16-2029-1 1(3) 1(3) 100 16-2042-1 1(1) 1(1) 100 16-2401-1 2(5) 2(5) 100 16-2181-1 10(17) 10(16) 94.1
表3-2 「1894」甘藍小孢子以不同溫度處理對胚分化之影響
Treatment
No. petridish with embryos/
total petridish
Total embryos
Cotyledonary Embryos / petridish 31℃ 6 / 10 15 1.5 ± 0.5 a
Ploidy level No. of plant (%) C 2C 4C Chimera 16-2181-1 30 6 (16.7%) 28 (77.8%) 2 (5.6%) 0 ( 0.0%)
生 物 技 術
表3-5 培植體大小對「廣東薑」與「竹薑」組培苗增殖與生長之影響
Cultivar Diameter of microrhizome
(mm) z Shoot-buds/explant Leaves number/explant Plantlet height(cm) Guang Dong 2 1.9 ± 0.2 b y 4.1 ± 0.3 b 1.5 ± 0.1 ab
4 4.0 ± 0.3 a 5.2 ± 0.3 a 1.5 ± 0.0 ab 6 4.7 ± 0.4 a 4.8 ± 0.2 ab 1.7 ± 0.1 a
Chu 2 2.4 ± 0.3 b 4.8 ± 0.2 a 1.9 ± 0.2 a
4 4.5 ± 0.6 a 4.8 ± 0.6 a 1.8 ± 0.3 a 6 4.5 ± 0.7 a 5.0 ± 0.6 a 2.2 ± 0.2 a
zIn vitro microrhizome explants (about2, 4, or 6 mm in diameter) were cultured on MS medium containing 1 mg L-1 BA and 0.1 mg L-1 NAA for 8 wks of culture. Each treatment had 5 replications, and 3 explants were used in each replication. Plantlets higher than 5 mm were recorded.
y Means in each same column under various cultivar followed by different letters are significantly different at the 5% level by LSD test.
表3-6 液態培養時間與BA 濃度對「廣東薑」組織培養苗增殖與生長之影響
Liquid culture
period (wk)
BA (mg L-1)
Liquid culture z Liquid-solid culture y
Total plantlets (number)
Plantlets with unfolded leaves
Plantlets with green shoots
Plantlets with yellowish buds
Total plantlets (number)
Plantlets with unfolded leaves
Plantlets with green shoots
- (%) - (%)
-2 0 3.8 ± 0.2 hx 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 8.9 ± 1.8 e 78.2 ± 6.9 d 21.8 ± 6.9 a 0.5 4.2 ± 0.3 gh 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 9.8 ± 1.3 de 80.1 ± 4.6 cd 19.9 ± 4.6 ab 1.0 4.2 ± 0.4 gh 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 9.8 ± 2.0 de 86.5 ± 2.6 bcd 13.5 ± 2.6 abc 2.0 4.6 ± 0.3 fg 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 9.7 ± 0.6 de 85.4 ± 5.1 bcd 14.6 ± 5.1 abc 4 0 5.1 ± 0.2 def 0.0 ± 0.0 d 52.8 ± 16.0 a 47.2 ± 16.0 b 13.0 ± 1.5 c 90.9 ± 4.7 b 9.1 ± 4.7 c
0.5 5.3 ± 0.1 bcde 0.0 ± 0.0 d 34.5 ± 18.6 ab 65.5 ± 18.6 b 20.5 ± 1.3 b 89.9 ± 5.1 bc 10.1 ± 5.1 bc 1.0 5.2 ± 0.1 bcdef 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 20.1 ± 1.6 b 88.3 ± 2.1 bcd 11.7 ± 2.1 abc 2.0 5.0 ± 0.2 ef 0.0 ± 0.0 d 0.0 ± 0.0 c 100.0 ± 0.0a 21.0 ± 2.8 b 90.0 ± 2.4 bcd 10.0 ± 2.4 abc 6 0 5.7 ± 0.1 abcd 50.3 ± 7.7 a 37.9 ± 4.7 ab 11.8 ± 11.8 c 12.4 ± 1.8 cd 100.0 ± 0.0a 0.0 ± 0.0 d
0.5 6.1 ± 0.4 a 22.4 ± 0.4 b 27.4 ± 10.5 b 50.1 ± 10.7 b 19.6 ± 2.4 b 100.0 ± 0.0a 0.0 ± 0.0 d 1.0 5.8 ± 0.1 abc 20.8 ±11.3 bc 28.9 ± 10.2 ab 50.3 ± 9.2 b 22.3 ± 1.3 b 87.2 ± 1.6 bcd 12.8 ± 1.6 abc 2.0 5.8 ± 0.2 abc 7.4 ± 4.9 c 38.0 ± 14.4 ab 54.6 ± 19.0 b 29.2 ± 2.7 a 86.9 ± 4.6 bcd 13.1 ± 4.6 abc
z In vitro rhizome explants (about 5×5×3 mm3) were cultured on B5 liquid medium containing 0-2.0 mg L-1 BA and 0.1 mg L-1 NAA for 2, 4 and 6 wks of culture. Each treatment had 3 replications, and 3 explants were used in each replication.
y Uncut shoot-bud derived from various liquid culture periods were cultured on the B5 solid medium supplemented with 0.5 mg L-1 BA and 0.1 mg L-1 NAA for another 8 wks of culture.
x Means in each same column followed by different letters are significantly different at the 5% level by LSD test. Percentage data were arcsine-square -root transformed prior to analysis.
生 物 技 術
表3-7 液態培養時間與BA 濃度對「竹薑」組織培養苗增殖與生長之影響
Liquid culture
period (wk)
BA (mg L-1)
Liquid culture z Liquid-solid culture y Total plantlets
(number)
Plantlets with unfolded leaves
Plantlets with green shoots
Plantlets with yellowish buds
Total plantlets (number)
Plantlets with unfolded leaves
Plantlets with green shoots
- (%) - (%)
-2 0 4.0 ± 0.2 ex 0.0 ± 0.0 e 0.0 ± 0.0 e 100.0 ± 0.0 a 4.6 ± 0.1 e 100.0 ± 0.0 a 0.0 ± 0.0 c 0.5 4.3 ± 0.0 de 0.0 ± 0.0 e 0.0 ± 0.0 e 100.0 ± 0.0 a 5.4 ± 0.2 de 85.6 ± 2.3 bc 14.4 ± 2.3 ab 1.0 4.3 ± 0.3 de 0.0 ± 0.0 e 0.0 ± 0.0 e 100.0 ± 0.0 a 6.2 ± 0.6 cde 92.3 ± 2.4 abc 7.7 ± 2.4 abc 2.0 4.2 ± 0.7 e 0.0 ± 0.0 e 0.0 ± 0.0 e 100.0 ± 0.0 a 7.1 ± 1.1 bcd 87.1 ± 1.4 c 12.9 ± 1.4 a 4 0 5.3 ± 0.2 cd 0.0 ± 0.0 e 0.0 ± 0.0 e 100.0 ± 0.0 a 5.4 ± 0.5 de 96.8 ± 3.2 a 3.2 ± 3.2 c 0.5 5.8 ± 0.6 bc 0.1 ± 0.1 de 7.4 ± 7.4 de 92.6 ± 7.4 ab 8.0 ± 0.3 bc 95.3 ± 2.5 ab 4.7 ± 2.5 bc 1.0 5.9 ± 0.1 bc 0.2 ± 0.1 de 11.5 ± 8.4 de 88.5 ± 8.4 ab 9.2 ± 0.4 ab 96.8 ± 3.2 ab 3.2 ± 3.2 bc 2.0 5.9 ± 0.1 bc 0.3 ± 0.0 cd 12.7 ± 2.3 cd 87.3 ± 2.3 b 11.1 ± 2.0 a 94.6 ± 4.1 ab 5.4 ± 4.1 bc 6 0 5.4 ± 0.1 bc 23.7 ± 5.8 ab 5.9 ± 0.4 d 70.4 ± 5.8 a 7.2 ± 0.3 bcd 100.0 ± 0.0 a 0.0 ± 0.0 c
0.5 5.9 ± 0.1 bc 26.9 ± 3.3 a 32.2 ± 4.9 c 40.9 ± 4.2 b 10.4 ± 0.6 a 97.8 ± 1.1 ab 2.2 ± 1.1 bc 1.0 6.4 ± 0.2 ab 25.8 ± 6.4 a 30.4 ± 8.6 c 43.8 ± 5.6 b 10.3 ± 1.0 a 100.0 ± 0.0 a 0.0 ± 0.0 abc 2.0 7.0 ± 0.6 a 28.7 ± 2.9 a 32.0 ± 7.3 c 39.4 ± 6.8 b 10.7 ± 0.2 a 99.1 ± 0.9 a 0.9 ± 0.9 c
z, y, x Same as Table 2.
圖3-2 利用不同大小組培根莖進行培養，組培薑苗之增殖 與生長情形。將「廣東薑」(A) 與「竹薑」(B) 組培 根莖直徑約2 mm (1)、4 mm (2) 及 6 mm (3) 之培 植體，培養於含有1 mg L-1 BA 與 0.1 mg L-1 NAA 之MS 固態培養基，經培養 8 wks 後，組培苗增殖 與生長之情形。Bar = 1 cm。
圖3-3 組培根莖於不同BA 濃度與液固態培養方式條件下，
「廣東薑」與「竹薑」組培苗增殖與生長情形。「廣 東薑」(A) 與「竹薑」(B) 之組培根莖 ( 約 5 mm 直徑 ) 於含有0、0.5、1 及 2 mg L-1 BA ( 依序為 A 與 B 圖 中 之1、2、3、4) 與 0.1 mg L-1 NAA 之 MS 液態培 養基培養4 wks (a) 與 6 wks (b) 後，將芽苗團塊未 經切割分別繼代培養於含有0.5 mg L-1 BA 和 0.1 mg L-1 NAA 之 B5 固態培養基 8 wks 後之瓶苗生長情形。
Bars = 2 cm。
生 物 技 術
藍紫色蝴蝶蘭育種之研究 經流式細胞儀檢測確 定4 倍體之P. bellina fma. coerulea 植株與 2 倍體植 株 （圖3-4），比較二者之花朵及園藝性狀結果顯 示，4 倍體具有較大的花徑，花朵質地較堅挺硬實，
葉片、小花柄、唇瓣中央裂片、蕊柱較寬，小花柄、
蕊柱較長 （表3-8、圖3-5），因此藉由多倍體化誘 導可改善植株花朵及其園藝性狀，觀察少數已開花
之4 倍體花朵壽命顯示未比 2 倍體長，二者花朵壽 命相同，但亦有花朵壽命較2 倍體短之 4 倍體單株。
在4 倍體植株雜交親和性方面仍需更進一步雜交授 粉測試。於CYT142 雜交編號可分別選拔出具有圓 整 花 型 之CYT142-6 以及花序排列佳之 CYT142-8 藍紫色優良單株，花徑約4.5 cm （圖3-6），花期 在秋季。
圖3-4 利用流式細胞儀分析藍紫色蝴蝶蘭P. bellina fma. coerulea (A) 2x 倍數體 (B) 4x 倍數體之圖譜。
圖3-5 藍紫色蝴蝶蘭P. bellina fma. coerulea 2 倍體與 4 倍 體(A) 花徑、(B) 小花柄、(C) 唇瓣側裂片、(D) 唇瓣 中裂片、(E) 蕊柱以及 (F) 葉片性狀之比較。Bars = 1cm。
圖3-6 選拔出具有(A) 圓整花型之 CYT142-6 以及 (B) 花 序排列佳之CYT142-8 藍紫色優良單株，花徑約 4.5 cm。Bars = 1cm。
表3-8 比較2 倍體藍紫色蝴蝶蘭P. bellina fma. coerulea 與其誘導所得之 4 倍體植株之園藝性狀 倍體數 梗長
(cm) 梗徑 (mm)
花徑 (cm)
蕊柱長 (cm)
蕊柱寬 (mm)
小花柄長 (cm)
小花柄寬 (mm)
唇瓣中央裂 片長(cm)
唇瓣中央裂 片寬(mm)
葉長 (cm)
葉寬 (cm) 2X 4.9 b 3.7 a 3.9 b 1.1 b 4.1 b 3.3 b 2.5 b 1.3 a 8.0 b 9.0 a 5.1 b 4X 4.3 a 4.8 a 4.8 a 1.3 a 4.6 a 4.0 a 3.4 a 1.5 a 9.8 a 8.8 a 6.3 a
生 物 技 術
迷你蝴蝶蘭瓶內開花之研究 迷你蝴蝶蘭Phal.
parishii與Phal. appendiculata種子不適合播種於含有 活性碳之培養基，種子發芽後原球體容易褐化，母 瓶同樣繼代於不含活性碳之播種培養基時，原球體 生長與發育情形良好，Phal. lobbii可播種於含有活 性碳之培養基，母瓶同樣繼代於含活性碳之培養基，
原球體生長與發育情形良好，開始分化成完整植株，
生長速度較Phal. parishii與Phal. appendiculata快（圖 3-7）。以迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata為模 式植物，評估蝴蝶蘭屬植物可於瓶內開花之培養條 件及開花特性表現。將著生3 片葉、雙葉幅約 2 公 分之Phal. appendiculata小苗分別接種於含有花寶一 號（HYPONeX No. 1. N:P:K = 7:6:19）基本鹽類之 HP 培養基中，分別培養 4、6、8 個月後以 20/15℃
（日/ 夜溫）、23/20℃（8/16 小時）、26℃（24 小 時）等3 種不同溫度處理誘導瓶內抽梗，結果顯示 培養6 與 8 個月瓶內小苗以 26℃環境下 22~24 天可 誘導出花梗，誘導率皆為28%，自抽梗至第一朵開 花天數為51~52 天（表3-9、圖3-8），但部份下位 葉片有黃化，黃化率分別為8% 與 100%，黃化葉數 平均分別為0.6 與 3.8 片葉，每花梗著花數為 4.6~4.8 朵（表3-10、圖3-9）。不同著花位置之花朵壽命不 同，以第一朵花壽命最長，為10~12 天，依序遞減，
花梗末端最後著花位置之花朵壽命最短為2~3 天 （表 3-11）。
圖3-7 迷你蝴蝶蘭原生種 (A) Phal. appendiculata、(B) Phal.
parishii 與(C) Phal. lobbii 分別播種於含活性碳(左側) 與不含活性碳( 右側 ) 之花寶 1 號基本鹽類培養基種 子發芽與生長之情形。
表3-9 迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata 小苗於 HP 培養基分別培養 4、6、8 個月於 20/15 ( 日 / 夜溫 ℃)、23/20 ( 日 / 夜溫℃) 和 26℃ 三種溫度處理之花梗發生
培養時間( 月 ) 花梗發生率 (%)
花梗發生天數 第一朵花天數
20/15( 日 / 夜溫℃ ) 23/20( 日 / 夜溫℃ ) 26℃
4 0 0 0 b -
-6 0 0 28 a 22.0 ± 0.9 51.0 ± 1.5
0 0 0 28 a 24.4 ± 2.3 52.0 ± 2.0
表3-10 迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata 小苗於 HP 培養基分別培養 4、6、8 個月於 26℃ 溫度處理之生長與開花情形
培養時間( 月 ) 葉數 葉長 葉寬 花朵數 梗數 黃葉率(%) 黃葉數
4 5.8 ± 0.2 b 3.8 ± 0.2 c 1.8 ± 0.1 c 0.0 ± 0.0 b 0 ± 0 b 0 ± 0.0 b 0.0 ± 0.0 b 6 6.4 ± 0.2 b 4.5 ± 0.2 b 2.5 ± 0.1 b 4.8 ± 0.2 a 1 ± 0 a 8 ± 4.9 b 0.6 ± 0.4 b 0 7.8 ± 0.2 a 5.8 ± 0.2 a 2.9 ± 0.1 a 4.6 ± 0.2 a 1 ± 0 a 100 ± 0.0 a 3.8 ± 0.2 a
表3-11 迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata 小苗於瓶內與瓶外開花花朵壽命之比較
培養環境 不同著花位置花朵壽命( 天 )
第一朵 第二朵 第三朵 第四朵 第五朵
瓶內 10.6 ± 0.4 a 7.4 ± 0.2 b 5.8 ± 0.4 b 4.2 ± 0.4 b 2.2 ± 0.2 b 瓶外 11.8 ± 0.7 a 11.4 ± 0.6 a 11.0 ± 0.6 a 11.4 ± 0.5 a 10.8 ± 0.6 a
生 物 技 術
圖3-8 迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata 培養於含活性碳之花寶 1 號基本鹽類 HP 培養基 6 個月瓶內開花之情形。
圖3-8 迷你蝴蝶蘭原生種Phal. appendiculata 於含活性碳之花寶 1 號基本鹽類 HP 培養基分別持續培養 4、6、8 個月生長之 情形。Bar ＝ 1 cm。