HF-7α-Gly-EDIOL、DBD-7α-Gly-EDIOL 之逆合成分析與合成步驟

由於 HF-7α-Gly-EDIOL 和 DBD-7α-Gly-EDIOL 這兩個分子相似，差異只在 於螢光團的部分，因此一起介紹兩者的逆合成分析與合成步驟。若要將雌二醇和 螢光團的部分利用親核取代反應連接起來，其中必須一個含有親核基團，另一個 含有親電基團，目前化合物 8 與螢光團衍生物上均為親電基團，而比起化合物 8，

螢光團衍生物在合成上較為容易，故選擇先將螢光團衍生物上的親核基團轉為親 電基團，再將化合物 8 與螢光團衍生物連接在一起，同時於 linker 上引入 Gly 這個 官能基。

2.4.1 HF-7α-Gly-EDIOL

如圖 2-6 所示，HF-7α-Gly-EDIOL 由化合物 14 去 THP 保護而得。共同前驅 物化合物 8 與化合物 13 進行 SN2 取代反應後，可得連接雌二醇與螢光團之化合物 14。化合物 13 由螢光團衍生物 4'-EA-3-HF 與活化過的碘乙酸進行加成離去反應

而得。

圖 2-6 螢光團衍生物 HF-7α-Gly-EDIOL 之逆合成分析。

螢光團衍生物 4'-EA-3-HF 與經 N-羥基琥珀醯亞胺(N-hydroxysuccinimide，NHS) 活化過的碘乙酸進行加成離去反應。⁹⁵在此反應中會有 SN2 反應做競爭，但 SN2 反應速率會受到溶劑、立障等因素影響，故縱使碘是一個好的離去基，加成離去 的反應速率較 SN2 反應快。以氯仿為溶劑，於室溫下將 4'-EA-3-HF 慢慢滴入經活 化的碘乙酸中，反應 1 小時，經加壓管柱層析純化後，可得化合物 13，產率 86%，

如式 (16)。

(16)

接下來要將雌二醇和螢光團部分利用 SN2 取代反應連接起來。由於碘的活性 太高，發現有一個雌二醇連接兩個螢光團的副產物產生，而此副產物和產物的極 性相似，管 柱層析分離不易，故嘗試 把化合物 8 上的胺基利用叔丁氧羰基 (tert-butyloxycarbonyl，Boc) 保護起來，再利用氫化鈉將二級胺去質子後與化合物 13 進行 SN2 反應，如式 (17)，但並沒有得到預期的產物。最後還是採當量數控制 和慢慢滴加的方式，成功得到只有一個螢光團之產物。以 DMF 當作溶劑，N,N-二 異丙基乙基胺 (DIPEA) 當作鹼，將化合物 13 於 0 ℃下分 9 小時慢慢滴入含有化 合物 8 的溶液中，經加壓管柱層析純化後，可得化合物 14，產率 87%，如式 (18)。

值得一提，化合物 13 剛開始可以較快的速度滴加，然而越到後期滴入速度就要越 慢，不然很容易就會有兩個螢光團的副產物出現。

(17)

(18)

最後則是將化合物 14 的 THP 保護基移除，得到雌二醇 3 號和 17 號位置為羥 基之產物。一開始是參照實驗室余柔靚學姊去 THP 保護的方法，⁸⁹在 10%的三氟 乙酸/二氯甲烷條件下，室溫反應 1 小時，純化後並未得到預期產物，如式 (19)。

之後使用化合物 3 去 THP 保護的條件，在 10%的乙醯氯/甲醇條件室溫反應，純化 後也並未得到預期產物，如式 (20)。推測這兩個反應條件對於化合物 14 太過劇烈，

因此更換為較溫和的反應條件。以乙醇和二氯甲烷為共溶劑，PPTS 當作催化劑，

酸性條件下進行水解，55 ℃下反應 24 小時，經加壓管柱層析純化後，可得目標 產物 HF-7α-Gly-EDIOL，產率 90%，如式 (21)。

(19)

(20)

(21)

2.4.2 DBD-7α-Gly-EDIOL

如圖 2-7 所示，DBD-7α-Gly-EDIOL 由化合物 16 去 THP 保護而得。共同前驅 物化合物 8 與化合物 15 進行 SN2 取代反應後，可得連接雌二醇與螢光團之化合物 16。化合物 13 由螢光團衍生物 7-EDADBD 與活化過的溴乙酸進行加成離去反應 而得。利用活化過的溴乙酸而非碘乙酸的原因，是希望若將離去基改成反應性較 低的溴，能避免進行兩次雌二醇與螢光團的 S_N2 反應。但實驗結果顯示溴的活性 還是過高，依然須採用當量數控制和慢慢滴加的方式控制產物的生成。

圖 2-7 螢光團衍生物 DBD-7α-Gly-EDIOL 之逆合成分析。

在合成化合物 15 之前，須先活化溴乙酸。¹⁰¹以四氫呋喃為溶劑，0 ℃下加入 脫水試劑 N,N'-二環己基碳二亞胺 (N,N'-dicyclohexylcarbodiimide，DCC)，先與溴 乙酸形成高活性的中間體，再和 NHS 的羥基進行加成離去反應，回室溫反應 12 小時，經再沉澱純化後，可得活化產物，產率 72%，如式 (22)。接著螢光團衍生 物 7-EDADBD 與經活化過的溴乙酸進行加成離去反應。以四氫呋喃為溶劑，於室 溫下將 7-EDADBD 慢慢滴入，反應 2 小時，經加壓管柱層析純化後，可得化合物 15，產率 41%，回收起始物後產率為 91%，如式 (23)。

(22)

(23)

接下來利用 SN2 取代反應將雌二醇和螢光團部分連接起來，反應條件和加料 方式同式 (18)。將化合物 15 於室溫下分 10 小時慢慢滴入化合物 8 中，經加壓管 柱層析純化後，可得化合物 16，產率 98%，如式 (24)。

(24)

化合物 16 去 THP 保護條件同式 (21)，在酸性條件下進行水解，55 ℃下反應 2 天，經加壓管柱層析純化後，可得目標產物 DBD-7α-Gly-EDIOL，產率 80%，

如式 (25)。