Taipei Medical University Institutional Repository:Item 987654321/4360
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(2) 致謝 終於…終於完成論文了!碩士班的兩年一下子就過了，忙碌的的二年級，每天 都有處理不完的事情，雖然有些事不是很急，一旦累積多了，就會有火燒屁股的 感覺。不過，幸運的我，身旁總有很多貴人幫助我克服這些難題，果然平常多去 拜拜，心中保有善念(偶而帶點邪念)，一切的事情就會否極泰來! 在此要特別感謝中山醫學大學毛義方老師、萬芳醫院許文憲醫師，以及系上 簡伶朱老師，在繁忙之中，抽空擔任我的口試委員，給予我的論文許多建議，讓 我的論文更加完善。 研究所這兩年，我想對我最好、讓我做任何事都可以無憂無慮的開心去做， 感覺像老師、朋友、以及媽媽(簡稱亦師亦友亦母)的葉媽媽，是我最最最要感謝 的人，有葉媽媽寬大的心，以及每次都不厭其煩的聽我訴說實驗的失敗、實驗室 又壞了什麼東西、實驗室需要進貢什麼、以及偶而的冷笑話及八卦，這位亦師亦 友亦母的葉媽媽最常說的就是： 「妳開心就好!」 ，讓我真的有開開心心的過完這兩 年的研究所生活，雖然也有痛苦、壓力大的時候，不過開心總是大於這些討厭的 情緒。 另外，要感謝簡老師總是聽我碎念一些生活瑣事(所以我不需要小紅椅，就可 以隨時隨地訴說心事)，也很開心可以跟簡老師分享一些情報，可以當茶餘飯後閒 聊的好配菜!因為簡老師的好脾氣，讓我跟老師有暢所欲言的感覺! 另外，要感謝葉家家族的姿君(最佳平民的公主)、育穎(宰相肚裡最能塞食物 的最佳寫照)、瓊琳(最悲情的苦力學妹)，謝謝妳們在許多事情上的鼎力相助。也 要謝謝同窗兩年的同學們：慧瑩、彥寧、明君、原道、子威、正偉、昱勳、伯鑫。 另外，更要感謝我的家人以及小源源對我的包容以及支持，懹我無憂無慮的完成 研究所學業。 劉子涵 謹致於 台北醫學大學公共衛生研究所 2008 年 7 月 22 日. I.
(3) 摘要 全球約有 50%以上的人感染幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori; HP)，感染 HP 與消化道疾病的發生有密切相關，在 1994 年世界衛生組織亦將 HP 歸類為第一級 致癌物。當感染 HP 引起胃部的發炎反應，會使體內氧化壓力增加。因此，本研 究係探討 HP 感染的盛行率、危險因子，以及 HP 感染與體內氧化壓力指標間之 相關性。 本研究採橫斷性研究，從花蓮門諾醫院共收集 116 位接受胃腸道內視鏡檢查 之病人進入研究。收集個案之問卷、HP 感染檢驗結果，以及血液檢體進行脂質 過 氧 化 物 質 - 丙 二 醛 濃 度 (Malondialdehyde; MDA) 、 抗 氧 化 劑 - 麩 胱 肽 濃 度 (Glutathione; GSH)、超氧化物歧化酶活性(Superoxide dismutase; SOD)，及微量營 養元素鋅(Zinc; Zn)、銅(Copper; Cu)濃度分析。 本研究中 HP 感染者有 45 位 (38.8%)，平均年齡為 46.8 歲；女性佔 65.5% (76/116)，非原住民佔 78.5% (91/116)。在盛行率方面，原住民族群的 HP 盛行率 顯著性高於非原住民族群(原住民=60.0%，非原住民= 33.0%；OR=3.05，95% CI=1.23-7.59)，此外，原住民與非原住民在年齡、BMI 值、喝酒習慣，以及教育 程度方面，皆有達統計上顯著差異(p＜0.05)。校正可能的干擾因子後，MDA 濃 度與 HP 感染呈顯著性相關(p=0.048)。 原住民族群與 HP 感染有密切的相關，而 HP 感染可能會影響血漿中 MDA 濃度，造成體內氧化壓力增加。. 關鍵字：幽門螺旋桿菌、脂質過氧化、氧化壓力、抗氧化劑。. II.
(4) Abstract Helicobacter pylori (H. pylori; HP) chronically infect the stomach of more than half of the human population in the world and it has been implicated in the pathogenesis of a number of digestive tract disorders. In 1994, HP was classified as a class I carcinogenic agent. HP infection induces an inflammatory response that result oxidative burst. The aim of this study is to investigate the prevalence and risk factors of HP infection. Additionally, also investigate the relationship between oxidative stress and HP infection. This study is performed by cross-sectional study. A total of 116 patients with digestive tract disorder underwent endoscopy in Mennonite Christian Hospital in Hula lien were enrolled. Questionnaires, laboratory tests for HP, and blood samples are collected. The concentrations of malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), superoxide dismutase (SOD), zinc, and copper in the blood were determined. Among 116 subjects, there 45 (38.8%) were HP-infected. The averageage was 46.8 years old. Of all patients, 65.5% were female (76/116) and 78.5% were non-aborigine (91/116). The prevalence of HP in aborigine was significant higher than non-aborigine (60.0% vs. 33.0%; OR=3.05，95% CI=1.23-7.59). Furthermore, aborigine and non-aborigine were significant different in age, BMI, drinking, and education (p＜0.05). After adjusted possible confounding factors, the MDA concentrations was significant related with. HP infection (p=0.048). In this study, we find that the aborigine and HP infection were highly correlation, and HP infection affected the MDA concentrations in the plasma.. Keywords: Helicobacter pylori、lipid peroxidative、oxidative stress、antioxidant. III.
(5) 目錄 第一章 緒論 ......................................................................................................................1 第一節 研究背景及動機 ..............................................................................................1 第二節 研究目的與假設 ..............................................................................................3 第三節 研究架構 ..........................................................................................................4 第二章 文獻探討 ..............................................................................................................5 第一節 HP 感染之途徑及臨床診斷與症狀 ................................................................5 第二節 HP 感染之盛行率及危險因子 ........................................................................9 第三節 HP 感染與體內 ROS 生成之機轉 ................................................................13 第四節 HP 感染與體內氧化壓力及抗氧化能力之關係 ..........................................16 第三章 材料與方法 ........................................................................................................23 第一節 研究流程 ........................................................................................................23 第二節 研究對象與資料收集 ....................................................................................24 第三節 實驗方法 ........................................................................................................26 第四節 資料處理與統計分析 ....................................................................................39 第四章 研究結果 ............................................................................................................40 第一節 基本描述性統計...........................................................................................40 第二節 HP 盛行率及危險因子之分析 ....................................................................45 第三節 氧化壓力、抗氧化能力與各變項之相關 ....................................................52 第四節 HP 感染與體內氧化壓力之相關分析 ..........................................................59 第五章 討論與結論 ........................................................................................................68 第一節 HP 感染之盛行率與危險因子 ......................................................................68 第二節 HP 感染與體內氧化壓力 ..............................................................................71 第三節 研究限制 ........................................................................................................74 第四節 結論與建議 ....................................................................................................75 參考文獻 ..........................................................................................................................76 IV.
(6) 表目錄 表 1-1- 1 台灣癌症申報年齡標準化發生率按地區、性別分類 .................................2. 表 2-1- 1 檢驗 HP 感染之侵襲性檢查方法 ..................................................................7 表 2-1- 2 檢驗 HP 感染之非侵襲性檢查方法 ..............................................................8. 表 2-2- 1 感染 HP 的危險因子 .................................................................................... 11 表 2-2- 2 感染 HP 的危險因子(續) .............................................................................12. 表 2-4- 1 HP 感染與脂質過氧化物質濃度之文獻探討 .............................................20 表 2-4- 2 HP 感染與脂質過氧化物質濃度之文獻探討(續) ......................................21 表 2-4- 3 HP 感染與抗氧化能力之文獻探討 .............................................................22. 表 3-4- 1 SOD 活性計算：VS/VC RATIO .....................................................................34 表 3-4- 2 金屬元素分析-FLAAS 儀器參數 ................................................................37 表 3-4- 3 金屬元素分析參數 .......................................................................................37 表 3-4- 4 血清標準品參考值(SRM)之分析結果 ........................................................37. 表 4-1- 1 總個案之基本人口學變項描述 .....................................................................42 表 4-1- 2 總個案之生活及飲食習慣描述 .....................................................................43 表 4-1- 3 總個案之血液測定值描述 (N=114) ..............................................................44. 表 4-2- 1 基本人口學變項與 HP 盛行率之相關分析..................................................46 表 4-2- 2 生活習慣與 HP 盛行率之相關分析..............................................................47 表 4-2- 3 飲食習慣與 HP 盛行率之相關分析..............................................................48 表 4-2- 4 原住民與非原住民基本人口學與生活習慣之相關分析 .............................50 表 4-2- 5 原住民與非原住民飲食習慣之相關分析 .....................................................51. 表 4-3- 1 基本人口學變項與體內 MDA、GSH 濃度之相關......................................53 V.
(7) 表 4-3- 2 生活習慣與體內 MDA、GSH 濃度之相關..................................................54 表 4-3- 3 飲食習慣與體內 MDA、GSH 濃度之相關..................................................55 表 4-3- 4 基本人口學變項與 SOD 活性及 ZN、CU 濃度之相關................................56 表 4-3- 5 生活習慣與 SOD 活性及 ZN、CU 濃度之相關............................................57 表 4-3- 6 飲食習慣與 SOD 活性及 ZN、CU 濃度之相關............................................58 表 4-4- 1 HP 感染與血液檢測值之分析........................................................................61 表 4-4- 2 變項間斯皮曼相關係數 .................................................................................62 表 4-4- 3 HP 感染與體內氧化壓力之羅吉斯迴歸模式分析........................................63 表 4-4- 4 HP 感染與體內氧化壓力之羅吉斯迴歸模式分析(續) .................................64 表 4-4-5 影響體內 MDA 濃度之複迴歸模式分析.......................................................66 表 4-4-6 影響體內 MDA 濃度之複迴歸模式分析(續)................................................66 表 4-4-7 影響體內 MDA 濃度之複迴歸模式分析(續)................................................67. 圖目錄 圖 2-1- 1 HP 感染引起之臨床症狀 ...............................................................................6. 圖 2-2- 1 HP 盛行率與年齡之關係 ...............................................................................9. 圖 2-3- 1 HP 引起發炎反應機制 .................................................................................13 圖 2-3- 2 HP 與 ROS 增加之關係 ...............................................................................14 圖 2-3- 3 ROS 造成細胞傷害的機制...........................................................................15. 圖 3-4- 1 MDA 標準品在波長 586 NM 下之檢量線圖 ...............................................28 圖 3-4- 2 GSH 標準品在波長 400 NM 下之檢量線圖.................................................31 圖 3-4- 3 元素鋅之檢量線 ...........................................................................................36 圖 3-4- 4 元素銅之檢量線 ...........................................................................................36. VI.
(8) 第一章 緒論. 第一章 緒論 第一節 研究背景及動機 全球約有 50%以上的人感染幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylorii; HP) (Everhart et al. 2000)，在台灣的盛行率約 54% (Lin et al. 1999)。HP 與腸胃疾病有密切的關 係，如胃炎、消化道潰瘍，甚至胃癌 (Dunn, Cohen, and Blaser 1997)，1994 年世 界衛生組織亦將 HP 歸類為第一級致癌物質(IARC 1994)。 若人體內細胞或組織產生過多的自由基，與多元不飽和脂肪酸產生連鎖反 應，造成細胞膜的脂質過氧化，此時若體內的抗氧化系統無法負荷，則會使體內 氧化壓力上升。當胃部感染 HP 時，體內會產生大量的活性氧分子(Reactive oxygen species; ROS)，使得胃黏膜及血液中氧化壓力增加 (Davies et al. 1994; Khanzode, Khanzode, and Dakhale 2003)。 另外，鋅(Zinc; Zn)、銅(Copper; Cu)元素是人體所必須的微量營養元素，在 人體內扮演重要的角色。鋅參與了三百多種的酵素催化過程，也是多種蛋白質、 荷爾蒙、核甘酸的結構成分 (Vallee, and Falchuk 1993)。此外，鋅、銅與體內的抗 氧化酵素活性有密切的相關，例如：銅/鋅-超氧化物歧化酶(Cu/Zn-Superoxide Dismutase; Cu/Zn-SOD)，可以調節體內氧化壓力 (Vallee et al. 1993; Pizent et al. 2008)。 台灣地區東北部及東部山地鄉鎮是胃癌的高死亡率地區 (陳炯年 2002)，根 據行政院衛生署癌症登記小組之癌症登記年報顯示，花蓮地區的胃癌標準化發生 率，不論男性或女性，皆高於其他行政區，如表 1-1-1 所示，因此預防胃癌的發 生，除了改變生活及飲食習慣外，防止消化道疾病惡化亦是重要的。花蓮地區因 族群組成關係，幽門螺旋桿菌感染可能會因為種族的差異而有所不同，而生活型 態等因子亦皆可能是消化道疾病或胃癌的危險因子。 因此本研究於花蓮門諾醫院胃腸科門診收集研究對象，收集其問卷、臨床生 化指標，及血液檢體，以測定體內脂質過氧化物質-丙二醛濃度(Malondialdehyde; 1.
(9) 第一章 緒論. MDA)、抗氧化劑-麩胱肽濃度(Glutathione; GSH)、超氧化物歧化酶活性(Superoxide dismutase; SOD)，及微量營養元素 Zn、Cu 濃度，以探討 HP 感染的盛行率以及可 能的危險因子，另外，亦分析 HP 感染盛行率與體內氧化壓力之相關性。 表 1-1-1. 台灣癌症申報年齡標準化發生率按地區、性別分類 花蓮縣. 台灣地區. 每十萬人口年齡. 每十萬人口年齡. 標準化發生率. 標準化發生率. 年度. 男性. 女性. 男性. 女性. 88 89 90 91 92 93 94. 22.60 24.34 15.25 23.53 26.96 20.86 14.40. 14.33 12.31 10.78 8.84 10.68 16.99 8.88. 19.62 18.58 19.45 19.73 18.00 18.02 16.82. 10.49 10.46 10.15 10.43 9.86 10.32 9.59. 註：每十萬人口年齡標準化發生率：使用 2000 年世界標準人口為標準人口. 2.
(10) 第一章 緒論. 第二節 研究目的與假設 一、目的 本研究目的欲探討門諾醫院胃腸科門診病人之 HP 感染盛行率及危險因子分 析，並探討 HP 感染盛行率與體內氧化壓力之相關性。. 二、假設 本研究假設為 HP 感染者，其體內氧化壓力較高，而抗氧化能力較低。例如： 有感染 HP 者，其體內 MDA 濃度較高、GSH 濃度及 SOD 活性較低。. 3.
(11) 第一章 緒論. 第三節 研究架構 本研究架構為 HP 感染與體內氧化壓力是有相關性的，其關係可能受到性 別、年齡、生活或飲食習慣等因子(干擾因子)影響，另外，體內抗氧化能力(修飾 因子)亦有可能修飾 HP 感染與氧化壓力之間的相關性。 性別、年齡、教育程度、抽菸、 喝酒、飲食習慣、營養狀況。. HP 感染. 氧化壓力：MDA 濃度. 抗氧化能力 GSH、SOD、Zn、Cu. 4.
(12) 第二章 文獻探討. 第二章 文獻探討 第一節 HP 感染之途徑及臨床診斷與症狀 一、HP 感染途徑 HP 屬於革蘭氏陰性，微嗜氧菌，最適合生長在 35-37℃的環境中，而人類是 HP 唯一的自然宿主。HP 傳染途徑多是由口進入，主要是幼年時期被家人傳染， 而人、動物、食物、水源都是可能的傳染源 (Dunn et al. 1997; Goodman, and Correa 1995; Kodaira, Escobar, and Grisi 2002; Van Duynhoven, and de Jonge 2001)。 Baker and Hegarty（2001）探討 HP 的感染與飲用水間的相關性，作者利用結 合螢光抗體的方式測量飲用水中是否有 HP 的存在，結果顯示飲用水中含有 HP 與當地的感染率有密切相關 (Baker, and Hegarty 2001)。另外，有研究指出 HP 並 無法在大多數食品中生長，若食品本身的水活性(water activity)大於 0.97 和 pH 值 範圍為 4.9 至 6.0，就可以提供 HP 基本的生存條件 (Van Duynhoven et al. 2001; Beuchat 2002; Jiang, and Doyle 2002)。 接觸到 HP 感染者之嘔吐物、唾液、或使用消毒不完全的醫療器材(如：內視 鏡等)亦有可能受到感染。接觸或誤食到人類、動物糞便，以及受污染之食物或水 源亦可能感染 HP (Gebel et al. 2001)。 研究指出居住在收容機構或有較多成員的家庭中 HP 感染盛行率較高 (Dunn et al. 1997; Goodman, and Correa 2000; Tindberg et al. 2001)，這些結果顯示 HP 是 可能來自共同傳染源 (Brown 2000)。. 二、HP 臨床診斷與症狀 HP 的感染率會因為國家、地區發展程度而有所不同，開發中國家比已開發 國家的感染率高，在台灣 HP 的感染率約為 54％ (Lin et al. 1993)。 目前診斷 HP 的感染有許多方法，主要分為兩大類：侵襲性(invasive)與非侵 襲性(non-invasive)檢查。侵襲性檢查包括：快速尿素酶檢查(rapid urease test )、組 5.
(13) 第二章 文獻探討. 織學(histology)、細菌培養(culture)、聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction ; PCR)、細胞刷拭檢查(brushing cytology)或直接抹片染色(direct smear)；非侵襲性 檢查包括：血清學檢查(serologic test)、尿素呼氣法(urea breath test; UBT)、糞便抗 原檢查、尿液及唾液之抗體檢查。表 2-1-1、表 2-1-2 呈現臺灣地區對於 HP 各種 診斷方法的靈敏度以及精密度 (Wang 2002)。 另外，在臨床症狀方面，當感染 HP 後，可能會導致胃部的慢性發炎(chronic inflammation) 、 萎 縮 性 胃 炎 (astrophic gastritis) ， 以 及 小 腸 化 生 (intestinal metaplasia)，甚至胃癌(carcinoma)等，如圖 2-1-1(Fox, and Wang 2007)。文獻也指 出感染 HP 的人，其終身發生胃癌的機率為 1 - 2% (Kuipers 1998)。 在 HP 根除治療後，復發情形在已開發國家中是少見的，而開發中國家則較 常 見 (Gisbert 2005) ， 而 復 發 分 兩 種 情 況 ， 分 別 為 在 胃 黏 膜 發 現 同 種 HP (recrudescence) ， 或 發 現 不 同 種 HP (reinfection) ， 大 多 的 病 人 復 發 是 屬 於 recrudescence(Xia et al. 1997)。過去研究指出，在 HP 根除治療成功後，利用 13CUBT 追蹤一年皆為陰性者，結果發現在已開發國家中每年的 HP 復發率為 2.67%，而 在開發中國家為 13.00%(Niv 2008)。. 圖 2-1-1 HP 感染引起之臨床症 狀 。 ( 摘 自 Journal of Clinical Investigation (2007)： 117, 60-69) 6.
(14) 第二章 文獻探討. 表 2-1- 1. 檢驗 HP 感染之侵襲性檢查方法. 侵襲性檢查方法. 原理. 靈敏度(％). 特異度(％). 快速尿素酶檢查. HP 會分泌大量尿素酶，將尿素水解成氨與重碳酸根。故利用在尿素瓊脂片之內加 上酚紅指示劑，檢查時將胃黏膜組 織置於尿素瓊脂片，若有 HP 存在於胃黏膜 組織中，則會將尿素水解，使瓊脂的環境變成鹼性，因而其內的酚紅指示劑會從 原來黃色的瓊脂變成粉紅色。. 90-97. 64-97. 組織學. 利用切片方式自胃部取出組織，經染色處理後，可在顯微鏡下觀察是否有 HP 存 在，並同時可瞭解胃黏膜病變。一般建議使用 hematoxylin and eosin stain 和特殊 染色如 Warthin-Starry stain，Giemsa stain 等。. 87-97. 73-91. 細菌培養. 診斷 HP 最標準的方式(gold standard)。胃黏膜切片浸泡在培養液中，24 小時內移 置於細菌培養皿培養，其培養環境的條件一般為：5％O2、10％CO2、85％N2、37 ℃、4-10 天，若培養成功就直接證明 HP 的存在，同時可做抗生素的藥物敏感試 驗。. 71-99. 100. 聚合酶連鎖反應. 屬於較基礎研究性質的檢查方式，測定特殊的 DNA 序列，可以測到少數(10-100 隻)HP 感染。. 98. 85. 細胞刷拭檢查. 做內視鏡檢查時直接從胃竇做刷拭抹片，以 Giemsa 等特殊染色，將細菌染出或利 用切片組織直接塗抹做革蘭氏染色，也可看出 HP 的存在。. 98. 96. 7.
(15) 第二章 文獻探討. 表 2-1- 2. 檢驗 HP 感染之非侵襲性檢查方法. 非侵襲性檢查方法. 原理. 靈敏度(％). 特異度(％). 血清學檢查. 抽血檢查是否有 HP 感染是相當普便的一種檢查方法，一般都是檢查 IgG 抗體， IgG 抗體陽性可表示受檢者有慢性 HP 感染或是曾經感染過。目前常使用的血清 學檢查有酵素結合免疫吸收法 (ELISA)等。. 85-95. 71-97. 尿素呼氣法. 分為碳-13 及碳-14 尿素呼吸法，原理為利用讓受試者喝下含有碳的同位素：碳 -13 或碳-14 之尿素水溶液，若體內有 H. pylori，則會將尿素水解成氨及二氧化 碳，受試者就會呼出含碳-13 或碳-14 的二氧化碳。. 96-99. 87-95. 糞便抗原檢查. 利用 polyclonal antibody 以 ELISA 之方法檢測糞便中有無 HP 的抗原(HPSA)。. 95-96. 97-100. 尿液及唾液抗體檢查. 檢測尿液或唾液中 HP 的 IgG 抗體(AntiHPIgG)與血清學檢查同樣方便，且更無 侵襲性，但唾液之抗體檢查準確性不高。. 95. 87. 8.
(16) 第二章 文獻探討. 第二節 HP 感染之盛行率及危險因子 全球的 HP 感染盛行率會因國家而有所不同，在開發中國家約有 70 - 90 %的 人口感染 HP，已開發國家則是 25 - 50 % (Dunn et al. 1997; Brown 2000)。在亞洲 國家方面，印度、孟加拉、巴基斯坦、及泰國等開發中國家，其盛行率高於日本、 中國、新加坡(Singh, and Ghoshal 2006)。 HP 的感染主要是發生在孩童時期 (Banatvala et al. 1993; Parsonnet 1998; Suerbaum, and Michetti 2002)，感染盛行率會隨著年齡增加而有上升的趨勢，在開 發中或已開發國家中皆可發現此現象，如圖 2-2-1 所示 (Czinn 2005)，故年齡為 HP 感染盛行率的重要因子之一 (Lin et al. 1997; Murray et al. 1997; Moges et al. 2006; Khan, and Ghazi 2007)。. 圖 2-2- 1 HP 盛行率與年齡之關係。(摘自 Journal of Pediatrics (2005): 146, S21-S26) De Martel 與 Parsonnet (2006) 的 meta-analysis 指出，土耳其、中國、義大利、 北愛爾蘭、芬蘭、墨西哥、蘇格蘭等國家的 HP 盛行率都高於 50％，而且在校正 年齡與社經地位後，男性的盛行率顯著較女性高 (de Martel, and Parsonnet 2006)。 社經地位方面，Seyda 等人(2007)研究指出，中、低社經地位的 HP 感染危險 性分別是高社經地位者的 1.92 倍及 3.29 倍 (Seyda et al. 2007)，同樣地，其他研 究中亦觀察到中低教育程度者與勞工階層的危險性比高教育程度及非勞工階層 者高 (Murray et al. 1997; Brown 2000)。 居住環境方面，居住在郊區或鄉村的居民，其 HP 的感染危險性分別是居住 9.
(17) 第二章 文獻探討. 在城市的 1.51 倍及 1.43 倍 (Seyda et al. 2007)。1999 年(Lin et al.)台灣的研究方 面，調查了 2551 位 3-6 歲健康學齡前兒童的 HP 感染盛行率，研究發現原住民鄉 鎮的學齡前兒童盛行率是一般鄉鎮或都市鄉鎮的 2.6 倍 (Lin et al. 1999)。另外， 家中成員較多或有共用房間情形者，則其感染的危險性也會較高 (Aguemon et al. 2005; Seyda et al. 2007)。 文獻指出有喝酒習慣者的 HP 感染盛行率較高，是沒有喝酒習慣者的 2.78 倍，並且達統計上顯著意義，另外 HP 的感染也與職業有相關(Moges et al. 2006)。 在抽菸方面，目前有抽菸習慣者或曾經有抽菸習慣者的感染盛行率是未曾抽菸者 的 1.22 倍 (Murray et al. 1997)。. 10.
(18) 第二章 文獻探討. 表 2-2- 1. 感染 HP 的危險因子. (作者,年代) (Seyda et al. 2007). 研究設計 Cross-sectional. 研究對象. 研究結果. 共 1567 位各種胃腸道不適的病 人參與研究。. 男性的盛行率為 67.7%，女性為 68.2%，在校正年齡後，女性 危險性是男性的 1.14 倍(95% CI=0.74-1.73，p=0.865)。 校正年齡後，中社經地位與低社經地位的感染危險性分別是高 社 經 地 位 的 1.92 倍 ((95% CI=1.33-2.82) 、 3.29 倍 (95% CI=2.31-5.46)，且三組有達統計上顯著差異，p<0.001。 家庭成員有 5-7 位與 8 位以上的感染危險性(校正年齡後)分別 是成員 4 位以下的 1.38 倍(95% CI=1.22-1.94)、2.94 倍(95% CI=1.76-4.82) ，且三組有達統計上顯著差異，p<0.001。 居住環境為郊區與鄉下的感染危險性(校政年齡後)分別是居住 在 城 市 的 1.51 倍 (95% CI=1.14-2.02) 、 1.43 倍 (95% CI=1.06-1.98) ，且三組有達統計上顯著差異，p<0.032。 盛行率在血型方面沒有統計上顯著相關。. (Moges et al. 2006). Cross-sectional. 共 215 位有消化不良症狀的病 人：男性 99 位，女性 116 位。. 血清學 HP 盛行率為 85.6%，且 50 歲以上盛行率顯著高於小於 20 歲的病人。 HP 感染與性別、血型及飲食沒有顯著相關，與飲用酒精性飲 料(OR = 2.78，95% CI=1.19-6.5；p < 0.01)及職業(χ 2=24. 78 ，p < 0.001)有統計上顯著相關。 居住在鄉村 HP 感染危險性比居住在城市危險性低(OR =0.45， 95% CI=0.21-0.92；p < 0.01)。. 11.
(19) 第二章 文獻探討. 表 2-2- 2. 感染 HP 的危險因子(續). (作者,年代) (Brown et al. 2002). 研究設計 Cross-sectional. 研究對象. 研究結果. 中國山東省臨朐縣 13 個村莊的 3288 位成人。. 家中有 1 位小孩以上(OR= 2.0，95% CI=1.1-3.6)、與 2 人以上 共用一張床(OR= 2.3，95% CI=1.3-4.2)、中低教育程度者(OR= 1.6，95% CI=1.3-2.0；OR= 2.3，95% CI=1.9-2.9)其 HP 感染盛 行率較高。 抽煙、喝酒以及蔬果的攝取，與 HP 感染盛行率沒有統計上的 顯著相關。. (Murray et al. 1997). Cross-sectional. 隨機選取北愛爾蘭 12-64 歲之居 民，共 4742 位。. HP 感染盛行率為 50.5％，且盛行率隨著年齡增加而有顯著增 加趨勢（12-14 歲為 23.4％；60-64 歲為 72.7％，p＜10-4）。 年齡 25 歲以上男生的盛行率較女生高（60.9％ vs.55.2％，p＜ 0.01），在控制年齡與社經地位後，男生感染的危險性為女生 的 1.19 倍（OR=1.19，95% CI =1.02-1.40）。 HP 感染與社經地位有關：勞力階級感染危險性為非勞力階級 的 1.7 倍（OR=1.7，95%CI=1.47-1.98）。 目前有抽菸及曾經抽菸者感染危險性比未抽菸者高：曾經抽菸 者（OR=1.22，95% CI=1.01-1.49）；抽煙一天大於 20 支者 （OR=1.33，95% CI=1.05-1.67）。 目前有酒精攝取習慣與 HP 感染沒有統計上顯著相關。. 12.
(20) 第二章 文獻探討. 第三節 HP 感染與體內 ROS 生成之機轉 HP 造成體內致病的毒力因子(bacterial virulence factors)，包含了 vaculating cytotoxin gene A (vacA)、cytotoxin association gene A (cagA)，以及 lipopolysaccharide (LPS) (Natio, and Yoshikawa 2002)。在台灣的相關研究指出有感染 HP 病人中，cag A-positive 的比例佔有 92.5% (Lin et al. 1997)，而 CagA 引起體內細胞發炎機制是 利用 Type IV Secretion system (T4SS)，T4SS 會將 CagA 蛋白質送到宿主細胞中， 此蛋白質隨即被宿主胃上皮細胞中的 tryosine kinase 磷酸化，進而影響宿主細胞 內的訊號傳遞系統，如圖 2-3-1 所示 (Fox et al. 2007)。 T4SS 造成胃黏膜上皮細胞發炎前反 應(proinflammatory responses)，主要藉由 兩種機制： HP 的 T4SS 將其 CagA 蛋白 質與肽聚糖(peptidoglycans; PGN)送至宿 主細胞中，PGN 隨即被 bacterial sensor Nod1 辨認，接著活化 nuclear factor-κB (NF-κB)；同樣地，磷酸化的 CagA 蛋白 質經過一系列的訊息傳導後，活化 NF-κ B 與 activator protein-1 (AP-1)，這些均會 使 宿 主 細 胞 產 生 介 白 素 -8(interleukin-8; IL-8) 引 起 發 炎 反 應 (Hatakeyama, and Brzozowski 2006)。. 圖 2-3- 1 HP 引起發炎反應機制。 (摘自 Journal of Clinical Investigation (2007): 117, 60-69). 13.
(21) 第二章 文獻探討. 當體內感染 HP 時，HP 嗜中性白血球活化蛋白(H. pylori-neutrophil activating protein;簡稱 HP-NAP)會誘導胃黏膜釋出嗜中性白血球及單核球等，這些白血球會 使胃黏膜產生大量的 ROS，如圖 2-3-2 所示 (Natio et al. 2002)。在 In vitro 實驗研 究 也 指 出 感 染 帶 有 cagA 基 因 型 的 HP ， 其 體 內 PMNs (polymorphonuclear neutrophils)與 ROS 均有增加的趨勢 (Zhang, Nakashabendi et al. 1996)，當體內 ROS 過多時，則會引起氧化壓力增加，以及造成多元不飽和脂肪酸、蛋白質、 DNA 或細胞的傷害，如圖 2-3-3 (Agarwal. A, Gupta. S, and Sharma. R.K 2005)。此 外，HP 會產生氨(NH3)與胃裡的 HOCl(次氯酸)反應產生 NH2Cl(一氯胺)，因為 NH2Cl 屬於親油性物質，可自由進出生物性細胞膜，進而氧化細胞內的物質 (Grisham, Jefferson, and Thomas 1984)。. 圖 2-3- 2 HP 與 ROS 增加之關係。(摘自 Reactive Oxygen and Nitrogen in Inflammation Free Radical Biology and Medicine (2002): 33, 323-336). 14.
(22) 第二章 文獻探討. 圖 2-3- 3 ROS 造成細胞傷害的機制。(摘自 Reproductive Biology and Endocrinology (2005): 3, 1-21). 15.
(23) 第二章 文獻探討. 第四節 HP 感染與體內氧化壓力及抗氧化能力之關係 本節將分別探討 HP 感染(HP 感染者以 HP＋表示；沒有 HP 感染者以 HP－ 表示) 與下列各物質之關係：脂質過氧化物質、體內抗氧化能力，以及鋅、銅元 素。. 一、脂質過氧化物質 細 胞 膜 是 由 磷 脂 類 (phospholipids) 所 構 成 ， 其 中 富 含 多 元 不 飽 和 脂 肪 酸 (PUFAs)，ROS 會去攻擊細胞膜上的多元不飽和脂肪酸，產生脂肪酸基(fatty acid radicals)以及脂肪酸氫過氧化物(lipid hydroperoxides; LOOH)，進而破壞細胞膜或 造成細胞的損傷。當細胞受到 ROS 攻擊會產生脂質過氧化物質(lipid peroxides)， 而 MDA 是目前最常被用來測量體內脂質過氧化程度的一個指標(Smita et al. 2007)。 HP＋之病人其胃黏膜脂質過氧化物質濃度較高 (Farinati et al. 1996; Drake et al. 1998; Everett et al. 2001)。此外，Khanzode 等人(2003)指出，HP＋的胃炎病人 及及胃癌病人其血清中 MDA 濃度顯著高於對照組( p<0.001 )，對照組濃度為 1.74 μmol/L、HP＋的胃炎病人為 3.12μmol/L、胃癌病人為 6.06μmol/L (Khanzode, Khanzode, and Dakhale 2003)。. 二、體內抗氧化能力 人體中抗氧化酵素系統目的是在阻止活性氧物質對細胞或組織造成的氧化 傷害， 人體內 抗氧 化酵素 主要有 三種 ：超氧 歧化酵 素(Superoxide dismutase; SOD)、過氧化氫酶(Catalase; CAT)，以及麩胱甘肽過氧化酶(Glutathione peroxidase; GSH-Px)，分別作用在不同 ROS 的降解作用上。而本研究主要是針對 SOD，以 及還原態的 GSH 作為探討。. (一) SOD SOD 是人體內第一線對抗超氧化物(Superoxide radical, O2‧-)的抗氧化酵素， 16.
(24) 第二章 文獻探討. 超氧化物進入人體內會與細胞產生反應， SOD 可直接將 O2 -降解為活性較低的 ‧. 過氧化氫(H2O2)，再由其它抗氧化酵素繼續進行 ROS 的降解作用，反應式如下：. (二) GSH GSH 是細胞內主要的非蛋白質硫醇類，是體內重要的抗氧化劑，在人體胃部 及肝臟中含量較高，GSH 通常以還原態存在細胞中，扮演著清除自由基的角色， 以及調節其他抗氧化劑，例如 vitamin E (Natio et al. 2002)。GSH 可提供一個電子 給 GSH-Px，將 H2O2 及 LOOH 分解成 H2O 和 O2 。 文獻指出，有 HP 感染的病人，其胃黏膜的 GSH 濃度較低 (Verhulst et al. 2000; Shirin et al. 2001)，另外在動物實驗中，以 HP 感染沙鼠(gerbils)十二週後，並沒 有發現體內 GSH 濃度有顯著的改變 (Suzuki et al. 1999)，這些不一致的結果可能 是因為物種的不同，或是不同長短的感染期間而導致。. 三、鋅、銅元素 鋅在人體內的含量僅次於鐵，約含有 3g (Solomons 1985)。鋅可以調節體內 的氧化壓力，在有氧環境下，體內的 ROS (O2‧-、OH‧、H2O2 )會不斷的產生，例 如 NADPH oxidases 利用 NDAPH 提供電子，將體內的 O2 催化生成 O2 -，而鋅可 ‧. 以抑制 NADPH oxidases 的催化作用，減少 O2‧-的生成。此外，鋅也是三百多種 酵素的輔因子(cofactor)，例如 SOD 等(Prasad 2008)，鋅元素亦與金屬硫蛋白 (metallothionein)的生成有關，而金屬硫蛋白是體內 OH ‧ 很好的清除者(Prasad 1993)。 銅在體內也是多種酵素的 cofacter，例如 cytochrome c oxidase、 dopamine β hydroxylase、tyrosinase，以及 superoxide dismutase 等，人體內約含有 0.8 - 1.5g 的銅，尤其是在肝臟、骨骼、肌肉中含量最多，飲食中銅的吸收會受到性別(女性 吸收量較男性多)、飲食的影響(鋅、鎘會影響銅的吸收) (Ince et al. 2008)，體內的 17.
(25) 第二章 文獻探討. ‧. 銅也會催化 H2O2 生成 OH ，其反應式如下 (Prasad 1993)：. 另一方面，體內的鋅元素會與銅元素競爭鍵結到細胞膜上，鋅的競爭可以降 ‧. 低 OH 的生成 (Prasad 1993)。人體內鋅、銅元素與慢性病的發生有密切的相關 (Kok et al. 1988; Bankson, Kestin, and Rifai 1993)，Mezzetti 等人(1998)探討血清中 鋅、銅濃度與氧化壓力之間的相關，研究發現銅濃度在年紀較大的組別顯著高於 健康成人組，此外鋅濃度與脂質過氧化物質(TBARS)呈顯著的負相關 (Mezzetti et al. 1998)。 Prasad 等人(2004)利用臨床試驗探討鋅是否是ㄧ個有效的抗氧化因子，實驗 組(n=10)為連續八週口服鋅補充錠(鋅含量 45mg)，對照組(n=10)為安慰劑組，結 果顯示：對照組使用安慰劑前後，血漿中 MDA 與 HAE 的濃度並無統計上顯著 差異 (1.57± 0.33 vs. 1. 56±0. 39μmo l / L)；實驗組在連續補充鋅之後，血漿中 MDA 與 HAE 濃度顯著低於補充鋅之前 ( 0.93 ±0.15 vs. 1 . 5 2±0 . 6 4μmo l / L，p < 0.05) (Prasad et al. 2004)。Roussel 等人(2003)對 56 位第二型糖尿病人進行 6 個月的口服 鋅補充錠(鋅含量 30mg)的臨床試驗，研究結果指出，實驗組中的血漿鋅濃度有顯 著的增加，以及血漿中氧化壓力指標亦呈顯著性的降低，而在安慰劑對照組則無 此現象(Roussel et al. 2003)。 目前只有兩篇文獻探討體內鋅濃度與 HP 感染之間的相關。Zullo 等人(2000) 的研究中，探討肝硬化病人中體內鋅濃度、氨(ammonia)濃度與 HP 感染之相關 性，HP＋有 16 位(平均年齡 66±8 歲)，HP－有 14 位(平均年齡 63±9 歲)，血清鋅 濃度與 HP 感染沒有達到統計上顯著差異(p=0.5)，HP＋血清鋅濃度為 81.7±21.9 μg/dL，HP－血清鋅濃度則為 87.3±26.4μg/dL (Zullo et al. 2000)。 此外， Akcam 等人(2007)探討 50 位 5－18 歲的孩童，其體內 HP 感染與血 清中葉酸、Vit B12、鐵蛋白，及鋅濃度間的相關，研究結果指出 HP＋與 HP－血 18.
(26) 第二章 文獻探討. 清中鐵蛋白、葉酸濃度均無統計上顯著差異，而血清鋅濃度方面，HP＋較 HP－ 稍高，濃度分別為 95±48μg/dL、87±31μg/dL，而 Vit B12 則是 HP＋者顯著低於 HP－者，濃度分別為 303±135pg/mL、393±166 pg/mL (Akcam et al. 2007)。. 19.
(27) 第二章 文獻探討. 表 2-4- 1. HP 感染與脂質過氧化物質濃度之文獻探討. (作者,年代) (Guney, Oral, and Mungan 2007). 研究設計 Case-control. 研究對象. 研究結果. 25 位 Hyperemesis gravidarum HEG 孕婦 HP＋與未懷孕對照組 HP＋，其血清 MDA 濃度未達 (HEG)孕婦；20 位孕婦對照組； 統計上顯著性差異。 未懷孕之婦女未照組：15 位。 孕婦對照組 HP＋與未懷孕對照組 HP＋，其血清 MDA 濃度， 呈統計上顯著性差異，p <0.01。 HP＋與 HP－，其血清 MDA 濃度未達統計上顯著差異，p < 0.155。. (Aslan et al. 2007). Case-control. 72 位經內視鏡檢查結果為非潰 HP＋血 清 中 總 抗 氧 化 能 力(TAC)顯 著 小 於 HP－ ， 分 別 為 瘍性消化不良病人(40 位 HP＋， 1.38±0.42 及 1.74±0.31 mmol Trolox Eq./L，p <0.001。 32 位 HP－)。 HP ＋ 血 清 中 總 氧 化 狀 態 (TOS) 顯 著 高 於 HP － ， 分 別 為 12.01±0.71 及 11.60±0.57μmolH2O2Equi v. / L，p <0.05。 HP＋體內氧化壓力指標(OSI= TOS/ TAC)顯著高於 HP－，分別 為 9.41±2.56 a 及 6.91±1.22 arbitrary unit，p <0.05。. 20.
(28) 第二章 文獻探討. 表 2-4- 2. HP 感染與脂質過氧化物質濃度之文獻探討(續). (作者,年代) (Mashimo et al. 2006). 研究設計 Cross-sectional. 研究對象. 研究結果. 86 位參與者，其中男性 62 位， 以化學發光(chemiluminescence)強度來評估體內 ROS 的產生， 女性 24 位，平均年齡為 56.6 歲， 強度越強則表示體內 ROS 量越多，並測量其他相關指標，如嗜 52 位 HP＋， 34 位 HP－。 中性白血球的量、C-reactive protein。 HP＋體內 chemiluminescence 強度顯著高於 HP－，強度分別為 3.98±3.21 及 1.76±1.26 kcpm，p < 0.0005。 在每單位嗜中性白血球 chemiluminescence 的強度方面，HP＋ 體內強度顯著高於 HP－，強度分別為 1.31±1.01 及 0.68±0.48 cpm，p < 0.0005。. (Baz et al. 2004). (Khanzode et al. 2003). Case-control. Case-control. 29 位玫瑰斑病人，以及 20 位經 性別、年齡配對後的健康對照 組。. 病例組 MDA 濃度顯著高於對照組，濃度分別為 2.90 ±0.21 nmol/mL；1.73 ±0.12 nmol/mL，p < 0.001。 在對照組中，HP＋與 HP－，MDA 濃度呈統計上邊緣差異， p =0.054。. 40 位自願的健康參與者，與 67 血清中 MDA 濃度在胃炎及胃癌的病人均顯著高於對照组，濃 位病人，其中 37 位 HP＋胃炎病 度分別為 3.12±0.07、6.06±0.27 以及 1.74±0.10 umol/lit。 人，以及 30 位胃癌病人。. 21.
(29) 第二章 文獻探討. 表 2-4- 3. HP 感染與抗氧化能力之文獻探討. (作者,年代) (Dovhanj et al. 2007). 研究設計 Case-control. 研究對象. 研究結果. 31 位慢性胃炎病人，25 位消化道 慢性胃癌與消化道潰瘍病人中，HP＋的 SOD 活性顯著低於 潰瘍，21 位健康者。 HP－以及健康對照組，p 值分別為 p=0.003，及 p <0.001。 HP－者的 GPx 活性顯著低於健康對照組，p = 0.001。 健康對照組的 GR 活性顯著低於 HP＋與 HP－，p 值分別為 0.009 及 0.008。. (Guney et al. 2007). Case-control. (Yatsuya et al. 2005). Case-control. 25 位 Hyperemesis gravidarum 在 HEG 孕婦中，HP＋血清 SOD、GSH-Px、CAT 活性，與未 (HEG)孕婦；20 位孕婦對照組； 懷孕之對照組未達統計上顯著性差異。 未懷孕之婦女未照組：15 位。 在孕婦對照組中，HP＋其血清 SOD、GSH-Px、CAT 活性，與 未懷孕之對照組呈統計上顯著性差異。 210 位胃癌病例組，以及 410 位 在對照組中，男性中 HP＋與 HP－的血清 SOD 活性沒有統計 配對之對照組。 上顯著差異，活性分別為 2.83±1.57、2.79±1.28 U/mL，p =0.4。 女性中 HP＋與 HP－的血清 SOD 活性亦無統計上顯著差異， 活性分別為 3.08±1.62、2.92±1.11 U/mL，p =0.37。 在病例組中，男性 HP＋與 HP－的血清 SOD 活性沒有統計上 顯著差異，活性分別為 2.96±1.54、2.82±1.70 U/mL，p =0.72。 女性 HP＋與 HP－的血清 SOD 活性亦無統計上顯著差異，活 性分別為為 3.15±2.02、3.09±1.59 U/mL，p =0.88。. 22.
(30) 第三章 材料與方法. 第三章 材料與方法 第一節 研究流程 詢問病人是否願意參與研究，同意 者則接續完成問卷訪視。. 採集病人血液檢體，並由醫師採集 病人胃黏膜檢體。. 胃黏膜檢體進行 HP 感染檢測，依 CLO test 檢測結果分組。. HP＋. 血漿中脂質過氧化 物質(MDA)測定。. HP－. 血球中抗氧化物質 (GSH、SOD)測定。. 評估 HP 感染對體內氧化 壓力之影響性。. 23. 血清中微量元素 (Zn、Cu)測定。.
(31) 第三章 材料與方法. 第二節 研究對象與資料收集 本研究以橫斷性研究法進行之，收集 2007 年 8 月至 2008 年 5 月期間於花蓮 門諾醫院胃腸科門診中接受胃腸道內視鏡檢查之病人，共 116 位參與者進入本研 究。收集病人之問卷、血液生化値檢驗資料、HP 感染檢驗結果，以及血液檢體 進行 MDA、GSH、、Zn、Cu 濃度、及 SOD 活性分析。排除曾接受 HP 治療者、 曾接受胃切除術者，及癌症病人。. 一、問卷資料 本研究使用結構式問卷，採用專家效度，係由單一訪員(護士)進行面訪，並 協助病人完成問卷，問卷內容包含： (一) 生活習慣 (習慣定義為每週三天，持續六個月以上) ： 包含抽菸、喝酒、吃檳榔等習慣。 (二) 飲食習慣： 包含葷食或素食習慣、飲食是否偏鹹、每天食用蔬果情形、每週食用油炸、 醃製、燻烤食品等情形。 (三) 使用保健食品習慣 (習慣定義為每週規律地使用一次以上)： 收集近半年每週使用保健食品之情況。 (四) 工作形式及睡眠情況 包含工作班別、工作時數、自覺睡眠品質狀況、每天平均睡眠時數等。 (五) 個人健康情形 包含自覺健康狀況、慢性病疾病史、慢性病用藥史。 (六) 家族疾病史 包含高血壓、高血脂、糖尿病、心臟病、消化道相關疾病等。 (七) 基本資料 包含年齡、血型、身高、體重、教育程度、婚姻、宗教信仰、職業等。 24.
(32) 第三章 材料與方法. 二、HP 感染之鑑定 本研究係以快速尿酶檢查(rapid urease test)檢驗 HP 的感染與否，使用的檢片 為 Pronto Dry test (Medical InstrumentsCorp, Frence)，其敏感度與精確度分別為 100%、96.8%，該原理如表 2-1-1 所示，此項檢驗作業由門諾醫院病理診斷科協 助檢驗。. 三、血液樣本收集 血液樣本收集是以含抗凝血劑 EDTA 的真空採血管(紫頭)，以及真空採血管 (紅頭)，採集研究對象之靜脈血液。採集病人血液樣本後，由花蓮門諾醫院檢驗 科人員協助將血液分成血漿、血球及血清，寄至台北醫學大學待分析，血漿、血 球及血清均存放於－70℃冰箱備用。. 25.
(33) 第三章 材料與方法. 第三節 實驗方法 一、脂質過氧化物質測定：丙二醛(Malondialdehyde; MDA) (一) 實驗原理 當生物體內的活性氧物質(ROS)攻擊細胞膜上的多元不飽和脂肪酸，經氧化 反應後形成醛類，而丙二醛(MDA)為其主要的脂質過氧化產物之一，MDA 含量 愈高，表示脂質過氧化程度愈高。 LPO-586 主要是利用 Reagent 1 和 MDA 在 45℃時會產生呈色反應，一分子 的 MDA 和兩分子的 R1 產生一個穩定的色基，在 586nm 有最大吸光値。反應式 如下：. (二) 儀器設備 1. 紫外線/可見光譜儀(Hitachi U-1800，益弘)。 2. 高速冷凍離心機。 (三) 樣本前處理 1. 配置 5％ BHT：0.25g BHT in 5mL methanol (100％)。 2. 將 5％BHT 與 EDTA plasma 以 1：100 的比例混合均勻。. 26.
(34) 第三章 材料與方法. (四) Kit 與試劑 1. Oxis Bioxytech LPO-586 (Oxis International, Inc, USA)： R1：N-methy-2-phenylindole in acetonitrile。 R2：Methanesulfonic acid。 MDA Standard：1,1,3,3-Teramethoxypropane in Tris-HCl。 Diluent：Ferric Iron in Methanol。 2. 37％ HCl (Merk, Germany)。 3. BHT：Butylhydroxytoluene (Sigma, USA)。 4. 二次去離子水：電阻係數大於或等於 18mΩ之純水。 (五) 分析前處理 1. Diluted R1：取 R1 與 Diluent 以 3 比 1 之比例稀釋，保存於 4℃。 2. S2：取 20μlMDASt a nd a r d加二次水定量至 10mL。 3. 配製 MDA 標準品(Standard)： Std conc. (μM). 0. 0.5. 1. 2. 3. 4. S2 (μl). 0. 25. 50. 100. 150. 200. 200. 175. 150. 100. 50. 0. 二次水 (μl). (六) 測定流程 1. 取 Sample (EDTA plasma 加 5％ BHT)及 Standard 各 2 00 μl 。 2. 分別加入 Di l ut e dR165 0 μl於 Sample 及 Standard 中，混勻。 3. 分別加入 37％ HCl 1 50 μl於 Sample 及 Standard 中，混勻。 4. 水浴 45℃，60 分鐘。 5. 離心 1,5000 x g，10 分鐘。 6. 取上清液，在波長 586nm 下測吸光值，並先以 Blank(即 STD=0)將 吸光值歸零。. 27.
(35) 第三章 材料與方法. (七) 濃度計算. 【MDA】 =. A586 b df a. 單位：μM. A586：樣品在 586nm 的淨吸光値。 a：標準曲線的斜率。 b：標準曲線的截距。 df：稀釋倍數。. MDA 0.5. y = 0.1172x - 0.0021. Abs (586 nm). 0.4. R2 = 0.9998. 0.3 0.2 0.1 0 0. 1. 2. 3. 4. 5. MDA std conc.(μmol/L). 圖 3-4- 1. MDA 標準品在波長 586 nm 下之檢量線圖. 28.
(36) 第三章 材料與方法. 二、麩胱肽(Glutathione; GSH)測定 (一) 實驗原理 穀胱甘肽(GSH)是提供一個電子給 GPx (Glutathione Peroxidase)，將體內 H2O2 代謝為 H2O。 GSH-400 是利用 Reagent 1 經過專一取代反應產生硫醚(thioether)。反應式如 下：. 接著 GSH 會和硫醚結合，經過 Reagent 2 催化後，形成呈色的 Thione，在 400nm 有最大吸光値。反應式如下：. (二) 儀器設備 1. 紫外線/可見光譜儀(Hitachi U-1800，益弘)。 2. 高速冷凍離心機。 (三) 樣本前處理 1. 以 0.9％生理食鹽水洗滌紅血球三次，存放於-80℃冰箱，直至分析。 2. 配置 5% mmole/L reduced glutathione(GSH)。. 29.
(37) 第三章 材料與方法. (四) Kit 與試劑 1. Oxis Bioxytech GSH-400 (Oxis International, Inc, USA)： R1：Solution of chromogenic reagent in HCl。 R2：30％ NaOH。 Buffer：Potassium phosphate, containing diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA) and lubrol。 2. GSH：Reduced glutathione (Merk, Germany)。 3. MPA：Metaphosphoric acid (Showa, Tokyo)。 4. 二次去離子水：電阻係數大於或等於 18mΩ之純水。 (五) 分析前處理 1. 將紅血球(紫頭)與冰冷的 5％ MPA 以體積 1：4 的比例混合後，以 3000 rpm，4℃離心 10 分鐘。 2. 取其上清液置於 4℃冰箱備用(一小時內分析完)。 3. 配製 GSH 標準品(Standard)： STD Conc.(μM) Buffer (μl) 0.5M GSH(μl). 0. 20. 40. 60. 80. 100. 900. 860. 820. 780. 740. 700. 0. 40. 80. 120. 160. 200. 4. 至少做三個 Blank (即 STD=0)，吸光值平均之後為 A0。 (六) 測定流程 1. 取 Sample (上清液)200 μl加入 Bu f f e r7 0 0 μl ，混勻。 2. 分別加入 R15 0μl於 Sample 及 Standard 中，混勻。 3. 分別加入 R25 0μl於 Sample 及 Standard 中，混勻。 4. 於室溫下(25±3℃)下避光 10 分鐘。 5. 在波長 400nm 下測吸光值，並先以 Buffer 將吸光值歸零。. 30.
(38) 第三章 材料與方法. (七) 濃度計算. 【GSH】=. A400 A0 D . 單位：μM. A400：樣品在 400nm 的吸光値。 A0：以 Buffer 為空白的吸光。 ε：標準曲線的斜率。 I：比色管的 optical path (cm)。 D：稀釋倍數。. Abs (400 nm). GSH 1.6. y = 0.0135x + 0.071. 1.2. R2 = 0.9998. 0.8 0.4 0 0. 20. 40. 60. 80. 100. 120. GSH std conc. (μmol/L). 圖 3-4- 2. GSH 標準品在波長 400 nm 下之檢量線圖. 31.
(39) 第三章 材料與方法. 三、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase; SOD)測定 (一) 實驗原理 SOD 可將體內超氧離子(O2. ˙－. )代謝為 H2O2 ，而體內 SOD 有三種形式：. Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD。 SOD-525 是利用 Reagent 2 去除樣本中硫醇類(mercaptans, RSH)的干擾，反應 式如下：. 接著加入 Reagent 1，在鹼性環境下，SOD 活性可在 525nm 有最大吸光値。 反應式如下：. (二) 儀器設備 1. 分光光度計。 2. 高速冷凍離心機。 (三) 樣本前處理 以 0.9％生理食鹽水洗滌紅血球三次，存放於-80℃冰箱，直至分析。. 32.
(40) 第三章 材料與方法. (四). Kit 與試劑 1. Oxis Bioxytech SOD-525 (Oxis International, Inc, USA)： R1：5,6,6a, 11b-tetrahydro-3,9,10-trihydroxybenzo fluorine, in HCl containing diethylenetriaminepentaacetic acid (DTPA) and ethanol。 R2：1-methyl-2-vinylpyridinium trifuloromethanesulfonate, in HCl。 Buffer：2-amino-2-methyl-1,3-propanediol, containing boric acid and DTPA, pH=8.8(at 37℃)。 2. 二次去離子水：電阻係數大於或等於 18mΩ之純水。. (五) 分析前處理 1. 取適量的 Buffer，置於一開放式容器中，使之在 37℃與空氣接觸， 並利用 pipet 快速吸取 Buffer 數次。 2. 取適量血球樣本加入其 4 倍體積量之冰水中，混合均勻。 (六) 測定流程 1. 取 Buffer 900μl置待測於之 Blanks 及 Samples 離心管中。 2. 每次實驗至少配置 4 個 Blank。 3. 分別加入 40μl的 Blanks 及 Samples。 4. 分別加入 R2 30μl於 Blanks 及 Samples 中，混勻。 5. 水浴 37℃，1 分鐘。 6. 加入 R1 30μl分別於 Blanks 及 Samples 中，混勻。 7. 在波長 525nm 下，先以二次去離子水將吸光值歸零。 8. 於第 60 秒及第 120 秒測其吸光値。. 33.
(41) 第三章 材料與方法. (七) 濃度計算 1. 計算出 Blanks 與 Samples 的ΔA/min。Blank 標示為 Vc，Sample 標示為 Vs。 2. 將 4 次 Blank 的 Vc 取其平均值。 3. 將 Samples Vs 値除以 Vc。Vs/Vc 値必須大於 1，且 Vs/Vc 值範圍 在 3-8 為最佳，若值大於 8 則樣本需再稀釋後分析。 4. 由 Vs/Vc 比值間接求出 SOD 活性，如表 3-4-1(單位為 units/mL)。 5. 表中 SOD 活性，再乘以稀釋倍數及單位換算，則為樣本 SOD 活性。 例如：Vs / Vc= 2.90，則查表後 SOD 活性為 2.05 units/mL； 乘以稀釋倍數：2.05×5×25=256.25 U/mL 單位換算：256.25(U/mL) / 0.15(g/mL)=1708.33 (U/g Hb). 表 3-4- 1. SOD 活性計算：Vs/Vc Ratio. 34.
(42) 第三章 材料與方法. 四、血液中鋅、銅濃度測定 (一) 儀器設備 火焰式原子吸收光譜儀(Flame Atomic Absorption Spectrometry; FAAS)，Model Z-5000 series Polarized Zeeman, Hitachi (二) 試劑與試藥 1. 65％ HNO3，分析試藥級 (Merck, Germany)。 2. 單一金屬標準溶液(鋅、銅)：分析試藥級，1000ppm (Merk, Germany)。 3. 二次去離子水：電阻係數大於或等於 18mΩ之純水。 4. 標準參考品：Standard reference material (SRM)，LOT JL4409 (SERO, Sweden)。 (三) 分析前處理：(血液之消化步驟) 1. 將血清 0.5mL 置入 15mL 塑膠離心管中。 2. 加入 65％濃硝酸 2mL 於塑膠離心管中，輕搖瓶身使之均勻，並置於抽氣 櫃(Hood)中 30 分鐘後再將瓶蓋鎖緊。 3. 將裝有樣本之塑膠離心管置入已預熱完成(65℃)之水浴機中，再將水浴機 溫度調至 95℃，使樣本慢慢升溫，水浴 2 小時。 4. 取出塑膠離心管待冷卻，以加酸的二次水(2％ HNO3)定量至 5mL。 5. 存放於 4℃冰箱直至分析。 (四) 標準溶液之配製 由 1000 ppm 之標準溶液稀釋至所需之濃度，各元素之檢量線分別如下： 鋅： 0 / 0.05 / 0.10 / 0.15 / 0.20 / 0.25 ppm。 銅： 0 / 0.05 / 0.10 / 0.15 / 0.20 / 0.25 ppm。 (五) 金屬測定條件 以火焰式原子吸收光譜儀測量血清中鋅、銅濃度，本實驗所使用之分析條件 如表 3-4-2 所示。 35.
(43) 第三章 材料與方法. (六) 濃度計算. Abs b df a. 【Conc.】=. 單位：ppm. Abs：樣品的淨吸光値。 a：標準曲線的斜率。 b：標準曲線的截距。 df：稀釋倍數。. Abs. Zn 0.08. y = 0.2834x + 0.0007. 0.06. R2 = 0.9996. 0.04 0.02 0 0.00. 0.05. 0.10. 0.15. 0.20. 0.25. Zn std conc. (ppm). 圖 3-4- 3. 元素鋅之檢量線. Abs. Cu 0.008. y = 0.0309x - 8E-05. 0.006. R = 0.9996. 2. 0.004 0.002 0 0.00. 0.05. 0.10. 0.15. 0.20. 0.25. Cu std conc. (ppm). 圖 3-4- 4. 元素銅之檢量線. 36. 0.30. 0.30.
(44) 第三章 材料與方法. 表 3-4- 2. 金屬元素分析-FLAAS 儀器參數 Element. Signal Mode Measurement Mode Slicing Height (%) Wavelength (nm) Determine the W.L. Slit Width (nm) Time Constant (s) Lamp Current (mA). 表 3-4- 3. Zn. Cu. BKG Corr. Integral 10 213.9 Auto 1.3 1.0 6.5. BKG Corr. Integral 10 324.8 Auto 1.3 1.0 9.0. Zn. Cu. Standard Air-C2H2 2.0 160 15.0 7.5 5.0 5.0. Standard Air-C2H2 2.2 160 15.0 7.5 5.0 5.0. 金屬元素分析參數 Element. Atomizer Flame Type Fuel Flow (L/min) Oxidank (kpa) Oxidant (L/min) Burner Height (mm) Delay Time Measurement time. 表 3-4- 4. 血清標準品參考值(SRM)之分析結果. 金屬種類. 單位. 標準品參考值. 測定值. 準確度 (%). CV (%). 鋅 (Zn). mg/L. 0.845 (0.791-0.899). 0.824± 0.034. 1.54-6.63. 4.13. 銅 (Cu). mg/L. 1.060 (0.997-1.123). 0.989± 0.003. 6.42-6.89. 0.30. 37.
(45) 第三章 材料與方法. 五、測量分析之品質管制 (1) 空白值的配置： 每一批樣品進行前處理時，同時以二次水置備空白樣品，以檢測樣品是 否遭受污染。 (2) 重複分析： 每支樣品均做二重複，且變異係數(RSD%)須小於 15%。 (3) 標準品的檢測： 以 NIST (National Institute of Standard technology)之標準品參考 樣品(SRM)進行測試，以確定其準確度。 (4) 儀器偵測極限： 使用二次水上機連續測六次，求其標準差，取三倍標準差值即為儀器偵 測極限。 (5) 檢量線配置： 每次進行分析前均重新製作檢量線，相關係數須大於 0.995，才視為有效 檢量線。 (6) 回收率： 添加已知濃度在樣本中，並於相同樣條件下經過消化，上機測定，計算 其回收率，回收率須在 80%－120%間。. 38.
(46) 第三章 材料與方法. 第四節 資料處理與統計分析 本研究之問卷及醫院生化値檢驗、幽門螺旋桿菌檢驗結果，以及實驗數據， 均採用 Excel 2003 建檔，利用 SAS 9.1 進行統計分析。 另外，在不良飲食習慣方面，為飲食是否偏鹹、每天食用是否蔬果少於三小 碟、每週是否至少食用一次油炸、醃漬或燻烤食品之總計分，每題回答選項為「是」 則以 1 分計算，若回答選項為「否」，則為 0 分，不良飲食習慣為此五項計分之 加總。 利用描述性統計描述個案之人口學變項、生活及飲食習慣，以及體內 MDA、 GSH、Zn、Cu 濃度、SOD 活性之分布，其中連續性變項以平均值±標準誤表示， 類別變項以人數（百分比）表示。 在 HP 感染與各變項之相關分析方面，類別變項卡方檢定(chi-sqare test)及薛 費氏精確檢定(fisher’ s exact test)進行分析，連續變項則以 t 檢定(student’ s t test)進 行之。 體內 MDA、GSH、Zn、Cu 濃度、SOD 活性與各類別變項之分布情形，則以 t 檢定、變異數分析(ANOVA test)、及 K-W 檢定(kruskal - wallis 最後利用迴歸模式分析 HP 感染與體內氧化壓力之關係。. 39. test)進行分析，.
(47) 第四章 研究結果. 第四章 研究結果 第一節. 基本描述性統計. 一、基本人口學 本研究採橫斷性研究，共收進 116 位個案，依 HP 檢驗結果發現 HP＋有 45 位(38.8%)，HP－有 71 位(61.2%)；總個案之平均年齡為 46.8±1.4 歲；平均 BMI 值為 23.4±0.4 kg/m2，大部份個案的 BMI 值均在正常健康範圍(18.5≦BMI＜24)， 佔 50.5%；性別方面，男性 40 位(34.5%)，女性 76 位(65.5%)；在教育程度方面， 以小學以下人數最多(30.2%)，而大學以上的人數次之(26.7%)；種族方面，非原 住民有 91 位(78.5%)，而原住民有有 25 位(21.6%)，如表 4-1-1 所示。. 二、生活、飲食習慣 如表 4-1-2 所示，總個案中有抽菸習慣者為 31 位(27.0%)、喝酒習慣者為 24 位(21.1%)、有嚼食檳榔習慣者為 17 位(14.8%)；在使用保健食品方面，有 42 位 每週均有使用一次以上保健食品；而有 67 位個案(59.3%)則是有使用慢病藥物。 在飲食方面，36 位個案(33.3%)自覺飲食較其他人偏鹹；而每日蔬果少於三 小碟者有 66 位(57.9%)；另外，在每週食用油炸、醃漬或燻烤食品方面，有 41 位 (36.0%)每週至少食用一次以上油炸食品、38 位(32.8%)每週至少食用一次以上醃 漬食品、在燻烤食品則是 20 位(17.2%)每週至少食用一次以上。若依不良飲食習 慣加總計分(包含飲食偏鹹、每天食用蔬果、每週食用油炸、醃漬或燻烤食品之計 分，回答「是」者，得一分)，不良飲食習慣計分為 0 分者有 20 位(19.0%)，而大 於 3 分以上者有 26 位(24.8%)。. 三、血液測定值 如表 4-1-3 所示，總個案體內脂質過氧化物質(MDA)平均濃度為 6.40±0.42 μmol/L；而抗氧化能力方面，GSH 平均濃度為 1.65±0.03 mmol/L，SOD 平均活性 40.
(48) 第四章 研究結果. 為 1781.28±52.69 U/g Hb，血清鋅、銅濃度則分別為 0.83±0.01 mg/L 以及 0.92± 0.01mg/L。 在體內臨床營養狀況指標方面：白蛋白(Albumin; Alb)平均濃度為 4.11±0.03 g/dL；白血球(White blood cell; WBC) 平均濃度為 6.55±0.18×103/μL；紅血球(Red blood cell; RBC) 平均濃度為 4.68±0.05×106/μL；血色素(Hemoglobin; Hb) 平均濃 度為 13.43±0.15 g/dL；而在血球容積方面(Hematocrit; Hct)，平均濃度為 39.43± 0.37%。. 41.
(49) 第四章 研究結果. 表 4-1- 1 總個案之基本人口學變項描述 變項 年齡 (歲) ＜40. 總個案. 變項. n=116 (100%) 46.8±1.4 aa. 總個案 n=116 (100%). BMI (kg/m2). 23.4±0.4. ＜18.5. 10（9.2）. bb. 41（35.3）. 40－54. 39（33.6）. 18.5－23.9. 55（50.5）. 55＋. 36（31.0）. 24＋. 44（40.4）. HP 感染. 種族. HP－. 71（61.2）. 非原住民. 91（78.5）. HP＋. 45（38.8）. 原住民. 25（21.6）. 性別. 婚姻狀況. 女. 76（65.5）. 未婚. 25（21.6）. 男. 40（34.5）. 已婚 a. 91（78.5）. 教育程度. 血型. 小學以下. 35（30.2）. O型. 49（45.4）. 初、高中. 50（43.1）. A型. 26（24.1）. 大學以上. 31（26.7）. B型. 27（25.0）. AB 型. 6（5.6）. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：已婚包含已婚、離婚、喪偶。aa：連續性變項 以平均值±標準誤表示。bb：類別變項以人數（百分比）表示。. 42.
(50) 第四章 研究結果. 表 4-1- 2 總個案之生活及飲食習慣描述 變項. 總個案 n=116 (100%). 抽菸習慣 否 有. 變項. 總個案 n=116 (100%). 飲食偏鹹 bb. 84（73.0）. 31（27.0）. 喝酒習慣. 否. 72（66.7）. 是. 36（33.3）. 每天食用少於三小碟蔬果類. 否. 90（79.0）. 否. 48（42.1）. 有. 24（21.1）. 是. 66（57.9）. 吃檳榔習慣. 每週至少食用一次油炸食品. 否. 98（85.2）. 否. 73（64.0）. 有. 17（14.8）. 是. 41（36.0）. 使用保健食品. 每週至少食用一次醃漬食品. 否. 74（63.8）. 否. 78（67.2）. 有. 42（36.2）. 是. 38（32.8）. 使用慢病藥物. 每週至少食用一次燻烤食品. 否. 67（59.3）. 否. 96（82.8）. 有. 46（40.7）. 是. 20（17.2）. 不良飲食習慣 a 0. 20（19.0）. 1. 29（27.6）. 2. 30（28.6）. ≧ 3. 26（24.8）. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：不良飲食習慣為飲食偏鹹、每天食用蔬果少於 三小碟、每週至少食用一次油炸、醃漬或燻烤食品之計分。bb：類別變項以人數（百 分比）表示。. 43.
(51) 第四章 研究結果. 表 4-1- 3 總個案之血液測定值描述 (n=114) 變項. 平均值±標準誤. 最小值. 中位値. 最大值. MDA (μmol/L). 6.40±0.42aa. 1.04. 4.73. 19.78. GSH (mmol/L). 1.65±0.03. 0.81. 1.60. 2.50. SOD (U/g Hb). 1781.28±52.69. 838.61. 1697.92. 3736.84. SZn (mg/L). 0.83±0.01. 0.47. 0.82. 1.30. SCu (mg/L). 0.92±0.01. 0.57. 0.92. 1.34. Alb (g/dL). 4.11±0.03. 2.9. 4.1. 4.8. WBC (103/μL). 6.55±0.18. 3.10. 6.22. 15.19. RBC (106/μL). 4.68±0.05. 3.50. 4.61. 5.82. Hb (g/dL). 13.43±0.15. 9.1. 13.4. 16.9. Hct (%). 39.43±0.37. 28.00. 39.25. 48.80. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。aa：連續性變項以平均值±標準誤表示。. 44.
(52) 第四章 研究結果. 第二節. HP 盛行率及危險因子之分析. 如表 4-2-1 所示，本研究共有 116 位參與者進入研究，總個案 HP 盛行率為 38.8%。在性別方面，女性盛行率為 38.2%，男性為 40%；教育程度初、高中者， HP 盛行率為 42%，(OR=1.23，95% CI=0.51-2.97)；種族方面，原住民 HP 盛行率 為 60%，非原住民為 33.0%，原住民族群的盛行率顯著性高於非原住民族群 (OR=3.05，95% CI=1.23-7.59)；婚姻狀況為已婚者，其盛行率較高(39.6%)。. 二、生活習慣 在總個案中的抽菸、喝酒，以及嚼檳榔習慣方面，均以沒有抽菸、沒有飲酒、 沒有嚼檳榔習慣者居多，另外，在有抽菸者 HP 盛行率為 45.2%、有喝酒者為 54.2%、嚼檳榔習慣者為 47.1%，盛行率皆比沒有這些習慣者高，但未達統計上 顯著差異。如表 4-2-2 所示。. 三、飲食習慣 本研究之參與者均為葷食者。自覺飲食較其他人偏鹹者的 HP 盛行率為 44.4%，盛行率較自覺飲食沒有比其他人偏鹹者高（OR=1.42，95% CI=0.63-3.20） ； 每天食用蔬果少於三小碟者、每週至少食用一次油炸、醃漬或燻烤食品者，其 HP 盛行率皆較沒有這些飲食習慣者高，盛行率分別為 39.4%、46.3%、39.5%、 50.0%；此外，以不良飲食習慣分組來看，若不良飲食習慣計分為 3 分以上者， 其盛行率為 53.8%，較計分為 0 分者高。如表 4-2-3 所示。. 45.
(53) 第四章 研究結果. 表 4-2- 1 基本人口學變項與 HP 盛行率之相關分析 總個案. HP＋. HP－. n=116. n=45. n=71. 46.8±1.4aa. 47.3±2.3. 46.5±1.8. 1.01（0.98－1.03） 0.768. 23.4±0.4. 23.7±0.5. 23.2±0.5. 1.04（0.94－1.15） 0.476. 女. 76（100.0）bb. 29（38.2）. 47（61.8）. 男. 40（100.0）. 16（40.0）. 24（60.0）. 小學以下. 35（100.0）. 13（37.1）. 22（62.9）. 初、高中. 50（100.0）. 21（42.0）. 29（58.0）. 1.23（0.51－2.97） 0.653. 大學以上. 31（100.0）. 11（35.5）. 20（64.5）. 0.93（0.34－2.55） 0.889. 非原住民. 91（100.0）. 30（33.0）. 61（67.0）. 原住民. 25（100.0）. 15（60.0）. 10（40.0）. 未婚. 25（100.0）. 9（36.0）. 16（64.0）. 已婚 a. 91（100.0）. 36（39.6）. 55（60.4）. O型. 49（100.0）. 17（34.7）. 32（65.3）. A型. 26（100.0）. 11（42.3）. 15（57.7）. 1.38（0.52－3.66） 0.517. B型. 27（100.0）. 11（40.7）. 16（59.3）. 1.29（0.49－3.40） 0.601. AB 型. 6（100.0）. 2（33.3）. 4（66.7）. 0.94（0.16－5.67） 0.947. 變項 年齡 (歲) BMI (kg/m2). OR (95%CI). p值. 性別 1.00 1.08（0.49－2.37） 0.847. 教育程度 1.00. 種族 1.00 3.05（1.23－7.59） 0.017*. 婚姻狀況 1.00 1.16（0.46－2.92） 0.746. 血型 1.00. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：已婚包含已婚、離婚、喪偶。aa：連續性變項 以平均值±標準誤表示。bb：類別變項以人數（百分比）表示。*：p＜0.05。. 46.
(54) 第四章 研究結果. 表 4-2- 2 生活習慣與 HP 盛行率之相關分析 總個案. HP＋. HP－. n=116. n=45. n=71. 否. 84（100.0）bb. 31（36.9）. 53（63.1）. 有. 31（100.0）. 14（45.2）. 17（54.8）. 否. 90（100.0）. 32（35.6）. 58（64.4）. 有. 24（100.0）. 13（54.2）. 11（45.8）. 否. 98（100.0）. 37（37.8）. 61（62.2）. 有. 17（100.0）. 8（47.1）. 9（52.9）. 否. 74（100.0）. 30（40.5）. 44（59.5）. 有. 42（100.0）. 15（35.7）. 27（64.3）. 否. 70（100.0）. 30（42.9）. 40（57.1）. 有. 46（100.0）. 15（32.6）. 31（67.4）. 變項. OR（95%CI）. p值. 抽菸習慣 1.00 1.41（0.61－3.24） 0.422. 喝酒習慣 1.00 2.14（0.86－5.33） 0.102. 吃檳榔習慣 1.00 1.47（0.52－4.13） 0.470. 使用保健食品 1.00 0.82（0.37－1.78） 0.608. 使用慢病藥物 1.00 0.65（0.30－1.40） 0.269. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。bb：類別變項以人數（百分比）表示。. 47.
(55) 第四章 研究結果. 表 4-2- 3 飲食習慣與 HP 盛行率之相關分析 總個案. HP＋. HP－. n=116. n=45. n=71. 72（100.0）bb. 26（36.1）. 46（63.9）. 是 每天食用少於三小碟 蔬果類 否. 36（100.0）. 16（44.4）. 20（55.6）. 48（100.0）. 18（37.5）. 30（62.5）. 是 每週至少食用一次 油炸食品 否. 66（100.0）. 26（39.4）. 40（60.6）. 73（100.0）. 26（35.6）. 47（64.4）. 是 每週至少食用一次 醃漬食品 否. 41（100.0）. 19（46.3）. 22（53.7）. 78（100.0）. 30（38.5）. 48（61.5）. 是 每週至少食用一次 燻烤食品 否. 38（100.0）. 15（39.5）. 23（60.5）. 96（100.0）. 35（36.5）. 61（63.5）. 20（100.0）. 10（50.0）. 10（50.0）. 0. 20（100.0）. 9（45.0）. 11（55.0）. 1. 29（100.0）. 8（27.6）. 21（72.4）. 0.47（0.14－1.55） 0.212. 2. 30（100.0）. 10（33.3）. 20（66.7）. 0.61（0.19－1.96） 0.407. ≧ 3. 26（100.0）. 14（53.8）. 12（46.2）. 1.43（0.44－4.60） 0.553. 變項. OR（95%CI）. p值. 飲食偏鹹 否. 是. 1.00 1.42（0.63－3.20） 0.403. 1.00 1.08（0.50－2.33） 0.838. 1.00 1.56（0.72－3.40） 0.262. 1.00 1.04（0.47－2.31） 0.916. 1.00 1.74（0.66－4.60） 0.262. 不良飲食習慣 a 1.00. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：不良飲食習慣為飲食偏鹹、每天食用蔬果少於 三小碟、每週至少食用一次油炸、醃漬或燻烤食品之計分。bb：類別變項以人數（百 分比）表示。. 48.
(56) 第四章 研究結果. 四、原住民與非原住民之 HP 感染危險因子分析 在表 4-2-1 觀察到種族是 HP 感染的一個重要危險因子，因此本研究更進一 步分析原住民與非原住民之間在 HP 感染的危險因子分布上的差異。 由表 4-2-4 可觀察到：在年齡方面，原住民的年齡顯著高於非原住民(分別為 53.3±2.8 歲 vs. 45.0±1.6 歲，p=0.016)；原住民的 BMI 值也顯著高於非原住民(分 別為 24.9±1.0 vs. 23.0±0.4，p=0.040)；在教育程度方面，大部份原住民族群的教 育程度在小學以下(56.0%)，而非原住民族群則是以初、高中的人為最多(46.2%)， 原住民與非原住民之間的教育程度是有達統計上顯著差異(p=0.005)。 另外，在生活習關方面，原住民與非原住民的喝酒習慣是有達統計上顯著差 異(p=0.009)，40%的原住民有喝酒習慣，而非原住民則有 15.7%；原住民有嚼檳 榔習慣者亦較非原住民多(分別為 24.0% vs. 12.0%)，但未達統計上顯著意義 (p=0.199)，而種族之間在飲食習慣方面並無統計上顯著性不同，如表 4-2-5 所示。. 49.
(57) 第四章 研究結果. 表 4-2- 4 原住民與非原住民基本人口學與生活習慣之相關分析 變項 年齡 (歲) BMI (kg/m2). 總個案. 原住民. 非原住民. n=116. n=25. n=91. 46.8±1.4aa. 53.3±2.8. 45.0±1.6. 0.016*. 23.4±0.4. 24.9±1.0. 23.0±0.4. 0.040* 0.441. 性別 女 男. p值. bb. 76（65.5）. 40（34.5）. 18（72.0）. 58（63.7）. 7（28.0）. 33（36.3） 0.005*. 教育程度 小學以下. 35（30.2）. 14（56.0）. 21（23.1）. 初、高中. 50（43.1）. 8（32.0）. 42（46.2）. 大學以上. 31（26.7）. 3（12.0）. 28（30.8） 0.737. 婚姻狀況 未婚. 25（21.6）. 6（24.0）. 19（20.9）. 已婚 a. 91（78.5）. 19（76.0）. 72（79.1） 0.894. 抽菸習慣 1. 否. 84（73.0）. 18（72.0）. 66（73.3）. 有. 31（27.0）. 7（28.0）. 24（26.7） 0.009*. 喝酒習慣 否. 90（79.0）. 15（60.0）. 75（84.3）. 有. 24（21.1）. 10（40.0）. 14（15.7） 0.199b. 吃檳榔習慣 否. 98（85.2）. 19（76.0）. 79（87.8）. 有. 17（14.8）. 6（24.0）. 11（12.2） 0.152. 使用保健食品 否. 74（63.8）. 19（76.0）. 55（60.4）. 有. 42（36.2）. 6（24.0）. 36（39.6） 0.154. 使用慢病藥物 否. 70（60.3）. 12（48.0）. 58（63.7）. 有. 46（39.7）. 13（52.0）. 33（36.3）. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：已婚包含已婚、離婚、喪偶。aa：連續性變項 以平均值±標準誤表示。bb：類別變項以人數（百分比）表示。b：Fisher’ s exact test。*： p＜0.05。. 50.
(58) 第四章 研究結果. 表 4-2- 5 原住民與非原住民飲食習慣之相關分析 變項. 總個案. 原住民. 非原住民. n=116. n=25. n=91 1.000. 飲食偏鹹 否 是. p值. bb. 72（66.7）. 14（66.7）. 58（66.7）. 7（33.3）. 29（33.3）. 36（33.3）. 0.327. 每天食用少於三小碟蔬果類 否. 48（42.1）. 8（33.3）. 40（44.4）. 是. 66（57.9）. 16（66.7）. 50（55.6） 0.640. 每週至少食用一次油炸食品 否. 73（64.0）. 17（68.0）. 56（32.0）. 是. 41（36.0）. 8（62.9）. 33（37.1） 0.292. 每週至少食用一次醃漬食品 否. 78（67.2）. 19（76.0）. 59（64.8）. 是. 38（32.8）. 6（24.0）. 32（35.2） 0.135a. 每週至少食用一次燻烤食品 否. 96（82.8）. 18（72.0）. 78（85.7）. 是. 20（17.2）. 7（28.0）. 13（14.3） 0.781b. 不良飲食習慣 a 0. 20（19.1）. 3（15.0）. 17（20.0）. 1. 29（27.6）. 7（35.0）. 22（25.9）. 2. 30（28.6）. 4（20.0）. 26（30.6）. ≧ 3. 26（24.8）. 6（30.0）. 20（23.5）. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。bb：類別變項以人數（百分比）表示。a：Fisher’ s b exact test。 ：Mantel-Haenszel chi-square test。. 51.
(59) 第四章 研究結果. 第三節 氧化壓力、抗氧化能力與各變項之相關 一、基本人口學 在體內 GSH 濃度方面，女性 GSH 濃度較男性高(濃度分別為 1.69±0.04 mM vs. 1.56±0.06mM)，兩者達邊緣性統計上顯著意義(p=0.059)，如表 4-3-1 所示。血清 Cu 濃度方面，亦觀察到女性 Cu 濃度顯著性高於男性(濃度分別為 0.94±0.02 ppm vs. 0.87±0.02ppm，p=0.040)，如表 4-3-4 所示。. 二、生活習慣 如表 4-3-5 所示，使用保健食品方面，有使用者的 SOD 活性顯著性高於沒有 使用的人(活性分別為 1968.09±91.85 U/g Hb vs. 1672.31±60.84U/g Hb，p=0.006)， 有抽菸習慣者，其血清中 Cu 濃度較沒有抽菸習慣者低(濃度分別為 0.87±0.03ppm vs. 0.93±0.02ppm)，二者達邊緣性統計上顯著意義(p=0.066)；有嚼檳榔習慣者， 其血清 Zn 濃度顯著低於沒有嚼檳榔者(濃度分別為 0.77±0.05ppm vs. 0.84± 0.02ppm，p=0.028)；在使用慢病藥物方面，有使用者的血清 Zn 濃度較低、Cu 濃 度較高，皆有達統計上顯著意義(p＜0.05)。. 三、飲食習慣 在飲食習慣方面，每週至少食用一次燻烤食品者，體內 MDA 濃度較每週食 用少於一次者低(濃度分別為 4.54±0.81mM vs. 6.77±0.47mM，p=0.025)；不良飲食 習慣方面，不良飲食習慣計分為 3 分以上者，其 MDA 濃度較計分為 0 分者高（濃 度分別為 6.34±0.95μM vs. 5.75±1.03mM），而 GSH 濃度則較計分為 0 分者低， 如表 4-3-3 所示。. 52.
(60) 第四章 研究結果. 表 4-3- 1 基本人口學變項與體內 MDA、GSH 濃度之相關 變項. 個數. MDA ( μmol/L). p值. GSH (mmol/L). 0.600b. 性別. 0.059#. 女. 76. 6.13±0.48aa. 1.69±0.04. 男. 38. 6.93±0.82. 1.56±0.06 0.907c. 教育程度. 0.512. 小學以下. 35. 6.41±0.72. 1.66±0.06. 初、高中. 48. 6.56±0.72. 1.61±0.05. 大學以上. 31. 6.13±0.73. 1.70±0.07 0.377b. 種族. 0.244. 非原住民. 89. 6.34±0.49. 1.63±0.04. 原住民. 25. 6.59±0.81. 1.72±0.07 0.437b. 婚姻狀況. p值. 0.873. 未婚. 25. 6.95±0.95. 1.64±0.07. 已婚 a. 89. 6.24±0.47. 1.65±0.04. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。a：已婚包含已婚、離婚、喪偶。aa：連續性變項 以平均值±標準誤表示。b：Wilcoxon rank sum test。c：Kruskal-Wallis test。#：0.05＜p ＜0.10。. 53.
(61) 第四章 研究結果. 表 4-3- 2 生活習慣與體內 MDA、GSH 濃度之相關 變項. 個數. MDA ( μmol/L). p值. GSH (mmol/L). 0.356 a. 抽菸習慣. 0.500. 否. 83. 6.28±0.50aa. 1.67±0.04. 有. 30. 6.86±0.81. 1.62±0.07 0.234a. 喝酒習慣. 0.691. 否. 90. 6.19±0.46. 1.66±0.04. 有. 22. 7.63±1.10. 1.63±0.09 0.125 a. 吃檳榔習慣. 1.000 a. 否. 97. 6.22±0.45. 1.65±0.04. 有. 16. 7.72±1.15. 1.68±0.08 0.993 a. 使用保健食品. 0.780. 否. 72. 6.31±0.53. 1.64±0.04. 有. 42. 6.55±0.71. 1.66±0.06 0.830a. 使用慢病藥物. p值. 0.750. 否. 69. 6.32±0.54. 1.66±0.04. 有. 45. 6.52±0.68. 1.64±0.05. 註：人數未達 116 人乃遺漏値所致。aa：連續性變項以平均值±標準誤表示。a：Wilcoxon rank sum test。*：p＜0.05。. 54.
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