臺灣蜂膠美白活性之探討

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臺灣蜂膠美白活性之探討

陳秋蘭

¹

林彥均

¹

許宸瑜

¹

黃俐菁

²

吳宛樺

¹

蔡謹如

¹

顧宜佳

¹

周家甄

¹

林亭秀

¹

陳莉螢

¹

*

1嘉南藥理科技大學藥學系

2嘉南藥理科技大學醫藥化學系

摘要

蜂膠是一種由蜜蜂採集各種植物的嫩芽或樹皮之汁液，再與蜜蜂的唾液酵素、花粉、及蜂蠟等混合所得的膠狀黏性物質，用來塗裝在蜂巢的內壁，可用來防禦外敵、也可對抗微生物感染，避免食物的腐敗。蜂膠具有許多生理活性，包含有抗細菌、抗病毒、抗發炎及及抗腫瘤等。蜂膠中的主成份黃酮類也具有很好的抗氧化能力，可以對抗紫外線，避免皮膚受到傷害，因而被應用在化妝品和保養品上面。但當蜂膠產品塗抹在皮膚上，是否會進入皮膚角質層，而產生美白之效果？因此，本研究想先評估台灣蜂膠的乙醇萃取物及其分層是否能抑制黑色素之生合成。首先先看台灣蜂膠的乙醇萃取物及其分層是否會抑制酪胺酸酶的活性，再以MTT 分析其對 B16 黑色素瘤細胞是否具細胞毒性，並以波長 405nm 分析其在B16 細胞的黑色素含量。結果發現蜂膠的乙醇萃取物及其分層(BG-2 及 BG-3)可抑制酪胺酸酶活性，但對B16 細胞具有細胞毒性，且呈劑量及時間相關性，此細胞毒殺作用可能是因誘導細胞凋亡所致，但詳細機制則需更進一步的研究分析。

關鍵詞：台灣蜂膠、美白、黑色素生合成、酪胺酸酶

*通訊作者: 嘉南藥理科技大學藥學系 Tel: +886-6-2664911Ext2210

Fax: +886-6-2667318

E-mail: [email protected]

壹、前言

皮膚為人體中最大的器官，可對抗紫外線

〈ultraviolet rays; UV〉的照射，而黑色素〈melanin〉

則是皮膚對抗紫外線照射的主要因素〈Gilchrest et al. 1996 〉。黑色素在皮膚上是由黑色素細胞

〈melanocyte〉內的黑色素小體〈melanosome〉不斷製造所產生的。而皮膚的黑色素細胞是位在表皮組織的基底層，一個黑色素細胞周圍會被 30~40 個角質細胞〈keratinocyte〉所包圍，形成所謂的表皮層黑色素單位〈epidermal melanin unit〉。黑色素細胞會持續製造黑色小體，製造好的黑色素小體會經由黑色素細胞的樹狀軸突末端被分泌至周圍鄰

近的角質細胞內，除了可使皮膚呈現顏色外，也可對抗紫外線的照射。雖然黑色素細胞在此層組織只佔了少部分的空間，但其在皮膚上扮演著重要的功能〈Bolognia et al. 1988〉。

黑色小體位在黑色素細胞的細胞質內，是一種具有膜的球形或橢圓形的胞器〈Orlow 1995〉，

可對抗黑色素生合成〈melanogenesis〉過程中釋放出之自由基對細胞產生的氧化性傷害。黑色小體中黑色素的形成是在酪胺酸〈tyrosine〉的存在下，

先經酪胺酸酶〈tyrosinase〉的催化氧化形成 dopa 及 dopachrome，再經一連串酵素的催化下形成的 -

аϫᐂࢱ!

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聚合物〈Bolognia et al. 1988〉。而酪胺酸酶是一種含銅的酵素，是黑色素形成的速率決定步驟

〈Hearing et al. 1987〉。除了酪胺酸酶外，還有許多酵素的參與，包括兩個與酪胺酸相關的蛋白質

〈tyrosine related-protein; TRP〉，即 TRP-1〈又稱為DHICA oxidase〉及 TRP-2〈又稱為 dopachrome tautomerase〉〈Boissy 1998〉。而紫外線及黑色素刺激荷爾蒙〈MSH〉會促進黑色素生合成。當皮膚暴曬在紫外線中，產生少量的自由基，會活化訊息傳遞而刺激酪胺酸酶的轉錄作用，進而增加黑色素的合成。另外，也由於黑色素細胞受到刺激，活性增加，黑色小體增生且轉移至角質細胞的能力增加，因此皮膚呈現褐色。而這些增加的黑色素具有吸收紫外線、中和自由基的功能，這是身體對抗紫外線曝曬的一種保護作用〈Gilchrest et al. 1996〉。

黑色素刺激荷爾蒙是體內調控黑色素生合成的一種內生性荷爾蒙，其和 melanocortin-1 receptor 有很高的親和力，當它們結合後，會刺激黑色素細胞內 cAMP 的形成增加，而使得黑色素的產生增加〈Mountjoy 1994〉。當表皮的黑色素細胞活性增加，黑色素生合成的作用增加以及黑色小體數目增加的情況下，會導致黑色素過度化

〈hyperpigmentation〉的現象。此外，像是黑色小體分泌、轉移至角質細胞的能力增加，或是角質細胞分解黑色素的能力下降，也都會導致黑色素過度化的現象，此時皮膚的膚色會較黑。若黑色素過度化而引起色素沉著，就會形成了所謂的斑點

〈Jimbow 2001〉。另外，細胞由基底層新生，推至表皮約 14 天，而停留於表皮上保護皮膚約 14 天後，變成皮屑剝落。細胞由新生至剝落約28 日，

此皮膚生理稱為皮膚的新陳代謝。若基底細胞的增生速率減慢，導致皮膚的新陳代謝率減慢，含有黑色素小體的角質細胞還沒有脫落，也會讓皮膚看起來比較黑。

俗話說“一白遮三醜”，尤其在現今社會的審美觀，流行著擁有一身白皙的皮膚，而要讓皮膚看起來比較白皙的產品，即所謂的美白化妝品，在整

個化妝品的市場佔有非常重要的比例。有幾個方針可以讓膚色看起來白皙：c 增加皮膚的新陳代謝率，即促進基底層細胞的增生；d 減少黑色素細胞的數目，但若處理不當，可能導致白斑症；e 減少黑色素小體的數目或成熟度；f 抑制黑色素的生合成，可透過抑制酪氨酸酶的活性或減少其表現量來達成。目前市面上具有促進皮膚新陳代謝的產品中，其有效成分有維他命A〈retinol〉、果酸、

水楊酸〈salicylic acid〉等。維他命 A 是一種脂溶性的維生素，主要是因其具有促進表皮細胞分裂正常化，以及促進表皮細胞的新陳代謝，因此讓皮膚看起來顯得比較白皙光滑〈Pathak 1986〉。而果酸及水楊酸也都具有促進角質細胞新陳代謝的作用。

至於目前衛生署所核准上市的美白成分主要有七類，分別是magnesium ascorbyl phosphate、

kojic acid、ascorbyl glucoside、arbutin、chamomile ET、sodium ascorbyl phosphate 及 ellagic acid 等。

其中維他命 C 的衍生物就有 3 種，主要是因維他命 C 易氧化且為水溶性，不易為表皮吸收所致。

維他命 C 具有抗氧化的作用，可以將已形成的黑色素轉變成顏色較淡的黑色素，因此在皮膚的美白方面具有效果〈Hayakawa 1980〉。熊果素〈arbutin〉

是從 bearberry 這種小灌木的紅色果實中萃取出的天然成份。它具有皮膚美白的效果，主要是因為抑制酪胺酸酶的活性，而減低了黑色素的生合成

〈Maeda 1996〉。而麴酸(kojic acid)是由麴黴菌屬

〈Aspergillus〉和青黴菌屬〈Penicillium〉中提煉而得。其作用機制是藉由與銅離子螯合，而抑制酪胺酸酶的生合成及降低酪胺酸酶的活性，因此減少黑色素的生合成〈Briganti 2003〉。Endothelin 1

〈ET1〉是由內皮細胞所釋放，可作用在黑色素細胞上，使酪胺酸酶磷酸化，因此與 TRP-1 與偶合能力增強，進而促進黑色素生合成作用。 Chamomile ET 為 ET1 的拮抗劑，因此具有抑制黑色素生合成的作用〈Imokawa 1997〉。

蜂膠〈Propolis〉是一種由蜜蜂採集各種植物

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的嫩芽或樹皮之汁液，再與蜜蜂的唾液酵素、花粉、及蜂蠟等混合所得的膠狀黏性物質。Propolis 在希臘語中表示為「防禦中的城市」，因為蜜蜂把蜂膠用來塗裝在蜂巢的內壁，可用來防禦外敵、也可對抗微生物感染，避免食物的腐敗。人類早在希臘時代就明瞭蜂膠是天然的抗生物質，具有抗菌性、抗腐性等作用。在草藥醫學中，蜂膠可用來治療外傷、燙傷、喉嚨痛、腹痛及呼吸道疾病等。在許多有關蜂膠的生物活性、化學成份、醫療用途等研究報告陸續出爐後，蜂膠已成為本世紀最具潛力的健康養生聖品〈李錦楓2002、張世揚 2003、王麗潔2009、吳佳蓉 2009〉。

蜂膠會因季節、氣候和產區樹材的不同等因素，造成其成分上的差異。目前已知蜂膠是由50%

的樹脂及植物花苞、30%的蜂蠟、10%的芳香油脂、5%的花粉以及 5%的有機物質和礦物質等所組成。在這些組成物中，富含許多具有生物活性的成分，其中最重要的成份就是黃酮類〈flavonoids〉，

包含有flavones、flavonols、flavonones、flavanonols 等。其他還有萜烯〈terpenes〉、咖啡酸〈caffeic acid〉

及其酯類、以及肉桂酸〈cinnamic acid〉等有機酸

〈李錦楓2002、張世揚 2003、郭星君 2006、王麗潔2009〉。

科學研究證實蜂膠具有許多生理活性，包含有抗細菌〈Grange et al. 1990〉、抗黴菌〈Dalben-Dota et al. 2010〉、抗發炎及抗病毒〈Sartori et al. 2011〉、

抗氧化〈Guo et al. 2011〉及抗腫瘤〈Watanabe et al.

2011〉等。而在蜂膠眾多成份中，最常被拿來研究的物質是咖啡酸的酯類caffeic acid phenethyl ester

〈CAPE〉，已有許多研究指出 CAPE 是一個很強的抗氧化劑，具有抗氧化〈Russo et al. 2002〉、抗發炎〈Toyoda et al. 2009〉、抑制癌細胞生長及促進癌細胞凋亡〈apoptosis〉等抗腫瘤〈Wu et al. 2011〉

的作用。而台灣蜂膠中所含的特有成份propolins，

在結構上屬於 prenylflavanones，也被證實具有抗氧化及毒殺腫瘤細胞和誘導腫瘤細胞凋亡等作用

〈Chen et al. 2004; Chen et al. 2007; Chen et al.

2011〉。蜂膠中的成份雖然繁多，但其主成份黃酮類大都具有很好的抗氧化能力，可以對抗紫外線照

射皮膚所產生的自由基，避免皮膚受到傷害，因而被應用在化妝品和保養品上面〈Couteau et al. 2008;

Fonseca et al. 2011; Gregoris et al. 2011〉。

由於蜂膠具有很強的抗氧化及抗紫外線之作用，當其應用於皮膚上，吸收紫外線後，是否會因此而減少對黑色素細胞的刺激，產生膚色變淡之美白作用，有待進一步的研究。但當蜂膠產品塗抹在皮膚上，其活性成分，如黃酮類或CAPE 是否會進入皮膚角質層，而影響黑色素細胞？因此，本研究想先評估台灣蜂膠的乙醇萃取物及其分層是否會影響黑色素細胞的生合成作用，進而產生美白之作用。

貳、材料及方法

一、台灣蜂膠乙醇萃取物之製備

本研究所使用之蜂膠樣品為高雄市內門區的蜂農所提供。取50 g 之蜂膠置於 100 ml 的乙醇中，

利用微波萃取儀〈Milestone Startsynth〉萃取三次，

萃取條件為50℃，300 W，5 分鐘。將萃取液合併後，以減壓濃縮機將乙醇抽乾後，得36g 的乙醇萃取物〈BG〉。再取 23.5g 的乙醇萃取物，利用分子篩〈Sephadex LH-20〉管柱進行分離，以甲醇沖提之，得三個分層，再以減壓濃縮機將甲醇抽乾後，分別得BG-1〈401mg)、BG-2〈4.3g〉及 BG-3

〈533mg〉。將BG 及其各分層〈BG-1, BG-2, BG-3〉

溶於DMSO〈dimethylsulfone〉中，以進行各種活性實驗。

二、酪胺酸酶之活性分析

酪胺酸酶的活性分析〈tyrosinase activity assay〉是採用體外的方式，在 96 孔洞培養皿中，

於每個孔洞中加入105μl 的 phosphate buffer saline

〈PBS〉、10μl 各種不同濃度的試劑或蜂膠萃取液，及200U/ml 的酪胺酸酶 20μl，放入 37 ℃培養箱中反應30 分鐘，之後先以 ELISA reader 測其在 490nm 的波長下之基礎吸光值。然後再加入 2.5mM L-dopa 65μl，繼續放入培養箱中反應 30 分鐘後，

同樣在490 nm 的波長測其吸光值，減掉之前的基礎吸光值，即可由吸光值的變化量得知酪胺酸酶的

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活性〈Ishikawa et al. 2007〉。

三、小鼠 B16 黑色素瘤細胞之培養

小鼠的 B16 黑色素瘤細胞〈B16 melanoma cells〉所使用的培養液為含 10% 小牛血清〈new born calf serum 〉及 100 μ g/ml penicillin/streptomycin 的 DMEM 〈 Dulbecco’s modified eagle medium〉。將細胞每三天作一次繼代培養，整個過程在無菌操作台中進行。當細胞生長到約八至九分滿時，先吸出原有之培養液，以 10 毫升之 PBS 沖洗，再加入 2~3 毫升之胰蛋白酶

〈TEG〉靜置反應 1~2 分鐘，最後加入 8 毫升 PBS 終止反應。取出約5x10⁶的細胞放入T75 或 10cm 的培養盤中，加入 10 毫升的培養液，放入 5%

CO2、37 ℃的培養箱中培養。

四、細胞毒性之分析

此法是參考 Jiao 等學者之方法加以修飾而成。MTT 全名為 3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）

-2,5-diphenyltetrazoleliumbromide，為一黃色染劑，

加入細胞培養液中，會經擴散進入細胞中，在存活細胞中，經粒線體之succinate dehydrogenase 去氫氧化後形成藍紫色的formazan 結晶，再用 DMSO 將 formazan 結晶溶出，可得到藍紫色溶液，於 550nm 測吸光值，由吸光值高低便可知細胞存活的多寡，因此常用於檢測藥物對於細胞生長及存活率的影響。將100μl 含細胞的培養液植入 96 孔洞之培養盤，隔夜後後加入100μl 含各種不同濃度試劑或蜂膠萃取液的培養液。經24~48 小時培養後，加入100μl 含 MTT 之 PBS 溶液〈1mg/ml〉置於培養箱中反應3 小時後取出，並吸出培養液，用 100μl 的 DMSO 將藍紫色結晶溶出，再以 ELISA reader 判讀波長 550nm 時之吸光值，可由此比較細胞處理不同濃度試劑或蜂膠萃取液後生長曲線之變化

〈Jiao et al. 1992〉。

五、黑色素含量之測定

將細胞培養於10 公分的培養盤中，加入不同濃度的試劑或蜂膠萃取液培養1~6 天後，將細胞收

集，加入0.5 毫升 1N 之 NaOH，加熱 80~100 ⁰C 溶解30 分鐘，待冷卻後，取出 100μl 置於 96 孔洞培養皿中，以 405nm 的波長來測黑色素吸光值的變化量。同時以不同濃度的黑色素求出一條檢量線，算出檢體中所含黑色素的濃度〈μg/ml〉。另外，取 5μl 的細胞溶解液加入 250 μl 的 Bradford reagent 〈Sigma〉算出其蛋白質含量〈mg/ml〉。

將黑色素濃度除以蛋白質濃度即可得細胞中所含的黑色素含量〈μg melanin/mg protein〉〈Ishikawa et al. 2007〉。

六、統計方法

本研究所得之數據均以平均值加減標準差來表示。使用單維變異數分析〈one-way ANOVA〉

評估在各組別之間的變化，互相比較其差異性，當 P 值小於 0.05 時，則表示具有統計上顯著的差異。

參、結果及討論

一、酪胺酸酶之活性分析

酪胺酸酶是整個黑色素生合成路徑的速率決定步驟，且檢測酪胺酸酶活性的分析法是一種簡單、快速的方法〈Choi et al. 2002〉，因此可以用來篩選一些具有抑制酪胺酸酶活性的成分。已知麴酸可抑制酪胺酸酶的生合成及降低酪胺酸酶的活性，因而減少黑色素的生合成〈Briganti et al.

2003〉，在本實驗中當作正對照組，結果如圖 1A 所示，100μM 的麴酸確實可抑制酪胺酸酶的活性，

表示本實驗方法確實可行。而蜂膠醇萃取物〈BG〉

在 100μg/ml 時也可抑制酪胺酸酶的活性

〈*p<0.05〉。不過，由於蜂膠醇萃取物為混合物，

是哪些成份產生抑制作用，則需更進一步的分析。

將蜂膠醇萃取物經分子篩分層後，依分子量大小分別得到分子量較小的BG-1、BG-2 及分子量最大的 BG-3。同樣測其對酪胺酸酶活性的影響，

結果如圖1B 所示，100μg/ml 的 BG-1 並不具抑制活性，但BG-2 及 BG-3 均可達到顯著的抑制活性

〈*p<0.05〉，且以 BG-2 的抑制活性最強。這結果顯示蜂膠醇萃取物可抑制酪胺酸酶活性是由於 BG-2 及 BG-3 中的成份所貢獻。

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圖1、蜂膠及其各分層對酪胺酸酶活性之影響。

二、細胞毒性之分析

在皮膚角質層的黑色素細胞若死亡，無法製造黑色素，即會造成白班。因此，欲評估蜂膠在黑色細胞中是否具抑制黑色素生合成之作用前，需先評估其是否會對細胞產生毒性。蜂膠對 B16 黑色瘤細胞生長影響如圖2 所示，圖 2A 為處理蜂膠及其各分層 1 天的結果，低濃度〈1~10μg/ml〉的蜂膠及其各分層都稍微有促進細胞生長的作用，但高濃度〈100μg/ml〉的蜂膠及其各分層，則都有明顯細胞數目減少的作用〈p<0.05〉。

圖2、蜂膠及其各分層對 B16 黑色素瘤細胞生長之影響。

至於此細胞數目減少的作用，是因抑制細胞生長還是產生細胞毒殺作用，則需進一步用流式細胞儀的分析來探討細胞凋亡或細胞週期之調控。而此減少細胞數目的作用，以 BG-1 的作用大於 BG-2，再大於 BG-3，而 BG-2 的作用則與 BG 相當。由此結果可知BG-3 的毒性較小，且 BG-3 又能抑制酪胺酸酶的活性，因此有潛力成為美白產品。

而處理蜂膠及其各分層2 天後〈圖 2B〉，高濃度〈100μg/ml〉的蜂膠及其各分層抑制作用更明顯，連處理10μg/ml 蜂膠及其各分層的細胞數目也開始減少，其中以 BG-2 的毒性較強。雖然 BG-2 抑制酪胺酸酶的活性較強〈圖1B〉，但因其毒性較大，若欲應用於美白產品上，需限制其使用劑量。

本實驗中，台灣蜂膠及其各分層減少B16 細胞數目的機轉雖不清楚，但藉由觀察其細胞形狀可

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略知一二。圖3A 為處理 DMSO 溶劑後 2 天 B16 細胞的正常形態，處理 10μg/ml 毒性較強的 BG-2 後2 天，如圖 3B 所示，除細胞數目減少外，細胞變得狹長，外觀形態上已經有所改變。而BG-3 的毒性較小，10μg/ml 處理 2 天，對 B16 細胞形態還無明顯改變〈圖 3B〉。但高濃度〈100μg/ml〉的 BG-3 僅處理 1 天，即可看到細胞變得圓縮，形成許多類似凋亡小體〈apoptotic body〉冒泡泡的細胞，因此推測蜂膠可能是經由抑制細胞生長，誘導細胞凋亡所致。這與許多研究結果一致〈Chen et al.

2004; Chen et al. 2007; Wu et al. 2011〉，但究竟是何種成份造成？而其詳細機制為何？則需進一步用流式細胞儀的分析來探討細胞凋亡或細胞週期之調控，並以西方墨點法進行調控細胞生長蛋白質表現量之分析。

三、黑色素含量之測定

由於高濃度的蜂膠及其各分層均對B16 細胞有明顯毒性，因此選用較低濃度〈1μg/ml〉的蜂膠及其各分層來評估其對 B16 細胞黑色素生合成的影響。處理1μg/ml 的蜂膠及各分層 6 天後，即收集細胞分析其黑色素含量，初步結果如圖4 所示，

BG-1 稍微抑制〈91.6%〉黑色素含量，但並不具統計上的差異性，而BG-2 及 BG-3 則無。且此數據與體外酪胺酸酶活性分析稍有出入〈高濃度的 BG-2 及 BG-3 均可抑制〉，需要再進行更進一步的實驗分析。可能 BG-1 不是經由抑制酪胺酸酶活性，而是透過其他機轉，例如抑制TRP-1 或 TRP-2 之活性來降低黑色素含量。而BG-2 及 BG-3 雖在體外可抑制酪胺酸酶活性，但由於細胞毒性太大，

未來的研究則需再降低濃度並延長處理時間來看其對黑色素含量的影響。

圖3、蜂膠各分層對 B16 黑色素瘤細胞形態之影響。

圖4、蜂膠及其各分層對 B16 黑色素瘤黑色素含量之影響。

有關蜂膠的研究非常多，除了確認其活性成分外，大多集中在抗氧化、抗發炎及抗腫瘤等方面的研究。本實驗首次研究蜂膠對美白活性之探討，

綜合以上結果可知，台灣蜂膠在體外試驗可抑制酪胺酸酶之活性；對 B16 黑色素瘤細胞則具細胞毒性，且呈劑量及時間相關性，此細胞毒性可能與誘導細胞凋亡有關；而對 B16 黑色素瘤細胞黑色素含量的影響，這都需要更進一步的研究。

肆、謝辭

本研究得以完成，非常感謝嘉南藥理科技大學保健營養系的吳淑靜教授所提供的 B16 黑色素細胞瘤細胞株。

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伍、參考文獻

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(9)

The study of Taiwanese propolis on skin-whitening activity

Chiu Lan Chen

¹

Yen Chun Lin

¹

Chen Yu Hsu

¹

Li Ching Huang

²

Wan Hua Wu

¹

Chin Ju Tsai

¹

Yi Chia Ku

¹

Chia Chen Chou

¹

Ting Hsiu Lin

¹

Li Yin Chen

¹^*

1 Department of Pharmacy,

2Department of Medicinal Chemistry,

Chia-Nan University of Pharmacy and Science, Tainan, Taiwan 71710, R.O.C.

Abstract

Propolis is a hive product that bees manufacture from balsamic resins actively secreted by plants on leaf buds and barks. It possesses several biological activities such as antibacterial, antiviral, antiinflammatory, and antitumor effects. Propolis and its main flavonoids components also show high antioxidant activity.

Furthermore, these substances evidence effectiveness as broad spectrum UVB and UVA photoprotection sunscreens. The combination of these characteristics moves up propolis and its main flavonoids components to the class of cosmeceuticals, as possible active ingredient of sunscreen commercial formulations for their protective and preventive properties. However, when the epidermis is exposed to propolis products, the exact mode of melanogenesis is yet to be determined. Therefore, the objective of our study is to investigate the whitening and melanogenesis inhibitory potential of Taiwanese propolis ethanol extract and its fractions at tyrosinase activity assay and melanoma cells. Thus, we first screened the inhibit potential of propolis extract and its fractions on tyrosinase activity. We further determined the cytotoxicity of propolis extract and its fractions in mouse melanoma B16 cells by using tetrazolium salt (MTT). The effects of propolis extract and its fractions on melanin content in B16 cells were also measured by UV at OD405. The data showed that Taiwanese propolis extract and its fractions (BG-2 and BG-3) inhibited mushroom tyrosinase activity in vitro.

They were cytotoxic to B16 cells in a dose-and time-dependent manner and this effect may be from apoptosis induction, but the mechanism is needed further study.

Key words: Taiwanese propolis; melanogenesis; tyrosinase

*Correspondence:Development of Pharmacy, Chia-Nan University of Pharmacy and Science, Tainan, Taiwan 71710, R.O.C.

Tel: +886-6-2664911Ext2210 Fax: +886-6-2667318

E-mail: eijodesu @mail.chna.edu.tw

臺灣蜂膠美白活性之探討