電針及中藥方劑木香檳榔丸對麻醉後動物奧迪氏括約肌之影響：免疫組織化學與機轉之研究; Effect of Electroacupuncture and Muh-Shiang Bin-Lang-Wan on Sphincter of Oddi in Anesthetized Animal： Immuohistochemistry and Mechamism Studies
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(2) 中華民國九十二年十二月. V.
(3) 目 錄 第一章. 前言..................................................................................................1. 第二章. 文獻探討..........................................................................................2. 第一節. 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 之簡介............................. 2. 一、不同物種 SO 之解剖學比較 ........................................................2 二、不同物種 SO 生理學的比較 ........................................................2 三、SO 功能之體內調節控制的物質.................................................5 四、SO 功能之體內調控的方式 .........................................................8 五、SO 之病理狀態 .............................................................................8 第二節. SO 病理狀態之臨床舉例-膽石症 (cholelithiasis) 及中西 醫觀點 ...................................................................................... 10. 一、西醫觀點 .....................................................................................10 二、中醫觀點 .....................................................................................11 第三節. 現代治療膽石症 (cholelithiasis) 之挑戰 .............................. 16. 一、西醫的治療 .................................................................................16 二、中醫的治療 .................................................................................16 三、中西醫整合治療 .........................................................................16 第三章 PART. 材料與方法 ...................................................................................17 Ⅰ 貓：組織免疫學染色篇 .............................................................17. 第一節. 實驗動物 .................................................................................. 17. 一、貓 .................................................................................................17 第二節. 實驗儀器、材料與設備 .......................................................... 18. 一、實驗儀器 .....................................................................................18 二、材料 .............................................................................................18 三、器械、設備 .................................................................................19 第三節. 實驗方法 .................................................................................. 20. 一、術前準備 .....................................................................................20 二、電針模型的建立 .........................................................................20 三、免疫染色法（Immunohistochemistry stain.） ..........................20 iv.
(4) 第四節. 實驗設計及分組 ...................................................................... 23. 一、探討電針對貓腸道組織免疫學之效應 .....................................23 二、探討假電針對貓腸道組織免疫學之效應 .................................23 三、實驗對照組 .................................................................................23 第五節. 染色正反應結果百分比計分評估表之設定.......................... 23. PART Ⅱ 兔子：濃縮中藥，木香檳榔丸篇...........................................24 第一節. 實驗動物 .................................................................................. 24. 一、兔子 .............................................................................................24 第二節. 實驗儀器、材料與設備 .......................................................... 24. 一、實驗儀器 .....................................................................................24 二、藥物材料 .....................................................................................25 三、器械、設備 .................................................................................26 第三節 實驗方法 .................................................................................... 28 一、動物實驗模型建立 .....................................................................28 第四節. 鼻胃管灌食藥物之模型的建立 .............................................. 35. 一、胃大彎近幽門處解剖定位 (圖 3-5) ..........................................35 第五節. 實驗設計及分組 ...................................................................... 35. 一、探討木香檳榔丸對兔子奧迪氏括應約肌之調控效應.............35 二、探討木香檳榔丸對兔子奧迪氏括應約肌之作用機轉.............37 第六節. 實驗數據處理及統計方法 ...................................................... 38. 一、實驗數據處理 (圖 3-6) ..............................................................38 二、統計方法 .....................................................................................38 第四章. 結果................................................................................................40. PART I 貓：組織免疫學染色篇 ..............................................................40 第一節. EA group (電針組) 對貓腸道組織免疫學之反應................. 40. 第二節. Sham EA group (假電針組) 對貓腸道組織免疫學之反應... 40. 第三節. 實驗對照組對貓腸道組織免疫學之反應 .............................. 46. PARTⅡ. 兔子：濃縮中藥--木香檳榔丸篇............................................47. 第一節. 木香檳榔丸濃縮中藥對兔子奧迪氏括約肌的效應.............. 47. 第二節. 木香檳榔丸濃縮對兔子奧迪氏括約肌調控之作用機轉...... 60. 第三節. 木香檳榔丸濃縮對兔子奧迪氏括約肌調控之結論.............. 73 v.
(5) 第五章. 討論................................................................................................74. 第一節. 麻醉對奧迪氏括約肌之影響 .................................................. 74. 第二節. 奧迪氏括約肌的探討與實驗動物的選取 .............................. 76. 第三節. 電針與手針參數的取捨 .......................................................... 77. 第四節. 動物穴位之選擇 ...................................................................... 78. 第五節. 濃縮中藥之選擇 ...................................................................... 79. 第六節. 木香檳榔丸濃縮中藥之生藥基源與成品鑑定...................... 78. 第七節. 木香檳榔丸調控奧迪式括約肌有效成份之預測.................. 87. 第八節. 針刺、溫灸及中藥方劑木香檳榔丸之臨床適用性.............. 88. 第六章. 結論................................................................................................91. 一、PART I 貓：組織免疫學染色篇 ......................................................91 二、PART II 兔子：濃縮中藥木香檳榔丸篇.........................................91 參考文獻........................................................................................................92 英文摘要........................................................................................................95 謝辭................................................................................................................97. vi.
(6) 圖目錄 【圖 2.1】人類奧迪氏括約肌立體結構示意圖 .........................................3 【圖 2.2】負鼠奧迪氏括約肌立體結構示意圖 .........................................4 【圖 3.1】貓電針穴位之解剖定位 .............................................................21 【圖 3.2】貓腹部實景圖 .............................................................................22 【圖 3.3】兔子鼻胃插管實景圖 .................................................................30 【圖 3.4】兔子腹部手術及插管實景圖 .....................................................31 【圖 3.5】兔子鼻胃插管，胃大彎近幽門處示意圖 .................................36 【圖 3.6】奧迪式氏括約肌壓力圖及實驗數據之定義 .............................39 【圖 4.1】貓膽囊免疫學染色圖 .................................................................43 【圖 4.2】貓奧迪氏括約肌免疫學染色圖 .................................................44 【圖 4.3】貓十二指腸免疫學染色圖 .........................................................45 【圖 4.4】木香檳榔丸 0.25gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌壓力圖之變化 .........................................................................48 【圖 4.5】木香檳榔丸 0.25gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌基礎壓力（TP）之變化統計圖.............................................49 【圖 4.6】木香檳榔丸 0.25gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖.....................................50 【圖 4.7】木香檳榔丸 0.5gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約肌 壓力圖之變化 .............................................................................51 【圖 4.8】木香檳榔丸 0.5gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約肌 基礎壓力（TP）之變化統計圖.................................................52 【圖 4.9】木香檳榔丸 0.5gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約肌 相位收縮壓力（PP）之變化統計圖.........................................53 【圖 4.10】 木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 vii.
(7) 肌壓力圖之變化.......................................................................54 【圖 4.11】 木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌基礎壓力（TP）之變化統計圖 ..........................................55 【圖 4.12】 木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖 ..................................56 【圖 4.13】 木香檳榔丸 2.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌壓力圖之變化.......................................................................57 【圖 4.14】 木香檳榔丸 2.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌基礎壓力（TP）之變化統計圖 ..........................................58 【圖 4.15】 木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括 約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖 ..............................59 【圖 4.16】 澱粉（Starch）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌壓力圖之變 化 ...............................................................................................61 【圖 4.17】 澱粉（Starch）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌基礎壓力（TP） 之變化統計圖...........................................................................62 【圖 4.18】 澱粉（Starch）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌相位收縮壓 力（PP）之變化統計圖 ..........................................................63 【圖 4.19】 二次水（2nd H2O）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌壓力圖 之變化 .......................................................................................64 【圖 4.20】 二次水（2nd H2O）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌基礎壓 力（TP）之變化統計圖 ..........................................................65 【圖 4.21】 二次水（2nd H2O）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌相位收 縮壓力（PP）之變化統計圖 ..................................................66 【圖 4.22】 事先施予 A.P.P 對木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉 後兔子奧迪氏括約肌壓力圖之變化.......................................67 【圖 4.23】 事先施予 A.P.P 對木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉 後兔子奧迪氏括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖..........68 【圖 4.24】 事先施予 A.P.P 對木香檳榔丸 1.0g (MSBLW) 對麻醉後 兔子奧迪氏括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖 ......69 【圖 4.25】 事先施予 Pirenzepine 對木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對 viii.
(8) 麻醉後兔子奧迪氏括約肌壓力圖之變化...............................70 【圖 4.26】 先施予 Pirenzepine 對木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻 醉後兔子奧迪氏括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖......71 【圖 4.27】 先施予 Pirenzepine 對木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻 醉後兔子奧迪氏括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計 圖 ...............................................................................................72. ix.
(9) 表目錄 【表 3.1】木香檳榔丸（MUH SHIANG BIN LANG WAN）科學濃縮 中藥處方成份表 ........................................................................ 27 【表 4.1】膽囊（GB） 、奧迪氏括約肌（SO）及十二指腸（Duodenum） 染色正反應結果百分比評分表 ................................................ 42 【表 4.2】木香檳榔丸 0.25 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌之影響 .................................................................................... 48 【表 4.3】木香檳榔丸 0.5 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌之影響 .................................................................................... 51 【表 4.4】木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌之影響 .................................................................................... 54 【表 4.5】木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括約 肌之影響 .................................................................................... 57 【表 4.6】澱粉（Starch）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌之影響 .............. 61 【表 4.7】二次水（2nd H2O）對麻醉後兔子奧迪氏括約肌之影響 ..... 64 【表 4.8】事先施予 A.P.P 對木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 麻醉後兔 子奧迪氏括約肌之影響 ............................................................ 67 【表 4.9】事先施予 Pirenzepine 對木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 麻 醉後兔子奧迪氏括約肌之影響 ................................................ 70. x.
(10) 電針及中藥方劑木香檳榔丸對麻醉後動物奧迪氏括約肌之影 響：免疫組織化學與機轉之研究 博 士 生：郭勇麟 指導教授：林昭庚. 教授. 中國醫藥大學中國醫學研究所 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 在調控膽汁、胰液分泌至十二 指腸扮演很重要之角色，當其功能失常時臨床上常見右上腹部脹痛、腸 脹氣、黃疸、嘔吐及消化不良等，如西方醫學之膽石症、手術後奧迪氏 括約肌功能不全、慢性胰臟炎、肝後性鬱積型肝炎、阻塞性黃膽，在中 醫典籍對其病症常以脅痛、肝脹、膽脹及結胸等來描述。 本研究主要分為有二部分；partⅠ：探討電針 (Electroacupuncture) 麻醉後貓的右側期門、日月穴 20 分鐘後取出膽囊、奧迪氏括約肌及十 二指腸，經免疫染色法來探討其細胞組織形態之變化，進而了解 CCK 內分泌細胞、VIP 神經分佈狀況。partⅡ：以濃縮中藥木香檳榔丸經鼻胃 管灌食麻醉後之兔子來探討其奧迪氏括約肌 1 小時中之壓力變化及調控 機轉。 實驗結果發現電針麻醉後貓的右側期門、日月穴 20 分鐘後膽囊、 奧迪氏括約肌及十二指腸之 CCK (Cholecystokinin)分泌細胞及 VIP (Vasosctive intestinal polypetide)神經數量，經免疫染色後以半定量評分計 量評估後發現比未電針前之 CCK 分泌細胞及 VIP 神經數量表現更多且 明顯，證明了電針麻醉後貓的右側期門、日月穴可激發 CCK 分泌細胞 及 VIP 神經的表現，進而調控奧迪氏括約肌。以不同劑量（0.25 gm、0.5 gm、1.0 gm、2.0 gm）的傳統中藥處方木香檳榔丸經由鼻胃管灌食麻醉 後的兔子，來測量 1 小時中奧迪氏括約肌壓力之變化。在實驗中我們得 到的結果是：不同劑量的木香檳榔丸對麻醉後之兔子在灌食後 1 小時內 基礎壓 (tonic pressure)、相位收縮壓 (phasic contraction pressure)有不同 xi.
(11) 程度之改變且有統計學上的意義。其作用機轉；一：可被先施予靜脈給 藥 之 A.P.P. 所 阻 斷 可 證 明 其 作 用 機 轉 非 經 由 NANC (Nonadrenegic Noncholinergic) pathway 。二：可被事先施予鼻胃灌食之 pirenzepine 10 mg/kg（為專一性的 M1 Muscarinic receptors 之拮抗劑）所阻斷。因此木 香檳榔丸對奧迪氏括約肌之生理調控機轉可推測興奮了 M1 Muscarine receptors 而來。 所以，我們結論，傳統中國醫藥學在疾病治療中，電針及中藥方 劑 (木香檳榔丸) ，對動物奧迪氏括約肌的調控機轉，各扮演不同之重 要角色。 關鍵字： 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi); 電針 (Electroacupuncture); CCK (Cholecystokinin); VIP (Vasosctive intestinal polypetide); 基 礎 壓 (tonic pressure); 相 位 收 縮 壓 (phasic contraction pressure); NANC (Nonadrenegic Noncholinergic); pirenzepine; Muscarinic receptor, 木香檳榔丸. xii.
(12) 第一章 前言 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 在調控膽汁、胰液分泌至十二指 腸扮演很重要之角色，當其功能失常時臨床上常見右上腹部脹滿痛、腸 脹氣、黃疸、嘔吐及消化不良等，如在中醫典籍對其病症常以脅痛、肝 脹、膽脹及結胸等來描述，而在西方醫學則以膽石症、膽囊切除後症候 群（膽道弛緩不能、膽道痙攣）手術後奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 功能不全、慢性胰臟炎、原因不明復發性胰臟炎、肝後性鬱積型肝炎、 阻塞性黃膽等病症最常見。先前實驗證明了針刺麻醉後動物貓、兔子右 側期門、日月穴可引發 CCK (Cholecystokinin) 分泌血中濃度升高，調控 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 之基礎壓力及相位收縮壓力，增強膽 囊收縮及膽汁排出量. (1). 。基於此成果所以我們繼續另一方面研究計劃，. 做進一步探討針刺麻醉後動物貓右側期門、日月穴後其下膽道組織中膽 囊、奧迪氏約肌及十二指腸之免疫組織學之變化。 在傳統中國醫藥學中以針、灸、藥為疾病治療法之三大主軸。先前 的研究已證明了針刺麻醉後動物貓及兔子右側期門、日月穴可引發 CCK 分泌血中濃度升高. (1). (Nitric Oxide) 之釋出. ；溫灸麻醉後動物貓及兔子右側日月穴可促成 NO (2). 進而調控奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 壓. 力變化。基於對中藥方劑對麻醉後動物兔子奧迪氏括約肌之影響為何？ 作用機轉為何？之好奇與期望使然，因此我們另一研究計劃以中醫臨床 常用治療右上腹部脹滿痛、腸脹氣、黃疸、嘔吐及消化不良等症狀之中 藥方劑木香檳榔丸. (3). 來做研究，以濃縮中藥方劑木香檳榔丸經鼻胃管. 灌食麻醉後之兔子來探討其奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 1 小時中 之壓力變化及其調控機轉。 藉由上面之研究計劃之探討，進而是否可以解釋傳統中國醫藥學在 疾病治療法中，針刺、溫灸及中藥方劑 (木香檳榔丸)，對動物兔子奧迪 氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 的調控機轉，各伴演不同之重要角色。. 1.
(13) 第二章 文獻探討 第一節 奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 之簡介 遠于 1887 年，Oddi 這位醫學院的學生，就已經對 sphincter of Oddi (SO) 做了一個描述：”a sphincteric arrangement around the termination of the common bile duct in several species,including humans”。認為 SO 有調 節膽汁流入十二指腸的功能. (4). 。. 但至 1898 年 Henderickson 才証實 Oddi 的發現 Hendrickson 等人將 人類 SO 的構造藉由不同方向組織切片，描繪出來. (5)(6). 。Boyden 等學者. 在 1937 年，將人類 SO 再細分成四部份： choledochal sphincter，pancreatic sphincter，ampulla sphincter 及 intermediate fibres. (7). 。其中 choledochal. sphincter 存在於所有個體上，而 pancreatic 及 ampulla sphincter 則分別於 1/3 及 1/6 的人才有。在人類的 choledochal sphincter，壁內平均長度為 14 mm (範圍 7-22 mm) ，壁外平均長度為 5 mm (範圍 1-11 mm) ，而 choledochal 與 pancreatic 交會的共同通道約長 3 mm (0-9 mm) (8)。 一、不同物種 SO 之解剖學比較 在不同物種的 SO 解剖學上有極大的差異性，大致上可分為雜食性 與草食性兩大類,例如雜食性動物人、貓、狗等其 SO (附圖 2-1). (9). ，為. intraduodenal type。而草食性動物負鼠、兔子為 extraduodenal type (附圖 2-2) (9)。 二、不同物種 SO 生理學的比較 SO 的生理功能最重要是用來調節膽汁的流入十二指腸，但是，作用 的機制在不同種生物有不同的方法；例如在人類、貓及狗等雜食性動. 2.
(14) 【圖 2.1】人類奧迪氏括約肌立體結構示意圖. (9). 【說明】 其環狀平滑肌 (circular smooth muscle) 包裹住總膽管 (CBD) 末梢，且大部分奧迪氏括約肌位於十二指腸壁，經由一裂縫 （slit）開口於十二指腸中。故又稱 intraduodenal type 之奧迪 氏括約肌。. 3.
(15) 【圖 2.2】負鼠奧迪氏括約肌立體結構示意圖. (9). 【說明】 其奧迪氏括約肌末端、少有十二指腸平滑肌 (duodenal muscle) 包 裹 住 ， 經 由 一 裂 (slit) 開 口 於 十 二 指 腸 中 。 故 又 稱 extraduodenal type 之奧氏括約肌。而兔子與之類似。. 4.
(16) 物，SO 對 cholecystokinin (CCK) 的反應是抑制性的。而在草食性動物 如：兔子、負鼠等，SO 對 CCK 的反應是興奮性的；換言之，SO 在人 類、貓及狗的膽汁調控是阻力式 (resistor) 。而在草食動物則是蠕動幫 浦式 (peristaltic pump). (10) (11) (12). 。而其他荷爾蒙的調控也有不同。不同. 物種的 SO 對 CCK 反應不同，但其生理功能都在促使膽汁流入十二指 腸。例如人類、貓之機轉可能藉 CCK 抑制 SO 的壓力而使膽汁排出，而 在負鼠、兔子其機轉可能藉由增加 SO 壓力而排出膽汁. (13). 。. 三、SO 功能之體內調節控制的物質 SO 之調節控制依調控物質可分成，(一)交感、副交感神經調控。 （二） 非交感、副交感神經調控。（三）荷爾蒙調控。 (一)交感、副交感神經調控 在交感神經及副交感神經對 SO 之調控是截然不同的。在人類:副交 感神經造成膽囊、膽道收縮，SO 放鬆主要與 muscarinic receptor 之作用 有關. (14) (15). 。迷走神經切除對禁食之 opossum 的 SO 壓力沒有影響. (16). 。. 然而在交感神經方面則是 α1 受體使 SO 收縮，β2 受體使膽囊、膽 道放鬆. (17). 。至於交感神經及副交感神經之間如何協調、調控 SO，至. 今所知仍然有限。 （二）非交感、非副交感神經調控 在非 NANC (Nonadrenegic Noncholinergic) 非交感神經、非副交感 神經之神經傳遞物質 (neurotransmitter) 中，陸陸續續被發現及被討論研 究. (18) (19). 。詳述如下：. 1.Nitric Oxide (NO) 一氧化氮 NO 在胃腸道平滑肌的作用，主要是舒張平滑肌。在 1992 年， Vanderwinden 等 學 者 發 現 嬰 幼 兒 幽 門 肥 厚 性 梗 塞. (Infantile. Hypertrophic Pyloric Stenosis) ，其幽門平滑肌的 NO Synthase (NOS) 含 量特別少. (20). 。在奧迪氏括約肌方面，NO 的釋放與奧迪氏括約肌壓力 5.
(17) 下降有關. (21) (22). 在 prairie dog 的 動 物 實 驗 上 施 予 NO 之 抑 制 劑. L-NAME 則 SO 之 motility 增強且呈 dose-dependent response。而此現象 可被 NO 的前軀物 L-arginine 將之回復，但以 D-arginine 則無法回復. (22). (23). 。最近在本實驗室，利用貓及兔子模型，發現溫灸可降低貓及兔子二. 種不同物種 SO 之基礎壓力 (tonic pressure) 相位收縮壓力 (phasic conraction pressure) ，其機轉也是經由 NANC 及 NO 釋放的途徑. (2). 。. 2.endogenous opioid peptide 內源性腦啡在許多鎮痛的針刺研究中，電針 可因不同的內源性腦啡，如 2Hz 可引發 enkephalin.β-endorphin，15Hz 可引發 enkephalin、β-endorphin、dynorphin，100Hz 可引發 dynorphin， 在不同頻率 (Hz) 的周邊電針或手針刺激下皆可引發腦啡 (opioids) 的 釋出，無論在中樞神經系統或周邊神經系統皆會釋出. (24). 。而其三種腦. 啡受體 (opioid receptors) 如 enkephalin 的 δ 受體；β-endorphin 的 µ 受體 及 dynorphin 的 κ 受體。在過去的研究中 enkephalins 已被證實為腸道的 荷爾蒙. (25). ，而其對 SO 的影響在貓的動物實驗中 enkephalin 可使貓的. 奧迪氏括約肌先收縮再放鬆. (26). ，而 640 µg/kg 之 Naloxone 可完全抑制. Leu-enkephalin 8 µg/kg 造成 SO 之收縮。在其他的研究中 naloxone 對 opioids 之抑制也呈現 Dose-dependent response (27)。 3.Cholecystokinin (CCK) 膽囊收縮素 CCK 對 SO 的調控是最被生理學家所熱衷研究的荷爾蒙。目前以知 在人類，當禁食時 SO 呈現緊閉狀態控制膽汁流出十二指腸；當進食 時:CCK 釋出造成膽囊收縮，SO 放鬆使膽汁流出至十二指腸。但其作用 機轉在每一個動物並非相同. (28). 。例如在人類、貓、狗 其 CCK 作用機. 轉可能藉由抑制 SO 而排出膽汁，在負子鼠及兔子其機轉是藉由增加 SO 壓力將膽汁排出. (13). 。CCK 有幾種生理現象之神經媒介調控已被証實；. (a)CCK 激發乙醯膽鹼 acetylcholine 釋出使膽囊收縮；(b) CCK 誘發血管 活性腸多胜肽(VIP) 釋出，使 SO 放鬆；(c) CCK 活化了抑制性迷走神 經反射弧，且涉及釋出 VIP 使胃底放鬆，進而抑制胃排空. (29). ； (d) ：. CCK 可直接促進膽囊肌肉的收縮；若將 SO 的支配神經阻斷，CCK 可造 成 SO 肌肉的收縮. (30). ，顯示在沒有神經物質的參與下，是造成 SO 的 6.
(18) 收縮。另外 CCK 之 receptor 有 CCK-A receptor 及 CCK-B receptor，CCK-A receptor (31) 大多存在於周邊組織，如 pyloric sphincter、pancreas、vagus nerve。CCK-B 則大都在 brain (32) 。根據研究，大腦 CCK 的釋出可使胃 擴張產生飽食感而食慾降低 拮抗腦啡鎮痛效應. (34). (33). 。在鎮痛的實驗上，大腦釋出的 CCK 有. ，在大鼠中樞給予 CCK-8 可拮抗 morphine 鎮痛. 的效果，其效力約為 naloxone 的 3000 倍. (35). 。在貓的實驗中，若事先給. 予 VIP 的抗血清再給予 CCK，則 SO 放鬆的現象消失而呈現收縮，可得 而知 CCK 促使 SO 放鬆須 VIP 來參與 胞內機轉是藉由 cAMP 的參與. (36). (30). ;並且 CCK/VIP 放鬆 SO 之細. 。近期本實驗室研究已證明了針刺動. 物右側期門、日月穴可引發 CCK 分泌血中濃度升高，進而調控 SO，膽 囊壓力變化，對草食性動物兔子或雜食性之動物貓皆有共通之效果. (1). 。. 4.Vasoactive intestinal polypetide (VIP) 血管活性腸多胜肽 在腸道上 VIP 是屬於抑制性神經傳遞物質，在貓的實驗中可發現食 道和胃的交接處幽門括約肌、奧迪氏括約肌都有豐富的 VIP 神經的分佈 (37). 。其扮演的角色為抑制性的荷經阻斷劑 atropine，再電刺激右側迷走. 神經可使爾蒙可使上述的組織放鬆。若事先給予副交感神劑 acetylcholine 引發 VIP 釋出使 SO 放鬆；若事先施予 atropine 及 anti-VIP serum 則 SO 放鬆的現象被抑制. (38). 。在臨床研究報告上更發現在合谷、後溪兩穴給. 予經皮電神經刺激 (TENS) 45 mins 後，血中 VIP 升高、SO 之壓力降低 (39). 。更有趣的是有學者. (40). 提出 NO 之抑制劑 L-NNA 可抑制 VIP (52-54). %的釋出，及阻斷 VIP (58-88)%放鬆的效果。 （三）荷爾蒙調控 至於其他的荷爾蒙對 SO 的調控也都有報告:如 VIP 之釋出也包含了 peptide histidine isoleucine (PHI) 及 neuropeptide Y，因其皆屬於 VIPergic nerve 所釋出的物質，且對腸胃道呈抑制性反應 般而言為對 SO 是抑制 是 CCK 的八倍. (13). (28). (39). 。Glucagon 的作用一. ，而 Motilin 的作用與 CCK 相類似，其效力. 。. 7.
(19) 四、SO 功能之體內調控的方式 可分為：(一)內臟－內臟反射調控。（二）體表－內臟反射調控。 （一）內臟－內臟反射調控 (Visceroviscerval reflex) 早在 1967 年，Wyatt 等發現當用機械刺激膽囊時，會引起所謂的抑 制反射 (inhibitory reflex) ，進而使 SO 放鬆. (41). ;另外，一些研究發現，. 當膽囊壁或膽囊壓力增加時，SO 會被抑制；相對地，當膽壁壓力減少 時，SO 張力會增加. (42) (43). 。這種現象，稱之為內臟－內臟反射調控。. （二）體表－內臟反射調控 (Somatovisceral reflex) 目前這種利用體表的刺激，來調控內臟功能的反射，我們實驗室灸 療方面：溫灸有抑制麻醉後兔子、貓及人類 SO 壓力之作用其經由一氧 化氮 (NO) 來使 SO 放鬆. (2). 。電針刺激麻醉後兔子、貓之右側期門、. 日月穴後引發 CCK 分泌血中濃度升高，調控 SO 之基礎壓力及相位收縮 壓力，增強膽囊收縮及膽汁排出量. (1). 以有初步成果發表。. 五、SO 之病理狀態 由於 SO 具有調控膽汁流入十二指腸的關鍵地位，當 SO 呈現異常 功能時，就會產生許多臨床疾病，如膽囊切除後症候群 (postcholecystectomy syndrome) 、原因不明性復發性胰臟炎 (idiopathic recurrent pancreatitis) 、慢性胰臟炎 (chronic pancreatitis) 、 膽石症 (cholelithiasis) 、膽道弛緩不能 (biliary dyskinesia) 、膽道痙攣 (biliary spasm) 等疾病. (44). ，基本上這些症狀的產生是由於 SO 的管腔變窄小和. 弛張功能失調所引起，至於 SO 管腔變小的原因有兩種：一是狹窄 (stenosis) 另一是弛緩不全 (dyskinesia) ；所謂結構上狹窄是指 SO 管腔 因為纖維化 (fibrosis) ，導致管腔結構上變狹窄，例如因胰臟炎，或膽 道結石通過膽道時造成黏膜增生 (mucosal hyperplasia) ，或者因其他非 特殊性發炎所引起的狹窄. (45). 。至於弛緩不全 (dyskinesia) 則是 SO 管. 腔雖然變小，但是卻沒有纖維化 (fibrosis) 現象稱之 8. (46). 。.
(20) 不管是 stenosis 或 dyskinesia，其 SO 之基礎壓力（basal pressure or tonic pressure）或相位收縮壓力 phasic contraction pressure 都會增高，臨 床上，曾經使用平滑肌鬆弛劑如硝酸鹽 (Nitrates) 來鑑別診斷；如果是 stenosis type，則服用硝酸鹽後，TP or PP 則明顯下降，不過，由於這種 方法正確性不高，所以 Hogan 和 Geenen 又提出”Milwakee Biliary Group Classification“。如果是屬於 type I：則病人是 stenosis 的可能性遠大於 dyskinesia，如果是 type III：則較有可能是 dyskinesia type，如果是 type II： 則需作進一步的壓力學 (manometry) 才能判定(46)。. 9.
(21) 第二節 SO 病理狀態之臨床舉例-膽石症 (cholelithiasis) 及中 西醫觀點 一、西醫觀點 (一)定義 膽石症 (cholelithiasis) 是指膽道系統中膽囊內結石，總膽管結石及 肝內結石的總稱；其臨床表現取決於結石是否引起膽道感染、膽道梗阻 以及梗阻的部位與程度。 （二）臨床表現: 膽石症的臨床表現取決於膽石的動態、位置、大小和所在部位。由 於本研究與 SO 有關,所以我們將膽石症聚焦於”膽道內移行的結石”的臨 床表現：膽石從膽囊移行至膽囊管或總膽管時,往往產生嵌頓,此時由於 膽囊或總膽管平滑肌弛張或痙攣,企圖將膽石排出，因此產生膽絞痛。膽 絞痛大都在飽餐或進高脂肪餐後數小時內，或在腹部受到震動 (例如在 崎嘔的山路上驅車或騎馬 ) 後發作。痛多在中上腹，右上腹或後背部， 開始時呈持續性鈍痛，以後逐漸加重至難以忍受的痛程度 ; 病人常坐臥 不安、彎腰、打滾、用拳頭緊壓腹部，甚至哭喊 ; 疼痛常放射至右肩胛 處或右肩部。痛時常大汗淋漓、面色蒼白、噁心及嘔吐。發作多較短暫， 很少超過數小時。膽石退入膽囊或進入十二指腸後，疼痛可完全消失 ; 有時因膽管局部擴張而減輕，直至膽石移動位置時再度發作。有些病例 反覆發作，另一些則經數月至數年的緩解期後再復發。當膽石如果嵌入 Vater ampulla 時，持久性梗阻黃疸為其典型表現。在黃疸發生前常有絞 痛，但黃疸持績存在，絞痛卻常消失。膽石長期嵌頓引起慢性膽汁鬱滯 及伴發膽道感染者常可引起梗阻性膽汁性肝硬化。此外，Vater ampulla 梗阻引起膽汁反流至胰管時亦可致急性胰臟炎。 （三）西醫治療 西醫治療膽石症的最大原則有二：一、是使 SO 擴張促使結石排出， 10.
(22) 另一是減少膽石生成。 1. 飲食控制：脂肪類食物可促進 CCK 的釋放而增強膽囊的收縮，如奧 迪氏括約肌不能及時弛緩使膽汁流出，每可致不適感覺。在急性發作 期，應禁食脂肪類。 2. 溶石療法：近年來應用鵝去氧膽酸治療膽固醇膽石，溶石有效率（全 部或部分溶解）60%左右。作用機理是使膽汁內膽固醇的分泌和總膽 固醇的排出量減少，從而提高膽汁對膽固醇的溶解能力，促進膽石上 已沉澱的膽固醇的溶解，而使膽石縮小或消失，但對台灣膽色素結石 較多之區域，則效果不彰。 3. 增進膽汁排泌：硫酸鎂有鬆弛奧迪氏括約肌的作用，使滯留的膽汁易 於排出，可於餐後囗服 50%硫酸鎂溶液 10-15 ml ，每日 3 次。 4. 症狀消除：如給予一些鎮痛劑,抗經痙劑。 5. 手術治療：可分為膽囊摘除術及膽管截石術目前因腹腔鏡手術之進展 快速，利用微創性腹腔鏡手術解除病患的膽石症，是現今外科領域的 潮流。 二、中醫觀點 中醫對於膽石症並未如此將膽石成因、位置、成分做詳細敘述,僅就 膽石症所造成的症狀-脅痛、膽脹、肝脹、結胸做描述。 (一)中醫相關文獻（按年份排列）： 1. 脅痛 （1）<<素問.臟器法時論>> 肝病者，兩脅下痛引少腹令人善怒。 （2）<<素問.刺熱篇>> 肝熱病者，?脅滿痛，手足躁，不得安臥。 （3）<<素問、至真要大篇>> 厥陰之勝，胠脅氣並化而為熱，小便黃赤，胃皖當心而痛， 上支兩脅。 11.
(23) （4）<<素問、謬刺篇>> 邪客於足少陽之絡，令人脅痛不得息。 （5）<<靈樞、五邪篇>> 邪在肝，則兩脅中痛，•••惡血在內。 （6）<<諸病源候論、胸脅痛候>> 邪氣乘於胸脅，故傷其經脈，邪氣之與正氣交擊，故令胸脅相 引而急痛也。 （7）<<醫學正傳、脅痛>> 外有傷寒發寒熱而脅痛者，足少陽膽，足厥陰肝二經病也。或有 清痰食積，流注脅下而為痛者。或有登高墜仆，死血阻滯而為痛 者。又有飲食失節，勞役過度，以致脾土虛乏，肝木得以乘其土 位，而為胃脘當心而痛，上支兩脅痛，膈噎不通，食飲不下之證。 （8）<<張氏醫通．脅痛>> 肝主陰血而於左脅。脾主陽氣而隸於右脅。左脅多怒傷或留血作 痛。右脅多痰積或氣毒作痛。其間七情鬱之犯，飲食勞動之傷， 皆足以致痰凝氣聚，血蓄成積。雖然痰氣亦有流於左脅者，然必 與血相持而痛，血積亦有傷於右脅者，然必因脾氣衰而致。 （9）<<臨證指南醫案．脅痛>> 脅痛一證，多屬少陽厥陰。傷寒脅痛，皆在少陽膽經…雜證脅痛， 皆屬厥陰肝經。 2. 膽脹、肝脹 <<靈樞，脹論>> 膽脹者，脅下脹痛。 肝脹者，脅下滿而痛引少腹。 3. 結胸 <<傷寒論.太陽病篇>> 太陽病，脈浮而動數，浮則為風，數則為熱，動則為痛，數則為虛， 12.
(24) 頭痛發熱，微盜汗出，而反惡寒者,表未解也，醫反下之，動數變遲，膈 內拒痛，胃中空虛，短氣躁煩，心中懊擾,陽氣內陷，心下因硬，則為結 胸，大陷胸湯主之，若心下結胸，但頭汗出，餘處無汗，齊頸而還，小 便不利，身必發黃。 (二) 臨床表現 中醫對於膽石症並無像西醫一樣詳細，僅就膽石症所造成的臨床症 狀做一描述，例如脅痛、膽脹就是中醫對膽石症症狀描述的名詞之一。 脅痛、肝膽脹是以一側或兩側脅肋部疼痛、脹痛為主要表現的病證，也 是臨床上常見的一種自覺症狀。若以中醫的陰、陽、表、裏、寒、熱、 虛、實，來分辨病痛的屬性則： 1. 陰證— 如面向壁臥、閉目避光、不喜會人、身寒手足捲縮、心靜無 聲、呼吸細微、口淡不渴、小便清澈、大便無臭、脈沉或遲、 身寒手足厥。 2. 陽證— 面向外臥、開眼喜光、喜與人會、仰臥伸手擲足，身輕心煩、 呼吸氣粗，喜涼、口渴多飲多喝、小便短赤、便秘、脈浮或 數、身熱手足溫暖。 3. 表證— 凡六淫邪氣自外入侵，先傷及皮表的經絡者。 4. 裏證— 病自初即發於內，或因傷於七情、勞倦、飲食等，或以酒色 為因，內臟先起病變，病邪內傳入臟腑。 5. 寒證— 口不渴、或渴而不喜飲、喜熱飲、手足厥冷，顏色蒼白小便 透明而長、大便下痢而稀、舌苔白滑、脈遲或緩等。 6. 熱證— 口渴引飲、喜冷飲、潮熱煩燥、面赤目紅、小便短赤、大便 祕結、舌苔黃而糙、脈數等。 7. 虛證— 是指正氣的虛弱，色慘形瘦，神氣衰怯，或自汗不收，或二 便不禁，或夢遺失精，或嘔吐食不下，或久病多攻，或呼吸 息粗，或勞慟過重呆立，症似實而脈弱無力，體弱久病者。 13.
(25) 8. 實證— 是指邪氣亢盛，邪氣之實，經絡外閉，臟腑內結，或氣塞不 行，或血滯凝瘀，此為脈病具盛。 本病在辨證上按病機發展的早、中、後期，結合臨床表現特點為及 中醫辨證的陰、陽、表、裏、寒、熱、虛、實可分為：肝郁膽熱症證、 火毒蘊盛證、正虛毒戀證三種類型。前兩種類型正盛邪實，正邪相爭劇 烈，故以右脅疼痛，寒戰高熱為主要表現。屬裏熱寒證。虛證常在病的 後期或恢復期出現，表現為午後潮熱、面色少華、自汗盜汗、脈數無力 等症狀。臨床辨證按其病機的發展和演化，重點辨清虛、實，就能比較 全面性地適應臨床辨證用藥。 (三) 中醫治療 中醫對膽石症即中醫的脅痛、膽脹的治療有針、灸、藥三方面。 1. 針灸方面：是一種既經濟果效又迅速的工具尤其在偏遠落後地 區，藥物的取得並不容易之處，除了局部穴道如右側日月(47)、期 門. (48). 、，也遠取相關穴道來治療，如內關、足三里、大敦穴往. 往一針下去，或溫灸疼痛就減輕. (49). 。先前的研究已經探討證明. 其作用機轉了。 2. 中藥處方方面：在中藥處方使用上，應本著「通則不痛， 榮則 不痛」的理論為原則，裏、熱、實證以理氣、去瘀通絡、活血、 清熱、化濕等法為主；常見之處方有木香檳榔丸. (3). 、柴胡疏肝散、. 茵陳蒿湯、龍膽瀉肝湯、茵陳五苓散等等 ; 虛證以滋陰養血柔 肝為主，佐以理氣和絡；常見之處方有一貫煎、逍遙散木香順氣 散、小柴胡湯、溫膽湯等等。 (四) 現代中醫之研究 現 代 中 醫 的 治 療 則 有 經 皮 電 神 經 刺 激 (TENS: Transcutaneous Electrical Nerve Stimulation) 於合谷及後溪 45 mins 後，使血中 VIP 升高 有效降低 Biliary dyskinesia 病人的 SO 壓力. (39). 進而減輕疼痛。及灸療. 方面：溫灸有抑制麻醉後兔子、貓及人類 SO 壓力之作用其經由 NO 釋 14.
(26) 出使 SO 放鬆. (2). 。電針刺激麻醉後兔子、貓之下期門、日月穴後引發. CCK 分泌血中濃度升高，調控 SO 之基礎壓力及相位收縮壓力，增強膽 囊收縮及膽汁排出量. (1). 。. 15.
(27) 第三節 現代治療膽石症 (cholelithiasis) 之挑戰 一、西醫的治療 台灣肝內結石的病人很多佔膽石症手術 20.3﹪，手術後的結石復發 率高，膽囊手術後，易造成膽囊、奧迪氏括約肌功能不全的病人多，如 何使殘餘的結石排出，結石復發率降低，膽囊、奧迪氏括約肌功能在術 後快速恢復是現今治療上的一大挑戰。另外治療腹腔膽汁泄漏時 (bile leakage) 需： (a) .膽道內完全減壓。 (b) .膽道外引流完全。在治療急性 胰臟炎時，SO 需要放鬆以避免更嚴重之併發症發生。這些值得更進一 步探討研究。 二、中醫的治療 中醫對膽石症的病人，以針、灸、藥為三大法。應先辨症再論症、 論治，更深入瞭解療效的機轉。過去我們用局部熱使奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 放鬆，但是灸後有 rebound 的現象，電針刺激麻醉後 兔子、貓之下期門、日月穴後引發 CCK 分泌血中濃度升高，調控奧迪 氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 之基礎壓力及相位收縮壓力，增強膽囊收 縮及膽汁排出量。現今針、灸已經有出步成果，我們更進一步研究針刺 後腸道組織學之變化及中藥方劑（木香檳榔丸）是否對奧迪氏括約肌 (Sphincter of Oddi) 有調控作用，進而對膽石症的中西醫整合治療進一步 的貢獻？ 三、中西醫整合治療 中西醫整合治療，是未來趨勢，因傳統醫學日益精進，科學化以漸 漸被大眾所肯定。如較大之膽石堵塞引起急性膽囊炎、急性胰臟炎、嚴 重黃疸有生命威脅者，則予以手術治療。手術後膽道有殘餘小結石及膽 囊、奧迪氏括約肌功能不全的病人，則可以中醫來輔助治療。 16.
(28) 第三章 材料與方法. part Ⅰ. 貓：組織免疫學染色篇. 第一節 實驗動物 一、貓 在本實驗中所採用的貓 (cats) 重量 2.5-4.0 kg 之間，從台北榮民總 醫院後山抓取，立即飼養於台北榮民總醫院實驗動物房（Room 1）有每 日 12 小時為週期的黑暗白日週期，並有適當的室內溫度 (27℃) 及濕度 控制 (70%) ，供應充足的飼料及水分；當要手術之前，則先禁食 12 小 時，除了給水之外，其他食物一概不給。. 17.
(29) 第二節 實驗儀器、材料與設備 一、實驗儀器 A. 動物剃毛器 (Animal clipper blade, Model: 113. Oster Co.,USA) B. 手術鹵素燈 (Halogen Examination Lamp, TCA-300H) C. 快速高壓消毒器 (speedy autoclave, Tomis Co. Taiwan) 攝氏 121℃, 1.3 Kg/cm2, 30 mins 二、材料 (一) 安耐寧：Xylazine (Loughrea Co., Ireland) (25 ml, 2%) 安耐寧在本實 驗中被用來做實驗動物的誘導麻醉 (induction anesthesia)，其所用的 濃度是 20 mg/ml，使用於實驗動物的劑量是 5 mg/kg，肌肉注射。 (二) 克太明：Ketamine (Sigma Co., K-2753, USA) (2-[2-chlorophenyl] -2-methylamino cyclohexanone) 克太明在本實驗中被用來做實驗動 物 的 誘 導 麻 醉 (induced anesthesia) 及 維 持 麻 醉 (maintainence anesthesia)，其所用的濃度是 50 mg/ml，使用於本實驗動物的誘導 麻醉劑量是 35 mg/kg，維持麻醉的劑量是 5 mg/kg，行肌肉注射。 (三) 肝素：Heparin ( HK-10765 Leo Co.USA) 肝素在本實驗中是用來作 為防止實驗動物靜脈凝血,其所用的濃度是 1000 IU/ml,劑量是 1 IU/ml,使用方法是用 Heparin 之生理食鹽水 (1 IU/ml) 注入動靜脈導 管少許 (約 1 ml)，,以防止凝血。 (四) 抗體：rabbit anti-cholecystokinin octapeptide（CCK26-33）antibody （H-069-04）及 rabbit vasoactive intestinal peptide （VIP）antibody （H-064-16）購於 Phoenix Pharmaceuticals, INC., CA, USA，此為 primary rabbit/mouse antibody (link antibody) 於冷凍切片後 ABC 染 色用之第 1 道抗體。 18.
(30) (五) DAKO LSAB® 2 System HRP （DAKO corporation, Carpinteria, CA 93013 USA Code NO. K0675）產品內含 3 小瓶（1） Biotinylated Link anti-Mouse and anti-Rabbit 1 g Code NO. K0675 （2）Streptavidin-HRP Code NO. K0675 （3）AEC+Substrate - Chromogen Code NO. K3461 此為 ABC 染色第 2 道抗體及顯色用之製劑。 (六) Tissue-Tek® OTC（Miles Inc. Diagnostics Division Elkhart, IN 46515 USA）：為包埋檢體之水溶性介質。用冷凍切片前包埋檢體之用。 三、器械、設備 (一) 手術時使用器械包括：牽引器、拇指鑷子、剪刀、手術刀柄、手術 刀片、止血鉗、持針器、動脈夾、顯微手術彎剪、自動加熱墊 (automatic heating pad)、無菌手術縫合線(a) 3-0 mono sof, 4-0mono sof (Nylon, USSC Co., USA)；(b) 3-0，4-0 silk (Johnson Co., USA)。 (二) 電針時使用器械包括：32 號 0.5 吋針灸針；韓氏電針儀，電針參數 2/15 Hz 交替疏密波，電壓 1.5-2.5 伏特，波寬 400 µsec。 (三) 冷凍切片機：Leica CRYOCUT 1800 （Germany） (四) 膽囊、十二指腸及奧迪氏括約肌等檢體 OTC 冷凍固定儲存，儲存於 -200C 下，切片染色時切取 5μm 厚度檢體染色。. 19.
(31) 第三節 實驗方法 一、術前準備 貓先禁食 12 小時,手術台及手術器械備齊,然後以 Ketamine 35 mg/kg, Xylazine (rompun) 5 mg/kg 混合肌肉注射進行麻醉，接著剃除胸 腹部之貓毛，並固定於手術台上。 二、電針模型的建立 A、 貓電針穴位之解剖定位 (圖 3.1) (A) 右側期門穴 (Qimen，LR 14) ，位於兔子右側六、七肋…肋軟 骨交接處，屬於第六肋間神經分布區域。 (B) 右側日月穴 (Riyue，GB 24) ，位於兔子右側七、八肋…肋軟 骨交接處，屬於第七肋間神經分布區域。 B、 當貓達到術後穩定狀態時，進行本實驗:電針麻醉後的貓右側期門 穴、日月穴 20 分鐘後，立即犧牲並取出膽囊、十二指腸及奧迪氏括 約肌（圖 3.2）等檢體每檢體橫切取 5 mm 寬並快速以 OTC 冷凍固 定，儲存於-200℃下，切片染色時切取 5 µm 厚度檢體染色。 三、免疫染色法（Immunohistochemistry stain.） 本實驗免疫染色方法採用 ABC stain，步驟為先將檢體用 acetone fix 3-5 mins，並架於水平有溼潤的盒中，加 0.1% sodium azide: H2O2= 9:1 之 solution 100 µl 靜置 15 mins 後以 PBS wash 3 times，加 5% goat serum 靜 置 10 mins 後以 PBS wash 3 times，加 antibody 於室溫靜置 30 mins 後以 PBS wash 3 times，加 link antibody reagent 1 滴靜置 10 mins 後加 streptavidin reagent 1 滴靜置 15mins 後以 PBS wash 3 times，加(9.5 ml Tris + 0.5 ml AEC + 100 µl 3% H2O2)之 solution 100 µl 靜置 10-15 mins 後以 PBS wash 3 times，加 Hemto mayer/s: DDW = 1:1 solution 靜置 1 mins 後 以 PBS wash 3 times，加 glyceringelatins 一滴，蓋上蓋玻片，晾乾。 20.
(32) 【圖 3.1】 貓電針穴位之解剖定位 A 點： 期門（Qimen，LR 14）於鎖骨中線上，第六，七肋間，肋骨 與肋軟骨交接處。 B 點： 日月（Riyue，GB 24）於鎖骨中線上，第七，八肋間，肋骨 與肋軟骨交接處。. 21.
(33) 【圖 3.2】貓腹部實景圖 A：十二指腸 B：奧迪氏括約肌（intraduodenal type） C：總膽管. 22.
(34) 第四節 實驗設計及分組 一、探討電針對貓腸道組織免疫學之效應 (一) EA group (電針組) ： 當貓達到術後穩定狀態時，進行本組實驗:以 2/15 Hz 電針右 側期門穴、日月穴 20 分鐘。犧牲動物，取膽囊、奧迪氏括約肌、 十二指腸包埋冷凍、切片、ABC 免疫學染色法染色。 二、探討假電針對貓腸道組織免疫學之效應 (二) Sham EA group (假電針組) 當貓達到術後穩定狀態時，靜置 20 分鐘。犧牲動物，取膽囊、 奧迪氏括約肌、十二指腸包埋冷凍、切片、ABC 免疫學染色法染 色。 三、實驗對照組 以電針組及假電針組之組織檢體以兔子之血清當對照組抗體，用 ABC 免疫染色法染色對照。. 第五節 染色正反應結果百分比計分評估表之設定 Score of percentage of postive-stained：將電針組及假電針組免疫染色 後 CCK 內分泌細胞及 VIP 神經數量與以量化評分，全無 postive stain 以予 0；10﹪postive stain 以予 +；25﹪postive stain 以予 ++；50﹪postive stain 以上以予 +++。. 23.
(35) PART Ⅱ 兔子：濃縮中藥木香檳榔丸篇 第一節 實驗動物 一、兔子 在本實驗中所採用的雄性紐西蘭白兔 (New Zealand White Rabbits) 購自台大醫學院動物中心。所使用的白兔重量限制在 2.5-3.5 Kg 之間。 自台灣大學動物室取來之後，即飼養於台北榮民總醫院實驗動物房 （Room 1） ，有每日 12 小時為週期的黑暗白日週期，並有適當的室內溫 度 (270C) 及濕度控制 (70%) ，供應充足的飼料及水分；當要手術之 前，則白兔先禁食 12 小時，除了給水之外，其他食物一概不給。. 第二節 實驗儀器、材料與設備 一、實驗儀器 (一) 壓力轉換擴大器 (transducer amplifer, TA240, Model 42-8240-10. Gould Co., USA) chart speed : 0.5 mm/sec, chart speed : 0.5 mm/sec, fluid speed : 0.3 cc/sec, Full scale : 100 mmHg，並連接個人電腦及配 備分析軟體 (Acknowledge Version 3. 2.5)。 (二) 連續幫浦 (continuous pump, Model : 220. Kd co., USA) pump speed : 0.3 cc/min (三) 呼吸器 (ventilator, Model : 02053. NEMI co., USA), rate: 45 次/min (四) 動物剃毛器 (Animal clipper blade, Model : 113. Oster Co., USA) (五) 手術鹵素燈 (Halogen Examination Lamp, TCA-300H) (六) 快速高壓消毒器 (speedy autoclave, Tomis Co. Taiwan) 攝氏 121℃, 24.
(36) 1.3 Kg/cm2 , 30 mins 二、藥物材料 (一) 安耐寧：Xylazine (Loughrea Co., Ireland) (25 ml, 2%) 安耐寧在本實 驗中被用來做實驗動物的誘導麻醉 (induction anesthesia)，其所用的 濃度是 20 mg/ml，使用於實驗動物的劑量是 5 mg/kg，肌肉注射。 (二) 克太明：Ketamine (Sigma Co., K-2753, USA) (2-[2-chlorophenyl]2-methylamino cyclohexanone) 克太明在本實驗中被用來做實驗動 物 的 誘 導 麻 醉 (induced anesthesia) 及 維 持 麻 醉 (maintainence anesthesia)，其所用的濃度是 50 mg/ml，使用於本實驗動物的誘導 麻醉劑量是 35 mg/kg，維持麻醉的劑量是 5 mg/kg，行肌肉注射。 (三) 肝素：Heparin ( HK-10765 Leo Co.USA) 肝素在本實驗中是用來作 為防止實驗動物靜脈凝血，其所用的濃度是 1000 IU/ml，劑量是 1 IU/ml，使用方法是用 Heparin 之生理食鹽水 (1 IU/ml) 注入動靜脈 導管少許 (約 1 ml)，以防止凝血。 (四) 膽囊收縮素：Cholecystokinioctapetide CCK-8 (Sigma Co., C2175, USA) 激膽素在本實驗中是用來當 SO 導管插好時，確定該導管是 位於正確位置中，其所用之濃度是 2500 ng/ml，劑量是 100 ng/kg。 (五) 阿托品 Atropine sulfate salt. (Sigma Co., A0257, USA) 化學式: (C17H23NO3)2 H2SO4; FW:676.8。普潘奈 DL-Propranolol Hydrochloride (Sigma Co., PO884, USA) 化學式： C16H21NO2HCl FW:295.8。 Phentolamine Hydrochloride. (Sigma Co., P7547, USA) 化 學. 式:C17H19N3OHCl; FW:317.8 。atropine 是副交感神經受體的阻斷 劑，propranolol 是交感神經 β 受體的阻斷劑，phentolamine 是交感 神經 α 受體的阻斷劑。本實驗用 atropine 30 µg/kg propranolol 2 mg/kg, phentolamine 1.5 mg/kg 在電針前先給予靜脈注射。 (六) Pirenzepine Dihydrochloride （Sigma CO., P-7412, USA） 化學式 （5,11-Dihydro-11-[ (4-methyl-1-piperazinyl) acetyl]-6H-pyrido [2,3-b] 25.
(37) [1,4]benzodiazepin-6-one） C19H21N5O2•2HCl FW 424.3 本品為專 一性 muscarinic receptorm M1 阻斷劑。本實驗用 Pirenzepine 10 mg/kg 於尚未餵食 1 gm 木香檳榔丸前經鼻胃管給藥，用於探討木香檳榔丸 之作用機轉. (50) (51). 。. (七) 木香檳榔丸濃縮中藥 EG752101（表 3-1） 本品取自於莊松榮製藥廠。在中醫方劑學屬於攻裡劑，治療胸 腹積滯，痞滿結胸常用之處方. (3). 。在此實驗中用於探討經鼻胃管灌. 食後對麻醉後兔子奧迪氏括約肌之影響。 三、器械、設備 手術時使用器械包括：牽引器、拇指鑷子、剪刀、手術刀柄、手術 刀片、止血鉗、持針器、動脈夾、顯微手術彎剪、自動加熱墊 (automatic heating pad)、無菌手術縫合線(a) 3-0 mono sof，4-0 mono sof (Nylon, USSC Co., USA), (b) 3-0，4-0 silk (Johnson Co., USA)。. 26.
(38) 【表 3.1】木香檳榔丸（MUH SHIANG BIN LANG WAN）濃縮 中藥處方成份表 中藥名. 生. 藥. 名. 劑量. 木. 香. Saussureae radix. 1.0 gm. 檳. 榔. Arecae semen. 1.0 gm. 枳. 殼. Citri immaturus Fructus. 1.0 gm. 青. 皮. Citri undeveloped exocarpium. 1.0 gm. 陳. 皮. Auranti nobilis pericarpiium. 1.0 gm. 莪. 朮. Zedoariae rhizoma. 1.0 gm. 荊三稜. Scirpi rhizoma. 1.0 gm. 黃. 柏. Phellodenri cortex. 1.0 gm. 黃. 連. Coptidis rhizoma. 1.0 gm. 黑. 丑. Pharbitids semen. 4.0 gm. 香. 附. Cyperi rhizoma. 4.0 gm. 大. 黃. Rhei rhizoma. 2.0 gm. 芒. 硝. Mirabilitum depuratum. 2.0 gm. 備註： 以上生藥製成浸膏 4.0 gm（生藥與浸膏比 21：4＝5.25：1） 澱粉 Starch 2.0 gm；其製造過程以處方中 13 味生藥共 21.0 gm 加水（1：10, w/v）於 100℃下淬取 2 次，以細網篩過濾 收集生藥淬取液，於 45℃下濃縮成浸膏 4.0 gm，再以 2 gm 澱粉混合乾燥製成木香檳榔丸濃縮中藥。. 27.
(39) 第三節 實驗方法 一、動物實驗模型建立 (一)術前準備 白兔先禁食 12 小時，手術台及手術器械備齊，壓力轉換擴大器 (TA240) 先開機十分鐘並且歸零校正，呼吸器先開機三分鐘,檢查呼吸導 管中是否有水阻塞，自動加熱墊先加溫至攝氏 38 度,然後以 Ketamine 35 mg/kg, Xylazine (rompun) 5 mg/kg 混合肌肉注射進行麻醉，接著剃除、 包括腹部、大腿內側及頸部之兔毛，並固定於手術台上。 (二)鼻胃管插管（圖 3-3） 以先前定位之標準常度之 polyethylene tube（PE100）經鼻部插入胃 大彎近幽門處，待剖腹時再一次確認位置。 (三) 剖腹及插導管：Laporotomy & Catheterization（圖 3-4）步驟如下 1. 鋪無菌巾於腹部四周區，用刀背表淺劃在腹部正中線區。 2. 左手拿一塊紗布，將切口上端拉緊，在左手正下端開始下刀。 3. 切開皮膚後，露出其下之皮下層或脂肪層，尋找正中白線，再沿著此 白線繼續切深，直至露出腹膜。 4. 用手術刀在腹膜上做一小切口，腹膜底下以二根指頭墊高或用止血鉗 輕輕持住腹膜緣並舉高之，再用 Mayo 氏彎剪擴展傷口。 5. 腹部切開約 10 cm 後，用紗布墊在切開的腹膜緣，再用牽引器將開口 固定。 6. 尋找十二指腸，奧迪氏括約肌就在十二指腸靠外側壁上，往上找出總 膽管，用組織剪將總膽管週邊組織剝離乾淨。 7. 做兩條 3-0 絲線繞於總膽管下，拉此線使膽管暴露良好，再用顯微手 28.
(40) 術剪於近奧迪氏括約肌處的總膽管做一長約 3 mm 切口。. 29.
(41) 【圖 3.3】兔子鼻胃插管實景圖 A：PE100 鼻胃管，鼻胃管上標紅點處，為鼻胃插管深度之定位點 B：10 ml 空針管灌食容器. 30.
(42) 【圖 3.4】兔子腹部手術及插管實景圖 A：PE90 一端放置在總膽管內，一端引流膽汁 B：PE90 一端放置在奧迪式氏括約肌內，用來記錄奧迪式氏括約肌的 壓力變化，另一端接 TA240 壓力轉換放大器。. 31.
(43) 8. 以拇指鑷子將 polyethylene tube (PE90, inner diameter (ID): 0.86mm, outer diameter (OD): 1.27mm) 向上逆插於總肝管，以 3-0 絲線固定 之，作為膽汁引流管，使膽汁不要向上鬱積影響膽囊、肝臟正常生理。 9. 以拇指鑷子將另一根 PE90 (終末端封閉，開側孔) 順向插入總膽管直 至遇到阻力後，回抽約 1mm，用 3-0 絲線固定之。另一端 PE90 接於 壓力轉換放大器 (Transducer Amplifier 240)，該 PE90 管內裝生理食 鹽水，並以 0.3 ml/min，38℃持續灌流。 10.閉合 (closure) ，腸線連續縫合腹膜及腹直肌，縫針自腹膜外面穿到 內，至切口上端固定結，再用 3-0 尼龍線 (mono sof) 角針關閉皮膚。 ※注意： 剝離總膽管，需注意附隨其旁的肝動，以免造成大量出血。膽汁引 流管需確實紮，以免膽汁外，造成膽汁刺激性腹膜炎。整條 PE90 管中需 注意要完全無氣，以免影響測量。 (四)氣管切開術 (Tracheotomy) 由於本實驗進行，必須使實驗動物處於手術麻醉第三期（IIIa-IIIb） 時生理狀所以必須使用呼吸器以維持最佳生理狀態；由於需要使用呼吸 器，所以必須做氣管切開術，以令空氣進入支氣管及肺臟；步驟如下： 1. 清除頸部兔毛，並以 75%酒精消毒體表，頸部下方墊一小枕頭以使頸 部高度伸張。 2. 以左手摸到頸部氣管處，切開氣管上面的皮膚及組織，縱向切開約三 公分。 3. 以組織剪和鑷子分離其上的脂肪組織和肌肉，用紗布墊在切開的肌肉 緣，再用牽引器將開口撐大固定。 4. 露出氣管並以氣管鉤鉤住，切開氣管約 1.5 cm 長，插入 3 c.c.吸管做 套管，並接三通管。. 32.
(44) 5. 將呼吸器的進氣管和出氣管插入三通管，呼吸次數：45 次/分 6. 用 3-0 絲線連續縫肌肉層並固定氣管插管，用 3-0 mono sof 連續縫皮 膚層。 ※注意： 由於頸動脈及迷走神經在氣管旁約 1.0 cm 處，用牽引器擴張時，需 小心不要傷到該組織。進及出氣管中需注意有無水液，以免影響通氣。 插上氣管導管後，需注意兔子肺部有無同時呼吸氣起伏，若無，表示氣 切導管中有阻礙。 (五)股動脈及股靜脈導管插入術 (femoral artery & vein) 由於我們必須監測其動脈壓力以判定生理狀況是否穩定與達到標 準，所以我們做一右股動脈導管以測血壓，藥物的給予我們選擇從右股 靜脈進入，所以我們做一右股靜脈導管，步驟如下： 1. 清除大腿內側兔毛，並以 75%酒精消毒體表。 2. 找到右股動脈 (femoral artery) 搏動處，切開其上之皮膚肌肉 (切口 約 2.5-4 cm)，暴露出股動脈，將其周圍之股神經 (femoral nerve)、股 靜脈 (femoral vein) 及結締組織分離。 3. 以組織剪剝離股動脈周圍之結締組織，並用 90 度剝離器擴張股動脈 下緣，以 3-0 兩條絲線穿過股動脈下方，將遠心端一條綁緊，並以止 血鉗固定。 4. 以動脈夾夾於近心端股動脈處，並用顯微手術彎剪將股動脈剪一長約 2 mm 切口，插入 PE90 管，並用近心端 3-0 絲線略微綁緊，PE90 管 另一端接上 TA240 及連續幫浦。 5. 放開動脈夾，將 PE90 管往內推約 2 cm，再將近心端 3-0 絲線綁緊， 並將位於 PE90 管上的 3-0 絲線相互綁緊以固定之；以 3-0 mono sof 連續縫合皮膚。. 33.
(45) 6. 注射入少許 (約 1 ml) 含 Heparin 之生理食鹽水 (1 IOU/ml) 以防凝 血。如此便完成股動脈插管。 7. Pump 以 0.3 ml/sec 速率持續灌流導管。 股靜脈插管同股動脈插管步驟 (2) - (7) 。 ※注意： 由於股動脈位於股靜脈與股神經下方，在撥除股神經時，可能因器 械扯動而使大腿收縮，必要時 Xylocaine 局部浸潤防治之。. 34.
(46) 第四節 鼻胃管灌食藥物之模型的建立 一、胃大彎近幽門處解剖定位 (圖 3-5) (一) 先以 polyethylene tube（PE100）插入兔子胃大彎近幽門處後，再以 紅色油性筆標示於近鼻頭處之 polyethylene tube（PE100）上以便實 驗時做為插管時之標準長度。 (二) polyethylene tube（PE100）標示端接 10 ml 之空針管，此空針管為 灌時用容器。. 第五節 實驗設計及分組 一、探討木香檳榔丸(MSBLW)對兔子奧迪氏括應約肌之調控效應 (一)藥劑實驗組 1. MSBLW0.25 group；2. MSBLW0.5 group；3. MSBLW1.0 group；4. MSBLW2.0 group 當兔子達到術後穩定狀態時，進行本組實驗: 本組實驗分為 4 小組， 木香檳榔丸濃縮中藥分為 1. 0.25 gm；2. 0.5 gm；3. 1.0 gm；4. 2.0 gm 四 小組個別溶解於 5 ml 室溫二次水中經鼻胃灌食觀察 60 分鐘，並且記錄 奧迪氏括約肌的壓力圖之變化。探討木香檳榔丸濃縮中藥不同濃度劑量 對兔子奧迪氏括約肌的調控。 (二)控制組 1. Starch group 當兔子達到術後穩定狀態時，進行本組實驗：將 0.33 gm 澱粉溶解 於 5 ml 室溫二次水中經鼻胃灌食觀察 60 分鐘，並且記錄奧迪氏括約肌 35.
(47) 【圖 3.5】兔子鼻胃插管，胃大彎近幽門處示意圖. 36.
(48) 的壓力圖之變化。探討木香檳榔丸濃縮中藥加入之附型劑是否對兔子奧 迪氏括約肌有影響。 2. 2nd H2O group 當兔子達到術後穩定狀態時，進行本組實驗：將 5 ml 室溫二次水 中經鼻胃灌食觀察 60 分鐘，並且記錄奧迪氏括約肌的壓力圖之變化。 探討溶劑是否對兔子奧迪氏括約肌有影響。 二、探討木香檳榔丸(MSBLW)對兔子奧迪氏括應約肌之作用機轉 (一)APP+MSBLW group 探討木香檳榔丸濃縮中藥對兔子奧迪氏括約肌之調控與非交感神 經；非副交感神經有關。當兔子達到術後穩定狀態時，進行本組時驗: 靜 脈 注 射 atropine 30 µg/kg, propranolol 2 mg/kg, phentolamine 1.5 mg/kg，當 SO 狀態再達穩定後，木香檳榔丸濃縮中藥 1.0 gm 溶解於 5 ml 室溫二次水中經鼻胃灌食觀察 60 分鐘，並且記錄奧迪氏括約肌的壓力 圖。探討木香檳榔丸濃縮中藥是否經由交感神經或副交感神經活性增加 參與兔子奧迪氏括約肌的調控。 (二)Pirenzepine+MSBLW group 當兔子達到術後穩定狀態時，進行本組實驗：經鼻胃灌食 Pirenzepine 10 mg/kg 當 SO 狀態在達穩定後，木香檳榔丸濃縮中藥 1.0 gm 溶解於 5 ml 室溫二次水中經鼻胃灌食觀察 60 分鐘，並且記錄奧迪氏括約肌的壓力 圖。探討木香檳榔丸濃縮中藥是否經由興奮 muscarinic M1 receptors 調控 兔子奧迪氏括約肌的變化。. 37.
(49) 第六節 實驗數據處理及統計方法 一、實驗數據處理 (圖 3-6) 測量 SO 壓力線上 (on line) 儲入個人電腦後，於線外 (off line) 做 資料分析。當兔子麻醉時的生理狀態達到下列之標準時，才進行資料分 析： (1) 兔子血壓維持在 50-80 mmHg 之間， (2) 兔子呼吸的干擾幅度 小於奧迪氏括約肌壓力幅度 (3) 十分鐘內，奧迪氏括約肌至少有五十個 尖峰波 (4) Tonic pressure 在 15-25 mmHg 之間， (5) Phasic contraction pressure 在 4-9 mmHg 之間，當滿足上述標準時，我們進行奧迪氏括約肌 壓力曲線分析; 主要分析對象為 Tonic Pressure (TP), Phasic contraction pressure (PP) 兩者為構成 sphincter of Oddi’s pressure 的重要組成。 (一)Tonic pressure (TP) 基礎壓力 是指呼氣終末壓力 (Mean End-Expiratory Pressure)，由於吸氣時橫 隔膜會下彈，會使 Tonic Pressure 比真實的情況壓力略高，所以取 mean end-expiratory pressure 作為測量 Tonic Pressure 的基準，以毫米汞柱 (mmHg) 來表示(52)。 (二)Phasic contraction pressure (PP) 相位收縮壓力 是取奧迪氏括約肌收縮幅度超過 Tonic Pressure 的部分，以毫米汞柱 (mmHg) 來表示(52)。 二、統計方法 數據全部以 Mean±S.E.M. (Standard Error of Mean) 的形式來表示， 並且據以用之於數據的統計。P<0.05 表統計學上有顯著意義。所採用的 電腦統計軟體是 Acknowledge III-MP100WSW BIOPAC SYSTEMS, Inc., Santa Barbara, CA ； 用 Wilcoxon Signed rank sum test for single comparisons and analysis of variance （ANOVA）統計。 38.
(50) 【圖 3.6】 奧迪式氏括約肌壓力圖及實驗數據之定義(52) B-line： Tonic pressure（TP）基礎壓力，取呼吸終末平均壓力，以毫 米汞柱 (mmHg) 來表示 A-line： Phasic contraction pressure (PP) 相位收縮壓力，取超過基礎 壓力（TP）的振幅壓力，以毫米汞柱 (mmHg) 來表. 39.
(51) 第四章 結果 PART I 貓：組織免疫學染色篇 第一節 EA group (電針組) 對貓腸道組織免疫學之反應 一、 膽囊—在 anti-CCK8 的染色，Score of percentage of postive-stained 為 +++，相反的 anti-VIP 為 -。【表 4.1；圖 4.1】 二、 奧迪氏括約肌—在 anti-CCK8 的染色，Score of percentage of postive-stained 為 +++，anti-VIP 的染色下縱肌及環肌皆有 VIP 神 經纖維之 Score of percentage of postive-stained 為 +++。【表 4.1； 圖 4.2】 三、 十 二 指 腸 — 在 anti-CCK8 的 染 色 ， Score of percentage of postive-stained 為 +++，anti-VIP 的染色下縱肌及環肌皆有 VIP 神 經纖維 Score of percentage of postive-stained 為 +++。【表 4.1；圖 4.3】. 第二節. Sham EA group (假電針組) 對貓腸道組織免疫學之反 應. 一、 膽囊—在 anti-CCK8 及 anti-VIP 的染色，Score of percentage of postive-stained -。【表 4.1；圖 4.1】 二、 奧迪氏括約肌—在 anti-CCK8 的染色，Score of percentage of postive-stained +, anti-VIP 的染色下縱肌及環肌 VIP 神經纖維 Score of percentage of postive-stained +-。【表 4.1；圖 4.2】 三、 十二指腸—在 anti-CCK8 的染色，Score of percentage of postivestained +，anti-VIP 的染色下縱肌及環肌 VIP 神經纖維 Score of 40.
(52) percentage of postive-stained+-。【表 4.1；圖 4.3】. 41.
(53) 【表 4.1】膽囊（GB）奧迪氏括約肌（SO）十二指腸(Duodenum) 染色正反應結果百分比評分表 Groups GB. CCK endocrine cells. VIP nerves. －. －. +++. －. +. +－. +++. +++. +. +－. +++. +++. sham EA group EA group. SO. sham EA group EA group. Duodenum. sham EA group EA group. Number of CCK endocrine cells and VIP nerves are assessed , with ‘－’: no positive stain; ‘+－’: ＜5% positive stain; ‘+’: 5-25﹪positive stain; ‘++’: 26-50 % positive stain; ‘+++’: ＞50 % positive stain.. 42.
(54) 【圖 4.1】貓膽囊免疫學染色圖 ABC stain in gallbladder of feline A：anti-CCK8 control group of sham EA group（×100） B：anti-CCK8 control group of EA（×200） C：anti-CCK8 sham EA group（×200） D：anti-CCK8 EA group（×200） 箭頭 a：膽囊 mucosa 上 endocrine cells 之 positive stain. 43.
(55) 【圖 4.2】貓奧迪氏括約肌免疫學染色圖 ABC stain in Sphincter of Oddi of feline A：anti-VIP control group of sham EA group（×200） B：anti-VIP control group of EA（×200） C：anti-VIP sham EA group（×200） D：anti-VIP EA group（×200） 箭頭 a：奧迪氏括約肌縱肌上 VIP nerves 之 positive stain. 44.
(56) 【圖 4.3】貓十二指腸免疫學染色圖 ABC stain in duodennum of feline A：anti-CCK8 control group of sham EA group（×100） B：anti-CCK8 control group of EA（×200） C：anti-CCK8 sham EA group（×100） D：anti-CCK8 EA group（×100） 箭頭 a：十二指腸 mucosa 上 endocrine cells 之 positive stain. 45.
(57) 第三節 實驗對照組對貓腸道組織免疫學之反應 以兔子血清染色，其中膽囊、奧迪氏括約肌及十二指腸皆無橘色反 應證明 anti-CCK8 及 anti-VIP 具有專一的受體結合反應性。 【表 4.1；圖 4.1；4.2；4.3】. 46.
(58) PARTⅡ. 兔子：濃縮中藥木香檳榔丸篇. 第一節 木香檳榔丸濃縮中藥對兔子奧迪氏括約肌的效應 一、藥劑實驗組 (一) MSBLW 0.25 group（N＝6） ：在本實驗組中，經鼻胃管灌食 0.25 gm 木香檳榔丸濃縮中藥 60 分鐘內 SO 壓力記錄圖變化；顯示 Tonic pressure. (TP) 無明顯變化，而 Phasic contraction pressure (PP) 在. 20 分鐘、40 分鐘、60 分鐘有明顯興奮現象，P＜0.05 (表 4.2；圖 4.4； 圖 4.5；圖 4.6)。 (二) MSBLW 0.5 group（N＝7） ：在本實驗組中，經鼻胃管灌食 0.5 gm 木 香檳榔丸濃縮中藥 60 分鐘內 SO 壓力記錄圖變化，顯示 Tonic pressure. (TP) 在 60 分鐘處有明顯抑制現象，P＜0.05；而 Phasic. contraction pressure (PP) 在 20 分鐘、40 分鐘、60 分鐘處有明顯興 奮現象，P＜0.05 (表 4.3；圖 4.7；圖 4.8；圖 4.9)。 (三) MSBLW 1.0 group（N＝8） ：在本實驗組中，經鼻胃管灌食 1.0 gm 木 香檳榔丸濃縮中藥 60 分鐘內 SO 壓力記錄圖變化，顯示 Tonic pressure. (TP) 在 20 分鐘、40 分鐘、60 分鐘處有明顯抑制現象，P. ＜0.05；而 Phasic contraction pressure (PP) 在 20 分鐘、40 分鐘、60 分鐘處有明顯興奮現象，P＜0.05 (表 4.4；圖 4.10；圖 4.11；圖 4.12)。 (四) MSBLW 2.0 group（N＝6） ：在本實驗組中，經鼻胃管灌食 2.0 gm 木 香檳榔丸濃縮中藥 60 分鐘內 SO 壓力記錄圖變化，顯示 Tonic pressure. (TP) 在無明顯變化；而 Phasic contraction pressure (PP) 在. 20 分鐘、40 分鐘、60 分鐘處有明顯興奮現象，P＜0.05 (表 4.5；圖 4.13；圖 4.14；圖 4.15)。 (五) 顯示不同等分木香檳榔丸濃縮中藥劑量，對兔子奧迪氏括約肌之壓 力變化有劑量相關依存性。. 47.
(59) 【表 4.2】木香檳榔丸 0.25 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌之影響 Tonic pressure. Phasic contraction. (mmHg). pressure (mmHg). Mean±S.E.M.. Mean±S.E.M.. baseline. 16.67±0.64. 5.58±0.36. MSBLW 0.25-20. 15.83±0.74. 6.79±0.56*. MSBLW 0.25-40. 16.33±0.94. 7.32±0.41*. MSBLW 0.25-60. 16.42±1.14. 8.00±0.44*. Groups MSBLW 0.25 gm (N=6). 【說明】 Tonic pressure (mmHg) ：SO 基礎壓力；Phasic contraction pressure (mmHg) ：相位收縮壓力；baseline：未施藥前；MSBLM 0.25-20 ： 施 予 木 香 檳 榔 丸 0.25 gm 20 分 鐘 後 ； MSBLM 0.25-40 ： 施 予 木 香 檳 榔 丸 0.25 gm 40 分 鐘 後 ； MSBLM 0.25-60：施予木香檳榔丸 0.25 gm 60 分鐘後。Date are expressed as mean ± S.E.M. *p < 0.05 vs baseline.. 【圖 4.4】木香檳榔丸 0.25gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌壓力圖之變化 48.
(60) 【圖 4.5】木香檳榔丸 0.25 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖. 49.
(61) 【圖 4.6】木香檳榔丸 0.25 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖. 50.
(62) 【表 4.3】木香檳榔丸 0.5 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏括 約肌之影響 Tonic pressure. Phasic contraction. (mmHg). pressure (mmHg). Mean±S.E.M.. Mean±S.E.M.. baseline. 17.71±0.70. 5.93±0.32. MSBLW 0.5-20. 16.89±0.69. 7.60±0.54*. MSBLW 0.5-40. 16.82±0.83. 8.32±0.38*. MSBLW 0.5-60. 15.50±0.37*. 9.30±0.37*. Groups. MSBLW 0.5gm (N=7). 【說明】 Tonic pressure (mmHg) ：SO 基礎壓力；Phasic contraction pressure (mmHg) ：相位收縮壓力；baseline：未施藥前；MSBLM 0.5-20：施予木香檳榔丸 0.5 gm 20 分鐘後；MSBLM 0.5-40： 施予木香檳榔丸 0.5 gm 40 分鐘後；MSBLM 0.5-60：施予木 香檳榔丸 0.5 gm 60 分鐘後。Date are expressed as mean ± S.E.M. *p < 0.05 vs baseline.. 【圖 4.7】 木香檳榔丸 0.5 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌壓力圖之變化. 51.
(63) 【圖 4.8】 木香檳榔丸 0.5 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖. 52.
(64) 【圖 4.9】 木香檳榔丸 0.5 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖. 53.
(65) 【表 4.4】 木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌之影響 Tonic pressure. Phasic contraction. (mmHg). pressure (mmHg). Mean±S.E.M.. Mean±S.E.M.. baseline. 16.97±0.54. 6.34±0.60. MSBLW 1.0-20. 16.25±0.54*. 8.18±0.53*. MSBLW 1.0-40. 15.75±0.76*. 10.00±0.48*. MSBLW 1.0-60. 15.60±0.71*. 11.07±0.76*. Groups. MSBLW 1.0gm. (N=8). 【說明】 Tonic pressure (mmHg) ：SO 基礎壓力；Phasic contraction pressure (mmHg) ：相位收縮壓力； baseline：未施藥前； MSBLM 1.0-20：施予木香檳榔丸 1.0 gm 20 分鐘後；MSBLM 1.0-40：施予木香檳榔丸 1.0 gm 40 分鐘後；MSBLM 1.0-60： 施予木香檳榔丸 1.0 gm 60 分鐘後。Date are expressed as mean ± S.E.M. *p < 0.05 vs baseline.. 【圖 4.10】 木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌壓力圖之變化. 54.
(66) 【圖 4.11】 木香檳榔丸 1.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖. 55.
(67) 【圖 4.12】 木香檳榔丸 1.0gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖. 56.
(68) 【表 4.5】 木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌之影響. Groups. MSBLW 2.0gm. Tonic pressure. Phasic contraction. (mmHg). pressure (mmHg). Mean±S.E.M.. Mean±S.E.M.. (N=6). baseline. 16.67±0.46. 6.00±0.78. MSBLW 2.0-20. 16.46±0.45. 7.21±0.84*. MSBLW 2.0-40. 16.17±0.46. 7.79±0.96*. MSBLW 2.0-60. 16.71±0.42. 9.50±0.75*. 【說明】 Tonic pressure (mmHg) ：SO 基礎壓力；Phasic contraction pressure (mmHg) ：相位收縮壓力；baseline：未施藥前；MSBLM 2.0-20：施予木香檳榔丸 2.0 gm 20 分鐘後；MSBLM 2.0-40： 施予木香檳榔丸 2.0 gm 40 分鐘後；MSBLM 2.0-60：施予木 香檳榔丸 2.0 gm 60 分鐘後。Date are expressed as mean ± S.E.M. *p < 0.05 vs baseline.. 【圖 4.13】 木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌壓力圖之變化 57.
(69) 【圖 4.14】 木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌基礎壓力（TP）之變化統計圖. 58.
(70) 【圖 4.15】 木香檳榔丸 2.0 gm (MSBLW) 對麻醉後兔子奧迪氏 括約肌相位收縮壓力（PP）之變化統計圖. 59.
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