生物學上重要的工具
∼顯微鏡
顯微鏡的種類
光學顯微鏡
複式顯微鏡 解剖顯微鏡電子顯微鏡
穿透式電子顯微鏡 掃瞄式電子顯微鏡顯微鏡上的重要數值
放大率 magnification
物體放大的倍率
解像力 resolving power
區分兩個點的最短距離
比較表
顯微鏡種類 放大倍率 解像力 使用及優點 光學
顯微鏡
解剖顯微鏡 數十倍
（最小）
最小 解剖生物、具 立體感 複式顯微鏡 10∼2000倍 0.2μm 解像力較上者
大，普遍使用
電子 顯微鏡
穿透式電子 顯微鏡
數十萬至數百 萬倍（最大）
0.5 nm 最大
倍數及解像力 最大 掃描式電子
顯微鏡
數萬倍 3 nm 不需切片，可 觀察物體表面，
具立體感
µm nm nm
相位差顯微鏡
Phase contrast microscopy 分散干擾相位差顯微鏡
Differential interference contrast microscopy
螢光顯微鏡
Fluorescence microscopy 複式顯微鏡
機械台旋 鈕 鏡筒
機械台 鏡臂
接物鏡 細調節輪
電源開關鏡座 粗調節輪
亮度旋鈕 聚光鏡及
光圈 載物台 玻片夾及 撥桿 旋轉盤
接目鏡
運動神經元
解剖顯微鏡
dissecting microscope
TECHNIQUE RESULT
Brightfield (unstained specimen).
(a)
Differential-interference-contrast (Nomarski).
類似相位差顯微鏡，使用光學改良式設計來強調 密度的差異。
Fluorescence.
可顯現特定分子在細胞內的位置。螢光物質會吸收 短波長的紫外線輻射，並發出波長較長的可見光。
有些樣本原本就含有螢光物質，但是更常見到的情 形是將螢光分子標籤黏貼到我們所感興趣的分子上
。 Confocal.
利用雷射和特殊視覺來進行「光學切片」。唯有焦 點之狹窄深處內部的區域呈現黑色而非模糊。這種 顯微鏡一般搭配已經螢光染色的樣本使用。
50 µm
50 µm (d)
(e)
(f)
電子顯微鏡
ELECTRON MICROSCOPE
電子槍 電子束 電磁線圈 透鏡
標本 電磁線圈
透鏡
觀察螢幕 或照相板
電磁線圈 透鏡
電子偵 測器
穿透式電子顯微鏡
穿透式成像(×10,000) 掃瞄式電子顯微鏡
SEM opened sample chamber 掃瞄式成像∼花粉
掃瞄式電子顯微鏡
問題一：請問下面是由何種顯微鏡所拍攝出的花粉照片？
各種血球 導管
精子
標本的製備
玻片的種類
臨時標本
半永久性玻片標本
永久性玻片標本
臨時標本製備
永久性玻片標本製作
Fixation 固定
Embedding 包埋
Sectioning 切片
Staining 染色
Mounting 蓋片
固定
固定的目的是殺死細胞，防止細胞自體分 解，固定使原生質內流體的物質凝固而保 存組織。 常用的固定液是福馬林 formalin包埋
固定的組織經 ethanol 脫水，接下來用 chloroform, xylene 清洗，完畢後移入烘箱 內浸蠟 (paraffin wax) 經過 12 到 16 小時, 蠟滲入組織內取代水，以支持組織使切片時組織不致塌陷，浸蠟 完成後，將組織包埋在蠟內做成蠟塊(Block)
