markers in surrogate tissues
surrogate marker in target tissues biomarkers of
exposure
biologically
effective dose biomarkers of harm outcome
圖一 環境暴露因子與疾病之關係modified from: J Natl Cancer Inst 2002; 94: 1435-1444 Urinary 8-OHdG
進一步分析氣喘與相關環境指標之關係。 北市國小共 150 間)，每小時交通流量分別介於 51116-142372 輛，22662-49777 輛和 1194-20900 輛之間。平均組內學校數為 42-48 間。以隨機方式依序抽取二及四年級，選 取各若干校以滿足每個流量 2000 人，共 6000 人，進行 ISAAC 氣喘問卷調查，預期之
標準問卷: 問卷內容由學童父母填寫。
(1) 研究對象基本資料: 包括學童個人及家庭基本資料（身份證字號、學校別、班級、
座號、性別及出生年月日、家庭成員回答者與學童關係、父母教育程度）。
(2) 環境暴露狀況：學童家中成員吸菸狀況、拜香習慣、居家附近空氣汙染程度、居家 家具擺飾、通風狀況。
(3) 生活習慣: 抽菸與否、運動習慣等。
(4) 藥物使用習慣 氣喘篩檢問卷：
新英格蘭篩檢表，篩檢三種疾病：氣喘病、過敏性鼻炎、異位性皮膚炎。由 父母判斷學童是否曾經歷相似問卷所敘述欲篩檢的疾病症狀，過去一年發生的次 數，最常發生的月份，此症狀對學童的影響程度，是否曾經由醫師診斷過。
a. 氣喘相關症狀：呼吸困難，伴有咻咻聲的頻率及嚴重程度、是否伴隨運動發生、一 年中發生此情形的時間、因此症狀而中斷睡眠的頻率，以及是否經醫師診斷為氣喘 病。
b. 過敏性鼻炎相關症狀：非感冒情況下所發生的打噴嚏，流鼻血或鼻塞之頻率及一年 中發生之月份、鼻病影響學童日常生活的程度，以及是否經醫師診斷確定患有鼻子 過敏的疾病）。
c. 異位性皮膚炎之相關症狀（皮膚疹子症狀、發生疹子之身體部位、發生疹子干擾睡 眠的頻率，以及是否經醫師診斷為濕疹）。
3.3 氧化傷害分析
3.3.1 尿液檢體收集與分析
：由氣喘篩檢問卷結果，進行病例對照研究。當篩檢問卷判定為氣喘者則列為本研究 病例組之選擇對象，而對照組則是就所有參加基線問卷篩檢為非氣喘學生，以隨機方式 抽取。分別收集研究對象之尿液檢體進行8-OHdG分析。
尿液收集至50 ml PP ( polyproylene ) 材質離心管，收集之尿液樣本暫存在4℃攜帶 式冰盒運至實驗室，儲存至-80℃直到進行分析。尿液中之creatinine則由醫院生化檢驗 室進行自動化分析。尿液常規檢查: 10ml 尿液用Uriscan® strip尿液試紙，以比色方式做 尿液中紅血球、膽紅素、尿膽素原、酮體、蛋白質、亞硝酸鹽、葡萄糖、酸鹼值之常規 檢查。
尿液中creatinine測定:取0.5ml尿液委託醫院生化檢驗室測量creatinine濃度，進行自 動化分析。若尿液樣本之creatinine濃度小於30 mg/dL 表示此尿量極度稀釋，則不列資 料分析。
3.3.2 尿液之8-OHdG分析
：☆ 尿液前處理:
樣本解凍後以轉速2000g , 10-15分鐘離心以移除Particulate matter。
☆ 尿液8-OHdG分析
使用商業化產品OXIS researchTM8-OHdG ELISA kit (Japan Institute for the Control of Aging)進行分析。其原理利用競爭型抑制法ELISA來偵測8-OHdG，結果將以 μg/g creatinine表示。
3.4 資料分析
資料以Excel建立問卷檔案，以SAS統計軟體初步描述各變項之基本特性，並校對 建檔數據之正確性，在依其分佈情形選擇合適的統計分析方法。
3.4.1 氣喘盛行調查 3.4.1.1 描述性統計
以人數(百分比)描述暴露低、中、高交通流量之研究對象之人口學基本資料、BMI、
生活習慣、環境暴露史、個人病史、尿液常規檢查等資料，並以X2檢定其差異。
3.4.1.2 分析性統計
比較三組之間健康狀況、氣喘相關疾病發病頻率、氣喘之盛行率，及氣喘相關危險 因子與疾病發生之勝算比。依自變項之特性（類別或是連續變項）選定合適的分析方法 進行。
氣喘相關危險因子分析，是就盛行率調查之氣喘及非氣喘小孩集體分析，非病例中 的擬似病例將區隔出來。資料分析將先以單變項分析比較氣喘小孩和非氣喘在個人及家 庭人口社會經濟及地區差異，學校交通流量、家庭生活環境包括二手菸、拜香、個人生 活習性、藥物使用等，其他過敏問題等都在評估之列。進而才以多變項分析評估校正其 他因子後，可否顯現學校周邊交通流量和氣喘相關程度。
3.4.2 病歷對照研究資料分析 3.4.2.1 氧化傷害分析
資料分析首先將觀察病例和對照學童就學地區汽車流量分布差異以說明對照之選 取是否達到隨機的目的。接著(1)依單變項分析比較病例對照的個人、家庭人口、環境
暴露背景、生活習性、藥物使用之相關，(2)比較過敏性差異，(3) 針對8-OHdG做較詳 細的比較，並觀察是否有劑量效應(dose response)存在。(4)進而就所顯示較具相關之因 子做多變項分析。這些分析均可估計其勝算比及相關95%可信區間。必要時亦可做分層 分析。
3.4.3 資料分析工具
資料分析是利用 SAS 8.0 （SAS Inc. Carey, N.C.）版套裝軟體及 Microsoft Excel 2003 軟體進行。以卡方檢定來探討基本人口學變項與氣喘之關係，兩組對於 8-OHdG 含量高低之的影響變項差異以 Student’s t-test 和 ANOVA 進行分析。依研究族群之 8-OHdG 濃度以平均值分為高低兩組，以邏輯式迴歸分析來探討環境暴露因子、生活 習慣及相關危險因子對於氣喘之影響。各種分析皆以顯著性大於 5%為準。