訊息調控與血管平滑肌細胞增生之探討

NF-κB 系統的活化，會調節白血球黏附因子 (例如: ICAM-1、

VCAM-1、P-selectin、E-selectin等) (58, 109)、生長促進因子、細胞激素與 促發炎因子、促血栓形成因子 (prothrombotic factor) (31)。在先前的研究 有顯示 ERK1/2與 NF-κB 也會調節 MMP 的分泌 (15)。因此在我們的 研究上觀察到，經由鼠尾草酸與熊果酸的作用下，都能夠抑制瘦體素促 進大鼠血管平滑肌細胞上 ROS 的產生。而由這樣的結果我們也可以發 現到，鼠尾草酸與熊果酸可能抑制大鼠血管平滑肌細胞上 MMP-2的分

泌以及 NF-κB 蛋白質的表現，這些都可能導因於鼠尾草酸與熊果酸本 身具有的抗氧化、抗發炎的能力。

先前的研究顯示，瘦體素會誘發血管細胞 Protein kinase C (PKC) 和 MAPK 的活化 (17, 189)，並經 MAPK 的路徑刺激大鼠血管平滑肌細胞 的增生，另有研究提出，細胞內訊息傳遞路徑 MAPK，在細胞的生長與 分化上扮演一個重要的調節者。其中 ERK1/2 在誘發細胞增生上為重要 調節者，而 PD98059 為 MAPK 路徑上 ERK 的抑制劑，可以抑制 aldosterone、AngiotensinⅡ、瘦體素所誘發 ERK1/2 的活化 (84, 124, 175)。

因此在瘦體素的促使下，ROS 的產生和 PKC/ERK1/2 的活化，進而活 化 NF-κB 的表現 (138)，ERK1/2 的訊息是調節細胞增生的關鍵，因此 未來利用抗氧化劑來抑制 ERK 的表現也許也可能做為臨床上抗癌的試 劑 (92)。本實驗觀察到當 500 ng/ml 瘦體素作用在大鼠血管平滑肌細胞 時，磷酸化 ERK1/2 的表現在 20 分鐘時最強，約為控制組的 50 倍，也 因此在加入鼠尾草酸與熊果酸下，瘦體素誘發大鼠血管平滑肌細胞 20 分鐘後，明顯的抑制磷酸化 ERK1/2 的表現，表示鼠尾草酸與熊果酸可 以阻斷 ERK1/2 的訊息傳遞，另外也觀察到鼠尾草酸與熊果酸能抑制由 500 ng/ml 瘦體素作用 25 小時後 NF-κB 核蛋白的表現。先前的研究提 出，當 p65 和 p50 兩個次單元轉位 (translocation) 進入細胞核，促使

NF-κB 的活化，這是一個複雜的過程 (43)。有文獻提出，IκB 會結合 NF-κB p65 和 p50，則其呈不活化狀態，而停留在細胞質中，一旦 Iκ B 受 IKK (IκB Kinase) 的作用後，則 IκB 會降解，使得 NF-κB 中 的 p65 和 p50 得以進入細胞核 (10)。也有文獻提出，NF-κB 在細胞質 中是不活化的，當 IκBα的合成增加時，則會促使在細胞核周圍不活 化的 NF-κB 中的 p65 和 p50 進入細胞核內活化 promoter，並進行轉 錄 (93)。在免疫細胞螢光染色法對血管平滑肌細胞試驗中，有文獻提出 利用 TNF-α來誘發核轉錄因子 NF-κB 的表現，並利用醛糖還原酶來抑 制核轉錄因子 NF-κB 中的 p65 和 p50 進入細胞核內活化 promoter (150)，也有許多文獻提出利用蜂毒 (bee venom)、降血脂藥物 (atorvastatin) 來 抑 制 核 轉 錄 因 子 NF- κ B 中 的 p65 和 p50 進 入 細 胞 核 內 活 化 promoter (130, 166)，因此在我們的實驗上，透過西方點墨法與免疫細胞 螢光染色法，分別都可以觀察到瘦體素會誘發核轉錄因子 NF-κB 的表 現，而鼠尾草酸和熊果酸能抑制瘦體素所誘發之核轉錄因子 NF-κB 中 的 p65 和 p50 進入細胞核內活化 promoter 的表現。

瘦體素可以誘發大鼠血管平滑肌細胞的增生，而鼠尾草酸與熊果酸，

可以明顯的抑制大鼠血管平滑肌細胞的增生，並降低 MMP-2、ERK1/2、

NF-κB 等相關訊息調控路徑中蛋白質的表現，且結果顯示熊果酸的抑

制能力較鼠尾草酸強。因此馬鬱蘭中的主要抗氧化成分物質，鼠尾草酸 與熊果酸具有抑制大鼠血管平滑肌細胞增生的能力，也許在未來可以提 供做為預防動脈粥狀硬化的角色。