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題目：女性肝細胞癌之病因研究：一個多醫學中心之病例對照研究
Etiology of Hepatocellular Carcinoma in Females: A Multicenter Case-Control Study 計劃編號：NSC 89-2320-B-002-104 執行期限：八十八年八月一日 至 八十九年七月三十一日 主持人： 于明暉 執行機構：台大公共衛生學院 中文摘要 本研究利用病例對照研究法探討雄性荷 爾蒙受體第一外基因CAG微星體重複次數 和CYP17 MspA1基因多形性對女性罹患肝 細胞癌危險性的作用。研究個案包括103 名女性病例和183名年齡和氏族頻率配對 的 女 性 對 照 個 案 ， 雄 性 荷 爾 蒙 受 體 和 CYP17基因多形性是以聚合酵素鍊鎖反應 為基礎的方法進行分析。研究結果發現 CYP17 基 因 多 形 性 的 分 佈 在 病 例 組 (A1/A1：20.2%，A1/A2：52.6%，A2/A2： 27.2%)和對照組(A1/A1：19.5%，A1/A2： 45.4%，A2/A2：35.1%)無顯著差異。單變 項分析顯示兩股染色體之雄性荷爾蒙受體 基因CAG重複次數均在22以上者的對比值 為2.0(95%信賴區間：1.2-3.5)，控制年 齡、慢性B/C型肝炎病毒感染狀態、和其 他可能的肝細胞癌危險因子後，對比值增 加為2.6(95%信賴區間：1.1-6.0)。分層 分析發現雄性荷爾蒙受體CAG重複次數均 在22以上者的對比值只有在B型肝炎慢性 感染者中達到顯著意義(對比值：3.7； 95%信賴區間：1.5-8.9)。 英文摘要
To determine whether genetic poly-morphisms in the CYP17 and androgen receptor (AR) were associated with hepatocellular carcinoma (HCC) in women, we conducted a case-control study of 103 female cases of hepatocellular carcinoma (HCC) and 183 female controls who were frequency matched with the cases on age and ethnicity. Analysis of the number of CAG repeats in exon 1 of the AR gene and the CYP17 MspA1 genetic polymorphism was
performed by polymerase chain reaction-based methods. No significant difference in the frequency distribution of the CYP17 MspA1 genetic polymorphism was observed between cases (A1/A1: 20.2%, A1/A2: 52.6%, A2/A2: 27.2%) and controls (A1/A1: 19.5%, A1/A2: 45.4%, A2/A2: 35.1%). The odds ratio (OR) for individuals carrying two AR CAG alleles with more than 22 repeats compared with those carrying only one allele or no alleles with more than 22 repeats was 2.0 (95% confidence interval [CI]: 1.2-3.5). After adjustment for age, chronic infection with hepatitis B or C virus, and other potential HCC risk factors, the OR was 2.6 (95% CI: 1.1-6.0). Stratification by status of chronic infection with hepatitis B or C virus revealed that the positive association between the AR CAG repeats and HCC risk was only present in chronic hepatitis B virus carriers (OR: 3.7; 95% CI: 1.5-8.9). 計劃緣由與目的 肝細胞癌的發生率具有相當顯著的性別 差異，這是長久以來即知的事實，男性對 女性的性比例大約是2-3倍左右(1)。初步 研究資料顯示，男女性肝細胞癌危險因子 的型態有所不同，但以往對於女性肝細胞 癌的流行病學研究相當稀少。 肝臟是性荷爾蒙代謝的主要器官，具有 雄性和雌性荷爾蒙受體(2，3)。雖然已有 相當多的動物實驗結果顯示性荷爾蒙可能 在肝細胞致癌過程中扮演重要的角色(4-8)，但除了口服避孕藥和肝細胞癌的相關 性報告以外(9-11)，目前有關內生性性荷 爾蒙和人類肝細胞癌的研究仍相當稀少， 或探討不夠深入。雄性荷爾蒙受體第一外 基因內具有CAG微星體多形性，CAG重複次 數和雄性荷爾蒙受體-雄性荷爾蒙結合的
2 複合物影響其他基因的轉錄作用呈反比 (12)，此多形性已被發現和前列腺癌及乳 癌的罹病危險性有關(13,14)。細胞色素 P450c17α酵素和性荷爾蒙的合成有關， 此酵素基因(CYP17)在5’端的非轉譯區具 有單一點突變(T→C)所造成的多形性存 在，可以用MspA1內切酵素辨識，目前這 個多形性和內生性荷爾蒙及乳癌的關係尚 相當不一致(14-17)。為探討性荷爾蒙相 關因子對女性肝細胞癌發展的影響，本研 究已在台北地區四家大型醫院廣泛的收集 女性肝細胞癌病例，本篇報告將初步分析 雄性荷爾蒙受體第一外基因CAG微星體重 複次數和CYP17基因多形性對女性罹患肝 細胞癌危險性的作用。 結果 病例組包括103名確診的女性肝細胞癌 病例，其中43名為B型肝炎帶原者，46名 為C型肝炎病毒抗體陽性。對照組由病例 親屬隨機選取，病例和對照組頻率配對的 條 件 為 年 齡 (10 歲 組 距 ) 和 氏 族 團 體 ( 閩 南、客家、或大陸其他省份)。共計選取 183名對照個案(包括血親114名和姻親69 名)。
CYP17 MspA1 基 因 多 形 性 之 A1/A1 、 A1/A2及 A2/A2基 因 型在 病 例組 的 頻 率 各 為：20.2%、52.6%和27.2%；在對照組各 為19.5%、45.4%和35.1%。以A1/A1基因型 為參考組，A1/A2及A2/A2基因型的對比值 各為1.12 (95% 信賴區間：0.60-2.08)和 0.75 (95% 信賴區間：0.38-1.47)。雄性 荷爾蒙受體CAG短基因(兩股染色體中重複 次 數 較 短 的 基 因 ) 在 病 例 組 的 中 位 數 為 22(範圍：12-28)；在對照組的中位數為 21(範圍：10-26)。長基因在病例組的中 位數為25(範圍：20-33)；在對照組的中 位數為24(範圍：20-32)。分別以短基因 10-26CAG重複次數範圍中的每一數值為分 組依據進行分析，發現分組依據切在CAG 重複22次以上，對比值開始明顯的上升， 在2倍以上，且隨切點的CAG重複次數增 高，對比值持續上升。 37.9%的病例之兩股染色體的雄性荷爾 蒙受體基因CAG重複次數均在22以上，對 照組中的比率只有22.9%。單變項分析顯 示兩股染色體之雄性荷爾蒙受體基因CAG 重 複 次 數 均 在 22 以 上 者 的 對 比 值 為 2.0(95% 信 賴 區 間 ： 1.2-3.5) ， 控 制 年 齡、慢性B/C型肝炎病毒感染狀態、和其 他可能的肝細胞癌危險因子後，對比值增 加為2.6(95%信賴區間：1.1-6.0)。分層 分析發現雄性荷爾蒙受體基因CAG重複次 數均在22以上者的對比值只有在B型肝炎 慢 性 感 染 者 中 達 到 顯 著 意 義 ( 對 比 值 ： 3.7；95%信賴區間：1.5-8.9)，在B和C型 肝炎病毒均無慢性感染者中，對比值為 2.2(95%信賴區間：0.5-10.6)，在C型肝 炎抗體陽性者中，對比值為0.7(95%信賴 區間：0.2-3.5)。 討論 細胞色素P450c17α在性荷爾蒙先質生 成的催化反應中，扮演著重要的角色，此 酵素的產生受到CYP17基因控制，稍早的 流行病學研究發現帶有MspA1基因多形性 之A2基因顯著增加血清總雌二醇和助孕脂 酮(progesterone)濃度(15)，並發現攜帶 A2 基 因 的 女 性 之 乳 癌 危 險 性 顯 著 較 高 (16)。但是最近一個對乳癌的大型病例對 照研究，並未發現CYP17基因型和乳癌的 危險性有關，但分析基因型和性荷爾蒙濃 度的關係，仍舊發現帶有A2/A2基因型者 和A1/A1基因型比較，具顯著較高的女性 荷 爾 蒙 濃 度 (17) 。 根 據 本 研 究 對 照 組 CYP17基因型的分佈，台灣一般族群帶有 A2基因的頻率較日本人和歐美民族均高， 本研究並未發現CYP17 MspA1基因型和女 性罹患肝細胞癌的危險性具顯著相關，雖 然帶有A2/A2基因型者具有較低的相對危 險性估計值，似乎和動物實驗發現內生性 雌性荷爾蒙降低肝細胞癌危險性的結果相 當一致。 男性肝細胞癌的發生率高於女性，也可 能和男性荷爾蒙的作用有關，本研究室以 往的重疊病例對照研究，已發現較高的血
3 清總睪脂酮濃度增加男性罹患肝細胞癌危 險性 (18)。性荷爾蒙的作用需要和受體 結合，在Tfm (testicular feminization) 突變鼠 (一種雄性荷爾蒙受體失去功能的 突變)的動物模式中，突變鼠和正常鼠比 較，降低亞硝胺誘導的肝癌發生率至少3 倍 ， 肝 腫 瘤 生 長 速 度 至 少 降 低 30 倍 (19)。另一個動物實驗，觀察到亞硝胺餵 食的雌鼠，在致癌過程中增加肝組織雄性 荷爾蒙受體濃度，同時伴隨著肝腫瘤的快 速生長 (20)。雄性荷爾蒙受體基因已被 發現存在三種基因多形性，其中第一外基 因內CAG微星體的多形性，是目前三種多 形性中在功能上被瞭解較深入的。體外實 驗已發現CAG重複次數和雄性荷爾蒙受體 對其他基因的轉錄活性呈負相關(12)。流 行病學研究顯示較少的CAG重複次數，增 加前列腺癌的危險性(13)，一個追蹤研究 報告較多的CAG重複次數增加BRCA1相關的 乳癌危險性(14)，但目前有關CAG微星體 和乳癌的研究結果相當不一致(14,21)。 本研究發現較多的CAG重複次數顯著增加 女性肝細胞癌的危險性，而且此關係只存 在於B型肝炎慢性感染者中。這個研究結 果顯示可能雄性荷爾蒙受體在女性B型肝 炎帶原者的肝細胞癌發展過程中扮演一個 角色，但目前無已知的生物機轉可解釋這 個現象，女性雖然也具有雄性荷爾蒙，但 濃度遠較男性為低，除了男性荷爾蒙以 外，其他調控細胞生長或分化的因子也可 能和雄性荷爾蒙受體結合，進而影響到細 胞基因的表現。本研究既然只有43名B型 肝炎帶原的病例，未來有必要增加病例數 再行分析，如果研究結果仍舊相當一致， 找尋女性中和雄性荷爾蒙受體結合的相關 因子和其影響的下游基因，可能對深入瞭 解致癌機轉或研究可能的新治療方法是相 當重要的。 計劃成果自評 本年度計劃目標為探討CYP17基因多形 性、雄性荷爾蒙受體基因CAG微星體和女 性肝細胞癌危險性的關係。研究結果達到 原擬定目標。本研究目前已收集超過200 名女性肝細胞癌病例，增加樣本數再進行 分析，結果將適合發表在世界重要的雜 誌。 參考文獻
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