27
Clinical Medical Research,临床医学研究(2)2020,5 ISSN:2705-0475(Print);2705-0939(Online)
无创 DNA 测序是指对孕妇外周血进行采集，并提取游离 DNA，将新一代高通量测序技术与生物学信息分析结合使用，得 出胎儿患染色体非整倍性疾病，拥有高灵敏、高特异性的特点。而 传统的唐氏筛选和侵入性产前诊断方法被广泛应用，其中最为常 见的三种产前诊断为绒毛、羊水和脐血细胞染色体核型分析，结 果较为精确，且方便可靠，被称之为产前诊断的“金标准”，但也 存在一定的缺陷。而无创DNA测序则可以有效填补这些缺陷，减 少宫内感染、流产和死胎等情况的发生，能够提供妊娠期早期筛 查，包含先兆子痫和早产。基于此，本文选取 2018 年 5 月～2019 年 5 月接收的 2249 例孕妇作为研究对象，进行如下报道。
1 资料与方法 1.1 一般资料
本文选取 2018 年 5 月～2019 年 5 月接收的 2249 例孕妇作为 研究对象，对 2249 例孕妇进行无创胎儿 DNA 检测和传统方法。
本次研究均争取所有孕妇同意，孕妇年龄为 20-35 岁，平均年 龄为：27.6 ± 3.7 岁，对于 DNA 测序高风险孕妇在 20-24w（以 B超检查推算）时进行羊膜腔穿刺，并进行羊水细胞染色体核型 分析。
1.2 方法
1.2.1 唐氏症筛查方法
利用时间荧光分辨技术对 AFP、uE3、β -HCG，之后使用 芬兰产前筛查系统对 21- 三体、18- 三体和神经管缺陷风险值进 行计算。通常情况下，该系统会将21- 三体和 ONTD切割值确定 为≥ 1:270,18- 三体切割值确定为 1:350。
1.2.2 无创 DNA 检测
相关工作人员抽取 5 毫升若干个标准真空采血内，进行离心 操作，去除白细胞，并将上清融入在 2 毫升的离心管中，得到所 需要的血浆，并保存在零下 80 度的冰箱中，杜绝多次冻融，送入 研究室进行高通量测序。
1.2.3 羊水细胞培养和核型分析
相关工作人员对存在DNA测序高风险孕妇进行羊膜腔穿刺，
并对羊水细胞进行培养，在 7 天～8 天之后，对羊水细胞进行染 色体制片分析。
1.3 访问
对出生一年时间的婴儿进行访问，若婴儿出现苯丙酮尿症、
先天性甲状腺功能不佳等问题，需要进行相关的染色体检查。
2 结果
在 2249 例孕妇检测中国无创 DNA 测序异常的有 21 例，唐氏 筛查阳性为 42 例，随访结果中 21- 三体异常为 22 例，血清学筛 查阳性率高于随访结果，无创 DNA 产前检测阳性率与随访结果 无差异。其中真阳性20 例，阳性检测率为95.45%，假阳性为0 例，
假阳性检测率为 0.00%，阴性预测为 99.07%，敏感度为 95.45%，
特异性为 100%，假阴性为 1 例，假阴性率为 0.093%。
3 讨论
3.1 分析无创 DNA 测序与传统方法的优势 3.1.1 无创 DNA 测序与传统血清学筛查对比
在现如今，血清学筛查最为严重的缺陷就是高风险结果经过
无创 DNA 测序与传统方法在产前诊断应用中的比较
赵 启
鄂尔多斯市东胜区人民检验科，中国·内蒙古 鄂尔多斯 0 17000
【摘 要】目的:对无创 DNA 测序与传统方法在产前诊断应用进行比较。方法:选取 2018 年 1 月～2019 年 5 月接收的 2249 例孕妇作为研究 对象，在孕妇同意情况下对其进行无创DNA 测与传统检测两种防范进行检测。分析比较两种方法的优缺点。结果:无创DNA 测序的特异度为100%，
敏感度为 95.45%，假阳性率为 0.00%，假阴性率为 0.093%。结论:无创 DNA 测序与传统方法各有各的优势，在实际应用过程中，应要根据实际情 况，合理选择，进而保障产前诊断的精确性。
【关键词】无创 D N A 测序；传统方法；诊断应用
染色体确诊之后，大多数情况下为阴性，若假阴性率较高，并存 在一定数量的假阴性，则会出现羊水产前诊断效率不精确的问题。
而 DNA 测序与血清学筛查相比，诊断结果精确性更高，更为精 确，其归根结底是由于受到 21、18 和 13 号染色体技术成熟因素 的影响。所以，无创 DNA 测序能够在一定程度上有效填补唐氏 症筛查存在的不足，并且还可以有效减少对羊水刺穿诊断技术的 依赖，大大减少孕妇的不良情绪以及身体创伤。此外，T21、T18 和 T13 号的检查精确性已经与黄金标准相似，若检查结果为低风 险，则孕妇将不必进行侵入性检查；反之，若为高风险孕妇，很 有可能是怀有唐氏儿，需要进行羊水穿刺或者脐带血穿刺进一步 确定。
3.1.2 无创 DNA 测序与传统细胞遗传学诊断相比的优点 3.1.2.1 无创伤性
由于只需要采取孕妇 5 毫升的静脉血就可以检查，所以不易 发生感染和流产的风险，在一定程度上还可以减少孕妇的不良情 绪。该方法可以在试管婴儿、有多次流产史孕妇等中应用。而若 想应用传统方法，不仅需要医生高超的操作技术，而且还存在一 定的风险，在进行羊水穿刺手术之后，可能会出现早产、宫内感 染等。此外，由于绒毛抽取难度系数大，容易 对胎儿产生严重的 影响，有着较高的流产率。
3.1.2.2 孕早期检查
无创 DNA 测序在孕妇孕早期 12w 就可以检查，而唐氏症筛 查则需要在孕妇 16-20+6w 左右才可以检查，若脐血穿刺需要在 26w 以后检查。由此可见，无创 DNA 测序可以在一定程度上提 高产前诊断时间，减少建孕妇和家属的等待时间。
3.1.2.3 易于控制
无创 DNA 测序一般都是大量集中检查，测序全过程由计算 机进行操作，在一定程度上可以减少人为因素的影响，数据精确 度较高且可靠。而传统方法由人工操作，对工作人员的操作和分 析能力有一定的要求，同时结果的精确性还是需要依靠染色体分 裂相的好坏，所以无创 DNA 的优势较为明显。
3.2 无创 DNA 测序与传统方法比较的劣势
无创 DNA 测序由于受到原理因素的影响，导致存在以下几 个劣势：（1）若孕妇为染色体疾病患者则不适用。（2）孕妇近期 接受过异体输血、移植手术等会引入外源DNA，不适用无创DNA 测序。（3）多胎妊娠不适用无创 DNA 测序。（4）无创 DNA 测序 仅是应用于检测到染色体三体（21 号三体、18 号三体、13 号三 体）以及染色体的缺失重复，具有一定的局限性，无法精准确定 性染色体异常。而绒毛、羊水和脐血细胞进行染色体核型分析不 会受到影响，同时对于多胎关键时穿刺时尤为需要注意的是，不 同羊膜腔要分开，穿刺针头位置会对结果精确性受到影响。
参考文献：
[1]周舒香,刘妮,徐丽,杨一琼,陈玲,李靓.无创产前检测在胎儿染色体异常 疾病诊断中的应用[J].中国社区医师,2016,32(22):147-148.
[2]杨灿锋,吴晓.孕妇血浆中胎儿游离DNA测序在无创性产前检测中的 应用[J].实用妇产科杂志,2015,31(11):866-869.
