實驗主題：細菌分離與鑑定、控制細菌生長的因子與藥物敏感性實驗
課程日期：2013/03/07 姓名學號：第二十五組 曾士剛 B101099101 實驗結果：
Physical Agents for Control of Microbial Growth Heat 左圖：上方為25度為control 下方為60度20分鐘 右圖：上方為80度20分鐘 下方為100度10分鐘 觀察：除了25度的control以外，其他都沒有長出菌落。 Electromagnetic Radiation---UV 左上圖：未加蓋照射UV30秒 右上圖：加蓋照射UV5分鐘control 左下圖：未加蓋照射UV3分鐘 右下圖：未加蓋照射UV5分鐘 觀察：未加蓋照射UV3分鐘以上的培養皿，均沒有菌落生長，在未加蓋照射UV30秒的培養皿上，
Staphylococcus aureus和Escherchia coli有少許菌落生成，而Escherchia coli相對多一些，Candida albicans 和Bacillus cereus無菌落生成。
Antibiotic Susceptibility Test
Drug Susceptibility(S) Resistance(R) Actual result(mm) Evaluation AMC ≧19 mm ≦20 mm Ec:21 mm Sa:38 mm Ec:S Sa:S
CIP ≧15 mm ≦21 mm Ec:25 mm Sa:28mm Ec:S Sa:S CLR ≧13 mm ≦18 mm Ec:0 mm Sa:23 mm Ec:R Sa:S OX-1 ≧10 mm ≦13 mm Ec:0 mm Sa:22 mm Ec:R Sa:S
左圖為E. coli在四種抗生素下培養的結果 右圖為S. aureus在四種抗生素下培養的結果 觀察：對於E. coli，AMC和CIP具有抑制效果，對於S. aureus，AMC、CIP、CLR和OX都有抑制效果。 實驗討論
Physical Agents for Control of Microbial Growth Heat 1. 為什們我們除了 control 以外，其他的處理皆沒長出菌落？ 應該是沒有塗上細菌，原因可能是塗抹的菌液過少，也有可能在進行溫度處理時試管中的細菌就 已經全數死亡，因為共用同一批細菌的 26 組也有相同的問題。 2. 為什麼不先將菌液塗在洋菜膠上後再加熱處理？ 塗上菌液倒送至加熱，這段期間細菌就已經開始生長，造成實驗誤差，另外洋菜膠會有融化的狀 況，細菌可能混在一起或是混在膠中而無法形成明顯菌落。 Electromagnetic Radiation---UV 3. 為什麼 B. cereus 完全沒有生長？ 推測是當初管中就沒有細菌或菌量過少，因為共用細菌的 26 組亦有相同的狀況。 4. 依據今天 UV 照射之實驗結果，市售紫外光照射殺菌飲水機殺菌之效果可信嗎？ 我覺得可信度是高的，照射三分鐘以上，細菌都沒有明顯生長，而且 30 秒鐘即有減緩的效果， 雖然透過水的時候光強度會下降，但是我覺得只要不偷工減料，紫外光照射殺菌飲水機殺菌之效 果應該是很好的。 5. 什麼時候適合 UV 光殺菌，什麼時候適合加熱殺菌？ 當器材不是和加熱的時候，可以用 UV 光殺菌，當我們實驗後還要抽取 DNA 檢驗時，就適合使 用加熱殺菌，DNA 耐溫高。
Antibiotic Susceptibility Test
6. 四個抗生素的特性分別為何？ 藥名 劑量 作用機制 Amoxicillin/ clavulanic acid (AMC) 30μg 屬於廣效性Penicillin類抗生素，作用機轉為結合至細菌細胞壁的 Penicillin binding protein，干擾細胞壁的合成。添加的clavulanic acid 為β-lactamase 抑制penicillinase 而使penicillin分解失效。
Ciprofloxacin (CIP) 5μg 屬於Quinolone 類藥物，可以在細菌生長及複製的過程中干擾DNA gyrase(topoisomerase Ⅱ)的作用，進而抑制DNA 的複製。
Clarithromycin (CLR) 15μg 屬於macrolide 類抗生素，藉由結合在細菌核糖體的50S 次單元以 抑制其轉譯，讓細菌的蛋白質合成停止。
Oxacillin (OX-1) 1μg 為penicillin 類抗生素，本身即具有抗penicillinase的功能，能有效治 療對penicillin 有抗藥性的金黃色葡萄球菌。
7. 為什麼不同的細菌抑制的狀況有所不同？
因為 E. coli 為革蘭氏陰性菌，抑制細胞壁肽聚醣合成的抗生素的效果就不大，而 S. aureus 為陽性 菌，細胞壁上重要的成分無法鍵結，細胞壁變薄穿孔，細菌死亡、無法生長。
參考資料：
微生物學：P. R. Murray, K. S. Rosenthal, and M. A. Pfaller. 2009. Medical Microbiology, 7th ed., Elsevier Mosby, PA.
