金黃色葡萄球菌鑑定

前述流程係針對空氣樣本中之S. aureus 進行菌種鑑定。對於檢測流程之鑑定 能力之評估，結果常以兩種方式呈現，亦即鑑定方法之準確度（敏感性與特異性）

與其方法於某一群體之預測值（陽性預測值與陰性預測值）（表 3）

表 3 Staphylococcus aureus 鑑定相關名詞 S. aureus or MRSA

Non-S. aureus

or non-MRSA Total

Positive result（＋） a c a＋c

Negative result（－） b d b＋d

Total a＋b c＋d a＋b＋c＋d

（1）S. aureus or MRSA：由鑑定方法確認為 S. aureus 或 MRSA 菌種之菌落數目

（2）Non-S. aureus or non-MRSA：由鑑定方法確認為非 S. aureus 或 MRSA 菌種之 菌落數目

（3）Positive result（＋）：測試結果呈陽性反應之菌落數目

（4）Negative result（－）：測試結果呈陰性反應之菌落數目

（5）敏感性（Sensitivity）= a / a＋b

（6）特異性（Specificity）= d / c＋d

（7）陽性預測值（Positive Predictive Value, PPV）= a / a＋c

（8）陰性預測值（Negative Predictive Value, NPV）= d / b＋d

敏感性（Sensitivity）係指該檢驗或培養基偵測 S. aureus 或 MRSA 之能力，換 言之，Sensitivity高之檢驗或培養基較不會遺漏實際上係 S. aureus 或 MRSA 之菌 落；特異性（Specificity）係指該檢驗或培養基能辨識非 S. aureus 或 MRSA 之能力，

換言之，Specificity高之檢驗或培養基較不會誤判實際上非 S. aureus 或 MRSA 之 菌落為陽性。陽性預測值（Positive Predictive Value, PPV）係指該檢驗或培養基於 陽性菌落之預測值，亦即試驗結果或培養基上為陽性反應時，其確實為 S. aureus 或MRSA 之比例；陰性預測值（Negative Predictive Value, NPV）係指該檢驗或培

養基於陰性菌落之預測值，亦即試驗結果或培養基上為陰性反應時，其確實非 S.

aureus 或 MRSA 之比例（Hsiao et al. 2011）。

S. aureus 之空氣採樣文獻中，關於其鑑定方法之Sensitivity 與 Specificity 研究 相當有限，唯2011 年 Hsiao 等人之研究曾以 Andersen 1-STG 搭配 CSA 於醫療院 所進行7 分鐘之空氣採樣，其樣本經多項生化測試搭配聚合酶連鎖反應（PCR）進 行 S. aureus 與 MRSA 之菌種確認，結果顯示其 Sensitivity、Specificity、 PPV 與 NPV 分別為 24.1%、91.2%、15%與 94.9%。Hsiao 等人推論，其 Sensitivity 偏低之 原因係可能與S. aureus 之生物活性受環境空氣其中其他菌種之干擾所致。該研究 亦指出選擇性培養基之PPV 係與 S. aureus 於空氣中之濃度高低成比例，因此若於 S. aureus 濃度較高之環境進行空氣採樣，該培養基之 PPV 應能提升（Hsiao et al.

2011）。

2.2.3.2 選擇性培養基相關鑑定研究

本研究針對曾用於進行S. aureus 空氣採樣之四種選擇性培養基（MSA、BPA、

CSA 與 CSM）進行效能評估，其各自搭配不同鑑定流程，分析不同樣本來源中之 S. aureus 時所呈現之鑑定能力如表 4所示。

1992 年 Van Enk 與 Thompson 首先評估於 MSA 中添加 6mg/L 之 oxacillin

（OMSA）時，其用於分離呼吸道檢體中 MRSA 之效果，該研究係將相同之臨床 樣本分別培養於非選擇性培養基與 OMSA，結果顯示 29 株可於 OMSA 分離出之 MRSA，有 9 株無法於非選擇性培養基中被分離出來，研究指出若臨床樣本中所含 MRSA 濃度較低，則將樣本培養於非選擇性培養基時，易因雜菌生長過多而導致 計數MRSA 菌落之困難，而 OMSA 可有效抑制雜菌且不傷害 MRSA 生長（Van Enk and Thompson 1992）。相較於 BPA、CSA 與 CSM 而言，直接添加抗生素於 MSA 中，以作為MRSA 初步分離之培養基之做法常見於 MSA，亦為其特色（Sadaka et al. 2009, Safdar et al. 2003, Merlino, Gill and Robertson 1996）。於 MSA 鑑定相關文 獻中，其所搭配之生化鑑定流程之 Sensitivity、Specificity、 PPV 與 NPV 較高者 列於表 4。

另，BPA 係台灣行政院衛生署疾病管制局所公布之傳染病標準檢驗方法中，

用於分離食品中毒案件之人體檢體中的 S. aureus。其鑑定流程係將糞便檢體或嘔 吐物少許檢體接種於BPA，於 37℃培養 24-48 小時後，取黑色陽性菌落進行革蘭 氏染色（Gram stain），其陽性反應者再接種於 TSA，於37℃培養 24-48 小時後，

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進行Staphylase test、凝固酶試驗（Tube coagulase test, TCT）與觸酶試驗（Catalase test），以上測試皆呈陽性結果之菌落再以API ID 32 STAPH 生化鑑定套組進行菌種 確認。BPA 亦為國際標準組織（International Organization for Standardization, ISO）

（ISO 1999）與美國食品藥物管理局（U.S. Food and Drug Administration, FDA）建 議使用於分離食品中 S. aureus 之選擇性培養基（Saito et al. 2011）。

在 CSA 部分，2007 年 Han 等人以表 4所列之鑑定流程分析臨床上呼吸道抹 拭樣本中S. aureus，並評估CSA 與 MSA 之鑑定能力，結果顯示搭配 CSA 之鑑定 方法，其Sensitivity 與 Specificity 可達 98%與 99.6%，然搭配 MSA 進行鑑定時，

其Sensitivity 與 Specificity 為 84.3%與 100%，研究指出 CSA 相較於 MSA 對於上 呼吸道抹拭樣本中S. aureus有較高鑑定敏感性（Han et al. 2007）。另，Carricajo 等 人以CSA 搭配表 4所列測試鑑定775 件臨床血液與尿液檢體中S. aureus，結果顯 示，單以CSA 與 Gram stain 進行鑑定而未加做其他生化測試時，其 Sensitivity 與 Specificity 為 98.5%與 97%，然輔以 Staphychrom coagulase test 時，其 Specificity 可增至100%，亦即進行適當之生化測試，可有效改善選擇性培養基鑑定能力不足 之問題。雖然CSA 相較於其他傳統選擇性培養基而言，所需成本較高，然其高鑑 定準確度亦可減少後續鑑定項目與鑑定時間（Carricajo et al. 2001）。

表 4 Staphylococcus aureus 之生化測試

Gram stain→Catalase test→

Blood agar→37℃, 24hrs→TSA→37℃, 24hrs→MSA→37℃, 24hrs→DNase test→

Tube coagulase test→PCR（nuc）

75%

MSA→37℃, 24hrs→Gram stain→Catalase test→Mannitol fermentation test→Gelatin hydrolysis→Mixed sugar fermentation test

→Voges-Proskauer test→Coagulase test→

β-haemolysis test→37℃, 24hrs →PCR：

16S rRNA（rrs）

BPA→PCR→Vitek compact 100%

/100%

- Kim and

Oh 2010 CSA

CSA→PCR→Vitek compact 100%

/100%

- Kim and

Oh 2010 CSA→37℃, 18-24hrs→Blood agar→

Catalase test→Staphaurex slide test→

Tube coagulase test

98%

/99.6%

- Han et al.

2007

CSA→Gram stain→Staphychrom coagulase test

98%

/100%

- Carricajo et al. 2001

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