研究在正常的卵巢表面上皮 細胞中的確只偵測到微量的 P-cad mRNA，以如此微量的 mRNA 應該可 以推斷 OSE 無 P-cad 蛋白質表現。反觀黏液性囊腺瘤的 P-cad mRNA 與 OSE 比較，有非常顯著的增加(Fig.30)。愈來愈多的文獻顯示 P-cad 的過度表現可能和乳癌[Rasbridge SA et al.1993; Peralta SA et al.1999; Paredes J et al.2002]、胃癌[Shimoyama Y et al.1991;
Yasui W et al.1993]、子宮頸內皮贅生(cervical intraepithelial neoplasm)[Han AC et al.2000]，及子宮內膜癌[Stefansson IM et
al.2004]的發生和不良預後有關。Chen 及 Van der Linden 等人報告 P-cad 可能與子宮內膜異位症的發生有關[van der Linden PJ et al.1994; Chen GT et al.2002]。還有 Patel 等人指出 P-cad 不但在 卵巢癌有表現，且分期愈後其表現愈強[Patel IS et al.2003]。對 於 P-cad 與婦癌的研究，過往的文獻都認為 P-cad 會存在於密勒管上 皮的組織及卵巢癌的細胞中，卻不存在於正常卵巢表面上皮細胞，因 此卵巢表面上皮出現 P-cad 的表現時，可能暗示這些細胞有病變的傾 向[van der Linden PJ et al.1994; van der Linden et al.1995; Wong AST et al.1999; Patel IS et al.2003]。本研究也顯示卵巢黏液性 囊腺瘤的 P-cad mRNA 比 OSE 有非常明顯的增加，因此 P-cad 有可能 是上皮細胞的致腫瘤因子。
R-cad (Cad-4)也是屬於 type-I 鈣黏蛋白，最早從雞的角膜分離 出來，它被認為與橫紋肌[Rosenber P et al.1997]及腎臟[Dahl U et al.2002]的形成有關。雖然在文獻上很少關於 R-cad 的研究，因 此 R-cad 的生物機能並不是很清楚。但是本研究發現 R-cad 在 OSE 的 mRNA 量很高，顯示它是 OSE 主要的鈣黏蛋白。卵巢黏液性囊腺瘤中 的 mRNA 量，比正常 OSE 明顯的減少。因此我們認為卵巢黏液性囊腺 瘤的形成與 R-cad 減少有關。
Cad-6 屬於 type II 典型鈣黏蛋白，過往的研究發現 Cad-6 會 存在於腎臟的遠曲小管和腎細胞癌(renal cell carcinoma)中，而 Cad-6 的表現異常會與腎細胞癌的預後有直接的關係[Shimazui T et al. 1996; Shimazui T et al.1998]。Stewart 等人利用 Madin-Darby canine kidney system 作實驗發現，cad-6 表現減少的細胞其移動性 會增加[Stewart DB et al.2000]，表示 cad-6 減少或消失與腎癌細 胞轉移有關。Grant 等人的論文中指出，Cad-6 會存在於卵巢表皮細 胞中，對於卵巢癌的進展是一個抑制因子[Grant C et al.2001]。我 們的研究發現 Cad-6 在良性卵巢黏液性囊腺瘤中的表現，也遠比正常 子宮內膜蛻膜化的過程中扮演關健的角色[Chen GT et al.1999]。同 時也發現人類子宮內膜的 cad-11 表現，的確受生殖腺類固醇荷爾蒙 的調控[Chen GT et al.1998; Chen GT et al.1999]。在腫瘤方面，
有文獻指出 Cad-11 的表現與胃癌發生有關[Shibata T et al.1996]
或與乳癌的侵犯性有密切的關聯[Pishvaian MJ et al.1999; Felte
CM et al.2002] 本研究發現 Cad-11 的表現，在卵巢表面上皮細胞與 卵巢黏液性囊腺瘤之間沒有差異，因此它在卵巢黏液性囊腺瘤的形成 中不是關鍵的角色。
人類的卵巢表面上皮細胞具有賀爾蒙接受體，因此是一個 steroid responsive tissue [Karlan BY et al.1995; Bai W et al.
2000; Edmondson RJ et al.2002]。由於卵巢黏液性囊腺瘤一旦形成 以後會長得快又大，因此我們認為可能和賀爾蒙刺激有關。本實驗是 透過檢測生殖腺賀爾蒙接受體 mRNA 的表現，間接去探討生殖腺荷爾 蒙在卵巢黏液性囊腺瘤形成中所扮演的角色。
本報研究發現雌激素接受體包括ER-α及ER-β，黃體酮接受體 (PR)及雄激素接受體(AR)其mRNA的表現，在卵巢黏液性囊腺瘤中都遠 比在正常卵巢表面上皮細胞強。回顧過往的文獻，大部分作者都認為 雄激素及雌激素會刺激卵巢表面上皮細胞的增生，減少其凋零，因而 造 成 腫 瘤 或 癌 症 的 發 生 [Bai W et al.2000; Edmondson RJ et al.2002]，而雌激素接受體及雄激素接受體在卵巢癌表皮細胞的表現 也比正常的卵巢表面上皮細胞高[Bergqvist A et al.1981; Vierikko P et al.1983; Lantta.1984]，他們結論與我們的研究發現有相互呼
應，因此我們大膽推論腫瘤的形成與雌激素接受體及雄激素接受體的 表現有密切的關係。至於是先有生殖腺賀爾蒙接受體過度表現才慢慢 刺激導致腫瘤形成，還是腫瘤形成之後才導致生殖腺賀爾蒙接受體過 度表現，尚待研究來証明。
至於黃體酮接受體的表現，一些文獻指出卵巢癌比正常的卵巢表 面上皮細胞偏低[Bergqvist A et al.1981; Vierikko P et al.1983;
Willcocks D et al.1983; Lantta.1984; Toppila M et al.1986;
Anderl P et al.1988; Edmondson RJ et al.2002]，但我們的結果 卻發現黃體酮接受體在黏液性囊腺瘤的表現，遠比正常卵巢表皮細胞 高。這些研究結果的差異，很可能是研究的對象為惡性腫瘤和良性腫 瘤的不同。從我們的實驗結果來推論，黃體酮接受體與卵巢黏液性囊 腺瘤的良性特性有關係。
Shiohara等人的論文中以免疫瑩光染色法發現卵巢黏液性囊腺 瘤中含有雌激素接受體及黃體酮接受體，而他們認為這兩種接受體的 出 現 ， 便 是 密 勒 管 上 皮 的 分 化 的 標 記 [Koishi I et al.1990;
Kawaguchi K et al.1991; Amso NN et al.1994; Shiohara S et al.1997]。而我們的實驗也發現卵巢黏液性囊腺瘤中，其雌激素接受
器及黃體酮接受體的表現遠比正常的卵巢表皮強，這點再一次印證我 們之前的推論：正常卵巢表面上皮細胞發生密勒管上皮的化生，可能 是卵巢黏液性囊腺瘤形成的重要機轉。
至於本研究的OSE取自45歲未停經且無卵巢癌家族史的個案，是 否年齡增加造成賀爾蒙接受體的表現減少？目前沒有文獻指出不同 年齡的OSE有不同賀爾蒙接受體表現，唯一會影響研究的細胞來源是 有卵巢癌家族史的OSE。與無卵巢癌家族史的OSE比較，有家族史的細 胞生長型態及某些分子的表現不同[Wong AST et al.1999; Auerseprg N et al.2001]。
總結來說，我們的研究發現卵巢黏液性囊腺瘤總共表現有六種典 型鈣黏蛋白也就是 E-、N-、P-、R-、6 和 11，雖然同樣這六種典型 鈣黏蛋白過去就有報告指出它們表現於 OSE，但這是首次完整報告典 型鈣黏蛋白在卵巢黏液性囊腺瘤的表現。再者，與 OSE 相較之下，我
? 發現卵巢黏液性囊腺瘤的E-和 P-cad的表現明顯增加而N-和 R-cad 及 cad-6 的表現則明顯減少，這些差異比我? 想像的還要複雜許多。
當然有可能 OSE 受到某些因素的影響產生這麼複雜的變化而化生成 黏液性囊腺瘤，不過我們也懷疑卵巢黏液性囊腺瘤的起源可能是 OSE
設[Shiohara S et al.1997]，這一點還需要更多研究來釐清。還有，
生殖腺賀爾蒙接受體包括 ER-α、ER-β、PR 和 AR 在黏液性囊腺瘤的
生殖腺賀爾蒙接受體包括 ER-α、ER-β、PR 和 AR 在黏液性囊腺瘤的