Development and functionality assessment of fermented herbal wine that promotes hematopoietic process
簡雅玲、陳鴻章
E-mail: 9307897@mail.dyu.edu.tw
ABSTRACT
This study attempted to make Extracted hematopoietic herbal wines (EHHW) and Fermented hematopoietic herbal wines (FHHW) with six different kinds of Chinese herbs (Heshouwu, Sudihuang, Danggui, Chuanxiong, Gouqizi, and Black soybean) by extraction and fermentation. Three kinds of FHHW-Amylo (FHHW-A1, A2, A3) and FHHW-Raw koji (FHHW-RK1, RK2, RK3) were prepared with three ratios of rice/ molasses (2：0、1：1、1.5：0.5) and two kinds of fermentation methods (Amylo and Raw koji).
After chemical analysis and hedonic ranking test, alcohol content of FHHW-RK1 was the highest, it was 18.30±0.20%. The one with highest total soluble solid was FHHW-RK2. Total acidity was increased with amount of molasses added. Degree of lightness (L) from bright to dark was FHHW-A1＞FHHW-A3＞FHHW-RK1＞FHHW-A2＞FHHW-RK2＞FHHW-RK3. Two best 20
°FHHWs with hedonic ranking test in 20°FHHW-Amylo and 20°FHHW-Raw koji were 20°FHHW-A3 (rice/molasses = 1.5 Kg/ 0.5 Kg) and 20°FHHW-RK1 (rice is 2 Kg, and no molasses). They were compared with 20°, 60°EHHW. Color of 20
°FHHW-A3 was significantly more acceptable. The scale of flavor, taste and overall acceptability of 20°, 60°EHHW were significantly lower than 20°FHHW-A3 and 20°FHHW-RK1. The six different kinds of Chinese herbs extracted with H2O, 20%, and 60% ethanol and the concentrates of 20°FHHW-A3, 20°FHHW-RK1 and 20°, 60°EHHW were also proceeded with Ex vivo assay using culture of murine Bone marrow cells (BMCs) and assessed for their Granulocyte-macrophage colony-forming units (CFU-GM). For aqueous extract concentrates, the result proved that the CFU-GM colonies of Sudihung and Black soybean were formed outstandingly more than others. The best effect of Heshouwu, Chuanxiong and Gouqizi was at 400 μg/mL. The best effect of Danggui was at 200 μg/mL. For 20% ethanol extract concentrates, the tendency of Heshouwu, Danggui and Chuanxiong was the same at 200 μg/mL. The best effect of Sudihung, Gouqizi and Black soybean was respectively at 200, 400, 800 μg/mL. For 60% ethanol extract concentrates, the best capability of Heshouwu, Sudihung, Danggui and Chuanxiong was at 200 μg/mL. The best effect of Black soybean and Gouqizi was at 400 μg/mL. The best effect of 20°FHHW-RK1 was at 100 μg/mL. For concentrates of hematopoietic herbal wines, the best capability of 20°, 60°EHHW and 20°FHHW-A3 was at 200 μg/mL. At the same concentration, the hematopoietic promotion effect of 20°FHHW-A3 was more superior to others. Crude extract
concentrates of Chinese herbs and concentrates of hematopoietic herbal wines were used to Spleen cell-conditioned medium (SCM) (the averages of colonies were 12±2 and 5±1 colonies/1×105 BMCs) that has better efficacy than adding extracts directly (the averages of colonies were both 2±1 colonies/1×105 BMCs). It revealed that herbs and herbal wine all have hematopoietic promotion effect through the activation of immune response. The fermentation time of FHHW-Amylo processed shorten 3 folds than FHHW-Raw koji、EHHW. FHHW-Amylo stimulated BMCs CFU-GM colonies forming better than others. Therefore, making fermented hematopoietic herbal wine with Amylo method is practicable.
Keywords : Fermented hematopoietic herbal wine ; Ex vivo assay ; Hematopoiesis Table of Contents
目錄 封面內頁 簽名頁 授權書 iii 中文摘要 iv 英文摘要 vi 誌謝 viii 目錄 ix 圖目錄 xii 表目錄 xiv 第一章 緒論 1 1.1 研究背景 1 1.2 研究動機 2 1.3 研究大綱 2 1.4 研究重要性 3 第二章 文獻整理 4 2.1 補血中藥之探討 4 2.1.1 何首烏 4 2.1.2 熟地黃 9 2.1.3 當歸 14 2.1.4 川芎 19 2.1.5 黑大豆 23 2.1.6 枸杞子 28 2.2 藥酒之介紹 33 2.3 順位試驗法 35 2.3.1 範圍及應用 35 2.3.2 試驗原 則 35 2.3.3 測試的品評員 35 2.3.4 測試的程序 36 2.3.5 分析評分及結果說明 37 2.4 貧血與造血之介紹 38 2.4.1 貧血 38 2.4.2 造血作用 39 第三章 實驗材料及方法 42 3.1 實驗材料 42 3.2 實驗設備 43 3.3 實驗分組 45 3.4 實驗設計 47 3.5 實驗方法 50 3.5.1 補血藥酒之製備 50 3.5.2 補血發酵藥酒之分析 55 3.5.3 喜好順位官能性評估 59 3.5.4 中藥粗萃濃縮物及藥酒濃縮液之 造血功能評估 60 第四章 結果與討論 63 4.1 補血發酵藥酒之製備與分析 63 4.2喜好順位官能性評估 69 4.3中藥粗萃濃縮物及 補血藥酒濃縮液之收率 71 4.4 中藥及補血藥酒之造血功能評估 75 4.4.1中藥粗萃濃縮物之造血活性評估 75 4.4.2 補血藥酒濃 縮液之造血活性評估 83 第五章 結論 93 參考文獻 94 圖目錄 圖一. 何首烏 5 圖二. 大黃酚、大黃酚?酮、大黃素、大黃酸之 結構式 7 圖三. 熟地黃 11 圖四. β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇及梓醇之結構式 12 圖五. 當歸 15 圖六. 亞丁基苯?、鄰羧基苯 正戊酮及△2,4-二氫?酐之 結構式 17 圖七. 川芎 20 圖八. 阿魏酸及四甲基??之結構式 22 圖九. 黑大豆 25 圖十. 染料木素及黃 酮之結構式 26 圖十一. 枸杞子 29 圖十二. β-谷甾醇及玉蜀黍黃素之結構式 31 圖十三. 補血藥酒之官能評估設計圖 48 圖十
四. 中藥粗萃物及藥酒濃縮液之造血功能評估之流程圖 49 圖十五. 傳統浸泡式補血藥酒(EHHW)釀製流程圖 51 圖十六. 阿米 諾發酵式補血藥酒(FHHW-Amylo)釀製流程圖 53 圖十七. 生米麴發酵式補血藥酒(FHHW-Raw koji)釀製流程圖 54 圖十八. 酒 精蒸餾裝置 57 圖十九. 三種不同組成之阿米諾發酵式補血藥酒(FHHW-Amylo)在發酵期間pH值之變化 64 圖二十. 三種不同 組成之生米麴發酵式補血藥酒(FHHW-Raw koji)在發酵期間pH值之變化 65 圖二十一. 不同溶劑萃取之何首烏粗萃濃縮物與 何首烏 粗萃濃縮物-SCM之CFU-GM集落形成作用 76 圖二十二. 不同溶劑萃取之熟地黃粗萃濃縮物與熟地黃 粗萃濃縮 物-SCM之CFU-GM集落形成作用 77 圖二十三. 不同溶劑萃取之當歸粗萃濃縮物與當歸 粗萃濃縮物-SCM之CFU-GM集落 形成作用 78 圖二十四. 不同溶劑萃取之川芎粗萃濃縮物與川芎 粗萃濃縮物-SCM之CFU-GM集落形成作用 79 圖二十五. 不 同溶劑萃取之黑大豆粗萃濃縮物與黑大豆 粗萃濃縮物-SCM之CFU-GM集落形成作用 80 圖二十六. 不同溶劑萃取之枸杞子 粗萃濃縮物與枸杞子 粗萃濃縮物-SCM之CFU-GM集落形成作用 79 圖二十七. 20°EHHW濃縮液與20°EHHW濃縮 液-SCM之CFU-GM集落形成作用 87 圖二十八. 60°EHHW濃縮液與60°EHHW濃縮液-SCM之CFU-GM集落形成作用 88 圖二十九. 20°FHHW-A3濃縮液與20°FHHW-A3濃縮液 -SCM之CFU-GM集落形成作用 89 圖三十. 20°FHHW-RK1濃縮 液與20°FHHW-RK1濃縮液 -SCM之CFU-GM集落形成作用 90 表目錄 表一. 生產發酵式補血藥酒之醪液配方 46 表二. 阿 米諾發酵式補血藥酒(FHHW-Amylo)與生米麴發酵式 補血藥酒(FHHW-Raw koji)之可溶性固形物、酒精度、 總酸度、吸光 值(420 nm)及殘糖量 67 表三. 阿米諾發酵式補血藥酒(FHHW-Amylo)與生米麴發酵式 補血藥酒(FHHW-Raw koji)之顏色 68 表四. 三種不同組成之阿米諾發酵式補血藥酒(FHHW-Amylo) 與生米麴發酵式補血藥酒(FHHW-Raw koji)之官能性 評估 70 表五. FHHW-A3, FHHW-RK1與傳統浸泡式補血藥酒(20°及 60° EHHW)之官能性評估 72 表六. 中藥以水或20%, 60%乙 醇萃取之粗萃濃縮物收率(%) 73 表七. 補血藥酒之濃縮液之收率(%) 74 表八. 六種中藥的水粗萃濃縮物-脾臟細胞培養 基(SCM) 刺激骨髓細胞CFU-GM集落形成能力 84 表九. 六種中藥的20%乙醇粗萃濃縮物-脾臟細胞培養基 (SCM)刺激骨髓細 胞CFU-GM集落形成能力 85 表十. 六種中藥的60%乙醇粗萃濃縮物-脾臟細胞培養基 (SCM)刺激骨髓細胞CFU-GM集落形成 能力 86 表十一. 四種補血藥酒濃縮液-脾臟細胞培養基(SCM)刺激 骨髓細胞CFU-GM集落形成能力 91
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