中藥藥酒指標成分鑑別及含量測定之研究

五加皮38.4 mg、熟地黃38.4 mg、丹參38.4 mg、杜仲38.4 mg、蛇床子38.4 mg、乾薑38.4 mg、枸杞子38.4 mg、天門冬12.8 mg、鐘乳石 50.0 mg

2. 十全大補藥酒

當歸37.5 mg、川芎15.0 mg、白芍22.5 mg、熟 地黃30.0 mg、黨參20.0 mg、茯苓30.0 mg、白 朮30.0 mg、甘草10.0 mg、肉桂12.5 mg、黃耆 22.5 mg

3. 史國公藥酒去虎脛骨

當歸12.8 mg、鱉甲12.8 mg、羌活12.8 mg、防 風12.8 mg、萆薢12.8 mg、秦艽12.8 mg、川牛 膝12.8 mg、蠶砂12.8 mg、松節12.8 mg、乾茄 根50.0 mg、枸杞子32.0 mg

4. 周公百歲藥酒

黃耆7.5 mg、茯神7.5 mg、肉桂2.25 mg、當歸 4.5 mg、生地黃4.5 mg、熟地黃4.5 mg、黨參 3.75 mg、白朮3.75 mg、麥門冬3.75 mg、茯苓 3.75 mg、陳皮3.75 mg、山茱萸3.75 mg、枸杞 子3.75 mg、川芎3.75 mg、防風3.75 mg、龜板 膠3.75 mg、五味子3 mg、羌活3 mg

5. 東引黃龍藥酒

茯神1.870 mg、龍眼肉15.025 mg、遠志2.560 mg、覆盆子1.870 mg、續斷0.510 mg、紅花 1.280 mg、黨參2.560 mg、肉蓯蓉3.774 mg、蛇 床子1.870 mg、熟地黃3.744 mg、金櫻子0.380 mg、五加皮0.890 mg、當歸1.870 mg、黃耆 1.690 mg、補骨脂1.870 mg、枸杞子3.744 mg、

黃精0.890 mg、乾地黃1.280 mg、甘草1.080 mg、淫羊藿3.744 mg、菟絲子2.560 mg、鎖陽 0.770 mg、川芎0.770 mg

6. 東引千歲藥酒

人參1.54 mg、山萸肉2.56 mg、黃耆2.56 mg、

前　言

中藥酒劑在我國藥品管理制度上屬乙類成藥⁽¹⁾販售 通路較為廣泛，不限定於藥局，在百貨店、雜貨店及 餐飲服務商均可兼營零售之；又由於國人常有冬令進 補或小飲藥酒以補氣血、促進血液循環的飲用習慣，

中藥酒劑在台灣的中藥市場佔有一席之地。

往年政府對中藥酒劑的品管，著重質方面之控 管，包括產品性狀、比重、成分鑑別、重金屬及含醇 量等項目之檢驗。但於歷年藥酒之品質抽驗調查中，

曾發現不肖廠商利用未添加或添加不足量之原料藥材 製造一般酒類販賣之嚴重違規情形。據我國煙酒管理 法第四條之規定，依相關法規認屬藥品之酒類製劑得 免課徵菸酒稅，該行為實有逃稅及欺騙消費者之嫌。

為遏止此類情形之再發，行政院衛生署於90年1月4日 公告⁽²⁾增修中藥藥酒基準方22方時，規定其申請藥品 查驗登記，除需檢附原檢驗規格及方法外，並應加作 處方中二個指標成分之高效液相層析法之定性、定量 分析。為因應衛生署有關中藥酒劑相關管理規定之公 告，本年度計劃選擇五加皮藥酒等中藥藥酒基準方8 方，建立其指標成分之高效液相層析法，得運用於市 售藥酒成分之定性、定量分析，以提升中藥藥酒品質 之管制，並可作為業者品管之參考。

材料與方法

一、材料

灱 材料來源：市售中藥材、22度米酒（臺灣菸酒公 司）。

牞 自配藥酒：依公告之藥酒基準方組成份量，原料 酒加至1.0 mL。

1. 五加皮藥酒

中藥藥酒指標成分鑑別及含量測定之研究

秦玲　黃坤森　林秀珍　盧芬鈴　林雅姿　張華軒　鄭淑晶　黃秋羽　黃成禹　林哲輝 第三組

摘　要

為管制市售中藥藥酒品質，本計畫選擇中藥藥酒基準方之五加皮藥酒等8種處方，應用高效液相 層析法，建立處方藥材中指標成分之鑑別及含量測定方法。經實驗結果顯示，8種處方均使用C-18之 層析管，以0.03∼0.1%磷酸溶液與乙腈溶媒不同比例梯度沖提，其分離效果良好。各方法檢量線之相 關係數均在0.9990以上，而添加回收率則介於93.2∼114.5%之間，另各指標成分亦探討其最低檢測濃 度及最低定量濃度。

關鍵詞：中藥藥酒、指標成分、高效液相層析法、鑑別、含量測定

覆盆子2.05 mg、甘草2.56 mg、川芎1.28 mg、

天門冬1.28 mg、製首烏7.68 mg、菟絲子2.5 mg、肉蓯蓉2.56 mg、玉竹2.56 mg、五加皮2.56 mg、丁香1.28 mg、乾地黃2.56 mg、當歸2.56 mg、龍眼肉5.12 mg、蛇床子2.56 mg、茯神2.56 mg、遠志2.56 mg 、玄參2.56 mg、紅花2.05 mg、淫羊藿5.12 mg、枸杞子3.84 mg、烏藥2.56 mg

7. 金門龍鳳藥酒

五味子6.3 mg、山萸肉12.5 mg、巴戟天6.3 mg、肉蓯蓉12.5 mg、肉桂2.5 mg、當歸3.8 mg 8. 虎骨木瓜藥酒（去虎骨）

木瓜9.6 mg、川芎3.2 mg、川牛膝3.2 mg、當歸 3.2 mg、天麻3.2 mg、五加皮3.2 mg、紅花3.2 mg、續斷3.2 mg、白茄根3.2 mg、玉竹6.4 mg、

秦艽1.6 mg、防風1.6 mg、桑枝12.5 mg 犴標準品：

1. 標準品Cinnamic acid、Cinnamic aldehyde、

6-Gingerol、Gentiopicroside、Glycyrrhizin、

Liquiritin、Osthole及Paeoniflorine購自nacalai tesque

2. 標準品Ferulic acid購自ICHIMARU PHARCOS CO.,LTD

3. 標準品Loganin購自EXTRASYNTHESE 4. 標準品Schizandrin購自Wako

5. 標準品Tanshinone IIa購自中國藥品生物製 品檢驗所，另Amylparaben、Ethylparaben、

4-Hydroxy benzoic acid n-amyl ester、4-Hydroxy- benzoic acid n-hexyl ester （n-Hexyl 4-hydroxy- benzoate）、Methylparaben均採試藥級

灱試藥：甲醇、乙腈採HPLC級，磷酸均採試藥 級。

二、儀器裝置

灱高效液相層析儀1：

1. 溶媒傳送系統：Agilent 1100 series 2. 檢測器：Agilent 1100 series 3. 自動注射裝置：Agilent 1100 series 牞高效液相層析儀2：

1. 溶媒傳送系統：HITACHI L-2130 2. 檢測器：HITACHI L-2450 3. 自動注射裝置：HITACHI L-2200 三、實驗方法

灱高效液相層析法之分析條件 1. 五加皮藥酒：

分析成分：6-Gingerol、Osthol、Tanshinone IIa 內部標準品：Amylparaben

⑴ 層析管：Biosil 5 ODS-U，5 µm，4.6 x 250 mm

⑵層析管溫度：30ºC

⑶移動相：A：0.1%磷酸溶液 B：乙腈

Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 50 50 0.9

5 50 50 0.9

25 80 20 0.9

30 80 20 0.9

⑷檢測波長：285 nm

⑸注入量：10 µl 2. 十全大補藥酒⁽³⁾：

分析成分： Glycyrrhizin、Liquiritin、Cinnamic acid、Ferulic acid、Paeoniflorin 內部標準品：Methylparaben

⑴ 層析管：GL Sciences Inc. Inertsil，ODS-2，5 µm，4.6 x 250 mm

⑵層析管溫度：25ºC

⑶移動相：A：0.03%磷酸溶液 B：乙腈 Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 90 10 1.0

50 50 50 1.0

55 90 10 1.0

⑷檢測波長：240 nm

⑸注入量：10 µl 3. 史國公藥酒去虎脛骨⁽⁵⁾：

分析成分：Ferulic acid、Gentiopicroside 內部標準品：Methylparaben

⑴層析管：Inertsil ODS-2，5 µm，4.6 x 250 mm

⑵層析管溫度：30ºC

⑶移動相：A：0.1%磷酸溶液 B：乙腈 Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 90 10 1.0

10 80 20 1.0

40 80 20 1.0

45 90 10 1.0

50 90 10 1.0

⑷檢測波長：280 nm

⑸注入量：10 µl 4. 周公百歲藥酒：

分析成分：Cinnamic aldehyde、Schizandrin 內部標準品： 4-Hydroxy benzoic acid n-amyl

ester

⑴層析管：ACE 3 C18，3 µm，4.6 × 150 mm

⑵層析管溫度：30ºC

⑶移動相：A：0.1％磷酸溶液 B：乙腈

Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 75 25 1.0

20 75 25 1.0

38 50 50 1.0

41 75 25 1.0

55 75 25 1.0

⑷ 檢測波長：236 nm

⑸ 注入量：10 µl

5. 東引黃龍藥酒及東引千歲藥酒⁽⁴⁾： 分析成分：Glycyrrhizin、Osthole

內部標準品： 4-Hydroxybenzoic acid n-hexyl ester (n-Hexyl 4-hydroxybenzoate)

⑴ 層析管：ACE 3C18，3 µm，4.6 x 150 mm

⑵ 層析管溫度：30ºC

⑶ 移動相：A：0.1%磷酸溶液 B：乙腈 Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 74 26 0.9

38 48 52 0.9

44 48 52 0.9

45 74 26 0.9

60 74 26 0.9

⑷ 檢測波長：254 nm

⑸ 注入量：10 µl 6. 金門龍鳳藥酒：

分析成分：Loganin、Schizandrin

內部標準品：4-Hyroxybenzoic acid n-amyl ester

⑴ 層析管：Cosmosil MS 5C18，5 µm，4.6 x 250 mm

⑵ 層析管溫度：30ºC

⑶ 移動相：A：0.1%磷酸溶液 B：乙腈 Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 90 10 1.0

8 90 10 1.0

20 88 12 1.0

25 65 35 1.0

30 40 60 1.0

35 40 60 1.0

40 90 10 1.0

45 90 10 1.0

⑷ 檢測波長：254 nm

⑸ 注入量：10 µL

7. 虎骨木瓜藥酒（去虎骨）⁽⁵⁾：

分析成分：Ferulic acid、Gentiopicroside 內部標準品：Paeoniflorin

⑴ 層析管：Cosmosil 5C18 AR-II，5 µm，4.6 x

250 mm

⑵ 層析管溫度：30ºC

⑶ 移動相：A：0.1%磷酸溶液 B：乙腈 Time (min) A B F.R. (mL/min)

0 93 7 1.0

10 90 10 1.0

15 88 12 1.0

20 85 15 1.0

22 80 20 1.0

27 70 30 1.0

30 93 7 1.0

35 93 7 1.0

⑷ 檢測波長：240 nm

⑸ 注入量：10 µl

牞儀器檢出量、最低定量濃度

精確稱取各對照用標準品，分別稀釋調配成一系 列濃度，以高效液相層析儀分析之，選擇以訊號 雜訊比為3：1時之濃度，作為儀器最低檢出濃 度，10：1時之濃度，作為最低定量濃度。

犴標準曲線之製作

精確稱取各對照用標準品，稀釋調配成一系列至 少五種濃度之溶液，最低濃度不得低於最低定量 濃度。分別取不同濃度之標準品溶液10 µL，注入 高效液相層析儀分析，以標準品之濃度為X軸，波 峰面積為Y軸，製作標準曲線，並求出線性迴歸方 程式（Y = mX + b）及相關係數。

犵檢液之配製：

1. 自配藥酒：原料藥材研為粗末，依公告基準方 之藥材份量稱取之，加入22度米酒，浸泡21 天，濾清定容即得。

2. 自配藥酒空白液：個別去除欲探討成分之藥 材，依前法浸泡配製。

玎精密度：

1. 同日內試驗：取處方中之受測成分，其濃度均 在檢量線內，一日內定量六次。

2. 異日間試驗：取處方中之受測成分，其濃度均 在檢量線內，連續定量五天。

甪添加回收實驗：

分別取各定量成分檢量線內三種濃度，分別加入 該受測成分處方之檢液，再以高效液相層析儀分 析，並計算其回收率。

結果與討論

一、高效液相層析法條件之探討

選擇行政院衛生署公告中藥藥酒基準方中之8種 處方，依實驗方法（四）之步驟模擬配製藥酒製劑及 其空白液，再依實驗方法（一）之HPLC方法條件分析 之，選擇各藥酒指標成分滯留時間處未受到其他成分 干擾之方法為其檢驗方法。空白液不添加內部標準品

（IS），方可檢視該處亦不受其他成分干擾。其結果顯

示：

1. 五加皮藥酒：分析成分為乾薑之6-Gingerol，蛇 床子之Osthole，丹參之Tanshinone IIA，內部標 準品為Amylparaben（如圖一）。

2. 十全大補藥酒：分析成分為甘草之Glycyrrhi- zin、Liquiritin，肉桂之Cinnamic acid，當歸之 Ferulic acid，白芍之Paeoniflorin，內部標準品為

Methylparaben（如圖二）。

3. 史國公藥酒去虎脛骨：分析成分為當歸之Feru- lic acid，秦艽之Gentiopicroside，內部標準品為 Methylparaben（如圖三）。

4. 虎骨木瓜藥酒去虎骨：分析成分為當歸、川芎 之Ferulic acid，秦艽之Gentiopicroside，內部標 準品為Paeoniflorin（如圖四）。

0 5 10 15 20 25 30 min

mAU

0 20 40 60 80

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-165.D)

min

0 5 10 15 20 25 30

mAU

0 20 40 60 80

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-166.D)

min

0 5 10 15 20 25 30

mAU

0 20 40 60 80

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-167.D)

0 5 10 15 20 25 30 mi

mAU

0 25 50

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-159.D)

0 5 10 15 20 25 30 mi

mAU

0 25 50

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-160.D)

mi

0 5 10 15 20 25 30

mAU

0 25 50

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-163.D)

mi

0 5 10 15 20 25 30

mAU

0 25 50

DAD1 A, Sig=285,16 Ref=off (LYT\WIN2-164.D)

：

1 2 3 4

A

B

C

A

D

E

F

1 2

3 4

圖一、 五加皮藥酒：A.標準品 B.自配藥酒（稀釋） C.空白液-去蛇床子（稀釋） D.自配藥酒 E.空白液-去生薑 F.空白液- 去丹參。

1. 6-Gingerol 2. Amylparaben （I.S.） 3. Osthol 4. Tanshinone IIa

5. 周公百歲藥酒：分析成分為肉桂之Cinnamic aldehyde，五味子之Schizandrin，內部標準品為 4-Hydroxy benzoic acid n-amyl ester（如圖五）。

6. “東引”黃龍藥酒及千歲藥酒：分析成分為 甘草之Glycyrrhizin，蛇床子之Osthole，內部 標準品為4-Hydroxybenzoic acid n-hexyl ester

（n-Hexyl 4-hydroxybenzoate）（如圖六、

七）。

7. 金門龍鳳藥酒：分析成分為山茱萸之Loganin，

五味子之 Schizandrin，內部標準品為4-Hyroxy- benzoic acid n-amyl ester（如圖八）。

8種藥酒處方之HPLC分析條件，均使用逆相層析 管柱（C18）。層析管溫度，除十全大補藥酒分析設定 為25ºC外，其餘七方均為30ºC。檢測波長，依不同成 分而異，介於236∼285 nm之間。而移動相方面，則8

個處方均以0.03∼0.1%磷酸溶液與乙腈不同比例梯度沖 提，均得到良好分離效果。

二、分析成分之線性關係

分析各藥酒指標成分，其對照標準品在適當濃度 範圍內，其線性迴歸方程式及相關係數（r²）分別為表 一所示，r²值均在0.9990以上，顯示各分析方法均有良 好的線性關係。

三、分析成分之精密度

各藥酒指標成分，在其檢量線之線性範圍內，

選擇一濃度標準品溶液內含內部標準品分別於一天內 重覆注入分析6次，及不同之五天重覆注入分析3次，

所得之面積比計算其同日內（Intra-day test）與異日 間（Inter-day test）之標準偏差（Standard deviation；

0 5 10 15 20 25 30 35 40 min

mAU

0 20 40 60 80

0 5 10 15 20 25 30 35 40 min

mAU

0 20 40 60 80

min

0 5 10 15 20 25 30 35 40

mAU

0 20 40 60 80

A

B

C

1 2 3

4

5

6

圖二、十全大補藥酒：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去當歸

　　　 1. Paeoniflorin 2. Liquiritin 3. Ferulic acid 4. Methylparaben (I.S.) 5.Cinnamic acid 6.

Glycyrrhizin

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

11.400 17.934 26.897

0 10 20 30 40 min

mAU

0 20 40 60 80 100

11.403 17.979 27.081

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

12.135 16.487 17.444 18.267

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

11.519 16.493 17.441 18.270

A

B

C

D

1 2

3

圖三、史國公藥酒去虎脛骨：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去秦艽D.空白液-去當歸、川芎 　　　1. Gentiopicroside 2. Ferulic acid 3. Methylparaben (I.S.)

min

0 5 10 15 20 25 30

Norm.

0 20 40 60 80

19.837 24.489 27.599

min

0 5 10 15 20 25 30

Norm.

0 20 40 60 80

19.842 24.474 27.599

min

0 5 10 15 20 25 30

Norm.

0 20 40 60 80

19.875 27.816

min

0 5 10 15 20 25 30

Norm.

0 20 40 60 80

27.591

A

B

C

1 2

3

D

圖四、 虎骨木瓜藥酒去虎骨：A.標準品 B.自配藥酒C.空白液-去當歸、川芎 D.空白液-去 秦艽

　　　1. Gentiopicroside 2. Paeoniflorin (I.S.) 3. Ferulic acid

圖五、 周公百歲藥酒：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去肉桂 D.空白液-去五味子。

　　　1. Cinnamic aldehyde 2. Hydroxy benzoic acid n-Amyl ester(I.S.) 3. Schizandrin

Minutes

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

mAU

0 10 20 30 40 50 60

70

2

3 1

A.

B

C

D

Minutes

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

m A U

0 50 100 150

m A U

0 50 100 150

1 3.

2 A

B

C

D

圖六、黃龍藥酒：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去蛇床子 D.空白液-去甘草 　　　1. Glycyrrhizin 2. Osthole 3. n-Hexyl -4-hydroxybenzoate (I.S.)

S.D.）及相對標準偏差（Relative standard deviation；

R.S.D.），結果如表二所示。異日間試驗除虎骨木瓜藥 酒（去虎骨）外，其他處方之RSD值均在1.50%以下，

而同日內試驗之RSD值均在1.00%以下。

四、分析成分之添加回收率

在五加皮藥酒等8種處方，受測成分處方之檢液中 添加各定量成分之三種濃度，再以高效液相層析儀分 析，計算其添加回收率，結果如表三所示。8個處方之 添加回收率介於93.2∼114.5%，相對標準偏差為0.02%

∼5.33%。

五、 各藥酒指標成分於高效液相層析儀之最低 檢出量及最低定量濃度

精確稱取各藥酒指標成分之對照用標準品，分別 稀釋調配成一系列濃度，以高效液相層析儀分析之，

選擇以訊號雜訊比為3：1時之濃度，作為儀器最低檢 出濃度，訊號雜訊比為10：1時之濃度，作為最低定量 濃度。結果如表四所示。

參考文獻

成藥及固有成方製劑管理辦法，62.04.11行政院衛 生署公布。

1.

行政院衛生署。90.01.04衛署中會字第0900002545 號公告。

Lin, S. J., Liu, F. S., Lu, F. L., Huang, C. Y. and Wen, K. C. 1993. Stability of Geniposide, Berberine and Pae- oniflorin in Uen-Ching-Yiin, San-Hwang-Shieh-shin- Tang and Sheau-Ching-Long-Tang. Journal of Food and Drug Analysis 1(1): 49-60.

Lin, S. J., Huang, C. Y., Wen, K. C. and Suen, T. T.

1994. Quantitative Anaiysis of Paeonitflorin, Genipo- side and Glycyrrhizin in Jing-Jieh-Lian-Chyau-Tong by High PerformanceLiquid Chromatography. Journal of Food and Drug Analysis. 2(2): 133-140.

Lin, S. J., Tseng, H. S., Wen, K. C. and Suen, T. T.

1996. Determination of Gentiopicroside,Mangiferin, Palmatine, Berberine,Wogonin and Glycyrrhizin in Traditional Chinese medicinal preparation Sann-Jian- Kuey-Jian-Tang by HPLC. Journal of Chromatography A 730:17-23.

Ku, Y. R. Lin, J. H., Wen, K. C. and Liao, C. H. 1998.

Determination of Polar Constituents in Scrophulariae Radix by Micellar Electrokinetic Capillary Capillary Chromatorgraphy. Journal of Food and Drug Analysis 6(1): 413-422.

2.

3.

4.

5.

6.

Minutes

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

m A U

0 50 100 150

m A U

0 50 100 150

A

B

C

D

1

2 3

圖七、 千歲藥酒：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去蛇床子 D.空白液-去甘草 　　　1. Glycyrrhizin 2. Osthole 3. n-Hexyl 4-hydroxybenzoate (I.S.)

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

17.228 34.898 37.210

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

17.480 34.757 37.211

min

0 10 20 30 40

mAU

0 20 40 60 80 100

34.765

min

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17.324

A

B

C

D

1

3 2

圖八、 金門龍鳳藥酒：A.標準品 B.自配藥酒 C.空白液-去山茱萸D.空白液-去五味子 　　　1. Loganin 2. Schizandrin 3. 4- Hyroxybenzoic acid n-amyl ester (I.S.)

表一、各藥酒指標成分之線性關係

處方名 藥材 分析成分 濃度範圍 r2

五加皮藥酒

乾薑 6-Gingerol 25-600 µg/mL 0.9999

蛇床子 Osthol 10.2-306 µg/mL 0.9999

丹參 Tanshinone IIa 2.5-160 µg/mL 0.9995

十全大補藥酒

甘草 Glycyrrhizin 3.5-69.8 µg /mL 1.0000

甘草 Liquiritin 0.49-48.8 µg /mL 0.9996

肉桂 Cinnamic acid 4.2-83.6 µg /mL 1.0000

當歸 Ferulic acid 3.1-62.4 µg /mL 0.9999

白芍 Paeoniflorin 3.8-225.6 µg /mL 0.9999

史國公藥酒去虎脛骨 當歸 Ferulic acid 0.0027888-0.32536 mg/mL 0.9999

秦艽 Gentiopicroside 0.00642-0.1498 mg/mL 1.0000

周公百歲藥酒 肉桂 Cinnamic aldehyde 13.44-94.08 nL/mL（ppm） 0.9993

五味子 Schizandrin 1.664-11.648 µg/mL（ppm） 0.9999

東引黃龍藥酒 甘草 Glycyrrhizin 3.16-94.8 µg/mL 0.9990

蛇床子 Osthole 1.02-30.6 µg/mL 1.0000

東引千歲藥酒 甘草 Glycyrrhizin 3.16-94.8 µg/mL 0.9990

蛇床子 Osthole 1.02-30.6 µg/mL 1.0000

金門龍鳳藥酒 山茱萸 Loganin 0.986-78.88 µg/mL 0.9994

五味子 Schizandrin 1.04-41.6 µg/mL 0.9998

虎骨木瓜藥酒去虎骨 當歸、川芎 Ferulic acid 0.0011-0.045 mg/mL 0.9997

秦艽 Gentiopicroside 0.0055-0.274 mg/mL 0.9996

表二、各藥酒指標成分之精密度

處方名 項目 藥材 分析成分 Inter-day test

Mean ± S.D. (RSD:%） Intra-day test Mean ± S.D. (RSD:%）

五加皮藥酒

乾薑 6-Gingerol 100.54 ± 0.7811 (0.78） 100.37 ± 0.0382 (0.38）

蛇床子 Osthol 50.89 ± 0.6688 (1.31） 51.02 ± 0.1190 (0.23）

丹參 Tanshinone IIa 20.28 ± 0.0848 (0.42） 20.18 ± 0.0537 (0.27）

十全大補藥酒

甘草 Glycyrrhizin 35.2 ± 0.078 (0.22） 35.3 ± 0.063 (0.18）

甘草 Liquiritin 24.3 ± 0.045 (0.19） 24.4 ± 0.025 (0.10）

肉桂 Cinnamic acid 41.7 ± 0.143 (0.34） 41.9 ± 0.036 (0.09）

當歸 Ferulic acid 30.3 ± 0.0.314 (1.04） 30.8 ± 0.029 (0.09）

白芍 Paeoniflorin 37.6 ± 0.267 (0.712） 37.6 ± 0.049 (0.130）

史國公藥酒去虎脛骨 當歸 Ferulic acid 1.19 ± 0.002 (0.17） 1.20 ± 0.005 (0.40）

秦艽 Gentiopicroside 1.88 ± 0.004 (0.21） 1.88 ± 0.002 (0.11）

周公百歲藥酒 肉桂 Cinnamic aldehyde 2.53 ± 0.009 (0.37） 2.55 ± 0.006 (0.24）

五味子 Schizandrin 1.01 ± 0.003 (0.27） 1.11 ± 0.003 (0.29）

東引黃龍藥酒 甘草 Glycyrrhizin 0.834 ± 0.0024 (0.29） 0.834 ± 0.004 (0.45）

蛇床子 Osthole 0.380 ± 0.0006 (0.17） 0.380 ± 0.0004 (0.11）

東引千歲藥酒 甘草 Glycyrrhizin 0.834 ± 0.0024 (0.29） 0.834 ± 0.004 (0.45）

蛇床子 Osthole 0.380 ± 0.0006 (0.17） 0.380 ± 0.0004 (0.11）

金門龍鳳藥酒 山茱萸 Loganin 0.88 ± 0.006 (0.71） 0.88 ± 0.006 (0.71）

五味子 Schizandrin 1.14 ± 0.008 (0.71） 1.14 ± 0.011 (0.95）

虎骨木瓜藥酒去虎骨 當歸、川芎 Ferulic acid 1.37 ± 0.036 (2.64） 1.38 ± 0.008 (0.60）

秦艽 Gentiopicroside 1.35 ± 0.058 (4.33） 1.34 ± 0.008 (0.60）

表三、各藥酒指標成分之添加回收試驗

處方名 項目

藥材 分析成分 添加濃度(µg/mL) 回收率:Mean% ± S.D. (RSD:%)

五加皮藥酒

乾薑 6-Gingerol

200 98.5 ± 1.03 (1.05) 100 103.1 ± 0.35 (0.34) 50 102.8 ± 5.48 (5.33)

蛇床子 Osthol

102 99.9 ± 0.25 (0.25) 51 97.5 ± 0.58 (0.59) 25.5 102.0 ± 0.95 (0.93)

丹參 Tanshinone IIa

40 97.0 ± 0.69 (0.71) 20 96.5 ± 0.43 (0.44) 10 97.1 ± 3.14 (3.23) 十全大補藥酒

甘草 Glycyrrhizin

10.0 100.0 ± 0.25 (2.48) 15.0 99.3 ± 0.17 (1.13) 20.0 99.5 ± 0.51 (2.53)

甘草 Liquiritin

10.0 97.0 ± 0.004 (0.04) 15.0 98.0 ± 0.003 (0.02) 20.0 99.0 ± 0.505 (2.53)

肉桂 Cinnamic acid

6.2 97.1 ± 2.13 (1.87) 0.077 109.9 ± 0.96 (0.88) 0.109 114.5 ± 1.51 (1.32)

白芍 Paeoniflorin

37.6 98.9 ± 0.347 (0.93) 48.0 97.9 ± 0.652 (1.39) 57.6 97.4 ± 0.256 (0.46) 史國公藥酒去虎脛骨

當歸 Ferulic acid

0.074 100.1 ± 0.17 (0.17) 0.093 100.3 ± 0.30 (0.30) 0.112 98.5 ± 0.14 (0.14)

秦艽 Gentiopicroside

0.034 94.7 ± 0.15 (0.15) 0.043 104.1 ± 0.13 (0.12) 0.051 104.5 ± 0.18 (0.17) 周公百歲藥酒

肉桂 Cinnamicaldehyde

38.4 93.9 ± 0.8 (0.86) 48.0 94.1 ± 0.08 (0.08) 57.6 94.2 ± 0.11 (0.11)

處方名 項目

藥材 分析成分 添加濃度(µg/mL) 回收率:Mean% ± S.D. (RSD:%)

五味子 Schizandrin

6.66 101.4 ± 0.05 (0.04) 8.32 100.9 ± 0.23 (0.22) 9.98 100.1 ± 0.09 (0.09) 東引黃龍藥酒

甘草 Glycyrrhizin

13.12 105.0.8 ± 0.08 (0.08) 26.24 98.7 ± 0.30 (0.30) 39.36 102.8 ± 0.24 (0.23)

蛇床子 Osthole

4.08 102.8 ± 0.19 (0.18) 8.16 100.3 ± 0.11 (0.11) 12.24 102.6 ± 0.14 (0.14) 東引千歲藥酒

甘草 Glycyrrhizin

13.12 105.0.8 ± 0.08 (0.08) 26.24 98.7 ± 0.30 (0.30) 39.36 102.8 ± 0.24 (0.23)

蛇床子 Osthole

4.08 102.8 ± 0.19 (0.18) 8.16 100.3 ± 0.11 (0.11) 12.24 102.6 ± 0.14 (0.14) 金門龍鳳藥酒

山茱萸 Loganin

0.023 106.0 ± 0.73 (0.69) 0.030 104.8 ± 0.52 (0.50) 0.035 105.2 ± 0.30 (0.28)

五味子 Schizandrin

0.012 95.6 ± 0.72 (0.75) 0.016 95.1 ± 0.43 (0.46) 0.019 95.3 ± 0.38 (0.40) 虎骨木瓜藥酒

當歸、川

芎 Ferulic acid

0.009 93.2 ± 1.05 (1.13)

去虎骨 0.013 98.1 ± 1.37 (1.40)

0.018 96.4 ± 1.26 (1.30)

秦艽 Gentiopicro- side

0.044 113.8 ± 2.13 (1.87) 0.077 109.9 ± 0.96 (0.88) 0.109 114.5 ± 1.51 (1.32) 表三、各藥酒指標成分之添加回收試驗（續）

表四、各藥酒指標成分之最低檢測濃度及最低定量濃度

處方名

項目 藥材 分析成分 最低檢測濃度(µg/mL) 最低定量濃度 (µg /mL)

五加皮藥酒

乾薑 6-Gingerol 375.0 ng/mL 1.25

蛇床子 Osthol 150.0 ng/mL 0.5

丹參 Tanshinone IIa 0.25 2.5

十全大補藥酒

甘草 Glycyrrhizin 0.44 1.45

甘草 Liquiritin 0.13 0.36

肉桂 Cinnamic acid 0.44 0.79

當歸 Ferulic acid 0.32 0.57

白芍 Paeoniflorin 0.13 0.43

史國公藥酒去虎脛骨 當歸 Ferulic acid 0.43 0.98

秦艽 Gentiopicroside 0.30 1.43

周公百歲藥酒 肉桂 Cinnamic aldehyde 0.12 ng/mL 0.38 ng/mL

五味子 Schizandrin 0.01 0.04

東引黃龍藥酒 甘草 Glycyrrhizin 0.22 0.74

蛇床子 Osthole 0.31 1.01

東引千歲藥酒 甘草 Glycyrrhizin 0.22 0.74

蛇床子 Osthole 0.31 1.01

金門龍鳳藥酒 山茱萸 Loganin 0.09 0.30

五味子 Schizandrin 0.04 0.13

虎骨木瓜藥酒去虎骨 當歸、川芎 Ferulic acid 0.45 1.49

秦艽 Gentiopicroside 0.55 1.82

Christopherson, M. J., Yoder, K. J. and Miller, R. B.

Validation of a Stability-lndicating HPLC Method for

7. the Determination of Amiodarone HCl and its Related Substances in Amiodarone HCl Injection.

Identification and Quantification of Target Compounds in Herbal Wine

LING CHIN, KUEN-SEN HUANG, SHION-JANE LIN, FEN-LING LU, YA-TZY LIN, HUA-HSUAN CHANG, SHU-CHONG CHENG, CHIU-YU HUANG, CHENG-YU HUANG AND JER-HUEI LIN

Pharmacognosy Division

ABSTRACT

High performance liquid chromatography method was employed to determine target compounds in herbal wine. These compounds included 6-gingerol, osthole, tanshinone IIA, glycyrrhizin, liquiritin, cinnamic acid, ferulic acid, paeoniflorin, gentiopicroside, cinnamic aldehyde, schizandrin and loganin. Each of them was from eight different formulations of herbal wine. Separations were effected using a C18 column by gradient elution with different ratio of （0.03∼0.1%） phosphoric acid and acetonitrile. The linear coefficients of regression equations were all above 0.9990 with the recoveries of eight samples of 93.2∼114.5%. The limitations of quantitation and detection were also reported.

Key words: herbal wine, target compounds, high performance liquid chromatography, identification, quantification